全球獸用疫苗研究進(jìn)展及發(fā)展情況概述

1、一、活疫苗 www.dx-活疫苗又稱弱毒疫苗，是微生物的自然強(qiáng)毒株通過物理的、化學(xué)的和生物學(xué)的方法，連續(xù)傳代，使其對原宿主動物喪失致病力，或只引起亞臨診感染，但仍保持良好的免疫原性、遺傳特性的毒株，用以制備的疫苗，如豬瘟兔化弱毒疫苗、傳染性支氣管炎弱毒苗等。此外，從自然界篩選的自然弱毒株若同樣具有上述遺傳特性，也同樣可以制備弱毒疫苗。如雞新城疫系苗、禽霍亂“1010”弱毒菌苗等。隨著現(xiàn)代生物工程技術(shù)的發(fā)展，活疫苗的范疇也發(fā)生了相應(yīng)的變化?；蛉笔б呙?、活載體疫苗和病毒抗體復(fù)合物疫苗等也屬于活疫苗。1、弱毒疫苗弱毒疫苗是一種病原致病力減弱但仍具有活力的完整病原疫苗，也就是用人工致弱或自然篩選的弱

2、毒株，經(jīng)培養(yǎng)后制備的疫苗。 目前，市場上應(yīng)用的活疫苗大多為弱毒疫苗。該苗的優(yōu)點是病原可在免疫動物體內(nèi)繁殖， 用量小， 免疫原性好，免疫期長，成本低，使用方便。缺點是弱毒株的毒力易返強(qiáng)，對一些極易感動物存在一定的危險性，其免疫效果易受多種因素的影響，且運輸和保存有一定的條件限制。該苗制作的關(guān)鍵是弱毒株的獲得。目前常用的致弱方法有：從自然界中篩選弱毒株；通過異種動物或細(xì)胞傳代致弱；采用物理和化學(xué)方法致弱；利用基因工程技術(shù)對病原進(jìn)行重組。2、基因缺失疫苗該苗是利用基因工程技術(shù)，將病原微生物的毒力基因缺失， 形成弱毒株后再培養(yǎng)制成疫苗。該苗兼有活疫苗和死疫苗的特點。目前已研制成功的基因缺失疫苗有偽狂犬

3、病毒TK-基因缺失疫苗、偽狂犬病毒gE-缺失疫苗、牛傳染性鼻氣管炎基因缺失疫苗等。3、基因工程或載體疫苗該苗是將致病性病原體的外源基因插入到載體病毒或細(xì)菌的非必需區(qū)而構(gòu)建的重組病毒或細(xì)菌所生產(chǎn)的疫苗。該疫苗不僅具有活疫苗和死疫苗的優(yōu)點， 而且對載體病毒或細(xì)菌以及插入基因相關(guān)病毒的侵染均有保護(hù)力。同時，一個載體可表達(dá)多個免疫基因，因此，可用該技術(shù)生產(chǎn)多價疫苗或多聯(lián)苗。 目前常用的載體病毒有痘苗病毒、腺病毒、桿狀病毒、單純皰疹病毒、SV40、牛乳瘤病毒、植物嵌合病毒等，常用的載體細(xì)菌有BCC、大腸桿菌、沙門氏菌、釀酒酵母等。 www.fan-4、病毒抗體復(fù)合物疫苗該疫苗是由特異性高免血清或抗體與適

4、當(dāng)比例的相應(yīng)病毒組成。其特點是可以延緩病毒釋放，提高疫苗安全性和免疫效果。該苗的關(guān)鍵是病毒與抗體的比例要適度。該疫苗可以在孵化期(經(jīng)卵免疫)使用，可以用強(qiáng)毒株給雞首免，在母源抗體表面提供免疫保護(hù)。目前已研制成功并被批準(zhǔn)投放市場的有IBDV-Ab復(fù)合體疫苗。二、死疫苗死疫苗又稱滅活疫苗，是以含有細(xì)菌或病毒的材料利用物理或化學(xué)的方法處理，使其喪失感染性和毒性而保持有免疫原性，并結(jié)合相應(yīng)的佐劑，接種動物后能產(chǎn)生自動免疫、預(yù)防疫病的一類生物制品。如禽霍亂組織滅活苗，新城疫油乳劑滅活苗等。同樣，死疫苗也不僅僅是滅活疫苗，化學(xué)合成疫苗、分泌抗原疫苗、基因工程亞單位疫苗、抗獨特型抗體疫苗、免疫復(fù)合體疫苗、核

5、酸疫苗等都屬于死疫苗范疇。1、滅活疫苗該疫苗是完整病毒經(jīng)滅活劑滅活后制成的疫苗。病原滅活是制備該疫苗的關(guān)鍵。目前常用的滅活劑有甲醛、乙酰乙烯基亞胺、乙烯亞胺、-丙酸內(nèi)酯等。2、化學(xué)合成疫苗該疫苗主要是通過化學(xué)反應(yīng)合成一些被認(rèn)為可以對人或動物有免疫保護(hù)作用的小分子抗原制備的疫苗，包括人工合成肽苗和人工合成多糖苗。由于多糖合成比較困難，因此，臨床上應(yīng)用的多糖苗中的多糖幾乎都是從病原體內(nèi)提取的。合成肽苗相對較多，如口蹄疫VPl疫苗、流感病毒血凝素合成肽苗、瘧疾合成多肽疫苗Spf66等。該疫苗的優(yōu)點是可以大量合成；適合難于人工合成培養(yǎng)的病原，無法致弱的病毒；純度高，準(zhǔn)確性好，使用安全。該疫苗的缺點是只

6、能刺激體液免疫，不能刺激細(xì)胞免疫，因而限制了該苗的發(fā)展。3、分泌抗原疫苗寄生蟲的分泌或代謝產(chǎn)物具有很強(qiáng)的抗原性。從其培養(yǎng)液中提取有效抗原制作的蟲苗即為分泌抗原疫苗，如牛和犬的巴貝斯蟲苗等，該疫苗的特點是，它屬于一種混合疫苗，含有多種成分。應(yīng)用時不僅需要免疫佐劑，而且還需要多次接種。由于提純成本太高，限制了應(yīng)用。4、基因工程亞單位疫苗除去病原微生物中有害成分和對免疫無關(guān)成分，保留其有效成分制成的疫苗稱亞單位疫苗。如口蹄疫VP3疫苗和VPI疫苗、貓白血病疫苗、仔豬腹瀉K88疫苗均屬此類疫苗。該疫苗具有死苗的特點，但比死苗的副作用小，性質(zhì)穩(wěn)定，易保存。缺點是免疫原性差。5、抗獨特型抗體(Id)疫苗用

7、抗獨特型抗體作疫苗即為抗獨特型抗體疫苗， 目前該疫苗的研制是一個新的熱點，且正在研制的疫苗很多，如牛種布氏菌抗獨特型抗體疫苗，抗IBDV-Id疫苗，伊氏錐蟲抗Id疫苗等。該苗的優(yōu)點是不含傳染源，使用安全；可大量制備單克隆抗獨特型抗體；抗獨特型抗體疫苗不需提純，可接受T細(xì)胞的充分協(xié)助；可替代無法致弱或毒力易返強(qiáng)毒株，或污染成分有害于宿主動物的滅活苗進(jìn)行免疫，獲取同樣的免疫效果；當(dāng)抗原無法分離或不足量時，亦可用抗Id疫苗；該苗可以設(shè)計出能選擇模擬抗原決定簇的抗獨特型，且這種抗原決定簇是多種病原株所共有的；該苗兼有治療作用。但該苗制作方法比較復(fù)雜，免疫原性較弱，有異種蛋白副作用。6、免疫復(fù)合體疫苗該

8、苗是由病毒亞單位和特異性抗體所構(gòu)成的免疫復(fù)合物(1C)制備的疫苗。與病毒抗體復(fù)合物疫苗所不同的是，該苗是死苗，且剔除了病毒中的有害及與免疫無關(guān)的成分，使用起來更安全，副作用更小。該苗制作的關(guān)鍵技術(shù)是抗原與抗體的比例問題。即制備時抗原應(yīng)等量或稍過量。正在研制的NDV-抗NDV復(fù)合物疫苗，在應(yīng)用試驗中取得了比較滿意的效果。三、免疫佐劑隨著生物技術(shù)的快速發(fā)展，一些新型疫苗不斷研制成功，由于這些疫苗的抗原分子較小，免疫原性很弱，必須在免疫佐劑的配合下，才能激發(fā)機(jī)體的細(xì)胞免疫和體液免疫，進(jìn)而推動了免疫佐劑研制的發(fā)展。免疫佐劑是指先于抗原或與抗原同時，或與抗原混合后注射動物，能非特異性增強(qiáng)機(jī)體對抗原免疫應(yīng)

9、答的物質(zhì)。免疫佐劑大致有以下幾類。1、化學(xué)類免疫佐劑是具有免疫增強(qiáng)作用的化學(xué)物質(zhì)，如氫氧化鋁、弗氏佐劑、礦物油、水花生油乳劑、吐溫-80、司盤、左旋咪唑、脂質(zhì)體等。2、微生物類免疫佐劑如分枝桿菌、BCC、脂多糖、胞壁酰二肽、胞肽、脂溶性蠟質(zhì)D、短小棒狀桿菌。3、植物類免疫佐劑多為從植物或大真菌中提取的多糖類。如茯苓多糖、紅花多糖、酵母多糖、香菇多糖、中草藥類等。4、生化類免疫佐劑主要為體內(nèi)的各種細(xì)胞因子。如胸腺肽、轉(zhuǎn)移因子、白細(xì)胞介素、干擾素、腫瘤壞死因子等。5、抗生素類免疫佐劑如紅霉素，伊維菌素。聚微球粒載體、硒、維生素(E、D、C)免疫刺激復(fù)合物(1SCOMS)等也在作為免疫佐劑被研究。四

10、、轉(zhuǎn)基因疫苗轉(zhuǎn)基因疫苗是疫苗研究的一個新方向，用轉(zhuǎn)基因動物生產(chǎn)疫苗就是利用基因工程技術(shù)制造疫苗、醫(yī)藥產(chǎn)品和激素等的抗原的基因轉(zhuǎn)移到動物體內(nèi)，當(dāng)動物生長后，獲得的動物產(chǎn)品(乳、蛋、肉)中帶有疫苗成分。如已有了用轉(zhuǎn)基因動物生產(chǎn)人的血清白蛋白、A-抗胰蛋白酶、凝血因子等。用植物生產(chǎn)疫苗，首先將編碼保護(hù)性反應(yīng)蛋白的結(jié)構(gòu)基因克隆入Tl質(zhì)粒，然后用這種重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化作物桿菌或病毒感染植物細(xì)胞后，就能把導(dǎo)入的外源基因整合到這些細(xì)胞的染色體上，這種含鼙合外源基因染色體的植物細(xì)胞在一定的條件可以生長為新的植株，這一新的植株可以把表達(dá)的外源基因與其新的性狀傳給子代，成為表達(dá)的疫苗品系。利用這種轉(zhuǎn)基因植物生產(chǎn)疫苗。目前已有狂犬病毒G蛋白在轉(zhuǎn)基因番茄中表達(dá)，NVCP在轉(zhuǎn)基因煙草和土豆中表達(dá)的報道。五、口服疫苗口服疫苗是通過口服(飲水或采食)而使動物在胃腸道粘膜產(chǎn)生局部免疫應(yīng)答，進(jìn)而獲得全身性保護(hù)的疫苗。目前口服疫苗研制的進(jìn)展不是很快，免疫效果十分滿意的疫苗亦不是很多。關(guān)鍵問題是疫苗有效成分在胃中被