單克隆抗體藥物綜述

1、單克隆抗體藥物綜述摘要：通過淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)或基因工程技術(shù)制備單克隆抗體藥物，已經(jīng)成為生物制藥領(lǐng)域的一個(gè)重要方面，由于單克隆抗體藥物專一性強(qiáng)、療效顯著，因此成為近年來研究的熱點(diǎn)藥物之一。此文就單抗藥物的分類、應(yīng)用進(jìn)行了綜述，并對(duì)其應(yīng)用前景及存在的不足作了概述。關(guān)鍵詞：?jiǎn)慰寺】贵w抗體藥物靶向聯(lián)用自1975年Koehler和Milstein首先報(bào)道利用小鼠雜交瘤細(xì)胞制備單克隆抗體以來,經(jīng)過近30年的發(fā)展，單抗技術(shù)在生命科學(xué)研究及醫(yī)學(xué)實(shí)踐方面作出了杰出的貢獻(xiàn)，已經(jīng)成為了現(xiàn)代生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)的支柱之一。然而，盡管單抗推動(dòng)了生物診斷技術(shù)的革命，但是在將單抗應(yīng)用于人體疾病的治療方面卻在長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)遲遲沒有進(jìn)展。

2、早期的臨床試驗(yàn)結(jié)果都不盡人意，這是因?yàn)槭笤磫慰箲?yīng)用于人體有許多限制.現(xiàn)今上市的單抗藥物，治療的領(lǐng)域主要集中在腫瘤、自身免疫疾病、器官移植排斥及病毒感染等領(lǐng)域。由于單抗具有明確的作用位點(diǎn)，與靶位點(diǎn)親和力高，而且通過改造的抗體其免疫原性大大減弱，這些因素使得單抗在臨床治療中具有特異性強(qiáng)、見效快、副作用較低等優(yōu)點(diǎn)，因而單抗治療有著廣闊的前景。目前，F(xiàn)DA批準(zhǔn)上市的17個(gè)單抗藥物中即有8個(gè)是用于治療淋巴細(xì)胞腫瘤、乳腺癌及結(jié)直腸癌等，而在開發(fā)階段的單抗也有一半以上是與治療各種癌癥相關(guān)?？梢灶A(yù)見，在未來幾年來將有更多的?B療性單抗藥物上市，其市場(chǎng)份額將進(jìn)一步擴(kuò)大。目前，單抗類藥物的市場(chǎng)銷售逐年提升的年均增

3、長(zhǎng)幅度在20%以上，表現(xiàn)強(qiáng)勁。用于治療非霍奇金淋巴瘤的單抗藥物Rituxan已成為世界第一的抗腫瘤藥物，2003年銷售為14.89億美元，2002年為11.63億美元，在2002年全球最暢銷前50位商標(biāo)名處方藥中排名43位。用于治療關(guān)節(jié)炎的單抗藥物Remicade,2002年銷售額為12.97億美元，當(dāng)年全球藥物銷售排名第37位。2000年世界單抗藥物的銷售額為22.05億美元，據(jù)Frost&Sullivan預(yù)測(cè)，到2003年銷售額將達(dá)到47億美元。下面就單克隆抗體藥物的研究進(jìn)展作一綜述。1 單克隆抗體藥物的分類單抗藥物一般分為：治療疾?。ㄓ绕涫悄[瘤）的單抗藥劑、抗腫瘤單抗偶聯(lián)物、治療

4、其他疾病的單抗。單抗藥劑針對(duì)的靶點(diǎn)通常為細(xì)胞表面的疾病相關(guān)抗原或特定的受體。如：最早被美國(guó)FDA批準(zhǔn)用于治療腫瘤的單抗藥物利妥昔單抗；抗腫瘤單抗偶聯(lián)物，或稱免疫偶聯(lián)物（Immunoconjugate）,由單抗與有治療作用的物質(zhì)（如:放射性核素、毒素和藥物等）兩部分構(gòu)成，其中包括放射免疫偶聯(lián)物、免疫毒素、化學(xué)免疫偶聯(lián)物，此外還有酶結(jié)合單抗偶聯(lián)物、光敏劑結(jié)合單抗偶聯(lián)物等。2 作為腫瘤治療藥劑的單克隆抗體藥物表1概括了近年來美國(guó)FDA批準(zhǔn)上市的5個(gè)治療腫瘤的單克隆抗體藥物的基本情況下面具體加以介紹。表1近年美國(guó)枇戲上市的5個(gè)治療胖病的電克隆抗體藥物Tab1Cancertherapeutictuono

5、clonaantibodyappiodlbyHJAMUSArwendy抗體名稱商品簾靶點(diǎn)抗體類型適應(yīng)證FD.”批推時(shí)間RjliDiiimb利妥昔軍抗KiEUxaiii嵌合型IgCiB細(xì)胞淋巴描1997Tiafluzumah|1:娶珠單抗HercejpdnIIER-2fku嵌合型棺1乳.腺癌AleiHnzuiinab阿倫珠單抗CanpathCD52人源化IgGEJ犯地愁忡.滬賄2001CjIugntih四妥音串抗Erhilux嵌件型大的空2強(qiáng)HRd長(zhǎng)聯(lián)抗AViialinVEi?人眥化近0大胸痛2004在自身免疫性疾病形成過程中,B細(xì)胞起重要作用。CD20是前B細(xì)胞向成熟淋巴細(xì)胞分化過程中表達(dá)的表

6、面抗原，參與調(diào)節(jié)B細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化。利妥昔單抗（美羅華）是一種針對(duì)CD20抗原的人鼠嵌合型單克隆抗體，是第一個(gè)被FDA批準(zhǔn)用于臨床治療的單抗。進(jìn)入人體后可與CD20特異性結(jié)合導(dǎo)致B細(xì)胞溶解，從而抑制B細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)成熟B細(xì)胞凋亡，但不影響原始B細(xì)胞。它能通過介導(dǎo)抗體依賴的細(xì)胞毒性（ADCC）、補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒性（CDC）乍用和抗體與CD20分子結(jié)合引起的直接效應(yīng)，包括抑制細(xì)胞生長(zhǎng)，改變細(xì)胞周期以及凋亡等方式殺死淋巴瘤細(xì)胞1。由于利妥昔單抗藥物可以提高腫瘤細(xì)胞對(duì)化療的敏感性，所以利妥昔單抗藥物的優(yōu)勢(shì)就在于與其他治療藥物及治療方式配合使用。臨床研究表明美羅華單藥或聯(lián)合化療治療腫瘤具有良好的療效和安

7、全性，但還是存在一定的毒副作用。夏忠軍等2進(jìn)行的臨床研究：34例確診惰性淋巴瘤的患者接受含利妥昔的方案化療，結(jié)果總有效率為92.3%，完全緩解率為60.0%。主要不良反應(yīng)為骨髓抑制，其它不良反應(yīng)包括惡心嘔吐、輕度脫發(fā)和肝功能受損等。張曉艷等3對(duì)4例CD20陽(yáng)性非霍奇金淋巴瘤（NHL）病人進(jìn)行了5次利妥昔單抗聯(lián)合自體外周血干細(xì)胞移植（APBSCT）治療研究，結(jié)果顯示所有病人均對(duì)利妥昔單抗耐受良好，植入后在811d內(nèi)達(dá)造血重建，表明利妥昔單抗聯(lián)合APBSC楮療CD20陽(yáng)性NHL是一種耐受及效果良好的方法。2.2曲妥珠單抗曲妥珠單抗為一種針對(duì)HER22neu的重組人源化IgG單克隆抗體，能特異性識(shí)別

8、Her22調(diào)控的細(xì)胞表面蛋白HER22，使其通過內(nèi)吞噬作用離開胞膜進(jìn)入核體內(nèi)，抑制其介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，從而起到治療腫瘤的作用。美國(guó)FDA于1999年批準(zhǔn)其上市,2002年在我國(guó)上市。大量臨床資料證實(shí)曲妥珠單用于乳腺癌的有效率為21%而且它與化療聯(lián)合應(yīng)用明顯提高了生存時(shí)間4。據(jù)報(bào)道，歐洲曲妥珠單抗輔助治療試驗(yàn)研究了曲妥珠單抗對(duì)HER22陽(yáng)性伴有或不伴有淋巴結(jié)陽(yáng)性的乳腺癌患者的療效，其中1組給予1年的曲妥珠單抗治療，另1組作為對(duì)照。曲妥珠單抗治療1年組與對(duì)照組相比，復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)減少了46%，兩組的整體生存率無(wú)明顯區(qū)別，說明曲妥珠單抗用于治療輔助化療后的HER22陽(yáng)性孚L腺癌患者，明顯延長(zhǎng)了患者的無(wú)病生存

9、期5。我國(guó)也對(duì)曲妥珠進(jìn)行了臨床研究，沈坤煒等6對(duì)42例nIDA期浸潤(rùn)性乳腺癌患者紫杉醇聯(lián)合曲妥珠單抗治療24周，結(jié)果單用新輔助化療組完全緩解率為26.3%,在新輔助化療聯(lián)用曲妥珠單抗組為65.2%，可見，對(duì)于HER22過表達(dá)的乳腺癌化療聯(lián)用曲妥珠單抗能顯著提高完全緩解率。2.3阿倫珠單抗阿倫珠單抗是人源化、非結(jié)合型單抗，作用靶點(diǎn)為正常與異常B淋巴細(xì)胞的CD52抗原，CD52廣泛分布于正常的B淋巴細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞及T淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞表面，在慢性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞表面尤為豐富。它與帶CD52的靶細(xì)胞結(jié)合后，通過宿主效應(yīng)子的補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒性（CDC）、抗體依賴性細(xì)胞毒

10、性（ADCC）和細(xì)胞凋亡等機(jī)制導(dǎo)致細(xì)胞死亡。阿倫珠單抗作為一種作用機(jī)制獨(dú)特的單克隆抗體，對(duì)源于B和T細(xì)胞的各種惡性腫瘤具有很好的治療作用。英國(guó)科學(xué)家應(yīng)用阿倫珠單抗和利妥昔單抗治療復(fù)發(fā)性淋巴瘤患者，結(jié)果總反應(yīng)率為52%，其中完全緩解8%，表明聯(lián)合使用阿倫珠單抗和利妥昔單抗是安全可行的。在其它T細(xì)胞惡性腫瘤的治療中：對(duì)22例出IV期皮膚T細(xì)胞淋巴瘤（蕈樣肉芽腫病和Sezary綜合征）患者靜脈輸注阿倫珠12周，結(jié)果顯示阿倫珠具有非常好的療效，總有效率達(dá)55%。其中，紅皮病患者總有效率達(dá)69%，片狀斑或皮膚腫瘤患者達(dá)40%7。阿倫珠單抗聯(lián)合其他藥物、化療等治療腫瘤具有顯著的效果。但臨床研究表明，其還存

11、在一些常見并發(fā)癥，如低血壓、寒顫、發(fā)熱、惡心、嘔吐、氣短、支氣管痙攣、皮疹、疲乏、呼吸困難、頭痛、腹瀉、感染等。2.4西妥昔單抗西妥昔單抗為igG1單克隆抗體，是表皮生長(zhǎng)因子受體拮抗劑，可與表達(dá)于正常細(xì)胞和多種腫瘤細(xì)胞表面的表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR特異性結(jié)合，并競(jìng)爭(zhēng)性阻斷EGF和其他配體，如a2轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF2a)的結(jié)合。它通過增加細(xì)胞周期抑制因子p27kip使得細(xì)胞周期停留在G1期;增加Bax表達(dá)和減少bcl22表達(dá)，誘導(dǎo)癌細(xì)胞的凋亡；它還可減少基質(zhì)金屬蛋白酶和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF的產(chǎn)生。相關(guān)實(shí)驗(yàn)表明，西妥昔單抗可抑制過度表達(dá)EGFR勺腫瘤細(xì)胞的增殖，但是對(duì)缺乏EGF砧達(dá)的腫瘤

12、細(xì)胞則沒有抗腫瘤效果，還發(fā)現(xiàn)西妥昔與化療聯(lián)用要優(yōu)于單獨(dú)化療8。在對(duì)西妥昔單抗聯(lián)合化療的研究中,BOAD試驗(yàn)最為著名。576例晚期結(jié)直腸癌(ACRC)患者中82%的EGFR過表達(dá)。治療采取兩個(gè)方案，第1組用西妥昔單抗聯(lián)合伊立替康治療；第2組單獨(dú)用西妥昔單抗單藥治療。西妥昔單抗聯(lián)合伊立替康與單用西妥昔單抗相比，聯(lián)用療效優(yōu)于單一使用，有效率分別為23%和11%，疾病控制率為56%和32%,疾病進(jìn)展中位時(shí)間為4.1和1.5個(gè)月，中位生存時(shí)間為8.6和6.9個(gè)月，而且西妥昔單抗并沒有增加化療的副作用。以上臨床實(shí)驗(yàn)顯示：西妥昔單抗能夠克服ACRC患者對(duì)伊立替康的耐藥性，生存質(zhì)量明顯提高9。西妥昔單抗的毒副

13、作用包括：瘞瘡樣皮疹、虛弱、腹痛、惡心、嘔吐、白細(xì)胞減少和過敏反應(yīng)等。其中瘞瘡樣皮疹是最常見的不良反應(yīng)，皮疹主要分布在臉部和軀干上部，這可能是由于西妥昔單抗干擾了EGF的表皮生理作用所致10。2.5貝伐單抗貝伐單抗是抗VEGF的人源化單抗，主要通過中和VEGF來阻斷其與內(nèi)皮細(xì)胞上的受體結(jié)合，使得腫瘤細(xì)胞不能得到養(yǎng)分和氧，起到治療腫瘤的作用。Presta等11將鼠抗人VEGF單克隆抗體(muMABVEGF)A.4.6.1的互補(bǔ)決定區(qū)與人IgG1的恒定區(qū)框架嵌合，并對(duì)相應(yīng)氨基酸殘基加以修飾，最終形成了人鼠嵌合型VEGF單抗，仍然有7%的氨基酸來源于鼠抗體。實(shí)驗(yàn)表明，貝伐單抗用于治療腫瘤安全有效。鄭

14、航等12探究貝伐單抗聯(lián)合伊立替康治療轉(zhuǎn)移性結(jié)腸癌的療效，90例患者中給予貝伐單抗聯(lián)合伊立替康治療的一組有效率為43.3%血清腫瘤標(biāo)志物的濃度治療前后有顯著變化。這說明貝伐聯(lián)合伊立替康治療轉(zhuǎn)移性結(jié)腸癌具有更高的疾病控制率。2005年美國(guó)臨床腫瘤學(xué)會(huì)年會(huì)上報(bào)道了貝伐單抗的最新研究結(jié)果，采用貝伐單抗聯(lián)合伊立替康和順鉗一線治療轉(zhuǎn)移性胃癌或者胃食管連接部腺癌的患者，治療的不良反應(yīng)除了原有伊立替康和順鉗引起的腎髓抑制、胃腸道反應(yīng)等，還有貝伐單抗造成的不良反應(yīng)包括栓塞性疾病、胃穿孔等。3抗腫瘤單抗偶聯(lián)物3.1放射免疫偶聯(lián)物放射免疫治療(RIT謔以單克隆抗體為載體，以放射性核素為彈頭，通過抗體特異性結(jié)合腫瘤細(xì)

15、胞相關(guān)抗原，將產(chǎn)生高能射線的放射性核素靶向到腫瘤細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤的近距離內(nèi)照射治療。RIT利用攜帶放射性核素的單克隆抗體特異地結(jié)合到病灶部位，減少了對(duì)正常組織的損傷。90Y-ibri2tumomab是第1個(gè)被FDA批準(zhǔn)應(yīng)用于臨床的放射免疫制劑，主要用于復(fù)發(fā)的淋巴瘤患者或?qū)为?dú)應(yīng)用利妥昔單抗療效不佳的患者。3.2免疫毒素免疫毒素是用化學(xué)方法或基因工程方法將腫瘤選擇性單抗與經(jīng)修飾的多肽毒素共價(jià)連接而成的腫瘤治療藥物。免疫毒素可與腫瘤細(xì)胞表面受體或與細(xì)胞表面的靶抗原相結(jié)合后內(nèi)化，繼而在胞內(nèi)抑制細(xì)胞蛋白質(zhì)合成，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞死亡。毒素有很多種，如植物毒素、細(xì)菌毒素、動(dòng)物毒素，其中引用最廣泛的是植物毒素中

16、的白喉毒素。美國(guó)FDA已經(jīng)批準(zhǔn)了白喉毒素與白細(xì)胞介素2重組的免疫毒素ONTAK(DAB3892IL2)，用于治療人皮膚T細(xì)胞淋巴瘤13214。單抗是藥物良好的靶向性載體，通過藥物分子上特殊的功能基團(tuán)如：羥基、疏基、氨基等，將治療藥物與單抗相連接而組成化學(xué)免疫偶聯(lián)物，避免了藥物對(duì)其他正常組織的毒害作用,選擇性地發(fā)揮治療作用。常與單抗進(jìn)行偶聯(lián)的藥物有阿霉素、柔紅霉素、平陽(yáng)霉素、博安霉素、絲裂霉素、新制癌菌素、氨甲喋吟等。4單克隆抗體在其他疾病中的應(yīng)用單克隆抗體藥物不只在腫瘤的治療中取得了很好療效，在其他疾病的治療中也取得了一些療效，例如:奧馬珠單抗(omalizumab)通過與游離IgE結(jié)合而顯著

17、降低游離IgE的水平,阻斷IgE與肥大細(xì)胞、嗜堿粒細(xì)胞結(jié)合，防止炎癥介質(zhì)的釋放。可顯著改善哮喘病人的癥狀、肺功能及生活質(zhì)量，減少哮喘惡化的發(fā)作次數(shù)，減少糖皮質(zhì)激素的用量，使用安全，具有很好的耐受性15oMab03.2C1C2在體外能抑制白念珠菌芽管的形成，從而抑制白念珠菌對(duì)上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞的粘附，降低白念珠菌的侵襲力。利妥昔單抗對(duì)類風(fēng)濕和系統(tǒng)性紅斑狼瘡也有很好的治療作用。英夫利昔單抗對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者疼痛、晨僵、關(guān)節(jié)腫脹等臨床癥狀減輕程度就可達(dá)60%。另有研究顯示，輸注英夫利昔單抗可快速、顯著緩解頑固性銀屑病、關(guān)節(jié)炎病人的關(guān)節(jié)和皮損癥狀16。英利昔單抗對(duì)克羅恩病、潰瘍性結(jié)腸炎、酒精性肝病等

18、消化系統(tǒng)疾病都有較好療效，且在推薦的治療范圍內(nèi)安全性良好17。參考文獻(xiàn)1馮潔.介紹幾種抗腫瘤的靶向新藥J.中國(guó)藥師,2006,9(2):1762178.2夏忠軍.含美羅華方案治療B細(xì)胞性惰性淋巴瘤34例報(bào)告J.癌癥,2006,25(4):4902494.3張曉艷.利妥昔單抗聯(lián)合自體外周血干細(xì)胞移植治療非霍奇金淋巴瘤J.中國(guó)新藥與臨床雜志，2006,7(19):5412544.4吳鳳霞.Herceptin一種治療乳腺癌的新藥J.中國(guó)生化藥物雜志，1999,20(1) :47.5董嵩，朱建權(quán)，吳一龍.美國(guó)臨床腫瘤學(xué)年度報(bào)告J.循證醫(yī)學(xué),2006,6(2):67273.6沈坤煒.紫杉醇序貫表阿霉素新

19、輔助化療聯(lián)合曲妥珠單抗顯著提高病理完全緩解率J循證醫(yī)學(xué),2006,4(6):84286.7崔銀珠，胡江寧.慢性淋巴細(xì)胞白血病治行新藥alemtuzumabJ.世界臨床藥物,2004,25(5):2922296.8BaselgaJ.TheEGFRasatargetforanticancertherapy2focusoncetux2imabJ.EurJCancer2001,37(4):16222.9NygrenP,SorbyeHO,SterlundP,etal.Targeteddrugsinmetastaticcolorectalcancerwithspecialemphasisonguidelinesfortheuseofbe2vacizumabandcetuximab:anActaOncologicaexpertreportJ.ActaOncol,2005,44(3):2032217.10BusamKJ,CapodieciP,MotzerR,etal.Cutaneo