(食品衛(wèi)生檢測(cè)技術(shù))第06章食品添加劑的測(cè)定

1、.第六章第六章.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定第一節(jié)第一節(jié) 概述概述第二節(jié)第二節(jié) 甜昧劑的測(cè)定甜昧劑的測(cè)定第三節(jié)第三節(jié) 防腐劑的測(cè)定防腐劑的測(cè)定第四節(jié)第四節(jié) 護(hù)色劑的測(cè)定護(hù)色劑的測(cè)定第五節(jié)第五節(jié) 漂白劑的測(cè)定漂白劑的測(cè)定第六節(jié)第六節(jié) 著色劑的測(cè)定著色劑的測(cè)定第七節(jié)第七節(jié) 抗氧化劑的測(cè)定抗氧化劑的測(cè)定.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 第一節(jié)第一節(jié) 概概 述述 一、食品添加劑的概念及分類一、食品添加劑的概念及分類 1 1. .食品添加劑的概念食品添加劑的概念 為了改善食品的品質(zhì)及色、香、味，各類食品添加劑被廣泛用于食品加工中。中華人民共和國(guó)食品衛(wèi)生法對(duì)食品添加劑的定義是：“為改善食品的品質(zhì)和色

2、、香、味，以及為防腐和加工的需要而加入食品中的化學(xué)合成或天然物質(zhì)?！睆纳鲜龆x可知，添加劑是出于技術(shù)目的而有意識(shí)加到食品中的物質(zhì)。顯然它不包括食品中的污染物。當(dāng)前食品添加劑已經(jīng)進(jìn)入到糧油、肉禽、果蔬加工等各個(gè)領(lǐng)域，也是烹飪行業(yè)必備的配料，并已進(jìn)入家庭的一日三餐。如方便面中含有的BHA（丁基羥基茴香醚）、BHT（二丁基羥基甲苯）等抗氧化劑，味精、肌苷酸等風(fēng)味劑，磷酸鹽等品質(zhì)改良劑。醬油中的防腐劑苯甲酸鈉、食用色素。飲料中含有酸味劑如檸檬酸、甜味劑如甜菊苷等。為此食品中添加劑的測(cè)定已成為食品分析中的重要內(nèi)容。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 2 2. .食品添加劑的分類食品添加劑的分類 食品添加

3、劑的種類繁多，我國(guó)較為常用的有300多種。 食品添加劑的分類可按其來(lái)源、功能等劃分。按來(lái)源分為天然食品添加劑和化學(xué)合成添加劑。按其功能和用途，可將食品添加劑分為22類，它們是：酸度調(diào)節(jié)劑；抗結(jié)劑；消泡劑；抗氧化劑；漂白劑；膨松劑；膠姆糖基礎(chǔ)劑；著色劑；護(hù)色劑；乳化劑；酶制劑；增味劑；面粉處理劑；被膜劑；水分保持劑；營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑；防腐劑；凝固劑；甜味劑；增稠劑；香料；其他。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 二、食品添加劑的安全使用和管理二、食品添加劑的安全使用和管理 對(duì)加工食品的要求，首先是無(wú)毒、無(wú)害、有一定的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，同時(shí)也要求一定的色、香、味、形態(tài)及結(jié)構(gòu)。為此，在食品生產(chǎn)中，經(jīng)常使用各種添加

4、劑。作為食品添加劑必須有一定的要求： （1）食品添加劑本身應(yīng)經(jīng)過(guò)充分的毒理學(xué)鑒定程序，證明 在使用限量范圍內(nèi)對(duì)人體無(wú)害。 （2）食品添加劑進(jìn)入人體后最好能參與人體正常代謝，或在正常解毒過(guò)程，排泄過(guò)程中排出體外，不在人體內(nèi)積累、分解或形成對(duì)人體有害的物質(zhì)。 （3）食品添加劑對(duì)食品的營(yíng)養(yǎng)成分不應(yīng)有破壞作用，也不應(yīng)影響食品的質(zhì)量及風(fēng)味。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 （4）食品添加劑必須有一定的工藝功效，具有保持食品營(yíng)養(yǎng)，防止腐敗變質(zhì)、增強(qiáng)感觀性狀、提高產(chǎn)品質(zhì)量的作用，應(yīng)在較低限量?jī)?nèi)產(chǎn)生顯著效果。 （5）使用方便、安全、易于貯存、運(yùn)輸與處理。 （6）添加于食品后能被分析鑒定出來(lái)。 隨著食品工業(yè)的

5、迅速發(fā)展，正確使用食品添加劑以保證食品質(zhì)量，保證人民身體健康，以及研制、開(kāi)發(fā)、推廣無(wú)毒或低毒的食品添加劑就有著更重要的意義。而食品添加劑的檢測(cè)就起到了監(jiān)督、保證與促進(jìn)的作用。 .食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 添加劑作為食品工業(yè)的重要組成部分，雖然它只在食品中添加0.01%0.1%，卻對(duì)改善食品的性狀、提高食品的檔次等發(fā)揮著極其重要的作用。食品添加劑的應(yīng)用可歸納如下。 提高食品的保藏性能，延長(zhǎng)保質(zhì)期，防止微生物引起的腐敗和由氧化引起的變質(zhì)。據(jù)報(bào)道，各種生鮮食品在采收后由于不能及時(shí)加工或加工不當(dāng)損失約2030。加入防腐劑和抗氧化劑可降低其損失，并延長(zhǎng)食品保存期。 改善食品的感官性狀，如食品的色

6、、香、味、形、質(zhì)地等。這些是衡量食品品質(zhì)的常用指標(biāo)。 有利于食品的加工操作，適應(yīng)機(jī)械化、連續(xù)化大生產(chǎn)。如在豆腐中加凝固劑可大規(guī)模生產(chǎn)盒裝豆腐。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 從某種意義上說(shuō)，沒(méi)有現(xiàn)代化的食品添加劑，就沒(méi)有現(xiàn)代化的食品工業(yè)。 作為人為引進(jìn)食品中的外來(lái)成分，添加劑的使用也存在著安全性問(wèn)題。除上述有益作用外，也會(huì)有一定的危害性。 無(wú)論是人工合成還是天然提取，添加劑在生產(chǎn)階段，因工藝問(wèn)題使產(chǎn)品不純凈而帶入少量的有害雜質(zhì)。 某些食品添加劑長(zhǎng)期低劑量攝食可能帶來(lái)危害。如亞硝酸鈉一直被作為肉類制品的護(hù)色劑，除了可使肉類制品呈現(xiàn)鮮亮的紅色外，還具有防腐作用，抑制多種厭氧性細(xì)菌，因而在肉制品

7、的加工保藏中占有重要意義。然而，隨著科學(xué)的發(fā)展，人們不但認(rèn)識(shí)到其本身具有較大的毒性，而且還可以與仲胺類物質(zhì)反應(yīng)生成對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物具有致癌作用的亞硝胺。在尚未找到更好的替代亞硝酸鈉的理想替代品之前，應(yīng)降低其使用量、嚴(yán)格控制用量，以降低危害。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 某些非營(yíng)養(yǎng)食品添加劑的使用，可導(dǎo)致低營(yíng)養(yǎng)密度食品的增加，會(huì)影響食品的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。如人們常提及的垃圾食品。 人們非常關(guān)注的食品摻假問(wèn)題，雖然并非都是由食品添加劑引起，但諸如用色素對(duì)質(zhì)量低劣或腐敗的食品著色等問(wèn)題，卻與食品添加劑密切相關(guān)。中國(guó)食品添加劑衛(wèi)生管理辦法規(guī)定“禁止以掩蓋食品腐敗或以摻雜摻假、偽造為目的而使用食品添加劑”。.食

8、品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 為保證食品的質(zhì)量，避免因添加劑的不當(dāng)使用造成不合格食品進(jìn)入家庭。在食品的生產(chǎn)、檢驗(yàn)、管理中對(duì)食品添加劑的測(cè)定是十分必要的。中國(guó)食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定了各類食品添加劑的適用范圍、最大使用量（參見(jiàn)有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)）。 三、食品添加劑檢測(cè)方法三、食品添加劑檢測(cè)方法 添加劑的種類多，功能各異，經(jīng)常測(cè)定的項(xiàng)目有：甜味劑、防腐劑、發(fā)色劑、漂白劑、著色劑、抗氧化等。測(cè)定中須先將上述添加劑從復(fù)雜的食品混合物中分離出來(lái)，再根據(jù)其物理、化學(xué)性質(zhì)選擇適當(dāng)?shù)姆椒ㄟM(jìn)行測(cè)定。常用的方法有紫外分光光度法、薄層層析法、高效液相色譜法等。 .食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定第二節(jié)第二節(jié) 甜昧劑的測(cè)

9、定甜昧劑的測(cè)定 一、糖精鈉的檢測(cè)一、糖精鈉的檢測(cè) 糖精鈉俗稱糖精，是廣泛使用的一種人工甜味劑，常用食品如醬菜、冰激凌、蜜餞、糕點(diǎn)、餅干、面包等均可以糖精鈉作甜味劑以提高其甜度。 糖精鈉被攝食后，在人體內(nèi)不分解、不吸收，將隨尿排出，不能供給熱能，無(wú)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，對(duì)其使用的安全性至今尚未有定論。在其產(chǎn)品檢驗(yàn)中，經(jīng)常出現(xiàn)含量超標(biāo)的現(xiàn)象。 糖精鈉的定量分析方法有高效液相色譜法、薄層色譜法、離子選擇電極法及紫外分光光度法等。其中目前使用較多的是高效液相色譜法。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 （一）高效液相色譜法（一）高效液相色譜法 1 1測(cè)定原理測(cè)定原理 試樣加溫除去二氧化碳和乙醇，調(diào)節(jié)pH至近中性，過(guò)

10、濾后進(jìn)高效液相色譜儀，經(jīng)反相色譜分離后，根據(jù)保留時(shí)間和峰面積進(jìn)行定性和定量。 2 2試劑試劑 （1）甲醇 經(jīng)濾膜（0.5m）過(guò)濾。 （2）氨水 1+1。 （3）乙酸銨溶液 0.02mol/L。稱取1.54g乙酸銨，加水至1000mL溶解，經(jīng)0.45m濾膜過(guò)濾。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 （4）糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液 準(zhǔn)確稱取0.0851g經(jīng)120烘干4h后的糖精鈉（C6H4CONNaSO22H2O），加水溶解定容至100mL。糖精鈉含量1.0mg/mL，作為貯備溶液。 （5）糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)使用溶液 吸取糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液10mL放入100mL容量瓶中，加水至刻度，經(jīng)0.45m濾膜過(guò)濾，該溶液每

11、毫升相當(dāng)于0.10mg的糖精鈉。 3 3儀器儀器 高效液相色譜儀，紫外檢測(cè)器。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 4 4分析步驟分析步驟 （1）樣品處理 汽水 稱取5.0010.00g，放入小燒杯中，微溫?cái)嚢璩ザ趸?，用氨水?+1）調(diào)pH約7，加水定容至適當(dāng)?shù)捏w積，經(jīng)0.45m濾膜過(guò)濾。 果汁類 稱取5.0010.00g，用氨水（1+1）調(diào)pH約7，加水定容至適當(dāng)?shù)捏w積，離心沉淀，上清液經(jīng)0.45m濾膜過(guò)濾。 配制酒類 稱取10.00g，放入小燒杯中，水浴加熱除去乙醇，用氨水（1+1）調(diào)pH約7，加水定容至20mL，經(jīng)0.45m濾膜過(guò)濾。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 （2）高效液相

12、色譜參考條件。 色譜柱 YWG-C184.6mm 250mm，10m不銹鋼柱。 流動(dòng)相 甲醇-乙酸銨溶液（0.02mol/L）（5+95）。 流速 l mL/min。 檢測(cè)器 紫外檢測(cè)器，230nm波長(zhǎng)，0.2AFS （3）測(cè)定 取樣品處理液和標(biāo)準(zhǔn)使用液各10L（或相同體積）注入高效液相色譜儀進(jìn)行分離，以其標(biāo)準(zhǔn)溶液峰的保留時(shí)間為依據(jù)進(jìn)行定性，以其峰面積求出樣液中被測(cè)物質(zhì)的含量，供計(jì)算。 .食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 5 5結(jié)果計(jì)算結(jié)果計(jì)算式中 X樣品中糖精鈉含量，g/kg； m1進(jìn)樣體積中糖精鈉的質(zhì)量，mg； V1樣品稀釋總體積，mL； V2進(jìn)樣體積，mL； m2樣品質(zhì)量，g。 結(jié)果的表

13、述：報(bào)告算術(shù)平均值的兩位有效數(shù)。 允許差 相對(duì)誤差10%。122110001000mXVmV.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 （二）薄層色譜法（二）薄層色譜法 1 1測(cè)定原理測(cè)定原理 在酸性條件下，食品中的糖精鈉用乙醚提取、濃縮、薄層色譜分離、顯色后，與標(biāo)準(zhǔn)比較，進(jìn)行定性和半定量測(cè)定。 2 2、試劑、試劑 （1）乙醚 不含過(guò)氧化物 （2）無(wú)水硫酸鈉 （3）無(wú)水乙醇及乙醇（95） （4）聚酰胺粉 200目 （5）鹽酸 1+1.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 （6）展開(kāi)劑 正丁醇+氨水十無(wú)水乙醇（7+1+2）；異丙醇+氨水十無(wú)水乙醇（7+1+2） （7）顯色劑 溴甲酚紫溶液（0.4g/L）。稱

14、取0.04g溴甲酚紫，用乙醇（50）溶解，加氫氧化鈉溶液（4g/L）1.1mL調(diào)制pH為8，定容至100mL （8）硫酸銅溶液 100g/L。稱取10g硫酸銅（CSO4.5H2O），用水溶解并稀釋至100 mL （9）氫氧化鈉溶液 40g/L （10）糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液 準(zhǔn)確稱取0.0851g經(jīng)120干燥4h后的糖精鈉，加乙醇溶解，移入100mL容量瓶中，加乙醇（95）稀釋至刻度，此溶液每毫升相當(dāng)于lmg糖精鈉。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 3 3儀器儀器 （1）玻璃紙 生物制品透析袋紙或不含增白劑的市售玻璃紙 （2）玻璃噴霧器 （3）微量注射器 （4）紫外光燈 波長(zhǎng)253.7nm （5）薄

15、層板 10cm20cm或20cm20cm （6）展開(kāi)槽 4 4分析步驟分析步驟 （1）試樣提取。 飲料、冰棍、汽水 取10.0mL均勻試樣（如試樣中含有二氧化碳，先加熱除去；如試樣中含有酒精，加4氫氧化鈉溶液使其呈堿性，在沸水浴中加熱除去），置于100mL分液漏斗中，加2mL鹽酸（1+1），用30mL、20mL、20mL乙醚提取3次。合并乙醚提取液，用5mL鹽酸酸化的水洗滌一次，棄去水層。乙醚層通過(guò)無(wú)水硫酸鈉脫水后，揮發(fā)乙醚，加2.0mL乙醇溶解殘留物，密塞保存，備用。 .食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 醬油、果汁、果醬等 稱取20.0g或吸取20.0mL均勻試樣，置于100mL容量瓶中，加

16、水至約60mL，加20mL硫酸銅溶液（100g/L），混勻，再加4.4mL氫氧化鈉溶液（40g/L），加水至刻度，混勻，靜置30min，過(guò)濾，取50mL濾液置于150mL分液漏斗中，加2mL鹽酸（1+1），用30mL、20mL、20mL乙醚提取3次。合并乙醚提取液，用5mL鹽酸酸化的水洗滌一次，棄去水層。乙醚層通過(guò)無(wú)水硫酸鈉脫水后，揮發(fā)乙醚，加2.0mL乙醇溶解殘留物，密塞保存，備用。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 固體果汁粉等 稱取20.0g磨碎的均勻試樣，置于200mL容量瓶中，加100mL水，加溫使溶解、放冷，加20mL硫酸銅溶液（100g/L），混勻，再加4.4mL氫氧化鈉溶液（4

17、0g/L），加水至刻度，混勻，靜置30min，過(guò)濾，取50mL濾液置于150mL分液漏斗中，加2mL鹽酸（1+1），用30mL、20mL、20mL乙醚提取3次。合并乙醚提取液，用5mL鹽酸酸化的水洗滌一次，棄去水層。乙醚層通過(guò)無(wú)水硫酸鈉脫水后，揮發(fā)乙醚，加2.0mL乙醇溶解殘留物，密塞保存，備用。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 糕點(diǎn)、餅干等蛋白質(zhì)、脂肪、淀粉多的食品 稱取25.0g均勻試樣，置于透析用玻璃紙中，放入大小適當(dāng)?shù)臒瓋?nèi)，加50mL氫氧化鈉溶液（0.8g/L）。調(diào)成糊狀，將玻璃紙口扎緊，放入盛有200mL氫氧化鈉溶液（0.8g/L）的燒杯中，蓋上表面皿，透析過(guò)夜。量取125mL透

18、析液（相當(dāng)12.5g試樣），加約0.4mL鹽酸（1+1）使成中性，加20mL硫酸銅溶液（100g/L），混勻，再加4.4mL氫氧化鈉溶液（40g/L），混勻，靜置30min，過(guò)濾。取120mL（相當(dāng)10g試樣），置于250mL分液漏斗中，加2mL鹽酸（1+1），用30mL、20mL、20mL乙醚提取3次，合并乙醚提取液，用5mL鹽酸酸化的水洗滌一次，棄去水層。乙醚層通過(guò)無(wú)水硫酸鈉脫水后，揮發(fā)乙醚，加2.0mL乙醇溶解殘留物，密塞保存，備用。 .食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 （2）薄層板制備 稱取1.6g聚酰胺粉，加0.4g可溶性淀粉，加約7.0mL水，研磨35min，立即涂成0.250.3

19、0mm厚的l0cm20cm的薄層板，室溫干燥后，在80下干燥1h。置于干燥器中保存。 （3）點(diǎn)樣 在薄層板下端2cm處，用微量注射器點(diǎn)10L和20L的樣液兩個(gè)點(diǎn)，同時(shí)點(diǎn)3.0L、5.0L、7.0L、10.0L糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液，各點(diǎn)間距1.5cm。 （4）展開(kāi)與顯色 將點(diǎn)好的薄層板放入盛有展開(kāi)劑（正丁醇+氨水+無(wú)水乙醇或異丙醇+氨水+無(wú)水乙醇）的展開(kāi)槽中，展開(kāi)劑液層約0.5cm，并預(yù)先已達(dá)到飽和狀態(tài)。展開(kāi)至l0cm，取出薄層板，揮干，噴顯色劑，斑點(diǎn)顯黃色，根據(jù)試樣點(diǎn)和標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)的比移值進(jìn)行定性，根據(jù)斑點(diǎn)顏色深淺進(jìn)行半定量測(cè)定。 .食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 5 5計(jì)算計(jì)算 式中 X試樣中糖精鈉的

20、含量，g/kg（或g/L）； m1測(cè)定用樣液中糖精鈉的質(zhì)量，mg； m試樣質(zhì)量（或體積），g（或mL）； V1試樣提取液殘留物加入乙醇的體積，mL； V2點(diǎn)板液體積，mL。112210001000mXVmV.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 （三）離子選擇電極測(cè)定法（三）離子選擇電極測(cè)定法 1 1原理原理 糖精選擇電極是以季銨鹽所制PVC薄膜為感應(yīng)膜的電極，它和作為參比電極的飽和甘汞電極配合使用以測(cè)定食品中糖精鈉的含量。當(dāng)測(cè)定溫度、溶液總離子強(qiáng)度和溶液接界電位條件一致時(shí)，測(cè)得的電位遵守能斯特方程式，電位差隨溶液中糖精離子的活度（或濃度）改變而變化。 被測(cè)溶液中糖精鈉含量在0.021mg/mL范

21、圍內(nèi)。電極值與糖精離子濃度的負(fù)對(duì)數(shù)成直線關(guān)系。 2 2試劑試劑 乙醚 使用前用鹽酸（6mol/L）飽和 無(wú)水硫酸鈉 鹽酸（6mol/L） 取100mL鹽酸，加水稀釋至200mL，使用前以乙醚飽和。 .食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 氫氧化鈉溶液（0.06mol/L） 取2.4g氫氧化鈉加水溶解并稀釋至1000mL。 硫酸銅溶液（100g/L） 稱取硫酸銅（CuSO45H2O）10g溶于100mL水中。 氫氧化鈉溶液（40g/L） 氫氧化鈉溶液（0.02mol/L） 將上述2.（4）稀釋而成。 磷酸二氫鈉c（NaH2PO42H2O）=lmol/L溶液 取78g磷酸二氫鈉（NaH2PO42H2O

22、）溶解后于500mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。 磷酸氫二鈉c（Na2HPO412H2O）二lmol/L 取89.5g磷酸氫二鈉（Na2HPO412H2O）于250mL容量瓶中溶解后，加水稀釋至刻度，搖勻。 總離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)緩沖液 87.7mL磷酸二氫鈉溶液（1mol/L）與12.3mL磷酸氫二鈉溶液（1mol/L）混合即得。 糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液 準(zhǔn)確稱取0.0851g經(jīng)120干燥4h后的糖精鈉結(jié)晶移入100mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻備用。此溶液每毫升相當(dāng)于1.0mg糖精鈉（C6H4CONNaSO22H2O）。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 3 3儀器儀器 精密級(jí)酸度計(jì)或離子活度計(jì)或

23、其它精密級(jí)電位計(jì)，準(zhǔn)確到lmV。 糖精選擇電極 217型甘汞電極 具雙鹽橋式甘汞電極，下面的鹽橋內(nèi) 裝入含1瓊脂的氯化鉀溶液（3mol/L）。 磁力攪拌器 透析用玻璃紙 半對(duì)數(shù)紙.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 4 4分析步驟分析步驟 （1）樣品提取 .液體樣品 濃縮果汁、飲料、汽水、汽酒、配制酒等。準(zhǔn)確吸取25mL均勻試樣（汽水、汽酒等需先除去二氧化碳后取樣），置于250mL分液漏斗中，加2mL鹽酸（6mol/L），用20，20，10mL乙醚提取三次，合并乙醚提取液，用5mL經(jīng)鹽酸酸化的水洗滌一次，棄去水層，乙醚層轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶，用少量乙醚洗滌原分液漏斗合并入容量瓶，并用乙醚定容至刻

24、度，必要時(shí)加入少許無(wú)水硫酸鈉，搖勻，脫水備用。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 含蛋白質(zhì)、脂肪、淀粉量高的食品 糕點(diǎn)、餅干、醬菜、豆制品、油炸食品，稱取20.00g切碎樣品，置透析用玻璃紙中，加50mL氫氧化鈉溶液（0.02mol/L），調(diào)勻后將玻璃紙口扎緊，放人盛有200mL氫氧化鈉溶液（0.02mol/L）的燒杯中，蓋上表面皿，透析24h，并不時(shí)攪動(dòng)浸泡液。量取125mL透析液，加約0.4mL鹽酸（6mol/L）使成中性，加20mL硫酸銅溶液混勻，再加4.4mL氫氧化鈉溶液（40g/L），混勻。靜置30min，過(guò)濾。取100mL 濾液于250mL分液漏斗中，以下按自“加2mL鹽酸（6mo

25、l/L）”起依法操作。 .食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 蜜餞類 稱取10.00g切碎的均勻樣品，置透析用玻璃紙中，加50mL氫氧化鈉溶液（0.06mol/L），調(diào)勻后將玻璃紙?jiān)o，放入盛有200mL氫氧化鈉溶液（0.06mol/L）的燒杯中，透析、沉淀、提取按操作。 糯米制食品。稱取25.00g切成米粒狀的小塊均勻樣品，按操作。 （2）測(cè)定 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 準(zhǔn)確吸取0，0.5，1.0，2.5，5.0，10.0mL糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液（相當(dāng)于0，0.5，1.0，2.5，5.0，10.0mg糖精鈉），分別置于50mL容量瓶中，各加5mL總離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)緩沖液，加水至刻度，搖勻。.食品添加劑的測(cè)定食品添

26、加劑的測(cè)定 將糖精選擇電極和甘汞電極分別與測(cè)量?jī)x器的負(fù)端和正端相連接，將電極插入盛有水的燒杯中，按其儀器的使用說(shuō)明書調(diào)節(jié)至使用狀態(tài)，在攪拌下用水洗至電極起始電位（例如某些電極起始電位達(dá)-320mV）。取出電極用濾紙吸干。將上述標(biāo)準(zhǔn)系列溶液按低濃度到高濃度逐個(gè)測(cè)定，得其在攪拌時(shí)的平衡電位值（-mV）。 在半對(duì)數(shù)紙上以毫升（毫克）為縱坐標(biāo)；電位值（-mV）為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 樣品的測(cè)定 準(zhǔn)確吸取20mL上述（4）項(xiàng)下的乙醚提取液置于50mL燒杯中，揮發(fā)至干殘?jiān)?，?mL總離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)緩沖液。小心轉(zhuǎn)動(dòng)，振搖燒杯使殘?jiān)芙?，將燒杯?nèi)容物全部定量轉(zhuǎn)移入50mL容量瓶中，原燒杯用少量水多次漂洗后，并入

27、容量瓶中，最后加水至刻度搖勻。依法測(cè)定其電位值（-mV），查標(biāo)準(zhǔn)曲線求得測(cè)定液中糖精鈉毫克。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 （3）計(jì)算 式中 X樣品中糖精鈉的含量，g/kg或g/L； m1測(cè)定液中糖精鈉的質(zhì)量，mg； V1乙醚提取液的體積，mL； V2分取乙醚提取液的體積，mL； m2樣品的質(zhì)量或體積，g或mL。 結(jié)果的表述：報(bào)告算術(shù)平均值的兩位有效數(shù)。 122110001000mXVmV.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 二、甜蜜素的測(cè)定二、甜蜜素的測(cè)定 甜蜜素的化學(xué)名為環(huán)己基氨基磺酸鈉，特點(diǎn)是甜味好，后苦味比糖精低。甜度不高，約為蔗糖的30倍，故用量大，易超標(biāo)使用。 （一）氣相色譜法（

28、一）氣相色譜法 1 1. .測(cè)定原理測(cè)定原理 在硫酸介質(zhì)中環(huán)己基氨基磺酸鈉與亞硝酸反應(yīng)，生成環(huán)己醇亞硝酸酯，利用氣相色譜法進(jìn)行定性和定量。 2 2試劑試劑 正己烷；氯化鈉；色譜硅膠（或海砂）；50g/L亞硝酸鈉溶液；100g/L硫酸溶液；環(huán)己基氨基磺酸鈉溶液（含環(huán)己基氨基磺酸鈉大于98。精確稱取1.0000g環(huán)己基氨基磺酸鈉，加水溶解并定容至100mL，此溶液每毫升含環(huán)己基氨基磺酸鈉10mg）。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 3 3儀器儀器 漩渦混合器；離心機(jī)；氣相色譜儀（附氫火焰離子化檢測(cè)器）；10L微量注射器。 色譜條件如下： 色譜柱 長(zhǎng)2m，徑3mm，形不銹鋼柱。 固定相 Chrom

29、osorbWAWDMCS 80100目，涂以10SE-30。 測(cè)定條件 柱溫80；氣化溫度150；檢測(cè)溫度150；流速為氮?dú)?0mL/min，氫氣30mL/min，空氣300mL/min。 4 4樣品處理樣品處理 (1)液體樣品 搖勻后直接稱取。含二氧化碳的樣品先加熱除去；含酒精的樣品加40g/L氫氧化鈉溶液調(diào)至堿性，于沸水浴中加熱除去，制成試樣。 (2)固體樣品 蜜餞類樣品將其剪碎制成試樣。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 5 5操作方法操作方法 (1)試樣制備 液體試樣 稱取20.0g試樣于l00mL帶塞比色管，置冰浴中。 固體試樣 稱取2.0g已剪碎的試樣于研缽中，加少許色譜硅膠（或海

30、砂）研磨至成干粉狀，經(jīng)漏斗倒入l00mL容量瓶中，加水沖洗研缽，并將洗液一并轉(zhuǎn)移至容量瓶中，加水至刻度，不時(shí)搖動(dòng)，1h后過(guò)濾，即得試樣，準(zhǔn)確吸取20mL于l00mL帶塞比色管，置冰浴中。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 (2)測(cè)定 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 準(zhǔn)確吸取1.00mL環(huán)己基氨基磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液于l00mL帶塞比色管中，加水20mL，置冰浴中，加入5mL 50g/L亞硝酸鈉溶液、5mL l00g/L硫酸溶液，搖勻，在冰浴中放置30min，并經(jīng)常搖動(dòng)。然后準(zhǔn)確加入10mL正己烷、5g氯化鈉，搖勻后置旋渦混合器上振動(dòng)lmin（或振搖80次），待靜止分層后吸出己烷層于10mL帶塞離心管中進(jìn)行離心分離。

31、每毫升己烷提取液相當(dāng)于lmg環(huán)己基氨基磺酸鈉，將標(biāo)準(zhǔn)提取液進(jìn)樣15L于氣相色譜儀中，根據(jù)響應(yīng)值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 .食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 樣品管加入5mL 50g/L亞硝酸鈉溶液、5mL 100g/L硫酸溶液，搖勻，在冰浴中放置30min，并經(jīng)常搖動(dòng)，然后準(zhǔn)確加入10mL正己烷、5g氯化鈉，搖勻后置漩渦混合器上振動(dòng)lmin（或振搖80次），待靜止分層后吸出己烷層于10mL帶塞離心管中進(jìn)行離心分離。然后將試樣提取液同樣進(jìn)樣l5L，測(cè)得響應(yīng)值，從標(biāo)準(zhǔn)線用中查出相應(yīng)含量。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 6 6結(jié)果計(jì)算結(jié)果計(jì)算 式中 X樣品中環(huán)己基氨基磺酸鈉的含量，g/kg； m樣品質(zhì)量，

32、g； V進(jìn)樣體積，L； 10正己烷加入量，mL； A測(cè)定用試樣中環(huán)己基氨基磺酸鈉的量，g。 精密度和允許誤差 重復(fù)測(cè)定相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)誤差7%。 兩次平行測(cè)定相對(duì)允許誤差絕對(duì)誤差10%，平行測(cè)定結(jié)果用算術(shù)平均值表示，保留二位小數(shù)。10 1000101000AAXm VmV.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 （二）分光光度法（二）分光光度法 1 1測(cè)定原理測(cè)定原理 在硫酸介質(zhì)中環(huán)己基氨基磺酸鈉與亞硝酸鈉反應(yīng)，生成環(huán)己醇亞硝酸酯，與磺胺重氮化后再與鹽酸萘乙二胺偶合生成紅色染料，在550nm波長(zhǎng)測(cè)其吸光度，與標(biāo)準(zhǔn)比較定量。 2 2. .試劑試劑 三氯甲烷 甲醇 透析劑 稱取0.5g二氯化汞和12.5氯化鈉于

33、燒杯中，以0.0lmol/L鹽酸溶液定容至100mL.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 亞硝酸鈉溶液 10g/L 硫酸溶液 100g/L 尿素溶液 100g/L，臨用時(shí)新配或冰箱保存 鹽酸溶液 100g/L 磺胺溶液 10g/L，稱取1g磺胺溶于10鹽酸溶液中，最后定容至100mL 鹽酸萘乙二胺溶液 1g/L 環(huán)己基氨基磺酸鈉溶液 精確稱取0.100 0g環(huán)己基氨基磺酸鈉，加水溶解，最后定容至100mL。此液每毫升含環(huán)己基氨基磺酸鈉1mg。臨用時(shí)將環(huán)己基氨基磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋放10倍，此液每毫升含環(huán)己基氨基磺酸鈉0.1mg 。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 3 3儀器儀器 分光光度計(jì)：漩渦

34、混合器：離心機(jī)：透析紙。 4 4試樣處理試樣處理 同氣相色譜法。 5 5操作方法操作方法 （1）提取 液體試樣 稱取10.0g試樣于透析紙中，加l0mL透析劑，將透析紙口扎緊，放入盛有l(wèi)00mL水的200mL廣口瓶?jī)?nèi)，加蓋，透析2024h得透析液。 固體試樣 準(zhǔn)確吸取10.0mL經(jīng)氣相色譜法處理后的試樣提取液于透析紙中，以下操作按本法項(xiàng)進(jìn)行。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 （2）測(cè)定。 取兩支50mL帶塞比色管，分別加入l0mL透析液和l0mL標(biāo)準(zhǔn)液，于03冰浴中，加入lmL10g/L亞硝酸鈉溶液、lmL100g/L硫酸溶液，搖勻后放入冰水中不時(shí)搖動(dòng)，放置1h。取出后加15mL三氯甲烷，置

35、旋渦混合器上振動(dòng)lmin，靜置后吸去上層清液，再加15mL水，振動(dòng)lmin，靜置后吸去上層清液，加l0mL l00g/L尿素溶液、2mL l00g/L鹽酸溶液，再振動(dòng)5min，靜置后吸去上層清液，加15mL水，振動(dòng)lmin.，靜置后吸去上層清液，分別準(zhǔn)確吸出5mL三氯甲烷于2支25mL比色管中。另取一支25mL比色管加入5mL三氯甲烷作參比管。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 于各管中加入15mL甲醇、lmL 10g/L磺胺，置冰水中15min，取出恢復(fù)常溫后加入 lmLlg/L鹽酸萘乙二胺溶液，加甲醇至刻度，在1530下放置2030min，用1cm比色皿于波長(zhǎng)550nm處測(cè)定吸光度，測(cè)得吸

36、光度A及As。 另取2支50mL帶塞比色管，分別加入l0mL水和l0mL透析液，除不加10g/L亞硝酸鈉外，其他按項(xiàng)進(jìn)行，測(cè)得吸光度及A0。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 6 6結(jié)果計(jì)算結(jié)果計(jì)算 式中 X樣品中環(huán)己基氨基磺酸鈉的含量，g/kg； m樣品質(zhì)量，g； V透析液用量，mL； C標(biāo)準(zhǔn)管濃度，g/mL； As標(biāo)準(zhǔn)液吸光度； 水的吸光度； A試料透析液吸光度； A0不加亞硝酸鈉的試料透析液吸光度。0sA00100 101100010001000ssAAcXmAAV.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定第三節(jié)第三節(jié) 防腐劑的測(cè)定防腐劑的測(cè)定 一、苯甲酸的測(cè)定一、苯甲酸的測(cè)定 苯甲酸俗稱安息香

37、酸，是最常用的防腐劑之一。因?qū)ζ浒踩陨杏袪?zhēng)議，認(rèn)為它可能有蓄積中毒現(xiàn)象，故有逐步被山梨酸鹽類防腐劑取代的趨勢(shì)。 苯甲酸（鈉）的測(cè)定有氣相色譜法、紫外分光光度法、高效液相色譜法和滴定法等。 （一）氣相色譜法（一）氣相色譜法 1 1. .測(cè)定原理測(cè)定原理 樣品酸化后，用乙醚提取苯甲酸，用附氫火焰離子化檢測(cè)器的氣相色譜儀進(jìn)行分離測(cè)定，與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 2 2試劑試劑 乙醚 不含過(guò)氧化物。 石油醚 沸程3060。 鹽酸 1+l。 無(wú)水硫酸鈉。 氯化鈉酸性溶液 40g/L，于氯化鈉溶液（40g/L）中加少量鹽酸（1+1）酸化。苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液 準(zhǔn)確稱取苯甲酸0.20

38、00g，置于100mL容量瓶中，用石油醚-乙醚（3+1）混合溶劑溶解并稀釋至刻度（此溶液每毫升相當(dāng)于2.0mg苯甲酸）。 苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)使用液 吸取適量的苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，以石油醚-乙醚（3+1）混合溶劑稀釋至每毫升相當(dāng)于50g、100g、150g、200g、250g苯甲酸。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 3 3儀器儀器 氣相色譜儀，具有氫火焰離子化檢測(cè)器。 4 4操作方法操作方法 （1）樣品提取 稱取2.50g事先混合均勻的樣品，置于25mL帶塞量筒中，加0.5mL鹽酸（1+1）酸化，用15mL、l0mL乙醚提取兩次，每次振搖lmin，靜置分層后將上層乙醚提取液吸入另一個(gè)25mL帶塞量筒中，合

39、并乙醚提取液。用3mL氯化鈉酸性溶液（40g/L）洗滌兩次，靜置15min，用滴管將乙醚層通過(guò)無(wú)水硫酸鈉濾入25mL容量瓶中，用乙醚洗量筒及硫酸鈉層，洗液并入容量瓶。加乙醚至刻度，混勻。準(zhǔn)確吸取5mL乙醚提取液于5mL帶塞刻度試管中，置40水浴上揮干，加入2mL石油醚-乙醚（3+1）混合溶劑溶解殘?jiān)?，備用?食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 （2）色譜參考條件 色譜柱 玻璃柱，內(nèi)徑3mm，長(zhǎng)2m，內(nèi)裝涂以5DEGS+1H3PO4固定液的6080目Chromosorb WAW。 氣流速度 載氣為氮?dú)猓?0mL/min（氮?dú)夂涂諝?、氫氣之比按各儀器型號(hào)不同選擇各自的最佳比例條件）。 溫度 進(jìn)樣口2

40、30；檢測(cè)器230；柱溫170。 （3）測(cè)定 進(jìn)樣2L標(biāo)準(zhǔn)系列中各濃度標(biāo)準(zhǔn)使用液于氣相色譜儀中，可測(cè)得不同濃度苯甲酸的峰高，以濃度為橫坐標(biāo)，相應(yīng)的峰高值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。同時(shí)進(jìn)樣2L樣品溶液。測(cè)得峰高與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較定量。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 5 5結(jié)果計(jì)算結(jié)果計(jì)算 式中 X樣品中苯甲酸的含量，g/kg； m1測(cè)定用樣品液中苯甲酸的質(zhì)量，g； V1加入石油醚-乙醚（3+1）混合溶劑的體積，mL； V2測(cè)定時(shí)進(jìn)樣的體積，L； m2樣品的質(zhì)量，g； 5測(cè)定時(shí)乙醚提取液的體積，mL； 25樣品乙醚提取液的總體積，mL。 若測(cè)定苯甲酸鈉的含量，可將上述苯甲酸的含量乘以1.18。122

41、11000(5/25) (/) 1000mXmVV.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 （二）高效液相色譜法（二）高效液相色譜法 1 1測(cè)定原理測(cè)定原理 試樣加溫除去二氧化碳和乙醇，調(diào)節(jié)pH至近中性，過(guò)濾后進(jìn)高效液相色譜儀，經(jīng)反相色譜分離后，根據(jù)保留時(shí)間和峰面積進(jìn)行定性和定量。 2 2試劑試劑 甲醇 經(jīng)0.5m濾膜過(guò)濾。 氨水 l+1。 乙酸銨溶液 0.02mol/L。稱取1.54g乙酸銨，加水至1000mL溶解，經(jīng)0.45m濾膜過(guò)濾。 .食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 碳酸氫鈉溶液 20g/L。 苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液 準(zhǔn)確稱取0.1000g苯甲酸，加碳酸氫鈉溶液（20g/L）5mL，加熱溶解，

42、移入100mL容量瓶中，加水定容至刻度，苯甲酸含量為1mg/mL，作為貯備溶液。 甲酸標(biāo)準(zhǔn)使用溶液 吸取苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液10.0mL，放入100mL容量瓶中，加水至刻度，經(jīng)0.45m濾膜過(guò)濾，該溶液每毫升相當(dāng)于0.10mg的苯甲酸。 3 3儀器儀器 高效液相色譜儀（帶紫外檢測(cè)器）。 .食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 4 4操作方法操作方法 （1）試樣處理。 汽水 稱取5.0010.0g試樣，放入小燒杯中，微溫?cái)嚢璩ザ趸迹冒彼?+1）調(diào)pH約7。加水定容至1020mL，經(jīng)0.45m濾膜過(guò)濾。 果汁類 稱取5.0010.0g試樣，用氨水（1+1）調(diào)pH約7，加水定容至適當(dāng)?shù)捏w積，離心

43、沉淀，上清液經(jīng)0.45m濾膜過(guò)濾。 配制酒類 稱取10.0g試樣，放入小燒杯中，水浴加熱除去乙醇，用氨水（1+1）調(diào)pH約7，加水定容至適當(dāng)體積，經(jīng)0.45m濾膜過(guò)濾。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 （2）高效液相色譜參考條件。 柱 YWG-C18 4.6mm250mm，10m不銹鋼柱 流動(dòng)相 甲醇-乙酸銨溶液（0.02mol/L）（5+95） 流速 lmL/min 進(jìn)樣量 10L 檢測(cè)器 紫外檢測(cè)器，230nm波長(zhǎng)，0.2AUFS （3）測(cè)定。根據(jù)保留時(shí)間定性，外標(biāo)峰面積法定量。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 5 5結(jié)果計(jì)算結(jié)果計(jì)算式中 X試樣中苯甲酸含量，g/kg； 進(jìn)樣體積中苯甲

44、酸的質(zhì)量，mg； V2進(jìn)樣體積，mL； V1試樣稀釋液總體積，mL； m試樣質(zhì)量，g。2110001000mXVmVm.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 二、山梨酸（鉀）的測(cè)定二、山梨酸（鉀）的測(cè)定 山梨酸俗名花楸酸，化學(xué)名稱為2，4-己二烯酸。山梨酸及其鉀鹽作為酸性防腐劑，在酸性介質(zhì)中對(duì)霉菌、酵母菌、好氧性細(xì)菌有良好的抑制作用，可與這些微生物酶系統(tǒng)中的巰基結(jié)合使之失活。但對(duì)厭氧的芽孢桿菌、乳酸菌無(wú)效。山梨酸是一種不飽和脂肪酸，在機(jī)體內(nèi)可參與正常的新陳代謝，是目前被認(rèn)為最安全的一類食品防腐劑。 山梨酸（鉀）的測(cè)定方法有氣相色譜法、高效液相色譜法、分光光度法等。其中氣相色譜法、高效液相色譜法測(cè)定

45、山梨酸（鉀），其原理、樣品制備、所用試劑、儀器及操作都與苯甲酸的測(cè)定完全相同，只是將苯甲酸的標(biāo)準(zhǔn)貯備液及標(biāo)準(zhǔn)使用液換為山梨酸（鉀）。具體操作見(jiàn)本節(jié)苯甲酸的測(cè)定。下面介紹分光光度法。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 1 1測(cè)定原理測(cè)定原理 提取樣品中山梨酸及其鹽類，經(jīng)硫酸-重鉻酸鉀氧化成丙二醛，再與硫代巴比妥酸形成紅色化合物，其顏色深淺與丙二醛含量成正比，可于530nm處比色定量。 2 2試劑試劑 重鉻酸鉀-硫酸溶液 1/60mol/L重鉻酸鉀與0.15mol/L硫酸以1:1混合備用。 硫代巴比妥酸溶液 準(zhǔn)確稱取0.5g硫代巴比妥酸于100mL容量瓶中，加20mL水，加10mL lmol/L氫

46、氧化鈉溶液，搖勻溶解后再加lmol/L鹽酸，以水定容（臨時(shí)用配制，6h內(nèi)使用）。 山梨酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液 準(zhǔn)確稱取250mg山梨酸鉀于250mL容量瓶中，用蒸餾水溶解并定容（本溶液山梨酸含量為lmg/mL，使用時(shí)再稀釋為0.1mg/mL）。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 3 3儀器儀器 分光光度計(jì)；組織搗碎機(jī)；10mL比色管。 4 4操作方法操作方法 （1）樣品處理 稱取100g樣品，加200mL水于組織搗碎機(jī)中搗成勻漿。稱取勻漿100g，加水200mL繼續(xù)搗lmin，稱取10g于250mL容量瓶中定容，搖勻，過(guò)濾備用。 （2）標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 吸取0.0mL、2.0mL、4.0mL、6.0mL、8

47、.0mL、10.0mL山梨酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液于250mL容量瓶中，用水定容。分別吸取2.0mL于相應(yīng)的10mL比色管中，加2mL重鉻酸鉀硫酸溶液，于100水浴中加熱7min，立即加入2.0mL硫代巴比妥酸，繼續(xù)加熱10min，立刻用冷水冷卻，于530nm處測(cè)吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 （3）試樣測(cè)定 吸取式樣處理液2mL于10mL比色管中，按標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制操作，于530nm處測(cè)吸光度，以標(biāo)準(zhǔn)曲線定量。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 5 5結(jié)果計(jì)算結(jié)果計(jì)算 式中 X1山梨酸鉀含量，g/kg； X2山梨酸含量，g/kg； c試液中含山梨酸鉀的濃度，mg/mL； m稱取勻漿相當(dāng)于試樣質(zhì)量,g； 1.34山梨

48、酸與山梨酸鉀之間的換算系數(shù)。11225021.34cXmXX.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定第四節(jié)第四節(jié) 護(hù)色劑的測(cè)定護(hù)色劑的測(cè)定 一、亞硝酸鹽的測(cè)定一、亞硝酸鹽的測(cè)定鹽酸萘乙二胺法鹽酸萘乙二胺法 鹽酸萘乙二胺法又稱格里斯試劑比色法，介紹如下。 1 1測(cè)定原理測(cè)定原理 樣品經(jīng)沉淀蛋白質(zhì)、除去脂肪后，在弱酸條件下亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸重氮化，再與N-1-萘基乙二胺偶合形成紫紅色染料，與標(biāo)準(zhǔn)比較定量。 2 2試劑試劑 亞鐵氰化鉀溶液 稱取106.0g亞鐵氰化鉀K4Fe（CN）63H2O，用水溶解，并稀釋至1000mL。 乙酸鋅溶液 稱取220.0g乙酸鋅Zn（CH3COO）22H2O，加30mL

49、冰醋酸溶于水，并稀釋至1000mL。 .食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 飽和硼砂溶液 稱取5.0g硼酸鈉（Na2B4O710H2O），溶于100mL熱水中，冷卻后備用。 對(duì)氨基苯磺酸溶液 4g/L。稱取0.4g對(duì)氨基苯磺酸，溶于100mL 20鹽酸中，置棕色瓶中混勻，避光保存。 鹽酸萘乙二胺溶液 2g/L。稱取0.2g鹽酸萘乙二胺，溶解于100mL水中，混勻后，置棕色瓶中，避光保存。 亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液 準(zhǔn)確稱取0.100 0g于硅膠干燥器中干燥24h的亞硝酸鈉，加水溶解移入500mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，混勻。此溶液每毫升相當(dāng)于200g的亞硝酸鈉。 亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)使用液 臨用前，吸取亞硝酸

50、鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液5.00mL，置于200mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，此溶液每毫升相當(dāng)于5.0g的亞硝酸鈉。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 3 3儀器儀器 小型絞肉機(jī)；分光光度計(jì)。 4 4操作方法操作方法 （1）樣品處理 稱取5.0g經(jīng)絞碎混勻的樣品，置于50mL燒杯中，加12.5mL飽和硼砂溶液，攪拌均勻，以70左右的水約300mL將試樣洗入500mL容量瓶中，于沸水浴中加熱15min，取出后冷卻至室溫，然后一面轉(zhuǎn)動(dòng)，一面加入5mL亞鐵氰化鉀溶液，搖勻，再加入5mL乙酸鋅溶液，以沉淀蛋白質(zhì)。加水至刻度，搖勻，放置0.5h，除去上層脂肪，清液用濾紙過(guò)濾，棄去初濾液30mL，濾液備用。 .食品添加

51、劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 （2）測(cè)定 吸取40.0mL上述濾液于50mL帶塞比色管中，另吸取0.00mL、0.20mL、0.40 mL、0.60 mL、0.80mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL、2.50mL亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)使用液（相當(dāng)于0g、1g、2g、3g、4g、5g、7.5g、10g、12.5g亞硝酸鈉），分別置于50mL帶塞比色管中。于標(biāo)準(zhǔn)管與試樣管中分別加入2mL對(duì)氨基苯磺酸溶液（4g/L），混勻，靜置35min后各加入lmL鹽酸萘乙二胺溶液（2g/L），加水至刻度，混勻，靜置15min。用2cm比色杯，以零管調(diào)節(jié)零點(diǎn)，于波長(zhǎng)538nm處測(cè)吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線比較，同時(shí)做試劑

52、空白。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 5 5結(jié)果計(jì)算結(jié)果計(jì)算 式中 X樣品中亞硝酸鹽的含量，mg/kg； m樣品質(zhì)量，g； 測(cè)定用樣液中亞硝酸鹽的質(zhì)量，g； V1樣品處理液總體積，mL； V2測(cè)定用樣液體積，mL。2110001000mXVmVm.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 二、硝酸鹽的測(cè)定二、硝酸鹽的測(cè)定鎘柱法鎘柱法 1 1測(cè)定原理測(cè)定原理 樣品經(jīng)沉淀蛋白質(zhì)、除去脂肪后，溶液通過(guò)鎘柱，使其中的硝酸根離子還原成亞硝酸根離子，在弱酸性條件下，亞硝酸根與對(duì)氨基苯磺酸重氮化后，再與鹽酸萘乙二胺偶合形成紅色染料，測(cè)得亞硝酸鹽總量，用總量減去亞硝酸鹽含量即得硝酸鹽含量。 2 2試劑試劑 氨緩沖

53、溶液（pH9.69.7） 量取20mL鹽酸，加50 mL水，混勻后加50mL氨水，再加水稀釋至1000mL，混勻。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定稀氨緩沖液 量取50mL氨緩沖溶液，加水稀釋至500mL，混勻。 鹽酸 0.1mol/L。 硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液 準(zhǔn)確稱取0.123 2g于110120干燥恒重的硝酸鈉，加水溶解，移入500mL容量瓶中，并稀釋至刻度。此溶液每毫升相當(dāng)于200g亞硝酸鈉。 硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)使用液 臨用時(shí)吸取硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液 2.50mL，置于100mL容量瓶中，加水稀釋至刻度。此溶液每毫升相當(dāng)于5g亞硝酸鈉。 亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)使用液 見(jiàn)亞硝酸鹽測(cè)定（鹽酸萘乙二胺法）。.食品添加劑的測(cè)

54、定食品添加劑的測(cè)定 3 3儀器儀器 鎘柱。 （1）海綿狀鎘的制備 投入足夠的鋅皮或鋅棒于500mL硫酸鎘溶液（200g/L）中，經(jīng)34h，當(dāng)其中的鎘全部被鋅置換后，用玻璃棒輕輕刮下，取出殘余鋅棒，使鎘沉底，傾去上層清液，以水用傾瀉法多次洗滌。然后移入組織搗碎機(jī)中，加500mL水，搗碎約2s，用水將金屬細(xì)粒洗至標(biāo)準(zhǔn)篩上，取2040目之間的部分。 （2）鎘柱的裝填 如圖6-1所示。用水裝滿鎘柱玻璃管，并裝入2cm高的玻璃棉作墊，將玻璃棉壓向柱底時(shí)，應(yīng)將其中所包含的空氣全部排出，在輕輕敲擊下加入海綿狀鎘至810cm高，上面用lcm高的玻璃棉覆蓋，上置一貯液漏斗，末端要穿過(guò)橡皮塞與鎘柱玻璃管緊密連接。

55、.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定圖6-1 鎘柱裝填示意圖1-貯液漏斗，內(nèi)徑35mm，外徑37mm；2-進(jìn)液毛細(xì)管，內(nèi)徑0.4mm，外徑6mm；3-橡皮塞；4-鎘柱玻璃管，內(nèi)徑12mm，外徑16mm；5，7-玻璃棉；6-海綿狀鎘；8-出液毛細(xì)管，內(nèi)徑2mm，外徑8mm.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 如無(wú)上述鎘柱玻璃管時(shí)，可以25mL酸式滴定管代用。 當(dāng)鎘柱填裝好后，先用25mL鹽酸（0.1mol/L）洗滌，再以水洗兩次，每次25mL，鎘柱不用時(shí)用水封蓋，隨時(shí)都要保持水平面在鎘層之上，不得使鎘層中夾有氣泡。 鎘柱每次使用完畢后，應(yīng)先以25mL鹽酸（0.1mol/L）洗滌，再以水洗兩次，每次2

56、5mL，最后用水封蓋鎘柱。 （3）鎘柱還原效率的測(cè)定 吸取20mL硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)使用液，加入5mL稀氨緩沖液，混勻后，吸取20mL于50mL燒杯中，加5mL氨緩沖溶液，混合后注入貯液漏斗中，使流經(jīng)鎘柱還原，以原燒杯收集流出液，當(dāng)貯液漏斗中的溶液流完后，再加5mL水置換柱內(nèi)留存的溶液。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定將全部收集液如前再經(jīng)鎘柱還原一次，第二次流出液收集于100mL容量瓶中，繼以水流經(jīng)鎘柱洗滌三次，每次20mL，洗液一并收集于同一容量瓶中，加水至刻度，混勻。 取10.0mL還原后的溶液（相當(dāng)10g亞硝酸鈉）于50mL比色管中，加入2mL對(duì)氨基苯磺酸溶液（4g/L），混勻，靜置35min

57、后各加入lmL鹽酸萘乙二胺溶液（2g/L），加水至刻度，混勻，靜置15min。用2cm比色杯，以零管調(diào)節(jié)零點(diǎn)，于波長(zhǎng)538nm處測(cè)吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線比較，同時(shí)做試劑空白。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算測(cè)得結(jié)果，與加入量一致，還原效率應(yīng)大于98為符合要求。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 （4）計(jì)算式； 式中 X還原效率； m測(cè)得亞硝酸鹽的質(zhì)量，g； 10測(cè)定用溶液相當(dāng)亞硝酸鹽的質(zhì)量，g。 4 4操作方法操作方法 （1）試樣處理 見(jiàn)亞硝酸鹽測(cè)定（鹽酸萘乙二胺法）。 （2）測(cè)定 先以25mL稀氨緩沖液沖洗鎘柱，流速控制在35mL/min（以滴定管代替的可控制在23 mL/min）。100%10mX .食品添

58、加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 吸取20mL處理過(guò)的樣液于50mL燒杯中，加5mL氨緩沖溶液，混合后注入貯液漏斗，使流經(jīng)鎘柱還原，以原燒杯收集流出液，當(dāng)貯液漏斗中的樣液流完后，再加5mL水置換柱內(nèi)留存的樣液。 將全部收集液如前再經(jīng)鎘柱還原一次，第二次流出液收集于100mL容量瓶中，繼以水流經(jīng)鎘柱洗滌三次，每次20mL，洗液一并收集于同一容量瓶中，加水至刻度，混勻。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 亞硝酸鈉總量的測(cè)定：吸取1020mL還原后的樣液于50mL比色管中。另吸取0.00mL、0.20mL、0.30mL、0.40mL、0.60mL、0.80mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL、2

59、.50mL亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)使用液（相當(dāng)于0g 、1g、2g、3g、4g、5g、7.5g、10g、12.5g亞硝酸鈉），分別置于50mL帶塞比色管中。于標(biāo)準(zhǔn)管與試樣管中分別加入2mL對(duì)氨基苯磺酸溶液（4g/L），混勻，靜置35min后各加入lmL鹽酸萘乙二胺溶液（2g/L），加水至刻度，混勻，靜置15min。用2cm比色杯，以零管調(diào)節(jié)零點(diǎn)，于波長(zhǎng)538nm處測(cè)吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線比較，同時(shí)做試劑空白。.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定 5 5結(jié)果計(jì)算結(jié)果計(jì)算 式中 X試樣中硝酸鹽的含量，mg/kg； m試樣的質(zhì)量，g； m1經(jīng)鎘粉還原后測(cè)得亞硝酸鈉的質(zhì)量，g m2直接測(cè)得亞硝酸鹽的質(zhì)量，g； 1.2

60、32亞硝酸鈉換算成硝酸鈉的系數(shù)； V1測(cè)總亞硝酸鈉的試樣處理液總體積，mL； V2測(cè)總亞硝酸鈉的測(cè)定用樣液體積，mL； V3經(jīng)鎘柱還原后樣液總體積，mL； V4經(jīng)鎘柱還原后樣液的測(cè)定用樣液體積，mL； V5直接測(cè)亞硝酸鈉的試樣處理液總體積，mL； V6直接測(cè)亞硝酸鈉的試樣處理液的測(cè)定用樣液體積，mL。12146235100010001.23210001000mmxVVVmmVVV.食品添加劑的測(cè)定食品添加劑的測(cè)定第五節(jié)第五節(jié) 漂白劑的測(cè)定漂白劑的測(cè)定 一、概述一、概述 二、亞硫酸鹽和二氧化硫的測(cè)定二、亞硫酸鹽和二氧化硫的測(cè)定 測(cè)定二氧化硫和亞硫酸鹽的方法有鹽酸副玫瑰苯胺光度法、中和滴定法、蒸餾