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1、第 III 局部 . 改良 OECD 篩選測(cè)定方法 (方法 C.4-B)III.1. 測(cè)定方法原理一份已測(cè)定體積的礦質(zhì)培養(yǎng)基 (包含一種濃度的測(cè)定物質(zhì) (10-40 mg DOC/L) 作為其唯一的微量有機(jī)碳源 )以每升培養(yǎng)基 0.5mL 的用量參加流出液,混合物在 22 2C黑暗中或散射光下通氣。在 28 天的周期里 , 伴隨著頻繁的 DOC 分析 ,降解不斷進(jìn)行 .生物降解度用以初始 濃度百分比的形式表達(dá)的 DOC 濃度降低 (空白培養(yǎng)液試驗(yàn)修正 )來(lái)計(jì)算。也可以 通過(guò)誘導(dǎo)期始末的輔助化學(xué)分析來(lái)計(jì)算生物降解度。III.2. 測(cè)定方法描述III.2.1. 儀器(a) 錐形瓶,根據(jù)DOC分析所
2、需體積從250mL到2L.(b) 振動(dòng)機(jī),可容納錐形瓶 ,自動(dòng)控溫或恒溫條件下使用,有足夠功率維持所有錐形瓶的有氧條件(c) 帶有適宜的薄膜的過(guò)濾裝置(d) DOC 分析儀(e) 溶解氧測(cè)定儀.(f) 離心機(jī) .III.2.2. 礦質(zhì)培養(yǎng)基的準(zhǔn)備儲(chǔ)藏液的制備 ,見(jiàn) I.6.2.將10mL溶液(a)用80mL水稀釋,將1mL溶液(b)參加(d)中,用水稀釋到1L。此方法只用0.5mL流出液/L作為培養(yǎng)液,因此培養(yǎng)基可能需要用痕量元素和生長(zhǎng) 因子加強(qiáng).可以在每升最后的培養(yǎng)基參加1mL以下溶液痕量元素溶液:四水硫酸錳 , MnSO4?4H2O39.9mg硼酸 ,H3BO357.2mg七水硫酸鋅 ,Z
3、nSO4?7H2O42.8mg鉬酸銨,(NH4)6 MO7O2434.7mgFe-EDTA 螯 合 物FeCL3已 二 胺 四 乙 酸 100.0mg用水稀釋至 1000mL維生素溶液 :15.0mg酵母萃將酵母萃溶于 100mL 水,通過(guò) 0.2 微米膜濾菌,或新鮮制備。111.2.3. 培養(yǎng)液的制備和預(yù)處理培養(yǎng)液取自濃集植物的二次流出液或主要來(lái)自生活污水的試驗(yàn)值。見(jiàn)164.2和I.6.5.每升礦質(zhì)培養(yǎng)基 0.5mL 用量。111.2.4. 錐形瓶的準(zhǔn)備例如,將礦質(zhì)培養(yǎng)基以每份 800mL 用量引入一些 2L 錐形瓶 ,將足量試驗(yàn)物質(zhì)和參 比物質(zhì)儲(chǔ)藏液分別參加不同錐形瓶中相當(dāng)于10-40mg
4、 DOC/L的濃度.檢驗(yàn)PH值, 如有必要調(diào)至74以0.5mL/L的污水流出量參加錐形瓶見(jiàn).1642.同時(shí)在礦質(zhì) 培養(yǎng)基中準(zhǔn)備培養(yǎng)液調(diào)節(jié)劑但不參加試驗(yàn)或參比物質(zhì) .如有要求 ,用一個(gè)容器通過(guò)參加一份包含有礦質(zhì)培養(yǎng)基中對(duì)照量試驗(yàn)物質(zhì)和參比 物質(zhì)濃聚物的溶液來(lái)檢驗(yàn)試驗(yàn)物質(zhì)可能的抑制作用 .同樣,如有必要的話 ,再準(zhǔn)備一個(gè)無(wú)菌錐形瓶通過(guò)未接種的化學(xué)物質(zhì)溶液來(lái)檢驗(yàn)試 驗(yàn)物質(zhì)是否降解 見(jiàn) I.6.6.另外 ,如疑心試驗(yàn)物質(zhì)顯著地被玻璃,污泥等吸附 ,首先初步估計(jì)可能的吸收程度進(jìn)而對(duì)該物質(zhì)檢驗(yàn)的可行性進(jìn)行評(píng)估見(jiàn)表 1.準(zhǔn)備一個(gè)裝有試驗(yàn)物質(zhì) ,培養(yǎng)液和殺菌劑的錐形瓶 .將所有裝有礦質(zhì)培養(yǎng)基的錐形瓶補(bǔ)足1L,
5、 混合后從每一瓶中取樣測(cè)定DOC 的初始濃度見(jiàn)附件11.4.蓋住錐形瓶如用鋁箔,但允許與外界空氣自由氣體交換然 后將導(dǎo)管通入振動(dòng)機(jī)準(zhǔn)備開(kāi)始試驗(yàn) .111.2.5. 典型試驗(yàn)中的錐形瓶數(shù)錐形瓶 1 和 2: 測(cè)定懸浮液錐形瓶 3 和 4: 空白培養(yǎng)液錐形瓶 5: 過(guò)程控制最好和當(dāng)有必要時(shí) :錐形瓶 6: 非生物無(wú)菌對(duì)照錐形瓶 7: 吸附對(duì)照錐形瓶 8: 毒性對(duì)照也見(jiàn) 1.6.7.111.2.6. 進(jìn)行試驗(yàn)在整個(gè)試驗(yàn)中 ,每隔指定時(shí)間測(cè)定每個(gè)瓶中的 DOC 濃度兩次 ,足夠頻繁以能夠測(cè) 定 10 天觀察周期的開(kāi)始和 10 天觀察周期末的減少百分?jǐn)?shù) .每次測(cè)定取最少需要 量的試驗(yàn)懸浮液 .如有必要
6、,加適量水稀釋防止樣品大量蒸發(fā)損失.取樣前充分混合培養(yǎng)基并且保證附著在器壁上的物質(zhì)溶解或懸浮.取樣后立即薄膜過(guò)濾或離心見(jiàn)附件II.4.當(dāng)天 分析濾過(guò)或已離心的樣品,否那么在2-4 C保存不超過(guò)48小時(shí),或低于-18 C保存更 長(zhǎng)的時(shí)間。III.3. 試驗(yàn)數(shù)據(jù)和結(jié)果報(bào)告III.3.1. 數(shù)據(jù)處理計(jì)算l.7.1.D0C測(cè)定給定的時(shí)間t時(shí)的降解百分?jǐn)?shù),或可選擇的1.72特效分析. 所以數(shù)據(jù)記錄在提供的數(shù)據(jù)表上 .111.3.2. 試驗(yàn)結(jié)果的有效性見(jiàn) l.5.2.111.3.3. 報(bào)告見(jiàn) l.8.lll.4. .數(shù)據(jù)記錄表以下給出一張數(shù)據(jù)記錄樣表 .改良 0ECD 篩選試驗(yàn)1. 實(shí)驗(yàn)室2. 試驗(yàn)開(kāi)始日期3. 試驗(yàn)物質(zhì)名稱(chēng):儲(chǔ)藏液濃度:mg試驗(yàn)物質(zhì)/L培養(yǎng)基初始濃度:mg試驗(yàn)物質(zhì)/L4. 培養(yǎng)液來(lái)源: 給定處理方法 :預(yù)處理如有:反響混合物中懸浮固體濃度:mg/L5. 碳測(cè)定碳分析器:6. 原始數(shù)據(jù)評(píng)估錐形瓶nrn天后%降解率0ninin3nx11 -印十朋 1Q0-曲耐/026工|1 -卜忡知j 乂 100 5為-r0平均0忙如Di和D2如差異顯著,不能取平均.注:參考物和毒性對(duì)照物可用相似的格
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