實驗室中藥材中農(nóng)藥多殘留檢測操作規(guī)程

1、中藥材中農(nóng)藥多殘留檢測操作規(guī)程一、有機氯類農(nóng)藥殘留量測定方法1簡述有機氯類農(nóng)藥是農(nóng)藥史中使用量最大，使用歷史最長的一類農(nóng)藥，其化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，脂溶性強，殘效期長，容易在脂肪組織中蓄積，造成慢性中蠹，嚴(yán)重危害人體健康。本方法通過提取、凈化等步驟制備供試品溶液，采用氣相色譜法，電子捕獲檢測器測定。2儀器與試劑2.1氣相色譜儀，電子捕獲檢測器，載氣為高純氮，超聲波處理器，快速溶劑萃取儀，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，高速離心機，氮吹儀，CPSil5CB毛細(xì)管柱（30.0mX250小mX0.25小m）2.2試劑和標(biāo)準(zhǔn)品五氯硝基苯、P,P-DDD、P,P-DDE、P,P-DDT、O,P-DDT、甲體六六六、乙體六六六、丙體

2、六六六、丁體六六六以上標(biāo)準(zhǔn)品均由中國計量科學(xué)研究院研制，丙酮（分析純）、正己烷（色譜級）、石油酰（分析純）、氯化鈉（分析純）、濃硫酸（分析純）、助濾劑Celite545、超純水。3色譜條件程序升溫：初始100C，每分鐘10C升至220C，每分鐘8C升至250C,保持10分鐘，進(jìn)樣口溫度230C;檢測器溫度300C，載氣為高純N2,流速1.0ml/min，尾吹：30ml/min，采用不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣體積1.0L。4操作方法4.1對照品儲備液的配制對照品儲備液制備精密稱取六六六（BHC）a-BHC,6-BHC,丫-BHC,a-BHC）,滴滴涕（DDT）PP'-DDE,PP'-DDD

3、,OP'-DDT,PP'-DDT及五氯硝基苯（PCNB）農(nóng)藥對照品適量，用正己烷分別制成每1ml約含45g的溶液，即得?；旌蠈φ掌穬湟旱闹苽渚芰咳∩鲜龈鲗φ掌穬湟?.5ml置10ml量瓶中,用正己烷稀釋至刻度，即得?；旌蠈φ掌啡芤旱闹苽渚芰咳∩鲜龌旌蠈φ掌穬湟海谜和橹瞥擅?L含0g、1g、5g、10g、50g、100g、250g的溶液，即得。4.2.1 4.2供試品溶液制備樣品的提取采用快速溶劑萃取儀進(jìn)行萃取，萃取池底部先放置抗溶劑隔片，稱量2g制備好的樣品與2g無水硫酸鈉，混合均勻后裝入30ml萃取池中，加助濾劑Celite545補足。出口處放置抗溶劑隔片，之后

4、擰緊池蓋。用正己烷進(jìn)行提取，選擇系統(tǒng)壓力為1200psi，溫度為105C,預(yù)熱5分鐘，靜態(tài)提取5分鐘，循環(huán)兩次，萃取結(jié)束后用氮氣吹掃，壓力為120psi,時間為1分鐘，提取液收集到收集瓶中備用。4.2.2 樣品的凈化將上述提取液轉(zhuǎn)移到100毫升分液漏斗，加2毫升濃硫酸磺化3次，去除磺化層，加40毫升4漩酸鈉水溶液洗正己烷層3次，去除硫酸鈉水溶液層，正己烷層過5克無水硫酸鈉脫水，轉(zhuǎn)移置旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，濃縮到適量體積定容待測。4.3測定法按上述色譜條件操作，分別精密吸取供試品溶液和混合對照品溶液各1.0L,分別連續(xù)進(jìn)樣3次，取平均值，按外標(biāo)法計算供試品中9種有機氯類農(nóng)藥殘留量。二、有機磷類農(nóng)藥殘留量測

5、定方法1簡述有機磷農(nóng)藥是繼有機氯農(nóng)藥之后在我國大量使用的一類農(nóng)藥，在我國農(nóng)藥產(chǎn)量中占有十分重要的地位，農(nóng)藥殘留的分析研究近年來發(fā)展迅速，因此開展這類農(nóng)藥在中藥中進(jìn)行分析研究很有必要。本方法通過提取、凈化等步驟制備供試品溶液，采用氣相色譜法，脈沖火焰檢測器測定。2儀器和試劑2.1儀器：美國VARIANGC-450氣相色譜儀，帶PFPD檢測器，CPSil8CB毛細(xì)管柱(30.0mX530mX0.32m),BUCHI-R210旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，KQ-3200超聲波活洗器，高速離心機，氮吹儀，快速溶劑萃取儀，玻璃層析柱，其他常用的實驗室裝置和器也。2.2試劑和標(biāo)準(zhǔn)品試劑：二氯甲烷（分析純）、丙酮（分析純）、

6、乙酸乙酯（分析純）經(jīng)全玻璃儀器重蒸；無水硫酸鈉（分析純，650C灼燒4小時后備用）助濾劑Celite545;活性炭；超純水；農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品：敵敵畏、甲胺磷、馬拉硫磷、速滅磷、甲基嚅噬磷、乙硫磷、倍硫磷、殺撲磷、二嗪農(nóng)，以上標(biāo)準(zhǔn)品由中國計量科學(xué)研究院和國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心提供。3色譜條件程序升溫：初始120C，每分鐘10C升至220C，每分鐘5C升至240C,保持2分鐘，每分鐘20C升至270C,保持1.0分鐘，進(jìn)樣口溫度240C；PFPD檢測器溫度300C,氮氣流速2ml/min，氫氣14ml/min，空氣i17ml/min,空氣210ml/min；光電倍增管壓500mv,門電壓300mv,不分流

7、進(jìn)樣，進(jìn)樣體積1.01L。4操作方法4.1對照品儲備液的配制對照品儲備液制備精密稱取敵敵畏、甲胺磷、馬拉硫磷、速滅磷、甲基嚅噬磷、乙硫磷、倍硫磷、殺撲磷、二嗪農(nóng)農(nóng)藥對照品適量，用乙酸乙酯分別制成每1ml約含100ug的溶液，即得?；旌蠈φ掌穬湟旱闹苽渚芰咳∩鲜龈鲗φ掌穬湟?ml,置20ml棕色量瓶中，加乙酸乙酯稀釋至刻度，即得?；旌蠈φ掌啡芤旱闹苽渚芰咳∩鲜龌旌蠈φ掌穬湟?，用乙酸乙酯制成每1mL含0.1g、0.5g、1g、2g、5g的溶液，即得。4.2樣品的制備4.2.1樣品的提取采用快速溶劑萃取儀進(jìn)行萃取，萃取池底部先放置抗溶劑隔片，稱量2g制備好的樣品與2g無水硫酸鈉，混合均勻后

8、裝入萃取池中，加助濾劑Celite545補足。出口處放置抗溶劑隔片，之后擰緊池蓋。用乙酸乙酯進(jìn)行提取，選擇系統(tǒng)壓力為1500psi,溫度為80C,預(yù)熱5分鐘，靜態(tài)提取5分鐘，循環(huán)兩次，萃取結(jié)束后用氮氣吹掃，壓力為120psi,時間為1分鐘，提取液收集到收集瓶中備用。4.2.2 樣品的凈化取玻璃層析柱（25cmx1.5cm,柱底部自帶玻璃砂芯，帶活塞，），自下而上依次裝填lcm厚無水硫酸鈉，5g活性碳+celite545助濾劑（1:3）,2cm厚無水硫酸鈉，裝填各部分均輕輕敲打，使填充均勻。用20mL乙酸乙酯預(yù)洗，待液面下降至上層硫酸鈉層時，將上述濃縮液轉(zhuǎn)移至層析柱上，并用正己烷-乙酸乙酯（1:

9、1）混合液50m1洗脫，收集淋洗液，置氮吹儀上濃縮至近十，精密加入乙酸乙酯1ml使溶解，即得待測。4.3測定法按上述色譜條件操作，分別精密吸取供試品溶液和混合對照品溶液各1.0L,分別連續(xù)進(jìn)樣3次，取平均值，按外標(biāo)法計算供試品中9種有機磷類農(nóng)藥殘留量。三、擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量測定方法1簡述擬除蟲菊酯雖具有高效、廣譜、低蠹、低殘留等優(yōu)點，但也存在著大部分品種對魚具有蠹性大、殺傷天敵、無內(nèi)吸作用及對瞞類藥效不高等缺點。本方法通過提取、凈化等步驟制備供試品溶液，采用氣相色譜法，電子捕獲檢測器測定。2儀器與試劑2.1氣相色譜儀，電子捕獲檢測器，載氣為高純氮，超聲波處理器，快速溶劑萃取儀，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，

10、高速離心機，氮吹儀，CPSil5CB毛細(xì)管柱（30.0mX250小mX0.25小m）2.2試劑和標(biāo)準(zhǔn)品試劑：丙酮（分析純）、正己烷（色譜級）、石油酰（分析純）、乙酸乙酯（色譜級）、氯化鈉（分析純）、氟羅里硅土、無水硫酸鈉（分析純）、助濾劑Celite545、超純水。農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品：氟胺割菊酯、順式氯菊酯、氯氟割菊酯、S-割戊菊酯、漠蟠酯，以上標(biāo)準(zhǔn)品由中國計量科學(xué)研究院和國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心提供。3色譜條件程序升溫：初始160C,保持1分鐘，每分鐘10C升至270C,保持0.5分鐘,每分鐘1C升至290C,保持5分鐘，進(jìn)樣口溫度260C,檢測器溫度300C載氣為高純N2,流速1.0ml/min,尾吹

11、：30ml/min,分流比20：1,進(jìn)樣體積1.01L。4操作方法4.1標(biāo)準(zhǔn)儲備液的配制分別精密稱取順式氯菊酯、氯氟割菊酯、S-割戊菊酯適量，用石油酰配制成1.00mg/ml的溶液，備用，準(zhǔn)確量取以上溶液及氟胺割菊酯、漠蟠酯100L置100ml容量瓶中，用石油酰稀釋至刻度,配制成1.011g/mL的混合農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)儲備液，于冰箱中保存，使用時根據(jù)實際需要配制成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)使用液。4.2.1 4.2樣品的制備樣品的提取：采用快速溶劑萃取儀進(jìn)行萃取，萃取池底部先放置抗溶劑隔片，稱量2g制備好的樣品與2g無水硫酸鈉，混合均勻后裝入30ml萃取池中，加助濾劑Celite545補足。出口處放置抗溶劑隔片，之后擰緊池蓋。用石油酰進(jìn)行提取，選擇系統(tǒng)壓力為1200psi,溫度為95C,預(yù)熱5分鐘，靜態(tài)提取5分鐘，循環(huán)兩次，萃取結(jié)束后用氮氣吹掃，壓力為120psi,時間為1分鐘，提取液收集到收集瓶中備用。樣品的凈化：選用lcm厚無水硫酸鈉+l.0g弗羅里硅土+O.5g中性氧化鋁(加