血液及血液成分的制備保存課件

1、血液及血液成分的制備保存血液及血液成分的制備保存徐醫(yī)附院 王浩正常人血液容量與體重密切相關，一般為體重的8-9%，其中血漿占55-60%；血細胞占40-45%。血漿中絕大多數(shù)為水分，占91-92%，其中固體成分只占8-9%；固體成分中，主要是蛋白質，如白蛋白、球蛋白和各種凝血因子，其他為少量無機鹽類和有機物質。血細胞則包括紅細胞、白細胞和血小板。一血液及血液制備的概述血液成分制備的概述 成分輸血是現(xiàn)代輸血醫(yī)學發(fā)展的重要里程碑成分輸血是現(xiàn)代輸血醫(yī)學發(fā)展的重要里程碑二、全血的制備和保存全血制備 全血：將一定量的血液采集到含有保養(yǎng)液的采血袋所制成的血液制劑。即包括血細胞和血漿的所有成分。 國際上一般

2、以450毫升全血為1單位， 我國則以200毫升為1單位 全血采集采集前采集中采集后場所工作人員采血器材獻血員靜脈選擇消毒穿刺采集采集結束注意事項致謝 留標本標識熱合血液保存標本處理及保存獻血現(xiàn)場整理 穿刺部位的選擇 應選擇無損傷、炎癥、皮疹、皮癬、疤痕的皮膚區(qū)域為穿刺部位。上肢肘部清晰可見、粗大、充盈飽滿、彈性好、較固定、不易滑動的靜脈； 常選擇的靜脈主要有肘正中靜脈、貴要靜脈等；穿刺部位消毒穿刺部位消毒 用無菌棉拭蘸取適量使用濃度消毒劑，以穿刺點為中心，自內(nèi)向外螺旋式旋轉涂拭，消毒面積不小于6 cm8 cm。作用13 min 。宜消毒23遍。不應觸摸已消毒的皮膚，不應靠近已消毒的皮膚講話。熱

3、合分段熱合血袋導管，以供交叉配血、血型復查和血液標本保存使用。血袋應保留注滿全血的導管至少20 cm。 在熱合過程中不應用力牽拉或扭轉導管，待焊極松開12秒后方可取出已封口的導應檢查熱合部位，如有滲漏，則重新熱合，并評估對血液無菌性的影響。 熱合分離針頭，將其放置在利器盒內(nèi)。 獻血后注意事項的告知 1 應當印制獻血后注意事項，并將其發(fā)給每位獻血者。2 獻血后注意事項主要有： 1）穿刺點上的敷料應保留至少4小時； 2）多補充水分，食用易消化的食物和水果，避免飲酒，保證充足的睡眠； 3）獻血后24小時內(nèi)不劇烈運動、高空作業(yè)和過度疲勞； 4）工作人員的聯(lián)系方式，如果存在獻血前沒有如實告知的可能影響血

4、液安全的高危行為，或者獻血后感覺明顯不適或異常，請其及時聯(lián)系工作人員。血液保存血液保存 全血采集后應盡快在合適的溫度下保存血站內(nèi)采血血液應及時儲存至42在采血車或采血屋，采出的血液要按一定條件進行儲存和運輸。 一般情況下，在采血后2小時內(nèi)，應將血液快速冷卻到222 ，并在此條件運輸。庫存血發(fā)往臨床用血等處。溫度應在210 最長運輸時間不應超過24小時全血的保存需解決的問題需解決的問題 血液凝固血液凝固 紅細胞溶血紅細胞溶血放氧能力下降放氧能力下降 抗凝劑抗凝劑紅細胞營養(yǎng)代謝紅細胞營養(yǎng)代謝抗溶血劑抗溶血劑改善放氧改善放氧保存容器保存容器血液抗凝劑血液抗凝劑 枸櫞酸鈉枸櫞酸鈉 肝素肝素 EDTA2

5、Na EDTA2Na 原理原理Ca抗凝血酶抗凝血酶Ca應用應用實驗室檢測血液標本的抗凝實驗室檢測血液標本的抗凝及外科體外循環(huán)手術的抗凝及外科體外循環(huán)手術的抗凝實驗室檢測血液標本的抗凝實驗室檢測血液標本的抗凝全血及血液成分保存的抗凝全血及血液成分保存的抗凝劑劑葡萄糖的在血液中濃度應為葡萄糖的在血液中濃度應為0.5%l%，以，以0.5%為宜為宜 葡萄糖用于維持紅細胞代謝，氧化功能，延長紅細胞的葡萄糖用于維持紅細胞代謝，氧化功能，延長紅細胞的保存時間。保存時間。 枸櫞酸可防止高壓滅菌葡萄糖的氧化反應枸櫞酸可防止高壓滅菌葡萄糖的氧化反應提供紅細胞的能量代謝提供紅細胞的能量代謝葡萄糖葡萄糖 枸櫞酸枸櫞酸

6、 + + 枸櫞酸鈉枸櫞酸鈉+ + 葡萄糖葡萄糖 提高提高ATPATP水平和活性的另一辦法就是在保存液中加入水平和活性的另一辦法就是在保存液中加入少量腺嘌呤，可以促進少量腺嘌呤，可以促進ATPATP的生物合成，有利于紅細的生物合成，有利于紅細胞活性的維持。胞活性的維持。腺嘌呤腺嘌呤磷酸腺苷（磷酸腺苷（AMPAMP）磷酸化磷酸化ATPATP提供紅細胞的能量代謝提供紅細胞的能量代謝-腺嘌呤腺嘌呤目前國際上使用較多的是甘露醇，它的用量很小，一目前國際上使用較多的是甘露醇，它的用量很小，一般在般在1 1以下。以下。 蔗糖蔗糖 山梨醇山梨醇甘露醇甘露醇具有緩解紅細胞溶血的功能和具有緩解紅細胞溶血的功能和加

7、固細胞膜的作用，而不影響加固細胞膜的作用，而不影響紅細胞代謝紅細胞代謝抗溶血劑抗溶血劑血液保存液血液保存液 ACDACD保養(yǎng)液保養(yǎng)液（枸櫞酸鹽（枸櫞酸鹽- -葡萄糖葡萄糖- -枸櫞酸）枸櫞酸）pH5.03pH5.03 21 21天天 CPDCPD保養(yǎng)液保養(yǎng)液（枸櫞酸鹽（枸櫞酸鹽- -葡萄糖葡萄糖- -枸櫞酸枸櫞酸- -磷酸鹽）磷酸鹽） pH5.63pH5.63 21 21天天CPDACPDA保養(yǎng)液保養(yǎng)液( (枸櫞酸鹽枸櫞酸鹽- -葡萄糖葡萄糖- -枸櫞酸枸櫞酸- -磷酸鹽磷酸鹽- -腺嘌呤腺嘌呤) )pH5.63 35pH5.63 35天天加入磷酸鹽加入磷酸鹽加入腺嘌呤加入腺嘌呤可提高可提高P

8、HPH使使2,3-DPG下降速度減慢下降速度減慢可以促進可以促進ATP的合成，利于紅細胞活性的維持的合成，利于紅細胞活性的維持表1 各種血液保存液配方成分全血保存溫度控制在42保存液CPD CPDA-1 1.1.血小板血小板44保存保存2424小時喪失小時喪失50%50%活性活性, ,保存保存4848小時更為顯著，小時更為顯著，7272小時雖形態(tài)正常但已失去小時雖形態(tài)正常但已失去止血功能止血功能; ;2.2.中性粒細胞中性粒細胞44保存保存4-84-8小時喪失大部小時喪失大部分功能分功能,24,24小時喪失全部功能小時喪失全部功能; ;3.3.因子因子44保存保存2424小時活性喪失小時活性喪

9、失50%50%。因子。因子保存保存3 3天喪失活性可達天喪失活性可達50%50% 全血并不全，因此國內(nèi)外把全血作為制備各全血并不全，因此國內(nèi)外把全血作為制備各種血液成分的原料。種血液成分的原料。全血的保存特點全血的保存特點三、血液成分的分離制備三、血液成分的分離制備 原理原理 血液成分制備的原則是采用手工或血細胞分離機方法將全血中的各種血液成分制備成體積小，濃度高，純度好的統(tǒng)一規(guī)格的有效治療成分。 人體血液經(jīng)過抗凝處理后稱為全血，全血離心后主要分為三層，自上而下依次為血漿層、白膜層和紅細胞層。 血漿層主要包含血漿、水、蛋白質、鹽類和各種離子等； 白膜層主要包括富含血小板區(qū)、富含淋巴細胞區(qū)、富含

10、單核細胞區(qū)和富含粒細胞區(qū)，這些有形細胞比重接近，因此聚集在白膜層； 紅細胞層可簡單分為年輕紅細胞和正常紅細胞，由于二者處于紅細胞的不同生長時期，因此比重略有差別。 根據(jù)全血離心后分層的原理，利用各種血液成分相對密度、體積等不同，通過離心、過濾的方法可以將各層中不同的血液成分分離、制備成成分血，這樣就可以合理利用血液資源，滿足患者對不同成分血的需求，提高治療效果。 成分相對密度紅細胞1.0901.111粒細胞1.0801.095淋巴細胞1.0501.078血小板1.0301.060血漿1.0251.030手工法制備手工法制備 手工法制備血液成分主要是用單袋或多聯(lián)袋采集血液，置于大容量冷凍離心機內(nèi)

11、離心，在無菌條件下進行分漿，獲得不同的成分。 不同的血液成分離心時，要通過相對離心力（g) 和離心機半徑（cm）（從離心機中軸點到離心筒內(nèi)底部的距離）換算出每分鐘離心轉數(shù)。離心機的每分鐘轉數(shù)，離心時間直接影響各種成分的分離效果，必須定期給與校正。 1. 應用塑料聯(lián)袋采集血液，使血液成分可以在密閉無菌的條件下進行分離。 血袋依照用途不同，可分為單聯(lián)袋、二聯(lián)袋、三聯(lián)袋、四聯(lián)袋以及雙二聯(lián)袋等。這些是用三通管并聯(lián)起來，其規(guī)格分為采血200-400ml 不等。另一種是上下串聯(lián)起來的多聯(lián)袋，稱為底-頂式血袋。在我國很少使用。2.根據(jù)血液成分的不同比重，選擇不同的相對離心力進行離心，分離出不同的成分 最早的

12、持續(xù)性離心裝置是在1877年瑞典醫(yī)生Carl 研究的手柄式乳烙分離器，1881年在美國獲得專利。后來，運用這種原理制造的離心機用于石油工業(yè)清除不純的潤滑油中的顆粒；在核燃料工業(yè)中處理鈾同位素中的固體和液體廢物。1950年美國科學家Cohn在哈佛大學首先發(fā)明了持續(xù)性血液分離機分離血液成分。這些裝置都是根據(jù)不同成分的密度來設置的。3.3.血液成分手工制備的注意事項血液成分手工制備的注意事項 制備新鮮冰凍血漿時，保養(yǎng)液為CPD CP2D CPDA-1的血液應該在8小時之內(nèi)分離并速凍 保養(yǎng)液為ACD的血液應在6小時之內(nèi)分離并速凍第二節(jié)第二節(jié) 紅細胞的制備和保存紅細胞的制備和保存 紅細胞制劑是由全血去除

13、部分血漿紅細胞制劑是由全血去除部分血漿制備而成。制備而成。 從從200ML200ML全血制備的各種紅細胞制品全血制備的各種紅細胞制品為為1U1U一、濃縮紅細胞一、濃縮紅細胞概念 濃縮紅細胞也稱為壓積紅細胞或少漿血，是將采集的全血大部分的血漿在全封閉的條件下分離后剩余的部分所制成的紅細胞成分血?？梢栽谌行П４嫫趦?nèi)任何時間分離出部分血漿制備而成，一般用二聯(lián)袋采集的全血制備濃縮紅細胞制備制備（1）用二聯(lián)袋采集1單位或2單位全血于主袋內(nèi)；（2）將全血在42離心，離心3400g, 離心7分鐘，沉淀紅細胞；（3）取出離心后全血，將部分血漿分入空的轉移袋內(nèi)；（4）用熱合機切斷塑料袋間的連接管，制備成濃縮

14、紅細胞。濃縮紅細胞的保存保存在42保存液CPD ACD-B保存期21天 CPDA-1 保存液為35天二、懸浮紅細胞二、懸浮紅細胞概念 懸浮紅細胞又稱添加劑紅細胞，將全血中的大部分（90%）血漿在全封閉的條件下分離后并向剩余物中加入紅細胞添加液制成的紅細胞成分制備單袋制備法 用單個塑料袋采集血液，離心后在無菌條件下與空塑料袋相連接，把上層血漿分離移入空袋，將等量的保存液加入紅細胞內(nèi)充分混勻。單袋制備方法要求嚴格的制備環(huán)境，整體環(huán)境達萬級凈化，局部操作空間達百級凈化。聯(lián)袋制備法 全血采集于多聯(lián)袋的主袋內(nèi)，與抗凝劑充分混勻后，在68小時內(nèi)制備。1）采血后的多聯(lián)袋在大容量冷凍離心機內(nèi)離心，離心力一般為

15、3400g，溫度控制在42，離心7分鐘；2）輕輕取出離心后的血袋懸掛于分離支架上或放于分漿夾內(nèi)，將上層不含血細胞的血漿分入空的轉移袋內(nèi)。注意不可把血細胞分入血漿中；3）把多聯(lián)袋末袋中的保存液加入主袋濃縮紅細胞內(nèi)，使紅細胞與保養(yǎng)液充分混勻，血細胞比容為0.50-0.65；4）用高頻熱合機切斷塑料袋間的連接管，封閉紅細胞袋上的所有管道，制成懸浮紅細胞。保存保存保存在42保存液紅細胞添加液SAG(生理鹽水-腺嘌呤-葡萄糖)SAGM(生理鹽水-腺嘌呤-葡萄糖-甘露醇） MAP(甘露醇-腺嘌呤-磷酸鹽)可保存35天AS-1 AS-3 AS-5可保存42天三、少白細胞的紅細胞三、少白細胞的紅細胞 概念 濃

16、縮少白細胞紅細胞 懸浮少白細胞紅細胞 白細胞與輸血反應的相關性 經(jīng)研究證實，大多數(shù)患者，因輸血或受孕，體內(nèi)產(chǎn)生白細胞抗體，這些抗體大部分屬于人類白細胞抗原（HLA)系統(tǒng)的同種抗體，當再度輸入含有白細胞的全血或其他血液成分時，有可能產(chǎn)生免疫性發(fā)熱反應等輸血副作用血制品中白細胞數(shù)量與輸血副作用的相關性制備方法 從全血和濃縮紅細胞內(nèi)去除白細胞的方法很多，其效果依據(jù)方法不同而異表4 去除紅細胞中白細胞的方法離心白膜法離心白膜法 簡單、經(jīng)濟，易于操作。 將全血采集于三聯(lián)袋主袋內(nèi)，分離出上層血漿至末袋內(nèi)，然后擠白膜層和白膜層下1-1.5cm 的紅細胞至空轉移袋內(nèi)，白膜層及白 膜層下含有大部分白細胞、血小板

17、和部分紅細胞。為了提高白細胞去除率，可將末袋的血漿注入主袋，重復離心，最后可制成少白細胞的紅細胞濾器過濾法 由于高分子工業(yè)的發(fā)展，促進了輸血器材的改革，各種不同功能的濾器相繼問世。主要包括兩大類：第一代是用纖維或泡沫制成的柱狀過濾器。第二代為聚酯或塑料為材料孔徑20-40微米的網(wǎng)狀過濾器；第三代過濾器以聚酯纖維無紡布作高效濾芯材料，不僅具有高效的白細胞去除率還有選擇性作用，既有去除濃縮紅細胞中白細胞和血小板作用，還能從濃縮血小板中去除白細胞。保存 第三代白細胞濾器減除白細胞可達99%，一般可使白細胞降至1.0106 1.0105袋，紅細胞的回收率大于90%，血小板大于85%保存在42保存液 紅

18、細胞添加液SAG(生理鹽水-腺嘌呤-葡萄糖)SAGM(生理鹽水-腺嘌呤-葡萄糖-甘露醇） MAP(甘露醇-腺嘌呤-磷酸鹽)可保存35天AS-1 AS-3 AS-5可保存42天四、洗滌紅細胞 概念 洗滌紅細胞是采用物理方式在無菌條件小，將保存期內(nèi)濃縮紅細胞或懸浮紅細胞等制劑用生理鹽水洗滌，去除絕大部分非紅細胞成分，并將紅細胞懸浮在生理鹽水中即為洗滌紅細胞。 洗滌紅細胞血漿清除率為 98%，白細胞清除率 80%，紅細胞的回收率 70%封閉式三聯(lián)鹽水袋洗滌法封閉式三聯(lián)鹽水袋洗滌法 三聯(lián)鹽水袋為三個容積350-400ml 單袋用塑料管道相連的密閉無菌、無熱源系統(tǒng)。每袋內(nèi)裝有200ml 注射用生理鹽水，

19、主袋連接穿刺針頭一個。三個袋子之間用塑料夾子夾住，彼此不相連。制備1）保存期內(nèi)懸浮紅細胞、濃縮紅細胞或全血均可以用作洗滌紅細胞的原料細胞，如已在4 冰箱保存，洗滌前從冰箱內(nèi)取出置室溫30-60 分鐘；2 ）將三聯(lián)袋鹽水袋主袋上的針頭插入紅細胞袋的進針座內(nèi)，把主袋內(nèi)200ml 鹽水加入紅細胞袋內(nèi)，充分混勻后，倒流入三聯(lián)袋主袋內(nèi)；3 ）4 個袋子分別裝于2 個離心套筒中（一側為血袋與空袋，另一側為兩個鹽水袋）平衡后，對稱放入離心機內(nèi)，在222 以4500g 的離心力離心3 分鐘；4 ）離心后將裝有血液的血袋懸掛于支架上，把上清和白膜分入空袋內(nèi)。熱合切斷與廢液相連的塑料管，棄去廢液袋5）重復2）、3

20、）、4）步驟，依次洗滌紅細胞3次；6）洗滌紅細胞制品在三聯(lián)袋的末袋內(nèi)，將與末袋相連的塑料管內(nèi)充滿紅細胞，分段熱合留樣本，用以臨床鑒定血型和交叉配血開放式洗滌法 如無三聯(lián)鹽水袋裝置，可以用普通醫(yī)用生理鹽水，在百級超凈臺內(nèi)連接洗滌或用無菌連接裝置在普通工作間連接洗滌1）同封閉式洗滌法中1）的要求；2）在超凈臺上用無菌操作將生理鹽水加入被洗滌的紅細胞袋內(nèi)，混勻；3 ）在222 以1160g 的離心力離心8 分鐘；4 ）在超凈臺上將上清液及白膜分入廢液袋中，再加入生理鹽水并混勻；5 ）在4 2 以5000g 的離心力離心6 分鐘；6 ）如此重復4 ）、5 ）步驟，反復洗滌3 次，最后一次分出上清與白膜

21、后，在洗滌的紅細胞制品中加入紅細胞量的一半生理鹽水，配制成70%比積的紅細胞懸液。3）機器洗滌法 洗滌紅細胞的機型較多。國內(nèi)較常見于洗滌冷凍紅細胞。保存 洗滌紅細胞保存溫度42 自制備后盡快輸注，最好在6小時之內(nèi)輸用，保存不超過24小時五、冰凍紅細胞 概念 冰凍紅細胞又稱為冰凍解凍去甘油紅細胞，是采用甘油作為冰凍保護劑深低溫保存，根據(jù)臨床需要再進行解凍洗滌去甘油處理的特殊紅細胞制劑 紅細胞低溫保存法為英國學Smith首先發(fā)明。后來，人們反復研究逐步認識到，冰凍紅細胞是長期保存紅細胞的一種理想方法。紅細胞的代謝速度取決于保存溫度，如把保存溫度降到使紅細胞代謝率幾乎停止時，紅細胞代謝耗能最少。達到

22、延期保存紅細胞的目的。但血液在零度以下會結冰，在細胞內(nèi)外形成冰晶，破壞細胞內(nèi)結構，使細胞外液滲透壓升高，促進細胞脫水，最終引起細胞的解體死亡，所以必須加入防凍液。 一是細胞內(nèi)防凍劑，具有高溶解度及低細胞毒性，降低冰點，增加不凍水量如甘油，二甲亞砜 細胞外防凍劑，降低冰點，增加不凍水量。如羥乙基淀粉，乳糖。 冰凍紅細胞最常用的防凍劑為甘油制備高濃度甘油慢凍法1）鹽水洗滌法： 甘油化：向一單位全血分離后的濃縮紅細胞內(nèi)加入57.1% 甘油溶液160ml ，加甘油的速度要先慢后快，在15-20分鐘內(nèi)加完，同時不斷震蕩，在室溫平衡半小時后，放入-80 低溫冰箱保存。解凍：于輸注前將貯存的冰凍紅細胞從低溫

23、冰箱取出，放入37恒溫水浴箱中緩慢搖動，融化到全部解凍。洗滌脫甘油：先加入9%NaCl40ml （5 分鐘內(nèi)加完），以每分鐘60-70ml 的速度加入0.9%NaCl250ml，離心去上清液；再以每分鐘60-70ml 的速度加入0.9%NaCl 400ml, 離心去上清液；另加0.9%NaCl 100ml，離心去上清液；最后加入0.9%NaCl 100ml制成紅細胞懸液供臨床輸注2）糖液洗滌法甘油化： 向一單位全血分離后余下100-120ml 紅細胞中緩慢加入等容積的甘油化試劑，大約10分鐘，并不斷攪拌，室溫平衡半小時后放入-80 低溫冰箱保存；解凍：同鹽水洗滌法；洗滌脫甘油：邊攪拌邊加入與甘

24、油化紅細胞等體積的50% 的葡萄糖液，再加入蔗糖溶液，等待紅細胞聚集沉淀后去除上清液。再用10% 蔗糖溶液500ml 反復洗滌兩次，除去上清液。加入生理鹽水混勻，離心除去上清液。再加入生理鹽水100ml 制成紅細胞懸液。(2)低濃度甘油超速冷凍法 甘油濃度在20% 左右，將紅細胞快速（1.5-2.0分鐘）冰凍并保存在-196 液氮中，輸注前從液氮中取出，立即在45水浴中震蕩快速解凍并進行洗滌保存冰凍紅細胞最大的有點可長期保存，高濃度甘油的紅細胞可以保存3年，低濃度甘油超速冷凍的紅細胞可以保存10年。高濃度甘油冷凍的紅細胞在-80保存，超低溫冰箱即可保存。解凍后的紅細胞保存在溫度42 自制備后盡

25、快輸注，最好在6小時之內(nèi)輸用，保存不超過24小時六、年輕紅細胞概念 年輕紅細胞是一種具有較多的網(wǎng)織紅細胞、酶活性相對增高、平均細胞年齡較小的紅細胞成分。大多用血液細胞分離機制備。年輕紅細胞存活期明顯長于成熟紅細胞，半存活期為44.9天，而成熟紅細胞僅為29天保存保存 輸入體內(nèi)可相對延長存活期，所以對長期依賴輸血的貧血患者，重型珠蛋白生成障礙性貧血患者療效較好。 保存同其他紅細胞成分七、輻照紅細胞 用射線照射滅活活性淋巴細胞的紅細胞制劑，用來預防TA-GVHD的發(fā)生，血液制劑的最佳輻照量是完全消除供血者淋巴細胞的有絲分裂能力而不破壞其他血液細胞功能。我國要求的照射劑量為25Gy.保存 美國FDA

26、規(guī)定紅細胞輻照后保存不超過28天，最好盡快輸注，輸后體內(nèi)回復率應75%。歐洲會議推薦紅細胞的輻照應在采血后14天內(nèi)進行，并且輻照后紅細胞的保存時間應在輻照后14天內(nèi)第三節(jié) 血小板的制備和保存手工法手工法 制備出的血小板為濃縮血小板并可進行多人分匯集保存和輸注，一般從獻血員采集200ml或400ml全血采用離心分離后手工擠壓分離出血小板制劑。目前我國規(guī)定手工法由200 ml全血制備濃縮血小板為1u,所含血小板數(shù)2.01010 機器單采法機器單采法 用血細胞分離機從單一獻血者體內(nèi)進行直接采集，制備的血小板為單采血小板，可從單一獻血者體內(nèi)采集1或2個成人治療劑量的血小板。我國規(guī)定一個治療單位（劑量）

27、為2.51011 無論哪種血小板均可進行進一步處理，已獲得更為高質量和安全的血小板制劑，如去除白細胞，病毒滅活，輻照等處理，可得到相應的血小板制劑一一 濃縮血小板（濃縮血小板（PC )PC )概念濃縮血小板（濃縮血小板（PC)PC)制劑制劑 是將室溫保存的多聯(lián)袋內(nèi)的全血，于采血后在一定時間內(nèi)（通常6小時內(nèi)）在2024的全封閉條件下將血小板分離出來并懸浮在血漿內(nèi)制成的成分血，已有研究表明，全血采集后室溫（ 2024）放置后再制備血小板，可得到更高產(chǎn)率。濃縮血小板（濃縮血小板（PC)PC)制劑有三種模式：制劑有三種模式：一種為富血小板血漿法（一種為富血小板血漿法（PRP)PRP)，新鮮采集的全血于

28、，新鮮采集的全血于4 46 6小時內(nèi)分小時內(nèi)分離離PRPPRP，再進一步分離為濃縮血小板（，再進一步分離為濃縮血小板（PCPC）另一種為白膜法，從白膜中經(jīng)第二次離心后提取血小板，將另一種為白膜法，從白膜中經(jīng)第二次離心后提取血小板，將5 5 6 6袋同型白膜和血漿用無菌接駁機串聯(lián)起來，并過濾后匯集成一袋同型白膜和血漿用無菌接駁機串聯(lián)起來，并過濾后匯集成一單位濃縮血小板。單位濃縮血小板。 制備方法制備方法多聯(lián)袋制備濃縮血小板多聯(lián)袋制備濃縮血小板(PRP(PRP法法) )1）全血采集于三聯(lián)袋或四聯(lián)袋主袋內(nèi)；2）采后 4-6小時內(nèi)，于222存放或輕度離心，以離心力1100g離心57分鐘或700 g離心

29、10分鐘，使紅細胞下沉，大部分血小板保留于血漿中為PRP層；3）將上層PRP分入第二轉移袋內(nèi)4）把第三袋內(nèi)的紅細胞保存液加入主袋壓積紅細胞內(nèi)，用熱合機熱合切斷主袋與第3 轉移袋之間的連接塑料管。在主袋與第2血袋間塑料管內(nèi)留取紅細胞與血漿為血樣品管；5）把第2PRP 袋協(xié)同第三轉移袋重度離心，溫度222，以離心力4650g，離心6分鐘，或3400g，離心10分鐘，使血小板下沉于底部形成沉淀；6）分離上層少血小板血漿進入第3 轉移袋內(nèi)，留下20-30ml(1單位全血所分出的血小板）或50-70ml （2單位全血所分血小板）血漿于第二血小板袋內(nèi)；7）在222靜置12小時，使血小板自然解聚重新懸浮形成

30、懸液，制備的血小板應放入222血小板振動器保存。多聯(lián)袋制備濃縮血小板多聯(lián)袋制備濃縮血小板（白膜法（白膜法）1）全血采集于四聯(lián)袋主袋內(nèi)2）將采血后的四聯(lián)袋，置222溫度離心，離心力為3100g，離心10分鐘3）把離心后的主袋置于分漿夾內(nèi)，先將大部分血漿分入第二袋，然后將白膜層（血小板、白細胞和少量紅細胞層）擠入第三袋，再從第二袋分出適量血漿至第三袋，夾住第2 、3 袋間的塑料管；4）將第四袋內(nèi)紅細胞保養(yǎng)液加入主袋內(nèi)，使之與紅細胞混勻，熱合主袋與第4 袋間的塑料管；5）將第3 、4 袋置222 輕度離心280 g ，6分鐘；6）第三袋上層懸液分入第4 袋即得濃縮血小板。機分法機分法全血采集于四聯(lián)袋

31、主袋內(nèi)將采血后的四聯(lián)袋，置222溫度離心，離心力為2100g，離心14分鐘開啟血細胞分離機的電腦，啟動分離血小板的程序，按儀器操作說明進行。分離結束后，取下分離好的懸浮紅細胞和血漿袋熱合，同時取下富有血小板層擠入2號轉移袋進行第二次離心，離心速度280 g ，10分鐘。溫度控制222將第二次離心后的血袋置于懸掛架上，進行分離，取下分離好的血小板，熱合稱重，一般約8090ml保存保存 PC PC均可在222震蕩保存數(shù)天，依據(jù)所使用的血小板專用保存袋而定，國外一般保存血小板5天，國內(nèi)可保存24小時。 國外常采用多人份匯集濃縮血小板進行白細胞過濾的方式，匯集后濃縮血小板制劑的保存期在美國規(guī)定為 4小

32、時，歐洲為6小時。我國雖未有明確規(guī)定，但匯集的多人份濃縮血小板制劑仍應盡早使用，保存不得超過24小時。二二 單采血小板單采血小板概念 單采血小板單采血小板 是使用血細胞分離機采集獻血者的血小板所制成的血小板制劑。由于單采血小板是從單一個體用全自動血細胞分離機采集而來，通常又稱為機采血小板。 單采血小板制劑應用廣泛，具有純度高、質量好等優(yōu)點，可以從單個獻血者體內(nèi)采集12個成人劑量的血小板(3.01011,且要白細胞的求去除白細胞，歐洲規(guī)定每單采血小板制劑中白細胞的殘留量必須5.0106，美國單采血小板白細胞殘留量幾乎能達到1.0106.單采血小板對獻血者的要求單采血小板對獻血者的要求獻血者除符合

33、捐獻全血的全部體檢要求外，還需符合以下要求：采前血小板計數(shù)150109L,血細胞比容38%。血小板計數(shù)300109L，可以進行采集2個血小板治療量（ 6.01011血小板）單采血小板的采集過程需要持續(xù)11.5小時，要求獻血者靜脈必須充盈良好。獻血前1天最好多飲水，當日必須吃早餐，宜清淡飲食，如稀飯、饅頭。要求獻血者在獻血前1周不得服用阿司匹林、吲哚美辛、保泰松、布洛芬、維生素E,雙密達莫，氨茶堿、青霉素及抗過敏藥物。單采血小板獻血間隔為1個月。制備制備 連續(xù)單采和非連續(xù)單采 美國規(guī)定每單位（1治療劑量）單采血小板計數(shù)為3.01011。 我國規(guī)定單采血小板計數(shù)應達到2.51011袋，白細胞混入量

34、5.0108 袋，紅細胞混入量8.0109袋。單采血小板的保存單采血小板的保存保養(yǎng)液為ACD-A及開放和采用普通血袋的單采血小板（125200ml)保存在222震蕩保存保存期為24小時。未經(jīng)開放處理并采用血小板專用保存袋的單采血小板保存在222震蕩保存保存期可保存5天。第四節(jié)第四節(jié) 血漿的制備和保存血漿的制備和保存 血漿是指抗凝全血經(jīng)離心去除紅細胞有形成分后的淡黃色液體，含有水，電解質和蛋白質，主要是白蛋白，免疫球蛋白和各種凝血因子。血漿可由單采或經(jīng)全血制備其他成分分離而來目前國內(nèi)常用的血漿制劑根據(jù)制備方法及來源的不同分為根據(jù)制備方法及來源的不同分為2 2類：類： 新鮮冰凍血漿和普通冰凍血漿根

35、據(jù)采集和方式不同還有單采血漿和病毒滅活血漿一、新鮮冰凍血漿一、新鮮冰凍血漿概念概念新鮮冰凍血漿新鮮冰凍血漿在全血采集后6小時（全血保養(yǎng)液為ACD）或8小時（全血保養(yǎng)液為CPD、CPDA-A)內(nèi)，在全封閉的條件下，將分離出的新鮮液體血漿速凍后并保存于-20以下冰箱即為新鮮冰凍血漿。制備制備可用二聯(lián)袋、三聯(lián)袋、四聯(lián)袋來制備 1）用三聯(lián)袋采集全血，于采后6小時內(nèi)經(jīng)第一次5000g的離心力離心7 分鐘，分出上層血漿。再將血漿第二次以5000g的離心力離心5 分鐘，分出清除紅細胞成分的血漿即為新鮮液體血漿；新鮮液體血漿立即放入-50 的速凍箱，在最短的時間內(nèi)迅速冷凍血漿，經(jīng)完成速凍的血漿再放入-20 以下的冰箱保存。 2）制備濃縮血小板后所得到的少血小板血漿和制備血小板、白膜后剩余的少血小板血漿可用作新鮮液體血漿，立即速凍并冷貯。保存保存 新鮮冰凍血漿含有全部凝血因子，包括不穩(wěn)定的第因子和第因子。 新鮮冰凍血漿保存于-20以下的冰箱可達一年，其后可轉為普通冰凍血漿。二二 、普通液體血漿、普通