蒲公英對(duì)大鼠急性顱腦損傷治療作用的實(shí)驗(yàn)研究

1、蒲公英對(duì)大鼠急性顱腦損傷治療作用的實(shí)驗(yàn)研究                     作者：張喆 鄢文海 楊 波 焦慶芳 呂海欣    【摘要】  目的 觀察蒲公英對(duì)急性創(chuàng)傷性腦損傷的治療作用，并探討該藥的作用機(jī)制與超氧化物歧化酶(SOD)以及谷胱甘肽過氧化物酶(GSHPX)的關(guān)系。方法 雄性SD大鼠48只，隨機(jī)分成以下6組：正常對(duì)照組、假手術(shù)組、腦

2、創(chuàng)傷組、蒲公英低劑量治療組(LDT組)、蒲公英中劑量治療組(MDT組)、蒲公英高劑量治療組(HDT組)，每組8只大鼠。采用Marmarou法制造大鼠重型彌漫性顱腦創(chuàng)傷模型，采用生物化學(xué)觀察蒲公英對(duì)大鼠腦組織中的丙二醛含量(MDA)、SOD活性、和GSHPX活性的影響。結(jié)果 與創(chuàng)傷對(duì)照組比較，LDT、MDT組大鼠腦組織MDA含量減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與創(chuàng)傷對(duì)照組比較，HDT組大鼠腦組織MDA含量明顯減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。與創(chuàng)傷對(duì)照組比較，LDT、MDT組大鼠腦組織SOD活性和GSHPX活性升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與創(chuàng)傷對(duì)照組比

3、較，HDT組大鼠腦組織SOD活性和GSHPX活性明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。結(jié)論 蒲公英通過增強(qiáng)創(chuàng)傷性腦損傷后SOD和GSH的活性，降低脂質(zhì)過氧化的水平，從而對(duì)創(chuàng)傷性腦損傷具有保護(hù)作用。     【關(guān)鍵詞】  蒲公英;創(chuàng)傷性腦損傷;超氧化物歧化酶;谷胱甘肽過氧化物酶    【Abstract】 Objective To observe the effect of TM on TBI, and to investigate the relation between the mechan

4、isms of TM and the activities of SOD and GSHPX.Methods Fortyeight male healthy SpragueDawley rats were randomly divided into 6 groups as follow :normal control group(C group),sham surgery group (SS group), traumatic brain injury group (TBI group, PR group), low dose TM treated group (LDT group), med

5、ium dose TM treated group (MDT group), high dose TM treated group (HDT group)， each group had 8 rats. TBI model was established by using improved Marmarou method. Biochemical assay was used to observe the effects of TM on MDA contents, activities of SOD, and the activities of GSHPX.Results The MDA c

6、ontent in LDT and MDT were significantly lower than those in TBI group (P<0.05); The MDA content in HDT was significantly lower than that in TBI group(P<0.01); Compared with the TBI group, the activities of SOD and GSHPX in LDT and MDT group significantly increased (P<0.05); The activities

7、of SOD and GSHPX in HDT were significantly higher than those in TBI group(P<0.01).Conclusion TM can increase the reduced level of SOD and GSHPX activity, and inhibit the level of lipid peroxidation after TBI, and therefore has neuroprotective actions after acute traumatic brain.   

8、 【Key words】 Taraxacum mongo;Traumatic brain injury; SOD; GSHPX    創(chuàng)傷性腦損傷(traumatic brain injury, TBI)在現(xiàn)代人活動(dòng)中有較高的發(fā)生率，繼發(fā)性腦損傷是指在原發(fā)性腦損傷的基礎(chǔ)上發(fā)生的一系列病理生理改變、腦組織各種物質(zhì)代謝紊亂及細(xì)胞凋亡等，包括凋亡、氧自由基的釋放等，它們均可造成腦組織的繼發(fā)性損害，進(jìn)一步加重TBI病人的腦損傷程度12。    蒲公英(taraxacum mongo,TM)是菊科多年生草本植物，現(xiàn)

9、代藥理研究表明，蒲公英具有光譜抗菌、抗突變、抗腫瘤、抗氧化等多種藥理學(xué)用。但蒲公英對(duì)細(xì)胞凋亡是否有影響以及其對(duì)顱腦損傷能否起到治療作用，目前國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)尚未見報(bào)道。本文觀察蒲公英對(duì)急性創(chuàng)傷性腦損傷的治療作用，并探討該藥的作用機(jī)制與超氧化物歧化酶(SOD)、以及谷胱甘肽過氧化物酶(GSHPX)的關(guān)系。    1 材料與方法    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康雄性SD大鼠，體質(zhì)量300350g，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。    1.2 藥物及試劑 蒲公英由鄭州市藥材公司提供并鑒定。

10、60;   1.3 實(shí)驗(yàn)方法            1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 11.0統(tǒng)計(jì)軟件包，采用方差分析，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，數(shù)據(jù)用(±s)表示，檢驗(yàn)水準(zhǔn)=0.05。    2 結(jié)果    2.1 蒲公英對(duì)急性顱腦損傷大鼠腦組織MDA含量的影響 與正常對(duì)照組、假手術(shù)組比較，創(chuàng)傷組大鼠腦組織中MDA含量均明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0

11、.01);與創(chuàng)傷對(duì)照組比較，LDT、MDT組大鼠在蒲公英治療3d后，其腦組織MDA含量減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與創(chuàng)傷對(duì)照組比較，HDT組大鼠腦組織MDA含量明顯減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。提示中、小劑量的蒲公英能夠抑制創(chuàng)傷性大鼠腦組織MDA含量的升高，大劑量的蒲公英能夠明顯抑制創(chuàng)傷性大鼠腦組織MDA含量的升高;空白對(duì)照組與假手術(shù)組2組大鼠腦組織MDA含量之間差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表1。表1 蒲公英對(duì)大鼠急性顱腦損傷后腦組織中MDA含量的影響同C組，SS組相比較，*P<0.01;同TBI組相比較，#P<0.05;同TBI組相比較，P<0.0

12、1    2.2 蒲公英對(duì)急性顱腦損傷大鼠腦組織SOD活性的影響 與正常對(duì)照組、假手術(shù)組比較，創(chuàng)傷組大鼠腦組織中SOD活性均明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);與創(chuàng)傷對(duì)照組比較，LDT、MDT組大鼠在蒲公英治療3d后，其腦組織SOD活性升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與創(chuàng)傷對(duì)照組比較，HDT組大鼠腦組織SOD活性明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。提示中、小劑量的蒲公英能夠促進(jìn)創(chuàng)傷性大鼠腦組織SOD活性的升高，大劑量的蒲公英能夠明顯促進(jìn)創(chuàng)傷性大鼠腦組織SOD活性的升高;空白對(duì)照組與假手術(shù)組2組大鼠腦組織SOD活性

13、之間差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表2。表2 蒲公英對(duì)大鼠急性顱腦損傷后腦組織中SOD活性的影響 同C組，SS組相比較，*P<0.01;同TBI組相比較，#P<0.05;同TBI組相比較，P<0.012.3 蒲公英對(duì)急性顱腦損傷大鼠腦組織GSHPX活性的影響 與正常對(duì)照組、假手術(shù)組比較，創(chuàng)傷組大鼠腦組織中GSHPX活性均明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);與創(chuàng)傷對(duì)照組比較，LDT、MDT組大鼠在蒲公英治療3d后，其腦組織GSHPX活性升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與創(chuàng)傷對(duì)照組比較，HDT組大鼠腦組織GSHPX活性明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.0

14、1)。提示中、小劑量的蒲公英能夠促進(jìn)創(chuàng)傷性大鼠腦組織GSHPX活性的升高，大劑量的蒲公英能夠明顯促進(jìn)創(chuàng)傷性大鼠腦組織GSHPX活性的升高;空白對(duì)照組與假手術(shù)組2組大鼠腦組織GSHPX活性之間差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表3。表3 蒲公英對(duì)大鼠急性顱腦損傷后腦組織中GSHPX活性的影響    3 討論    蒲公英具有十分有效的保健作用，其熱水提取液有一定抗腫瘤作用6。蒲公英提取物總黃酮能有效清除超氧陰離子自由基、羥自由基，抑制不飽和脂肪酸的氧化7。    大量的實(shí)驗(yàn)證據(jù)表明，各種氧自

15、由基能攻擊生物膜中的多不飽和脂肪酸，引發(fā)脂質(zhì)過氧化作用，造成多種類型的細(xì)胞損傷8。本研究結(jié)果表明蒲公英能夠有效減少脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，對(duì)顱腦損傷大鼠有一定的保護(hù)作用。SOD是一類清除自由基的主要的蛋白酶，對(duì)需氧生物的生存起著重要的作用，是生物體防御氧毒性的關(guān)鍵，是唯一能夠特異性清除超氧陰離子自由基(O2)的抗氧化酶。超氧陰離子自由基是體內(nèi)其他自由基的最初引發(fā)劑，可能引發(fā)“瀑布狀”自由基鏈?zhǔn)椒磻?yīng)9。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明蒲公英能夠提高創(chuàng)傷性大鼠腦組織SOD活性，能夠有效減少自由基對(duì)腦組織的損傷，是一種較強(qiáng)的自由基清除劑。GSHPX是細(xì)胞內(nèi)抗脂質(zhì)過氧化作用的保護(hù)系統(tǒng)主要成分之一，與維生素E協(xié)同地保護(hù)細(xì)胞免受氧

16、化損傷。GSHPX可通過還原性谷胱甘肽催化還原過氧化物和有機(jī)過氧化氫物，清除體內(nèi)脂質(zhì)過氧化物，抑制其有害反應(yīng)的重要作用，從而保護(hù)細(xì)胞和其他如DNA、蛋白及脂質(zhì)體等敏感生物分子免受氧自由基的損傷10。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明蒲公英能夠提高創(chuàng)傷性大鼠腦組織GSHPX活性，能夠有效減少自由基對(duì)腦組織的損傷。以上結(jié)果提示蒲公英通過增強(qiáng)創(chuàng)傷性腦損傷后SOD和GSH的活性，降低脂質(zhì)過氧化的水平，從而對(duì)創(chuàng)傷性腦損傷具有保護(hù)作用。    【參考文獻(xiàn)】  1 Marmarou A, Foda MA, Van den Brink W, et al. A new model

17、of diffuse brain injury in rats. Part 1: Patho physiology and biomechanicsJ.J Neurosurg, 1994, 80(2):291300.2 王雙坤,劉佰運(yùn),郝淑煜，等.創(chuàng)傷性腦損傷的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蚃.中國(guó)交通醫(yī)學(xué)雜志,2005,19(4): 327329.3 Lewis SB, Finnie JW, Blumbergs PC, et al. A head impact model of early axonal injury in the sheepJ. J Neurotrauma, 1996, 13(9):5055

18、14.4 Wei X, Liu H, Sun X, et al. Hydroxysafflor yellow A protects rat barins against ischemiareperfusion injury by antioxidant actionJ.Neurosci Lett, 2005, 386(l):5862.5 徐叔云,卞如濂，陳修主編.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)M.第2版.北京:人民衛(wèi)生出版社，1991:508516.6 朱蔚云,龐竹林,梁敏儀,等.蒲公英對(duì)環(huán)磷酰胺致小鼠骨髓細(xì)胞突變作用的抑制研究J.癌變崎變突變，2003，15(3):164167.7 陳景耀,龔祝南,宰學(xué)明,等.蒲公英提取物黃酮類物質(zhì)成分及其抗氧化活性的初步研究J.中國(guó)野生植物資源,2001,20(3):2225.8 Marklund N, Clausen F, LewanderT,et al. Monitor