消毒和滅菌遺傳和變異講義

1、2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義1第三章 消毒與滅菌理化的方法，殺死細(xì)菌，防止、控制傳染病2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義2 1、名詞解釋?zhuān)合?、滅菌、抑菌、防腐、消毒、滅菌、抑菌、防腐?無(wú)菌無(wú)菌 2、了解常用的物理、化學(xué)消毒方法。 本章要點(diǎn)2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義3根據(jù)作用的對(duì)象、殺滅的程度： 消毒、滅菌、抑菌、防腐、無(wú)菌消毒、滅菌、抑菌、防腐、無(wú)菌2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義4 消毒 disinfection 殺死物體上的方法（芽胞及非病原微生物不一定能殺死）。（非活組織）滅菌 sterilization 殺死物體上的方法（包括所有細(xì)菌

2、繁殖體及芽胞芽胞）。消毒滅菌概念抑菌 bacteriostasis 抑制細(xì)菌在體內(nèi)、外生長(zhǎng)的方法(一般用于活組織）2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義5防腐 antisepsis 防止或抑制細(xì)菌生 長(zhǎng)繁殖的方法。（非活組織） 有苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸、山梨酸鉀、丙酸鈣無(wú)菌 asepsis 不含活菌。防止細(xì)菌進(jìn)入機(jī)體或物品的技術(shù)，稱(chēng)。2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義6第一節(jié) 物理消毒滅菌法 一、常用方法 1、熱力法（干熱、濕熱） 2、輻射消毒（紫外線(xiàn)、電離幅射、微波） 3、濾過(guò)除菌（除菌濾器、適用物品） 4、超聲波（機(jī)制：裂解細(xì)菌，主要用于粉碎細(xì)胞、提取抗原） 5、干燥與低溫抑

3、菌2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義7 熱力滅菌法 高溫殺滅細(xì)菌焚燒-最徹底的滅菌方法燒灼-直接用火焰滅菌方法干烤-加熱160-180 2h干熱滅菌法干熱滅菌法2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義8濕熱滅菌法加壓蒸汽滅菌法最有效的最有效的滅菌方法 121 20-30mim煮沸消毒法水煮100 5mim(繁殖體)-2h(芽胞)流通蒸汽消毒法巴氏消毒法間歇蒸汽滅菌法水蒸汽100 15-30mim(繁殖體)反復(fù)多次流動(dòng)蒸汽間歇加熱滅菌較低的溫度（61 30mim/71 30s）殺滅致病菌2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義9濕熱滅菌與干熱滅菌的比較同一溫度下，濕熱滅菌比干熱滅菌效

4、果好同一溫度下，濕熱滅菌比干熱滅菌效果好原因原因1、濕熱中細(xì)菌菌體蛋白較易凝固2、濕熱的穿透力比干熱大3、濕熱的蒸汽有潛熱2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義10輻射殺菌法 紫外線(xiàn)殺菌機(jī)理：殺菌機(jī)理：波長(zhǎng)240-300nm的紫外線(xiàn)具有殺菌作用,其中260-266nm殺菌作用最強(qiáng)干擾DNA的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄紫外線(xiàn)穿透力較弱不耐熱物品的表面消毒特特 點(diǎn)：點(diǎn)：應(yīng)用范圍：應(yīng)用范圍：空氣消毒 手術(shù)室、傳染病房、細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室 2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義11殺菌機(jī)理：殺菌機(jī)理：應(yīng)用范圍：應(yīng)用范圍：電離輻射包括高速電子、X射線(xiàn)和 射線(xiàn)產(chǎn)生游離基,破壞DNA。一次性醫(yī)用塑料制品的消毒食品的消毒-不

5、破壞其營(yíng)養(yǎng)成分 2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義12濾過(guò)除菌法用物理阻留的方法 將液體或空氣中的細(xì)菌除去,以達(dá)到除菌目的濾菌器濾菌器含有微細(xì)小孔0.22m,只允許液體或氣體及 孔徑0.22m的顆粒通過(guò)，細(xì)菌不能濾過(guò) 適用范圍適用范圍血清、毒素、抗生素以及空氣等的除菌 2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義13不銹鋼濾器不銹鋼濾器針式濾器針式濾器2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義142022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義15第二節(jié) 化學(xué)消毒滅菌法 1、化學(xué)消毒劑的殺菌機(jī)制、化學(xué)消毒劑的殺菌機(jī)制 2、常用消毒劑、常用消毒劑 3、影響消毒劑作用的因素、影響消毒劑作用的因素2

6、022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義16一、化學(xué)消毒劑作用機(jī)制 1、促進(jìn)菌體蛋白質(zhì)變性凝固 （酚、醇、醛、酸堿類(lèi)） 2、干擾細(xì)菌酶系統(tǒng)和代謝 （氧化劑、重金屬鹽類(lèi)）3、損傷細(xì)菌細(xì)胞膜，增加其通透性 （表面活性劑、脂溶劑）2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義172022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義18各種消毒劑的應(yīng)用用途使用濃度種類(lèi)皮膚消毒3%5%碘酒皮膚消毒、手術(shù)部位消毒3%5%硫柳汞手術(shù)洗手、浸泡手術(shù)器械3%5%新潔而滅皮膚、粘膜、小創(chuàng)傷消毒3%5%紅汞皮膚、體溫計(jì)消毒3%5%乙醇淺表創(chuàng)傷消毒3%5%龍膽紫塑料、玻璃器材消毒3%5%過(guò)氧乙酸皮膚、尿道、蔬菜、水果消毒3%5%高

7、錳酸甲地面、器具表面、皮膚消毒3%5%石炭酸70%75%高錳酸鉀0. 1%2%0.1%0.2%0.3%2%2.5%2%4%2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義19選擇適當(dāng)?shù)南緞┑投镜投緝r(jià)廉價(jià)廉低破壞低破壞易貯藏易貯藏方便方便有效有效2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義20影響消毒劑作用的因素消毒劑種類(lèi)濃度時(shí)間細(xì) 菌菌齡種類(lèi) 環(huán) 境酸堿度有機(jī)物溫度2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義21本章小結(jié) 消毒 滅菌 抑菌 防腐 無(wú)菌高壓蒸汽滅菌最有效2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義22第四章 遺傳與變異變異：變異： 親代與子代、子代與子代之間性狀出親代與子代、子代與子代之間

8、性狀出現(xiàn)差異現(xiàn)差異消毒和滅菌遺傳和變異講義2022-3-1723變異：變異： 親代與子代、子代與子代之間性狀出親代與子代、子代與子代之間性狀出現(xiàn)差異?，F(xiàn)差異。遺傳：遺傳： 親代的生物學(xué)性狀相對(duì)穩(wěn)定地傳給子親代的生物學(xué)性狀相對(duì)穩(wěn)定地傳給子代，使物種得以延續(xù)。代，使物種得以延續(xù)。 形態(tài)結(jié)構(gòu)、生長(zhǎng)代謝、致病性、耐藥性、形態(tài)結(jié)構(gòu)、生長(zhǎng)代謝、致病性、耐藥性、抗原性等?？乖缘?。遺傳性變異：遺傳性變異：非遺傳性變異：非遺傳性變異：基因結(jié)構(gòu)改變基因結(jié)構(gòu)改變表型改變表型改變2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義24 名詞解釋轉(zhuǎn)化 接合 轉(zhuǎn)導(dǎo) 溶原性轉(zhuǎn)換本章要點(diǎn)2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義25

9、 一、細(xì)菌變異的現(xiàn)象現(xiàn)象 二、細(xì)菌遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ) 三、細(xì)菌變異的機(jī)制主要內(nèi)容轉(zhuǎn)化 接合 轉(zhuǎn)導(dǎo) 溶原性轉(zhuǎn)換2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義26第二節(jié) 細(xì)菌遺傳變異 一、細(xì)菌變異的現(xiàn)象 1 .1 .形態(tài)結(jié)構(gòu)變異形態(tài)結(jié)構(gòu)變異 L型菌；鞭毛（H-O變異）、 莢膜、芽胞變異等 2.2.毒力變異毒力變異 毒力增強(qiáng)-白喉棒狀桿菌 ； 毒力減弱-疫苗制備(BCG) 3.3.耐藥性變異耐藥性變異 臨床治療中嚴(yán)重問(wèn)題 痢疾志賀菌 鏈霉素依賴(lài)菌 4.4.菌落變異菌落變異 從光滑型（S） 粗糙型（R）2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義27細(xì)胞壁缺陷型細(xì)菌L型 細(xì)菌L型的命名 細(xì)菌L型培養(yǎng)后菌落特

10、征（圖） 細(xì)菌L型的臨床意義細(xì)菌細(xì)菌L L型菌落：型菌落：A A 細(xì)菌型菌落細(xì)菌型菌落 B B 荷包蛋樣荷包蛋樣L L型菌落型菌落 C C 顆粒型顆粒型L L型菌落型菌落 D D 絲狀型絲狀型L L型菌落型菌落2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義28二、 細(xì)菌變異的物質(zhì)基礎(chǔ) 染色體 質(zhì)粒 轉(zhuǎn)座子2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義29 （一）細(xì)菌染色體 細(xì)菌染色體為一環(huán)狀雙股DNA鏈，呈超螺旋形式纏繞成團(tuán)，構(gòu)成核質(zhì)（染色體長(zhǎng)度約為菌體總長(zhǎng)1000倍）。內(nèi)含細(xì)菌主要的遺傳信息。 目前，已完成約80種細(xì)菌全基因序列測(cè)定，對(duì)深入研究細(xì)菌致病機(jī)制及進(jìn)化有重要意義。二 細(xì)菌遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)20

11、22-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義30（二）質(zhì)粒 plasmid概念：質(zhì)粒為細(xì)菌染色體外的遺傳物質(zhì)，環(huán)狀雙股DNA。質(zhì)粒攜帶有遺傳信息，控制某些特定的遺傳性狀，可獨(dú)立復(fù)制，與細(xì)菌的遺傳變異有關(guān)。2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義31l種類(lèi)：l致育質(zhì)粒/F質(zhì)粒-(fertility plasmid)F質(zhì)粒， 產(chǎn)生性菌毛-F+l耐藥質(zhì)粒耐藥質(zhì)粒- (resistance plasmid) R質(zhì)粒l毒力質(zhì)粒毒力質(zhì)粒- (virulence plasmid) Vi質(zhì)粒，產(chǎn) 生相應(yīng)毒素l細(xì)菌素質(zhì)粒-Col質(zhì)粒，產(chǎn)生細(xì)菌素l代謝質(zhì)粒-編碼產(chǎn)生相關(guān)酶，如脲酶、枸櫞酸鹽 利用酶等2022-3-17

12、消毒和滅菌遺傳和變異講義32 特征： 自我復(fù)制-可與染色體同步/不同步 決定細(xì)菌某些生物學(xué)性狀 可自行丟失及消除，不影響細(xì)菌存活 可轉(zhuǎn)移性-可以各種方式轉(zhuǎn)移到其它菌 相容性-幾種質(zhì)?？纱嬖谟谕痪w內(nèi)，稱(chēng)相容性質(zhì)粒2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義33三、轉(zhuǎn)座因子l概念： 是一類(lèi)在細(xì)菌染色體、質(zhì)粒上 可自行移動(dòng)的特異性的獨(dú)立的DNA片段。種類(lèi)：1.插入序列2.轉(zhuǎn)座子3.整合子2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義34 意義： 改變遺傳物質(zhì)的核苷酸序列 影響插入點(diǎn)附近基因的表達(dá)（失活）l均能造成細(xì)菌性狀的變異2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義35轉(zhuǎn)座2022-3-17消毒和滅

13、菌遺傳和變異講義36噬菌體 感染細(xì)菌的一類(lèi)病毒病毒2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義37 毒性噬菌體： 殺死細(xì)菌 溫和噬菌體/前噬菌體：其基因整合到細(xì)菌基因組中2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義38噬菌體生活周期前噬菌體形成2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義39三、 細(xì)菌變異的機(jī)制 基因突變與修復(fù) 基因的轉(zhuǎn)移與重組2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義40 （一）基因突變概念 突變 mutation 指細(xì)菌遺傳物質(zhì)的結(jié)構(gòu)突然發(fā)生的穩(wěn)定性的改變，可遺傳子代。根據(jù)涉及基因的多少分為點(diǎn)突變點(diǎn)突變及染色染色體畸變體畸變二種基因突變2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義4

14、1 （二） 基因突變的規(guī)律： 1、突變率低 2、自發(fā)性和隨機(jī)性基因突變2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義42 3、回復(fù)突變 野生型（自然環(huán)境下的表型株） 突變型（發(fā)生了基因突變的菌株）突變突變回復(fù)突變回復(fù)突變野生型突變型2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義43 基因的轉(zhuǎn)移與重組 二個(gè)細(xì)菌間部分遺傳基因，可以發(fā)生轉(zhuǎn)移（gene transfer)和重組 (recombination)，使受體菌獲得新的遺傳性狀。 細(xì)菌基因轉(zhuǎn)移和重組的方式： 轉(zhuǎn)化 （transformation) 接合 (conjugation) 轉(zhuǎn)導(dǎo) (transduction) 溶原性轉(zhuǎn)換 (lysogenic

15、conversion) 原生質(zhì)體融合（protoplast fusion)基因的來(lái)源與基因的來(lái)源與載體載體2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義44（一）轉(zhuǎn)化 transformation 概念 供體菌游離的DNA片段直接直接被受體菌攝取，使受體菌獲得新的性狀小鼠體內(nèi)肺炎球菌轉(zhuǎn)化經(jīng)典試驗(yàn)2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義45有莢膜肺炎鏈球菌（活菌）IIIS無(wú)莢膜肺炎鏈球菌（活菌）IIR有莢膜肺炎鏈球菌（死菌）IIISIIR活菌+IIIS死菌或IIR活菌+提取的IIIS DNA分離出IIIS型有莢膜的活菌小鼠體內(nèi)肺炎鏈球菌轉(zhuǎn)化試驗(yàn)Griffith(1928)分離出IIIS2022-3

16、-17消毒和滅菌遺傳和變異講義46 轉(zhuǎn)化的DNA片段稱(chēng) 轉(zhuǎn)化因子 轉(zhuǎn)化因子分子量小，不超過(guò)1020個(gè)基因，才可能被受體菌攝取 攝入的供體菌DNA片段與受體菌相應(yīng)DNA重組 重組菌；重組菌繁殖時(shí)，就可形成重組突變株，獲得供體菌的某些性狀。2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義472022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義48（二）接合 conjugation 概念 供體菌通過(guò)性菌毛將遺傳物質(zhì)（質(zhì)粒）傳遞給受體菌（通過(guò)接合傳遞的質(zhì)粒有F質(zhì)粒、R質(zhì)粒、Col質(zhì)粒、毒力質(zhì)粒）2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義49細(xì)菌接合示意圖 掃描電鏡150002022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義5

17、0接合 F因子的傳遞 F因子經(jīng)接合傳遞后在受體菌中可有三種存在方式：2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義51 F質(zhì)粒在受體菌中單獨(dú)存在，使F- 菌轉(zhuǎn)變?yōu)镕+ 菌，長(zhǎng)出性菌毛。2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義522022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義53F質(zhì)粒經(jīng)接合傳遞后,與染色體重組, 整合后的細(xì)菌能高效地轉(zhuǎn)移染色體上的基因，故稱(chēng)高頻重組株 high frequency recombinant,Hfr。 Hfr的細(xì)菌，基染色體上帶有F質(zhì)粒，因此，也可產(chǎn)生性菌毛2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義542022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義55形成高頻重組株：F質(zhì)粒與

18、細(xì)菌染色體整合，并使細(xì)菌長(zhǎng)出性菌毛高頻重組株Hfr2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義56Hfr 中的F質(zhì)粒有時(shí)也可從Hfr 中脫離下來(lái)，又形成了質(zhì)粒。脫離下來(lái)的F質(zhì)粒上可以帶有染色體上鄰近的一些基因，這種質(zhì)粒稱(chēng)為F質(zhì)粒2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義57F因子轉(zhuǎn)移與復(fù)制形成高頻重組株HfrHfrHfr形成F質(zhì)粒F從Hfr上脫離的F2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義58因此，帶有F質(zhì)粒、 Hfr、F質(zhì)粒的細(xì)菌均是 F+陽(yáng)性菌，有性菌毛，可與F- 菌接合2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義59 R質(zhì)粒的傳遞 目前，臨床上多重耐藥菌株的出現(xiàn)與R質(zhì)粒通過(guò)接合傳遞密切有關(guān)

19、。R質(zhì)粒組成： 耐藥傳遞因子（resistance transfer resistance transfer factor,RTF) factor,RTF) RTF類(lèi)似F因子，可編碼產(chǎn)生性菌毛并以接合方式轉(zhuǎn)移。耐藥決定因子（r r決定因子）決定因子） 2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義60RTFISR決定因子Tn9Tn4Tn5Tn9 耐氯霉素Tn4 耐氨芐青霉素、鏈霉素等Tn5 耐卡那霉素R質(zhì)粒組成示意圖2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義612022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義62（三）轉(zhuǎn)導(dǎo) transduction 概念 以溫和溫和噬菌體為載體，將供體菌的遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移到受體菌中，使受體菌獲得新的遺傳性狀。 噬菌體種類(lèi) 毒性噬菌體溫和噬菌體(復(fù)習(xí))2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義63 轉(zhuǎn)導(dǎo)方式（普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)、局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)） 普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)-轉(zhuǎn)導(dǎo)的DNA片段可以是供體菌染色體中任何部分。2022-3-17消毒和滅菌遺傳和變異講義64 普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)示意圖整合成功完全轉(zhuǎn)導(dǎo)整合失敗流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體DNA細(xì)菌DNA細(xì)菌被裂解感染新的細(xì)菌供體菌DNA與受體菌DNA整合2022-3-17消毒和滅菌遺傳和