干姜提取物和四逆湯對(duì)心衰兔心臟舒縮性能的作用比較

1、干姜提取物和四逆湯對(duì)心衰兔心臟舒縮性能的作用比較            【關(guān)鍵詞】  心力衰竭    【摘要】 目的 探討干姜提取物和四逆湯對(duì)心衰兔心臟舒縮性能的作用異同。方法 以40只純種新西蘭兔為研究對(duì)象，隨機(jī)分為高、中、低劑量干姜組和四逆湯組共4組，用恒速滴注戊巴比妥鈉的方法建立兔急性心力衰竭模型，造模成功后，經(jīng)口插管入胃灌服受試品，用RM-600四道生理儀測(cè)定造模前、造模成功時(shí)及用藥后5min、10min、15min、

2、20min、30min、45min、60min、90min、120min、150min兔的心肌舒縮性能指標(biāo)，觀察各時(shí)段指標(biāo)的變化情況。結(jié)果 （1）干姜提取物和四逆湯均能使心衰兔的LVSP、LV±dp/dtmax、LV+dp/dtmax和LV-dp/dtmax呈逐漸上升趨勢(shì)，中、高劑量干姜組的作用明顯優(yōu)于四逆湯組，差異有顯著或非常顯著性，P<0.05或P<0.001;（2）兩者均能使t-dp/dtmax和LVET呈逐漸縮短趨勢(shì);（3）四逆湯組藥后各時(shí)點(diǎn)LVEDP與藥前值比較均未見(jiàn)差異，而各劑量干姜組藥后各時(shí)點(diǎn)LVEDP呈下降趨勢(shì)，尤以高劑量組下降趨勢(shì)明顯，在藥后10150m

3、in各時(shí)點(diǎn)，與藥前值比較差異有非常顯著性，P<0.001。結(jié)論 干姜提取物和四逆湯均具有增強(qiáng)心肌收縮和舒張性能、降低外周阻力作用，以干姜提取物的作用更強(qiáng);同時(shí)干姜提取物在降低舒張末期壓方面具有優(yōu)勢(shì)，更有利于減輕心臟前負(fù)荷，改善冠脈灌流。    關(guān)鍵詞 心力衰竭 動(dòng)物模型 干姜提取物 四逆湯 心肌舒縮性能  Lu Chuanjian，Xu Qingwen，Ou Ming，et al.     Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine，Guangzhou510

4、405.     【Abstract】 Objective To investigate the difference between the effects of Ginger Extract and4-Retro-decoction（Si-ni Tang）on cardiac systolic/diastolic function of rabbit with heart failure.Methods 40pure-breed New-Zealand rabbits were randomly divided into4groups:low（0.028mL/

5、kg），middle（0.056mL/kg），high（0.112mL/kg）dosage ginger group and4-Retro-decoction group.The heart failure model of rabbit was established by intravenous administration of20g/L pentobarbital sodium at a certain rate.Oral tube perfusion of ginger extract and4-Retro-decoction were administrated after the

6、 establishment of the model.Their hemodynamic changes were detected before and after the model establishment，and at5，10，15，20，30，45，60，90，120，150minutes respectively after the ginger administration by a RM-6004-graph physiological monitor.Results All the LVSP，LV±dp/dt  max  ，LV+dp/dt&

7、#160; max  ，LV-dp/dt  max  showed an ascending tendency in the3Ginger groups and4-Retro-decoction group.The effects in the middle and high dosage groups were better than that of the4-Retro-decoction group，with statistical significance，P<0.001.（2）LVET and T-dp/dt  max  was

8、 shortened gradually in both ginger groups and4-Retro-dectoction group.（3）LVEDP remained stable at all time-points in the4-Retro-decoction group，while a remarkable descending was seen in3Ginger groups.Compared with the pre-administrational，the high dosage group was the most prominent with very signi

9、ficant difference at10150mins.P    Key words heart failure animal model ginger extract 4-Retro-decoction（Si-ni Tang）cardiac systolic/diastolic function       本課題組在前期研究已證實(shí)，干姜提取物能使心衰兔LVSP、LV±dp/dt  max  、LV+dp/dt  max  、LV-dp/dt

10、0; max  呈逐漸上升趨勢(shì)，t-dp/dt  max  呈逐漸縮短趨勢(shì)，LVEDP呈下降趨勢(shì)，顯示其改善心肌收縮性能，減輕心衰癥狀的作用，并隨劑量增加而作用增強(qiáng)。由于四逆湯是回陽(yáng)救逆的傳統(tǒng)名方，有研究證實(shí)其具有增加心衰大鼠心輸出量、增強(qiáng)心肌收縮力、較好維持心臟功能的作用，并能提高過(guò)氧化物歧化酶（SOD）活性、降低丙二醛（MAD）含量、抗氧化應(yīng)激、抑制心肌細(xì)胞凋亡，從而保護(hù)心肌細(xì)胞功能 1  。干姜是四逆湯的臣藥，在四逆湯的臨床療效中起著舉足輕重的作用。為了探討干姜在四逆湯中發(fā)揮的內(nèi)在作用，試從兩者改善心衰兔的心肌舒縮性能的作用異同開(kāi)展研究。1 材料與

11、儀器    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 純種新西蘭兔（體重2.3kg±）40只，雌雄各半，隨機(jī)分為4組，每組10只，分別為低劑量干姜組、中劑量干姜組、高劑量干姜組和四逆湯組。由廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物合格證號(hào):省科學(xué)技術(shù)委員會(huì)2002A025，省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理委員會(huì)26-2003A004。    1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑 （1）戊巴比妥鈉（由中國(guó)醫(yī)藥集團(tuán)上?；瘜W(xué)試劑公司提供，批號(hào)F20020915），用生理鹽水配備為3%和2%濃度備用。（2）肝素（由徐州萬(wàn)邦生化制藥有限公司提供，批號(hào)0203107）用生理鹽水配備為125萬(wàn)U/1

12、00ml和125萬(wàn)U/250ml濃度備用。（3）5%葡萄糖（由廣東大冢制藥有限公司提供，批號(hào)030125）。（4）超臨界流體CO 2 萃取的干姜提取物（由廣州美晨藥業(yè)有限公司提供，批號(hào)200209054）。（5）食用花生油（由中山市鷹嘜食品有限公司提供，產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)號(hào)GB1534-86）。（6）受試品劑量計(jì)算、配制及觀察用量:按標(biāo)準(zhǔn)體重動(dòng)物的等效劑量折算，兔口服干姜提取物的LD 50  為1.689ml/kg，分別取其1/60（0.028ml/kg）、1/30（0.056ml/kg）、1/15（0.112ml/kg）為低、中、高劑量。用食用花生油作溶劑，將干姜提取物稀釋100倍、50倍、

13、25倍，分別配制成1%、2%、4%干姜提取物，配制后的觀察用量均為2.8ml/kg。（7）四逆湯的制備:藥物組成制附子、干姜、炙甘草，均購(gòu)于廣東省中醫(yī)院藥劑科，并經(jīng)廣州中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室李薇教授鑒定，所購(gòu)藥品均為正品。根據(jù)中國(guó)藥典2000版第一部 2  規(guī)定的比例，分別二次文火煎煮，煎液用水浴法蒸發(fā)濃縮為400ml，使其終濃度為0.5g生藥/ml，置4冰箱中冷藏備用。根據(jù)動(dòng)物與人體表比換算 3  ，兔口服四逆湯的等效劑量為生藥0.75g/kg，取10倍等效劑量7.5g/kg作為本實(shí)驗(yàn)觀察用量，即四逆湯煎劑用量為15ml/kg。    1.

14、3 主要儀器 （1）RM-600四道生理儀（日產(chǎn)光電）;（2）江灣I型微型人工呼吸機(jī)（第二軍醫(yī)大學(xué)生產(chǎn)）;（3）恒速輸液泵（2132microperpex peristaltic）;（4）心導(dǎo)管、輸液管（江蘇無(wú)錫市錫山 南泉高分子醫(yī)械廠出產(chǎn)）;（5）常規(guī)手術(shù)器械。2 實(shí)驗(yàn)方法    2.1 手術(shù)方法 46   （1）用3%戊巴比妥鈉對(duì)新西蘭兔行左側(cè)耳緣靜脈注射麻醉，仰臥固定;（2）分離氣管及左側(cè)頸總動(dòng)脈后，切開(kāi)左側(cè)頸總動(dòng)脈，插入直徑1mm已充滿(mǎn)肝素（濃度125萬(wàn)U/250ml）的心導(dǎo)管，心導(dǎo)管經(jīng)壓力換能器連接四道生理儀，緩緩?fù)七M(jìn)同時(shí)觀察示波器，

15、當(dāng)波型提示導(dǎo)管已進(jìn)入左心室時(shí)停止推進(jìn);（3）氣管切開(kāi)，連接微型人工呼吸機(jī)，潮氣量380ml左右，呼吸頻率40次/min左右，并根據(jù)動(dòng)物體重等個(gè)體情況調(diào)節(jié)呼吸頻率和潮氣量。    2.2 造模方法 上述手術(shù)完畢后，經(jīng)右側(cè)耳緣靜脈留置的輸液管，注入肝素注射液1ml/kg（濃度125萬(wàn)U/100ml），然后持續(xù)滴注5%葡萄糖（滴速20滴/min）;穩(wěn)定10min后，記錄各項(xiàng)指標(biāo)的造模前基礎(chǔ)值;用輸液泵經(jīng)上述留置的輸液管，恒速輸入2%戊巴比妥鈉，先以0.15ml?kg -1  ?min -1  的滴速，密切觀察各指標(biāo)的變化，當(dāng)LV±dp/dt

16、  max  下降到基礎(chǔ)值的20%左右，暫停滴入，穩(wěn)定觀察10min，觀察過(guò)程若出現(xiàn) LV±dp/dt max 回升者，再以0.1ml?kg -1  ?min -1  恒速給予維持量。    2.3 給藥途徑及用量 經(jīng)口插管入胃，于造模成功并穩(wěn)定維持10min后，灌服受試品或?qū)φ掌?，并用適量蒸溜水沖管。各組用藥量如下:低劑量干姜組:1%干姜提取物2.8ml/kg;中劑量干姜組:2%干姜提取物2.8ml/kg;高劑量干姜組:4%干姜提取物2.8ml/kg;四逆湯組:四逆湯煎液15ml/kg。  &

17、#160; 2.4 指標(biāo)的觀察3 數(shù)據(jù)處理    使用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)分析:（1）各組自身比較:各組藥前后自身比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)。（2）組間比較:以（各時(shí)點(diǎn)實(shí)測(cè)值-藥前值）/藥前值×100%計(jì)算各指標(biāo)的變化率。采用單因素方差分析（One-Way ANOVA），方差齊性者選擇最小顯著差異法檢驗(yàn)（LSD檢驗(yàn)）;方差不齊者選擇Dunnett t 3 法進(jìn)行檢驗(yàn)。4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果    結(jié)果見(jiàn)表1、表2、表3。結(jié)果表明，干姜提取物和四逆湯對(duì)心衰兔心肌舒縮性能的共同作用表現(xiàn)在幾方面:（1）使心衰動(dòng)物模型的LVS

18、P、LV±dp/dt  max  、LV+dp/dt  max  均呈逐漸上升趨勢(shì)，同時(shí)使t-dp/dt  max和LVET呈逐漸縮短趨勢(shì)，顯示其增強(qiáng)心肌收縮性能的作用;（2）使心衰動(dòng)物模型的LV±dp/dt  max  、LV-dp/dt  max  呈逐漸上升趨勢(shì)，顯示增強(qiáng)心肌舒張性能的作用;（3）使心衰動(dòng)物模型的t-dp/dt  max  呈逐漸縮短趨勢(shì)，顯示其降低外周阻力，減輕心臟后負(fù)荷的作用。通過(guò)以上幾方面的綜合作用，改善心衰兔的心臟功能，但其作用程度存在

19、一定的差異。    干姜提取物和四逆湯對(duì)心衰兔心肌舒縮性能的作用差異表現(xiàn)在幾方面:（1）四逆湯組與各劑量干姜組的t-dp/dt  max  和LVET的變化率組間差異無(wú)顯著性;（2）就LVSP而言，四逆湯組藥后120min時(shí)與高劑量干姜組之間，藥后150min時(shí)與中劑量干姜組之間，差異有顯著性或差異有非常顯著性，P<0.05或P<0.01;（3）就LV±dp/dt  max  而言，四逆湯組與高劑量干姜組在藥后30150min各時(shí)點(diǎn)均有差異，45min、60min、150min差異有非常顯著性，P<

20、;0.01，90120min差異有非常顯著性，P<0.001;（4）就LV+dp/dt  max  而言，四逆湯組與高劑量干姜組在藥后90150min各時(shí)點(diǎn)差異均有顯著性，P<0.05;（5）就LV-dp/dt  max  而言，四逆湯組與中劑量干姜組在藥后30150min各時(shí)點(diǎn)差異均有顯著性，90min時(shí)差異有非常顯著性，P<0.01，與高劑量干姜組在藥后30150min各時(shí)點(diǎn)均有差異，30min和150min時(shí) 差異有非常顯著性，P<0.01，45120min各時(shí)點(diǎn)差異有非常顯著性，P<0.001。（6）四逆湯組藥后各時(shí)

21、點(diǎn)LVEDP與藥前值比較均未見(jiàn)差異，而各劑量干姜組藥后各時(shí)點(diǎn)LVEDP呈下降趨勢(shì)，尤以高劑量組下降趨勢(shì)明顯，在藥后10150min各時(shí)點(diǎn)，與藥前值比較差異有非常顯著性，P<0.001。    表1 干姜提取物和四逆湯對(duì)心臟舒縮性能的影響 （略）注:與藥前值比較， P<0.05， P<0.01， P<0.001;與四逆湯組比較， # P<0.05;高劑量組與中劑量組比較， P表2 干姜提取物和四逆湯對(duì)心臟舒縮性能的影響 （略）       注:與藥前值比較， P<0.05

22、， P<0.01， P<0.001;與溶劑組比較， # P<0.05， # P<0.01， #  P<0.001。高劑量組與中劑量組比較， P<0.05;高劑量組與低劑量組比較， P<0.05， P<0.01， P<0.001表3 干姜提取物和四逆湯對(duì)心臟舒縮性能的影響 （略）注:與藥前值比較， P<0.05， P<0.01， P<0.001;與四逆湯組比較， # P<0.05， # P<0.01， #  P<0.001;高劑量組與中劑量組比較， P<0.05;高劑量組與低劑量組比較， P<0.05， P<0.01， P<0.0015 結(jié)論（1）中、高劑量干姜組，尤其是高劑量干姜組提高LVSP、LV±dp/dt  max  、LV+dp/dt  max  和LV-dp/dt  max  的幅度明顯比四逆湯組大，具有較強(qiáng)的增強(qiáng)心肌收縮和舒張性能的作