血小板檢查模板.ppt課件

1、血小板檢查血小板檢查檢驗(yàn)系臨檢教研室檢驗(yàn)系臨檢教研室 xx1感謝你的觀看2019年9月13目的要求目的要求掌握：血小板計(jì)數(shù)的原理、方法、質(zhì)量掌握：血小板計(jì)數(shù)的原理、方法、質(zhì)量控制、參考值、方法學(xué)平價(jià)及臨床意義?？刂啤⒖贾?、方法學(xué)平價(jià)及臨床意義。重點(diǎn)重點(diǎn) : 血小板計(jì)數(shù)血小板計(jì)數(shù)難點(diǎn)難點(diǎn): 血小板形態(tài)血小板形態(tài)2感謝你的觀看2019年9月13一、概述一、概述3感謝你的觀看2019年9月13（一）血小板的生成（一）血小板的生成造血多能干細(xì)胞造血多能干細(xì)胞TPO調(diào)控調(diào)控分化分化原巨核細(xì)胞原巨核細(xì)胞促進(jìn)巨核細(xì)胞祖細(xì)胞增促進(jìn)巨核細(xì)胞祖細(xì)胞增殖、分化、成熟與釋放殖、分化、成熟與釋放plt 進(jìn)入血液進(jìn)入血

2、液Plt 2/3在循環(huán)血，其余貯存于脾。在循環(huán)血，其余貯存于脾。4感謝你的觀看2019年9月13（二）血小板的破壞（二）血小板的破壞血小板的平均壽命為血小板的平均壽命為714天，具有止血功天，具有止血功能僅開始能僅開始2天。衰老的血小板在單核巨噬細(xì)天。衰老的血小板在單核巨噬細(xì)胞破壞，主要在脾破壞。胞破壞，主要在脾破壞。脾池化脾池化：全身約有：全身約有1/3的血小板滯留于脾竇的血小板滯留于脾竇和脾髓的細(xì)胞間，血小板在脾內(nèi)的這種滯和脾髓的細(xì)胞間，血小板在脾內(nèi)的這種滯留現(xiàn)象即留現(xiàn)象即“脾池化脾池化”，脾池中的血小板和，脾池中的血小板和循環(huán)池中的血小板可以互換。循環(huán)池中的血小板可以互換。5感謝你的觀看

3、2019年9月13（三）血小板檢測(cè)常用項(xiàng)目（三）血小板檢測(cè)常用項(xiàng)目1、血小板計(jì)數(shù)、血小板計(jì)數(shù) （PLT）:手工單項(xiàng)或血液手工單項(xiàng)或血液分析儀多項(xiàng)檢測(cè)分析儀多項(xiàng)檢測(cè)2、血小板平均體積（、血小板平均體積（MPV）3、血小板分布寬度、血小板分布寬度(PDW) 4、血小板比積、血小板比積(PCT) 血液分析儀測(cè)血液分析儀測(cè)6感謝你的觀看2019年9月13二、血小板計(jì)數(shù)二、血小板計(jì)數(shù)（手工法）（手工法）7感謝你的觀看2019年9月13（一）原理（一）原理將血液稀釋一定倍數(shù)，充入計(jì)數(shù)池內(nèi)計(jì)數(shù)，將血液稀釋一定倍數(shù)，充入計(jì)數(shù)池內(nèi)計(jì)數(shù)，計(jì)算出每一升血中血小板數(shù)。稀釋液破壞計(jì)算出每一升血中血小板數(shù)。稀釋液破壞RB

4、C, 固定固定Pt并防止聚集。并防止聚集。8感謝你的觀看2019年9月13（二）器材（二）器材光學(xué)顯微鏡；血球計(jì)數(shù)板、光學(xué)顯微鏡；血球計(jì)數(shù)板、Hb吸管、試管、采血針吸管、試管、采血針等。等。（三）試劑（三）試劑：下列試劑任選一種：下列試劑任選一種1.草酸銨稀釋液：草酸銨草酸銨稀釋液：草酸銨1.0g,EDTA-Na2 0.012g，蒸，蒸餾水加至餾水加至100mL.首選試劑。首選試劑。2.許汝和稀釋液（復(fù)方尿素稀釋液）：尿素許汝和稀釋液（復(fù)方尿素稀釋液）：尿素10g，枸，枸櫞酸鈉櫞酸鈉0.5g，40%甲醛甲醛0.1mL蒸餾水加至蒸餾水加至100mL。過濾冰箱保存。過濾冰箱保存。9感謝你的觀看20

5、19年9月13（四）操作（四）操作1.在小試管中加入在小試管中加入plt稀釋液稀釋液0.38mL。2.取末梢血取末梢血20L加入試管中，迅速搖勻。加入試管中，迅速搖勻。室溫放置室溫放置10分鐘。分鐘。3.充池，靜置充池，靜置1015分鐘。分鐘。4.高倍鏡下計(jì)數(shù)中央大方格中四角及正中共高倍鏡下計(jì)數(shù)中央大方格中四角及正中共5個(gè)中方格內(nèi)的個(gè)中方格內(nèi)的plt數(shù)。數(shù)。10感謝你的觀看2019年9月13（五）計(jì)算（五）計(jì)算血小板數(shù)血小板數(shù)/L=5個(gè)中方格內(nèi)血小板數(shù)（個(gè)中方格內(nèi)血小板數(shù)（N） 51020106/L =5個(gè)中方格內(nèi)血小板總數(shù)個(gè)中方格內(nèi)血小板總數(shù)109/L（六）結(jié)果報(bào)告（六）結(jié)果報(bào)告 PLT:

6、109/L11感謝你的觀看2019年9月13（七）注意事項(xiàng)（七）注意事項(xiàng) 1.全部用具和稀釋液要特別清潔，防塵、防全部用具和稀釋液要特別清潔，防塵、防菌，以免計(jì)數(shù)時(shí)誤認(rèn)。菌，以免計(jì)數(shù)時(shí)誤認(rèn)。2.針刺要深，吸血及稀釋動(dòng)作要快，防聚集。針刺要深，吸血及稀釋動(dòng)作要快，防聚集。3.同時(shí)做多項(xiàng)檢查時(shí)，優(yōu)先采同時(shí)做多項(xiàng)檢查時(shí)，優(yōu)先采plt計(jì)數(shù)之血。計(jì)數(shù)之血。4.充池前應(yīng)充分搖勻，充池后需靜置充池前應(yīng)充分搖勻，充池后需靜置10分鐘分鐘以上待以上待plt全部下沉后再計(jì)數(shù)。全部下沉后再計(jì)數(shù)。1h內(nèi)完成。內(nèi)完成。12感謝你的觀看2019年9月13（八）方法學(xué)平價(jià)（八）方法學(xué)平價(jià)1.草酸銨法對(duì)草酸銨法對(duì)RBC破壞力

7、強(qiáng)，使視野清晰，破壞力強(qiáng)，使視野清晰，plt形態(tài)清楚，是全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程推形態(tài)清楚，是全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程推薦方法。由于薦方法。由于Plt體積小，易粘附、聚集及體積小，易粘附、聚集及破壞等，結(jié)果不甚理想。破壞等，結(jié)果不甚理想。2.復(fù)方尿素法優(yōu)點(diǎn)是復(fù)方尿素法優(yōu)點(diǎn)是plt脹大易辨認(rèn)，但不脹大易辨認(rèn)，但不能完全溶解能完全溶解RBC，且尿素易分解，試劑保，且尿素易分解，試劑保存時(shí)間短。存時(shí)間短。13感謝你的觀看2019年9月133.血液分析儀法可同時(shí)測(cè)血液分析儀法可同時(shí)測(cè)MPV、PDW等多等多個(gè)指標(biāo)，快速，臨床適用。但不能鑒別紅個(gè)指標(biāo)，快速，臨床適用。但不能鑒別紅細(xì)胞碎片、灰塵等與細(xì)胞碎片、灰塵等

8、與plt大小相似之物，故大小相似之物，故計(jì)數(shù)誤差大。當(dāng)直方圖出現(xiàn)變化時(shí)，應(yīng)用計(jì)數(shù)誤差大。當(dāng)直方圖出現(xiàn)變化時(shí)，應(yīng)用顯微鏡計(jì)數(shù)法校準(zhǔn)之。顯微鏡計(jì)數(shù)法校準(zhǔn)之。14感謝你的觀看2019年9月134.流式細(xì)胞儀法：用血小板單克隆抗體染色流式細(xì)胞儀法：用血小板單克隆抗體染色標(biāo)記血小板，根據(jù)熒光強(qiáng)度和散射光強(qiáng)度，標(biāo)記血小板，根據(jù)熒光強(qiáng)度和散射光強(qiáng)度，用獨(dú)立的流式細(xì)胞儀檢測(cè)可得到準(zhǔn)確性極用獨(dú)立的流式細(xì)胞儀檢測(cè)可得到準(zhǔn)確性極高的血小板數(shù)。流式細(xì)胞儀法式目前血小高的血小板數(shù)。流式細(xì)胞儀法式目前血小板計(jì)數(shù)參考方法。板計(jì)數(shù)參考方法。15感謝你的觀看2019年9月135.相差顯微鏡法：相差顯微鏡下，血小板立相差顯微鏡法

9、：相差顯微鏡下，血小板立體感增強(qiáng)，有助于識(shí)別血小板，還可照相體感增強(qiáng)，有助于識(shí)別血小板，還可照相后核對(duì)計(jì)數(shù)結(jié)果，作為手工法血小板計(jì)數(shù)后核對(duì)計(jì)數(shù)結(jié)果，作為手工法血小板計(jì)數(shù)的參考方法。的參考方法。（九）參考值（九）參考值：（：（100300）109/L16感謝你的觀看2019年9月13（十）質(zhì)量保證（十）質(zhì)量保證原則是：避免血小板被激活、破壞，避免原則是：避免血小板被激活、破壞，避免雜物污染。雜物污染。1.檢測(cè)前檢測(cè)前：采血要順暢，抗凝劑選用合適，：采血要順暢，抗凝劑選用合適，儲(chǔ)存時(shí)間適當(dāng)；儲(chǔ)存時(shí)間適當(dāng)；2.檢測(cè)中檢測(cè)中：手工法計(jì)數(shù)要定期檢查稀釋液質(zhì)：手工法計(jì)數(shù)要定期檢查稀釋液質(zhì)量，儀器法要質(zhì)控合

10、格；量，儀器法要質(zhì)控合格；17感謝你的觀看2019年9月133.檢測(cè)后：檢測(cè)后：（1）用同一份標(biāo)本制備學(xué)血涂片染色精簡(jiǎn)）用同一份標(biāo)本制備學(xué)血涂片染色精簡(jiǎn)觀察血小板數(shù)量、大小、分布情況，并注觀察血小板數(shù)量、大小、分布情況，并注意有無異常增多的紅、白細(xì)胞碎片。意有無異常增多的紅、白細(xì)胞碎片。（2）用參考方法核對(duì)。）用參考方法核對(duì)。（3）同一份標(biāo)本）同一份標(biāo)本2次計(jì)數(shù)誤差要次計(jì)數(shù)誤差要10%。18感謝你的觀看2019年9月13（十一）臨床意義（十一）臨床意義生理變化：生理變化：新生兒新生兒嬰兒，出生后嬰兒，出生后3個(gè)月達(dá)成人水平。個(gè)月達(dá)成人水平。晨間晨間午后，春季午后，春季冬季，毛細(xì)血管冬季，毛細(xì)血

11、管6.4fL，出血，出血發(fā)生率也低。發(fā)生率也低。26感謝你的觀看2019年9月13四、血小板分布寬度四、血小板分布寬度(PDW)和血小板比積和血小板比積(PCT）27感謝你的觀看2019年9月131 PDW：是血液分析儀對(duì)血小板分布情況是血液分析儀對(duì)血小板分布情況進(jìn)行數(shù)據(jù)處理得到的血小板體積的變異系進(jìn)行數(shù)據(jù)處理得到的血小板體積的變異系數(shù)。數(shù)。2 PCT：是血小板計(jì)數(shù)值和是血小板計(jì)數(shù)值和MPV經(jīng)過計(jì)算經(jīng)過計(jì)算得到的，其值的大小與得到的，其值的大小與PLT和和MPV值有關(guān)。值有關(guān)。 PCT = PLTMPV28感謝你的觀看2019年9月133、參考值、參考值： PDW：15.5%18.1% PCT

12、: 成人：成人：0.108%0.282% 115歲兒歲兒童：童：0.221%0.406%4、臨床意義：、臨床意義： 暫未用于臨床，須與其他參數(shù)聯(lián)合應(yīng)用暫未用于臨床，須與其他參數(shù)聯(lián)合應(yīng)用 29感謝你的觀看2019年9月13五、血小板形態(tài)檢查五、血小板形態(tài)檢查30感謝你的觀看2019年9月13形態(tài)檢查內(nèi)容形態(tài)檢查內(nèi)容血小板大小：有無巨大血小板或小型血血小板大?。河袩o巨大血小板或小型血小板；小板；形態(tài)：胞質(zhì)的顏色，顆粒有無、分布、形態(tài)：胞質(zhì)的顏色，顆粒有無、分布、粗細(xì)，空泡；粗細(xì)，空泡；PLT分布。分布。31感謝你的觀看2019年9月13(一一)正常形態(tài)正常形態(tài)1.53m，呈圓形、橢，呈圓形、橢圓形

13、、逗點(diǎn)形或不規(guī)則圓形、逗點(diǎn)形或不規(guī)則形；胞質(zhì)呈淡藍(lán)或粉紅，形；胞質(zhì)呈淡藍(lán)或粉紅，中心有若干細(xì)小紫紅色中心有若干細(xì)小紫紅色顆粒，無細(xì)胞核，血片顆粒，無細(xì)胞核，血片上上35成群。成群。32感謝你的觀看2019年9月13血小板血小板 （血涂片）（血涂片）33感謝你的觀看2019年9月1334感謝你的觀看2019年9月13(二二)異常形態(tài)異常形態(tài) 1、大小異常、大小異常（1）大血小板：直徑）大血小板：直徑47m，巨型血小板直，巨型血小板直徑徑7.5m。見于。見于ITP、巨大血小板綜合征、巨大血小板綜合征、脾切除等。脾切除等。（2）小血小板：直徑）小血小板：直徑1.5m，主要見于缺鐵，主要見于缺鐵貧、再

14、障等。貧、再障等。35感謝你的觀看2019年9月13巨大血小板巨大血小板36感謝你的觀看2019年9月132.形態(tài)異常形態(tài)異常（1）幼稚形：顆粒少。）幼稚形：顆粒少。（2）老年形）老年形:邊緣不規(guī)則，顆粒粗，呈離心邊緣不規(guī)則，顆粒粗，呈離心分布，有空泡。分布，有空泡。（3）病理幼稚形：體積大，胞質(zhì)淡藍(lán)，幾）病理幼稚形：體積大，胞質(zhì)淡藍(lán)，幾乎無顆粒。乎無顆粒。37感謝你的觀看2019年9月13（4）病理刺激形：體積增大，形態(tài)不一，）病理刺激形：體積增大，形態(tài)不一，胞質(zhì)呈淡藍(lán)胞質(zhì)呈淡藍(lán)/紫紅，顆粒多而大小一致。紫紅，顆粒多而大小一致。（5）退化形：大小、形態(tài)不一，有大空泡，）退化形：大小、形態(tài)不一，有大空泡，無顆粒或顆粒聚集。無顆?；蝾w粒聚集。正常人異常正常人異常plt10%才有意才有意義。義。38感謝你的觀看2019年9月13（6）血小板衛(wèi)星現(xiàn)象：血小板粘附、圍繞）血小板衛(wèi)星現(xiàn)象：血小板粘附、圍繞于中性粒細(xì)胞（或偶爾粘附于單核細(xì)胞）于中性粒細(xì)胞（或偶爾粘附于單核細(xì)胞）的現(xiàn)象。偶見于的現(xiàn)象。偶見于EDTA抗