分析化學高效液相色譜法

1、第十八章 高效液相色譜法現(xiàn)在學習的是第一頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法u經(jīng)典液相色譜法為基礎(chǔ)，經(jīng)典液相色譜法為基礎(chǔ)，u引入氣相色譜法的理論和實驗技術(shù)，引入氣相色譜法的理論和實驗技術(shù)，u高壓輸送流動相，高壓輸送流動相，u高效固定相及高靈敏度檢測器，高效固定相及高靈敏度檢測器，u現(xiàn)代液相色譜分析方法?，F(xiàn)代液相色譜分析方法?，F(xiàn)在學習的是第二頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法u顆粒極細（一般為顆粒極細（一般為1010 m m以下）、規(guī)則均勻的以下）、規(guī)則均勻的固定相，固定相，( (鍵合相鍵合相) )傳質(zhì)阻抗小，柱效高，分離傳質(zhì)阻抗小，柱效高，分離效率高；效率高；u高壓輸液泵輸送流動相，流速快，

2、分析速度高壓輸液泵輸送流動相，流速快，分析速度快；快；u高靈敏度檢測器，靈敏度大大提高。紫外檢測器高靈敏度檢測器，靈敏度大大提高。紫外檢測器最小檢測限可達最小檢測限可達1010 9 9g g，而熒光檢測器最小檢測限，而熒光檢測器最小檢測限可達可達1010 1212g g。 現(xiàn)在學習的是第三頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法u不受試樣的揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制，應不受試樣的揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制，應用范圍廣；用范圍廣；u可選用各種溶劑作為流動相，對分離的選可選用各種溶劑作為流動相，對分離的選擇性有很大作用，選擇性高；擇性有很大作用，選擇性高；u一般在室溫條件下進行分離，不需要高柱溫。一般在室溫條

3、件下進行分離，不需要高柱溫。 現(xiàn)在學習的是第四頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法一、主要類型主要類型 四類基本類型色譜法四類基本類型色譜法 分配色譜法（分配色譜法（partition chromatographypartition chromatography）吸附色譜法（吸附色譜法（adsorption chromatographyadsorption chromatography）離子交換色譜法（離子交換色譜法（IECIEC）空間排阻色譜法（空間排阻色譜法（SECSEC）現(xiàn)在學習的是第五頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法第一節(jié) 高效液相色譜法的主要類型和原理 一、主要類型 四類基本類型

4、色譜法 分配色譜法（partition chromatography）吸附色譜法（adsorption chromatography）離子交換色譜法（IEC）空間排阻色譜法（SEC）化學鍵合相色譜法現(xiàn)在學習的是第六頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法其他色譜類型其他色譜類型u親合色譜法親合色譜法（affinity chromatographyaffinity chromatography；ACAC）u手性色譜法手性色譜法（chiral chromatographychiral chromatography；CCCC）u膠束色譜法膠束色譜法（micellar chromatographymice

5、llar chromatography；MCMC）u電色譜法電色譜法（electrochromatographyelectrochromatography；ECEC）現(xiàn)在學習的是第七頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法u以化學鍵合相為固定相的色譜法，簡稱鍵合相以化學鍵合相為固定相的色譜法，簡稱鍵合相色譜法色譜法(bonded phase chromatography(bonded phase chromatography；BPC)BPC)u化學鍵合相：采用化學反應的方法將官能團化學鍵合相：采用化學反應的方法將官能團鍵合在載體表面所形成的固定相鍵合在載體表面所形成的固定相 現(xiàn)在學習的是第八頁，共

6、54頁第十八章 高效液相色譜法優(yōu)點：優(yōu)點：u固定相的均一性和穩(wěn)定性好，在使用過程固定相的均一性和穩(wěn)定性好，在使用過程中不易流失，使用周期長；中不易流失，使用周期長；u柱效高；重現(xiàn)性好；柱效高；重現(xiàn)性好；u能使用的流動相和鍵合相的種類多，分離的能使用的流動相和鍵合相的種類多，分離的選擇性高選擇性高正相（正相（normal phasenormal phase，NPNP）和反相（）和反相（reversed reversed phasephase，RPRP）鍵合相色譜法）鍵合相色譜法：根據(jù)化學鍵合相與流動相極性的相對強弱根據(jù)化學鍵合相與流動相極性的相對強弱現(xiàn)在學習的是第九頁，共54頁第十八章 高效液相

7、色譜法u固定相：固定相：極性鍵合相極性鍵合相如氰基（如氰基（CNCN）、氨基（）、氨基（NHNH2 2）或二羥基鍵）或二羥基鍵合硅膠。（經(jīng)典：水飽和的硅膠）合硅膠。（經(jīng)典：水飽和的硅膠） u流動相：流動相：非極性或弱極性溶劑加極性調(diào)整劑非極性或弱極性溶劑加極性調(diào)整劑如烷烴加醇類。（與水不混溶的溶劑）如烷烴加醇類。（與水不混溶的溶劑）u適用范圍：適用范圍：溶于有機溶劑的極性至中等極性的分溶于有機溶劑的極性至中等極性的分子型化合物子型化合物如一些在硅膠柱上分離的物質(zhì)如一些在硅膠柱上分離的物質(zhì)現(xiàn)在學習的是第十頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法u分離機制？ 分配：把有機鍵合層作為一個液膜看待，溶質(zhì)在

8、兩相的溶解 吸附：溶質(zhì)與鍵合極性基團間的誘導、氫鍵和定向作用u分離選擇性：極性強的組分k大，后洗脫出柱。流動相的極性增強，洗脫能力增加，使組分k減小，tR 減小?，F(xiàn)在學習的是第十一頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法u固定相固定相：非極性鍵合相：非極性鍵合相 如十八烷基硅烷（如十八烷基硅烷（C C1818，ODSODS）、辛烷基（）、辛烷基（C C8 8）鍵合）鍵合硅膠硅膠 u流動相流動相：水水為基礎(chǔ)溶劑，加入一定量與水混溶為基礎(chǔ)溶劑，加入一定量與水混溶的極性調(diào)整劑的極性調(diào)整劑 常用甲醇水、乙腈水等常用甲醇水、乙腈水等 應用：最廣應用：最廣 非極性至中等極性的組分，非極性至中等極性的組分，（還

9、有有機酸、堿及鹽等）（還有有機酸、堿及鹽等） 現(xiàn)在學習的是第十二頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法保留機制保留機制 疏溶劑疏溶劑 （solvophobic theorysolvophobic theory）溶質(zhì)的保留主要是溶質(zhì)分子與極性溶劑分子間的排斥力，促使溶質(zhì)分子與鍵合相的烴基發(fā)生疏水締合。不是溶質(zhì)分子與鍵合相間的色散力?，F(xiàn)在學習的是第十三頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法u保留行為的主要影響因素保留行為的主要影響因素1 1、溶質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)（極性）、溶質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)（極性） 極性越弱，疏水性越強，極性越弱，疏水性越強，k k越大，越大，t tR R也越大也越大。 同系物碳數(shù)越多，極性越弱

10、，同系物碳數(shù)越多，極性越弱，k k越大；越大； 引入極性取代基，降低疏水性，引入極性取代基，降低疏水性，k k值變小。值變小。 現(xiàn)在學習的是第十四頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法2 2、固定相、固定相 鍵合烷基的疏水性隨鍵合烷基的疏水性隨碳鏈的延長碳鏈的延長而增而增 加，溶質(zhì)的加，溶質(zhì)的k k也增大。也增大。 硅膠表面硅膠表面鍵合烷基的濃度越大鍵合烷基的濃度越大，則溶則溶 質(zhì)的質(zhì)的k k越大越大。 反相鍵合相色譜法u保留行為的主要影響因素現(xiàn)在學習的是第十五頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法u保留行為的主要影響因素保留行為的主要影響因素3 3、流動相、流動相 極性越強，洗脫能力越弱，使溶質(zhì)

11、的極性越強，洗脫能力越弱，使溶質(zhì)的k k越大越大 溶劑種類溶劑種類：水為弱溶劑，醇為強溶劑：水為弱溶劑，醇為強溶劑 溶劑溶劑比例比例：水的比例增加，使：水的比例增加，使k k增大增大 中性鹽的中性鹽的加入加入：使中性溶質(zhì)的：使中性溶質(zhì)的k k增大增大 pHpH：影響弱：影響弱酸、弱減的離解酸、弱減的離解 流動相的流動相的pHpH降低，弱酸降低，弱酸k k增大，增大，t tR R增大；增大； 弱堿弱堿k k變小。變小。現(xiàn)在學習的是第十六頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法u離子抑制色譜法（離子抑制色譜法（ion suppression ion suppression chromatography

12、chromatography；ISC ISC ）u用少量弱酸、弱堿或緩沖溶液，調(diào)節(jié)流動相的用少量弱酸、弱堿或緩沖溶液，調(diào)節(jié)流動相的pHpH，抑制有機弱酸、弱堿的離解，增加疏水締合作抑制有機弱酸、弱堿的離解，增加疏水締合作用，使用，使k k變大。變大。u適用于適用于3p3pK Ka7a7的弱酸、的弱酸、7p7pK Ka8a8的弱堿的弱堿現(xiàn)在學習的是第十七頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法 把離子對試劑加入到含水流動相中，組把離子對試劑加入到含水流動相中，組分離子在流動相中與離子對試劑的反離分離子在流動相中與離子對試劑的反離子（子（counter ioncounter ion）生成）生成中性離子

13、對中性離子對，增，增加溶質(zhì)與非極性固定相的作用，使加溶質(zhì)與非極性固定相的作用，使k k增加，增加，改善分離效果。改善分離效果。 現(xiàn)在學習的是第十八頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法離子對模型離子對模型33+()+3s3(+固定相+()+B)+B + H+BHRSO NaRSO + Na+BHRSORSO)BH離子對mB+AB AmA(smBAmmmsmsBAAABABBABEK流動相通式現(xiàn)在學習的是第十九頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法影響容量因子的因素影響容量因子的因素離子對試劑的種類和濃度離子對試劑的種類和濃度：碳鏈長度增加，溶：碳鏈長度增加，溶質(zhì)的質(zhì)的k k增大；在一定范圍內(nèi)試劑的

14、濃度升高，溶增大；在一定范圍內(nèi)試劑的濃度升高，溶質(zhì)的質(zhì)的k k增大增大 流動相的流動相的pHpH：有利于組分和離子對試劑離子化：有利于組分和離子對試劑離子化時（離子對的形成），組分的時（離子對的形成），組分的k k值最大值最大固定相固定相 、流動相性質(zhì)、流動相性質(zhì)（同一般（同一般RP-HPLCRP-HPLC）。）。 現(xiàn)在學習的是第二十頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法u適用范圍適用范圍：有機酸、堿、鹽，離子型和非離子型化合：有機酸、堿、鹽，離子型和非離子型化合物的混合物。物的混合物。u分析酸類或帶負電荷物質(zhì)分析酸類或帶負電荷物質(zhì)：用季銨鹽，如四丁基銨：用季銨鹽，如四丁基銨磷酸鹽（磷酸鹽（TB

15、ATBA）和溴化十六烷基三甲基銨（）和溴化十六烷基三甲基銨（CTABCTAB）等。）等。u分析堿類或帶正電荷的物質(zhì)分析堿類或帶正電荷的物質(zhì)：用烷基磺酸鹽或硫酸：用烷基磺酸鹽或硫酸鹽，如正戊烷基磺酸鈉（鹽，如正戊烷基磺酸鈉（PICBPICB5 5）、正己烷基磺酸鈉）、正己烷基磺酸鈉（PICBPICB6 6）。）?，F(xiàn)在學習的是第二十一頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法現(xiàn)在學習的是第二十二頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法u固定相應符合下列要求固定相應符合下列要求：顆粒細且均勻；顆粒細且均勻；傳質(zhì)快；傳質(zhì)快；機械強度高，能耐高壓；機械強度高，能耐高壓；化學穩(wěn)定性好，不與流動相發(fā)生化學化學穩(wěn)定性好

16、，不與流動相發(fā)生化學反應。反應。現(xiàn)在學習的是第二十三頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法（一）鍵合相的種類（一）鍵合相的種類 非極性鍵合相非極性鍵合相 ：非極性烴基，如非極性烴基，如C C1818C C8 8C C1 1與苯基等鍵合在硅膠表面；與苯基等鍵合在硅膠表面；用于反相色譜；用于反相色譜；長鏈烷基可使溶質(zhì)的長鏈烷基可使溶質(zhì)的k k增大，選擇性改善，載樣量提高，增大，選擇性改善，載樣量提高，穩(wěn)定性更好。穩(wěn)定性更好?，F(xiàn)在學習的是第二十四頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法 鍵合相的種類鍵合相的種類u弱極性鍵合相：弱極性鍵合相： 醚基和二羥基等鍵合相醚基和二羥基等鍵合相用于反相或正相色譜用于反

17、相或正相色譜u極性鍵合相：極性鍵合相：常用氨基常用氨基氰基鍵合相（氰乙硅烷基氰基鍵合相（氰乙硅烷基Si(CHSi(CH2 2) )2 2CN)CN)鍵合硅膠鍵合硅膠一般用于正相色譜一般用于正相色譜 u特殊用途的鍵合相特殊用途的鍵合相現(xiàn)在學習的是第二十五頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法u鍵合反應鍵合反應 硅氧烷（硅氧烷（SiSiO OSiSiC C）型：氯硅烷與硅）型：氯硅烷與硅膠進行膠進行硅烷化反應硅烷化反應 如：YWGC18H37，無定形硅膠YWG上鍵合了十八硅烷基；Spherisorb ODS，球形硅膠Spherisorb 上鍵合了ODS。 現(xiàn)在學習的是第二十六頁，共54頁第十八章 高

18、效液相色譜法u鍵合相的性質(zhì)鍵合相的性質(zhì)含碳量：含碳的百分數(shù)含碳量：含碳的百分數(shù) 覆蓋度覆蓋度 ：已反應的硅醇基數(shù)目占硅膠表面硅醇：已反應的硅醇基數(shù)目占硅膠表面硅醇基總數(shù)的比例基總數(shù)的比例 封尾（封尾（end-cappingend-capping）：在鍵合反應后，用三）：在鍵合反應后，用三甲基氯硅烷等進行鈍化處理，減少殘余硅醇基。甲基氯硅烷等進行鈍化處理，減少殘余硅醇基。 現(xiàn)在學習的是第二十七頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法u鍵合相的特點鍵合相的特點使用過程中不流失；使用過程中不流失；化學穩(wěn)定性好；化學穩(wěn)定性好；適于梯度洗脫；適于梯度洗脫；載樣量大載樣量大 u注意注意：流動相的流動相的pHp

19、H一般應在一般應在3-83-8，否則會引起硅膠，否則會引起硅膠溶解；溶解；( (也有適用寬也有適用寬pHpH范圍的鍵合相范圍的鍵合相) )。 現(xiàn)在學習的是第二十八頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法u對流動相的要求：對流動相的要求：與固定相不發(fā)生化學反應。與固定相不發(fā)生化學反應。對試樣有適宜的溶解度。使對試樣有適宜的溶解度。使k k在在1 11010范圍內(nèi)，范圍內(nèi)，與檢測器相適應。例如用紫外檢測器時，選用與檢測器相適應。例如用紫外檢測器時，選用截止波長小于檢測波長的溶劑。截止波長小于檢測波長的溶劑。純度高，粘度小。低粘度流動相如甲醇純度高，粘度小。低粘度流動相如甲醇乙腈等乙腈等可以降低柱壓，提

20、高柱效?？梢越档椭鶋海岣咧?。 現(xiàn)在學習的是第二十九頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法（一）（一）流動相對分離的影響流動相對分離的影響n n由色譜柱（固定相）性能決定，由色譜柱（固定相）性能決定，主要受溶劑種類的影響，主要受溶劑種類的影響，k k受溶劑配比的影響。受溶劑配比的影響。 2211-4nkkR現(xiàn)在學習的是第三十頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法（二）流動相的強度和選擇性（二）流動相的強度和選擇性u溶劑的極性（強度）溶劑的極性（強度）正相色譜：溶劑極性越強，洗脫能力越強正相色譜：溶劑極性越強，洗脫能力越強 反相色譜：極性弱的溶劑洗脫能力強反相色譜：極性弱的溶劑洗脫能力強 u溶劑的

21、選擇性溶劑的選擇性不同種類的溶劑，分子間的作用力不同，故不同種類的溶劑，分子間的作用力不同，故選擇性不同選擇性不同 u混合溶劑混合溶劑（二元或多元流動相）（二元或多元流動相）現(xiàn)在學習的是第三十一頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法u（一）一）HPLCHPLC中的速率理論中的速率理論渦流擴散渦流擴散A A=2=2ddp p 球形、小粒度、均勻（球形、小粒度、均勻（RSDRSD5%5%）固定相，）固定相，勻漿高壓填充，以降低勻漿高壓填充，以降低A A?？v向擴散縱向擴散=2=2DDm m 可以忽略可以忽略。 因為因為D Dl l很小，室溫操作，且很小，室溫操作，且U U大于大于U U最佳最佳，現(xiàn)在學

22、習的是第三十二頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法u傳質(zhì)阻抗u固定相傳質(zhì)阻抗CS可以忽略 ，因df極小u流動相傳質(zhì)阻抗Cm u要求： dp小，Dm大m2PmmDdC現(xiàn)在學習的是第三十三頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法u靜態(tài)流動相傳質(zhì)阻抗靜態(tài)流動相傳質(zhì)阻抗：u由于部分流動相在固定相微孔內(nèi)的滯留由于部分流動相在固定相微孔內(nèi)的滯留u靜態(tài)流動相傳質(zhì)阻抗系數(shù)靜態(tài)流動相傳質(zhì)阻抗系數(shù)C Csmsm uC Csm sm ddp p2 2， C Csm sm 1 1/D/Dm m，而，而D Dm mTT/ / u要求要求: : 固定相固定相d dp p2 2、 流動相流動相都小都小現(xiàn)在學習的是第三十四頁，共

23、54頁第十八章 高效液相色譜法H H = =A A + + C Cm mu u + + C Csmsmu u 原因原因：化學鍵合相，液體流動相：化學鍵合相，液體流動相結(jié)果結(jié)果：HPLCHPLC的實驗條件應該是：小粒的實驗條件應該是：小粒度、均勻的球形化學鍵合相；低粘度度、均勻的球形化學鍵合相；低粘度流動相，流速不宜過快；柱溫適當。流動相，流速不宜過快；柱溫適當。 現(xiàn)在學習的是第三十五頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法u固定相固定相極性鍵合相如氰基、氨基鍵合相等極性鍵合相如氰基、氨基鍵合相等u流動相流動相烷烴加適量極性調(diào)節(jié)劑烷烴加適量極性調(diào)節(jié)劑現(xiàn)在學習的是第三十六頁，共54頁第十八章 高效液相

24、色譜法u固定相固定相非極性鍵合相如非極性鍵合相如ODSODSu流動相流動相以水為基礎(chǔ)溶劑，加入甲醇、以水為基礎(chǔ)溶劑，加入甲醇、 乙腈等極性調(diào)節(jié)劑乙腈等極性調(diào)節(jié)劑弱酸、弱堿或緩沖鹽作為離子抑制劑弱酸、弱堿或緩沖鹽作為離子抑制劑加入加入0.1%0.1%1%1%的醋酸鹽、磷酸鹽可減的醋酸鹽、磷酸鹽可減少殘余硅醇基的作用少殘余硅醇基的作用 現(xiàn)在學習的是第三十七頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法u固定相固定相 盡可能選擇表面覆蓋度高且疏盡可能選擇表面覆蓋度高且疏水性強的非極性鍵合相，水性強的非極性鍵合相，u離子對試劑離子對試劑 離子對試劑所帶的電荷離子對試劑所帶的電荷應與試樣離子的電荷相反應與試樣離子

25、的電荷相反 u流動相流動相pHpH使試樣組分與離子對試劑全部使試樣組分與離子對試劑全部離子化離子化u有機溶劑及其濃度有機溶劑及其濃度 同一般同一般HPLCHPLC 現(xiàn)在學習的是第三十八頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法u組成組成輸液系統(tǒng)輸液系統(tǒng)進樣系統(tǒng)進樣系統(tǒng)色譜柱系統(tǒng)色譜柱系統(tǒng)檢測系統(tǒng)檢測系統(tǒng)數(shù)據(jù)記錄處理系統(tǒng)數(shù)據(jù)記錄處理系統(tǒng) 現(xiàn)在學習的是第三十九頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法u高壓輸液泵高壓輸液泵恒流泵：在輸送流動相過程中流量恒定。恒流泵：在輸送流動相過程中流量恒定。常用柱塞往復泵常用柱塞往復泵雙泵：為了克服流量的脈動。雙泵：為了克服流量的脈動。 有串聯(lián)式和并聯(lián)式有串聯(lián)式和并聯(lián)式現(xiàn)在

26、學習的是第四十頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法輸液泵應具備的性能：輸液泵應具備的性能：u流量精度高且穩(wěn)定流量精度高且穩(wěn)定u流量范圍寬流量范圍寬u能在高壓下連續(xù)工作能在高壓下連續(xù)工作u液缸容積小液缸容積小u密封性能好，耐腐蝕密封性能好，耐腐蝕 現(xiàn)在學習的是第四十一頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法輸液泵操作注意事項：輸液泵操作注意事項：u防止固體微粒進入泵體防止固體微粒進入泵體u流動相不應含有腐蝕性物質(zhì)流動相不應含有腐蝕性物質(zhì)u防止溶劑瓶內(nèi)的流動相被用完防止溶劑瓶內(nèi)的流動相被用完u不超過規(guī)定的最高壓力不超過規(guī)定的最高壓力u流動相一般應該先脫氣流動相一般應該先脫氣現(xiàn)在學習的是第四十二頁，共5

27、4頁第十八章 高效液相色譜法u進樣器進樣器進樣閥（六通閥）、自動進樣裝置進樣閥（六通閥）、自動進樣裝置u色譜柱色譜柱（columncolumn） 由柱管和固定相組成由柱管和固定相組成分析柱、制備柱分析柱、制備柱 性能評價性能評價 H H、n n、f fs s、k k和和的重復性，或的重復性，或R R。 現(xiàn)在學習的是第四十三頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法u（一）檢測器（一）檢測器(detector)(detector)的主要性能的主要性能要求要求： 靈靈敏度（敏度（sensitivitysensitivity）高（檢測限低）噪音）高（檢測限低）噪音（noisenoise）低）低 線性范線性

28、范圍（圍（linear rangelinear range）寬）寬 重復性重復性（repeatabilityrepeatability）好）好 適用范圍適用范圍廣（通用型、專屬型）廣（通用型、專屬型） 現(xiàn)在學習的是第四十四頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法u檢測原理： 朗伯比爾 (Lambert-Beer) 定律，響應信號（吸光度）與濃度成正比A=Clu特點： 靈敏度較高（10-610-9 g/ml），噪音低，線性范圍寬，穩(wěn)定性好，適于梯度，不破壞樣品，應用廣（分析、制備）?，F(xiàn)在學習的是第四十五頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法u局限局限：只能檢測有紫外吸收的物質(zhì)，流動只能檢測有紫外吸收的

29、物質(zhì)，流動相的截止波長應小于檢測波長。相的截止波長應小于檢測波長。 u專屬型、濃度型檢測器專屬型、濃度型檢測器現(xiàn)在學習的是第四十六頁，共54頁第十八章 高效液相色譜法u固定波長檢測器固定波長檢測器 ：254nm254nmu可變波長檢測器：可變波長檢測器：光源：氘燈（和鎢燈），光源：氘燈（和鎢燈）， 200200400400（800800）nmnm， 單色器，單色器，流通池（試樣），光電管流通池（試樣），光電管光路系統(tǒng)和紫外分光光度計相似光路系統(tǒng)和紫外分光光度計相似 u光電二極管陣列檢測器光電二極管陣列檢測器 (photodiode array detector(photodiode array detector； PDAD)PDAD)：一系列光電二極管，一個二極管對應接受光譜上約一系列光電二極管，一個