教材中實驗專題復習第一部分

1、教材中實驗專題復習第一部分生物技術與實踐光學顯微鏡操作技術臨時裝片的染色低倍鏡和高倍鏡的使用掌握參考要求(2)實驗與探究生物體內物質的分離、鑒定技術光合色素的分離糖、蛋白質、脂肪的鑒定DNA的粗提取與鑒定調查遺傳學調查：群體調查、家系分析生態(tài)學調查：樣方法、標志重捕法考試說明考試說明中的中的內容要求（第一部分）內容要求（第一部分）考試說明考試說明中的能力要求：中的能力要求：(2)實驗與探究能力實驗與探究能力 能獨立完成生物學教材所規(guī)定的生物實驗完成生物學教材所規(guī)定的生物實驗。包括理解實驗實驗目的目的、原理原理、方法方法和操作步驟操作步驟，掌握相關的操作技能操作技能，并能將這些實驗涉及的方法和技

2、能進行綜合的運用綜合的運用。具備驗證簡單生物學事實驗證簡單生物學事實的能力，并能對實驗現象現象和結果結果進行解釋解釋、分析分析和處理處理。具有對一些生物學問題進行初步探究初步探究的能力。包括運用觀察觀察、試驗試驗與調查調查，假說演繹假說演繹、建立模型建立模型與系統(tǒng)分析系統(tǒng)分析等科學研究方法。能對一些簡單的實驗方案實驗方案作出恰當的評價評價和修訂修訂。實驗目的實驗目的實驗方法實驗方法原理原理（2013北京）5.關于高中生物學實驗的基本原理，敘述不正確的是A.噬菌體須在活菌中增殖培養(yǎng)是因其缺乏獨立的代謝系統(tǒng)B.提取組織DNA是利用不同化合物在溶劑中溶解度的差異C.成熟植物細胞在高滲溶液中發(fā)生質壁分

3、離是因為細胞壁具有選擇透（過）性D.PCR呈指數擴增DNA片段是因為上一輪反應的產物可作為下一輪反應的模板教材中實驗專題復習的目標是什么？ 掌握實驗原理、目的、方法、步驟 解釋、分析、處理實驗現象和結果 綜合運用實驗的方法和技能怎樣能達到這樣的教學目標？ 梳理、重現實驗原理、目的、方法、步驟 設置問題引領學生分析實驗現象和結果 聯(lián)系本學科研究挖掘實驗的“真”意義一、光學顯微鏡操作技術考試說明的要求光學顯微鏡操作技術制作臨時裝片臨時裝片的染色低倍鏡和高倍鏡的使用檢測生物組織中的油脂檢測細胞中的DNA和RNA觀察多種多樣的細胞觀察葉綠體和線粒體（人教版）觀察洋蔥表皮細胞的質壁分離及質壁分離復原探究

4、洋蔥表皮細胞細胞液的濃度范圍（浙科版）觀察細胞的有絲分裂制作并觀察植物細胞有絲分裂的臨時裝片觀察蝗蟲精母細胞減數分裂固定裝片（人教版）低溫誘導植物染色體數目的變化（人教版）探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數量的動態(tài)變化（浙科版）表示學生做過的實驗目鏡目鏡鏡筒鏡筒轉換器轉換器物鏡物鏡通光孔通光孔遮光器遮光器粗準焦粗準焦螺旋螺旋細準焦細準焦螺旋螺旋鏡臂鏡臂鏡柱鏡柱反光鏡反光鏡鏡座鏡座壓片夾壓片夾載物臺載物臺（一）（一）顯微鏡結構圖及各部位名稱：顯微鏡結構圖及各部位名稱：思考思考1.光學顯微鏡的光路圖如何？光學顯微鏡的光路圖如何？2.能調光的有關部位是什么？能調光的有關部位是什么？3.調節(jié)清晰度的部位是什么？

5、調節(jié)清晰度的部位是什么？ 顯微鏡的對光、調光顯微鏡的對光、調光 低、高倍鏡使用方法低、高倍鏡使用方法不同直徑的不同直徑的光圈光圈 視野明暗問題視野明暗問題（二）成像原理（二）成像原理成像效果：上下顛倒、左右對稱。成像效果：上下顛倒、左右對稱。目鏡成的是放大倒立的虛像，目鏡成的是放大倒立的虛像，焦距越短（鏡頭越短），焦距越短（鏡頭越短），放大倍放大倍數越大。數越大。物鏡成的是放大物鏡成的是放大倒立倒立的實像，的實像，焦距越長（鏡頭越長），焦距越長（鏡頭越長），放大倍放大倍數越大；數越大； 目鏡、物鏡差異目鏡、物鏡差異 裝片移動問題裝片移動問題 放大倍數問題放大倍數問題回顧：顯微鏡顯微鏡的使用方法

6、的使用方法1、取鏡、安放、取鏡、安放2、對光、對光3、壓片、壓片4、調焦、調焦5、觀察、觀察【低倍鏡下對焦低倍鏡下對焦將觀察目標移至視野中央將觀察目標移至視野中央轉動轉換轉動轉換器高倍鏡器高倍鏡增加光量增加光量調焦（只能細準焦螺旋）調焦（只能細準焦螺旋）】（三）玻片標本制作（三）玻片標本制作1.材料選擇：薄、透、小材料選擇：薄、透、?。槭裁矗浚槭裁?？）2.臨時玻片制作方法臨時玻片制作方法（了解）（了解）黑藻黑藻觀察葉觀察葉綠體和胞質環(huán)流綠體和胞質環(huán)流口腔上皮細胞口腔上皮細胞觀觀察線粒體察線粒體紫色洋蔥外表皮紫色洋蔥外表皮觀察觀察質壁分離和復原質壁分離和復原2.臨時玻片常用制作方法（了解）

7、：臨時玻片常用制作方法（了解）：涂片法：即用涂布的方法制成玻片標本。此法適用于生物涂片法：即用涂布的方法制成玻片標本。此法適用于生物游離細胞和比較疏松的組織。如：單細胞生物、小型群體游離細胞和比較疏松的組織。如：單細胞生物、小型群體藻類、藻類、血液血液、含有細菌的培養(yǎng)液、花粉母細胞等材料均可用、含有細菌的培養(yǎng)液、花粉母細胞等材料均可用此法制成玻片標本。此法制成玻片標本。裝片法：裝片法是把較小的生物體或某些器官的一部分整個裝片法：裝片法是把較小的生物體或某些器官的一部分整個裝于玻片上的制片方法，它適用于裝于玻片上的制片方法，它適用于小而薄小而薄的材料。如洋蔥的的材料。如洋蔥的表皮、人口腔上皮、昆

8、蟲的口器、翅、足等。表皮、人口腔上皮、昆蟲的口器、翅、足等。切片法：用手工或機械將植物或動物組織切成薄片，進而制切片法：用手工或機械將植物或動物組織切成薄片，進而制成裝片的方法。成裝片的方法。壓片法：將植物、動物壓片法：將植物、動物較疏松的材料較疏松的材料用較小的壓力壓碎在載用較小的壓力壓碎在載玻片上，使之成一薄片的制片方法?；ㄋ?、根尖、果蠅幼玻片上，使之成一薄片的制片方法?；ㄋ?、根尖、果蠅幼蟲的唾液腺等均可用此法制成玻片標本。蟲的唾液腺等均可用此法制成玻片標本。檢測生物組織中的油脂檢測生物組織中的油脂浙科版：實驗原理：實驗原理： 各種生物組織和細胞中，有機化合物含量各各種生物組織和細胞中，有

9、機化合物含量各不相同。對于某些化合物，可使用指示劑染色后不相同。對于某些化合物，可使用指示劑染色后在顯微鏡下進行檢查。蘇丹在顯微鏡下進行檢查。蘇丹染液能使細胞中染液能使細胞中的油脂呈橙黃色。的油脂呈橙黃色。 生物組織必須制成薄片才能在顯微鏡下觀生物組織必須制成薄片才能在顯微鏡下觀察。察。檢測生物組織中的油脂檢測生物組織中的油脂浙科版：實驗步驟：實驗步驟：（1）取材切片：）取材切片：浸泡后浸泡后花生種子去種皮花生種子去種皮（2）染色：）染色：蘇丹蘇丹（橙黃色）蘇丹（橙黃色）蘇丹（紅色）（紅色）（3）制片：用吸水紙吸取染液，再滴加）制片：用吸水紙吸取染液，再滴加1-2滴體滴體積分數為積分數為_，_

10、，用吸水紙吸，用吸水紙吸去子葉周圍的酒精，滴一滴蒸餾水，蓋上蓋玻去子葉周圍的酒精，滴一滴蒸餾水，蓋上蓋玻片，制成臨時裝片。片，制成臨時裝片。（4）觀察：）觀察：檢測生物組織中的油脂檢測生物組織中的油脂浙科版：思考思考1.1.為什么選擇花生子葉做實驗材料？為什么選擇花生子葉做實驗材料？2.2.如果不使用酒精洗浮色，實驗結果會有什么不如果不使用酒精洗浮色，實驗結果會有什么不同？同？蘇丹染液染色后的脂肪滴觀察(檢測)細胞中的DNA和RNA的分布實驗原理：實驗原理：生物組織材料必須制成薄片才能用于顯微鏡下觀察生物組織材料必須制成薄片才能用于顯微鏡下觀察DNA與與RNA在細胞中的分布部位不同，在細胞中的

11、分布部位不同，DNA主要分主要分布在細胞核中，布在細胞核中，RNA主要分布在細胞質中，甲基綠可主要分布在細胞質中，甲基綠可使使DNA著色，即使得細胞核呈藍綠色，吡羅紅可著色，即使得細胞核呈藍綠色，吡羅紅可使細胞中的使細胞中的RNA著色，即使得細胞質呈紅色。著色，即使得細胞質呈紅色。鹽酸能改變細胞膜的通透性，加速染色劑進入細鹽酸能改變細胞膜的通透性，加速染色劑進入細胞，同時使染色質的胞，同時使染色質的DNA和蛋白質分離，有利于和蛋白質分離，有利于DNA與染色劑結合。與染色劑結合。方法步驟：方法步驟：制片制片 水解水解漂洗漂洗染色染色觀察觀察人口腔上皮細胞人口腔上皮細胞/洋蔥內表皮洋蔥內表皮鹽酸，

12、保溫鹽酸，保溫蒸餾水，緩流蒸餾水，緩流甲基綠甲基綠-吡羅紅混合染劑吡羅紅混合染劑細胞核呈綠色，細胞質呈紅色細胞核呈綠色，細胞質呈紅色觀察(檢測)細胞中的DNA和RNA的分布烘干烘干后水浴保溫水解蒸餾水緩緩沖洗觀察(檢測)細胞中的DNA和RNA的分布 烘干目的：殺死固定細胞烘干目的：殺死固定細胞觀察(檢測)細胞中的DNA和RNA的分布染液：甲基綠染液：甲基綠-吡咯紅混合染液吡咯紅混合染液結果：細胞質呈綠色，細胞核呈紅色。結果：細胞質呈綠色，細胞核呈紅色。結果分析：結果分析：RNA主要在細胞質中，主要在細胞質中，DNA主要在細胞核中主要在細胞核中。觀察(檢測)細胞中的DNA和RNA的分布思考思考1

13、.1.該實驗為什么選擇洋蔥鱗片葉內表皮細胞？該實驗為什么選擇洋蔥鱗片葉內表皮細胞？2.2.加入鹽酸水解時，為何需要保溫一段時間？加入鹽酸水解時，為何需要保溫一段時間？3.3.該實驗能否看得到該實驗能否看得到DNADNA和和RNARNA分子？分子？觀察(檢測)細胞中的DNA和RNA的分布觀察葉綠體和線粒體實驗原理：實驗原理：葉肉細胞中的葉綠體，散布于細胞質中，呈綠葉肉細胞中的葉綠體，散布于細胞質中，呈綠色、扁平的橢球形或球形。可在高倍顯微鏡下色、扁平的橢球形或球形?？稍诟弑讹@微鏡下觀察它的形態(tài)和分布。觀察它的形態(tài)和分布。線粒體普遍存在于植物和動物細胞中。線粒體線粒體普遍存在于植物和動物細胞中。線

14、粒體形態(tài)多樣，呈短棒狀、圓球狀、線形、啞鈴形形態(tài)多樣，呈短棒狀、圓球狀、線形、啞鈴形等。健那綠染液是將等。健那綠染液是將活細胞活細胞線粒體染色的專一線粒體染色的專一性染料，可使線粒體呈藍綠色，而細胞質接近無性染料，可使線粒體呈藍綠色，而細胞質接近無色。色。觀察葉綠體和線粒體思考思考1.1.觀察葉綠體和線粒體的材料細胞是活的還是死的？為觀察葉綠體和線粒體的材料細胞是活的還是死的？為什么？什么？2.2.為什么為什么選選用用黑藻葉片或黑藻葉片或蘚類的小葉或者菠菜葉的蘚類的小葉或者菠菜葉的下表皮（稍帶葉肉）作觀察葉綠體的材料？下表皮（稍帶葉肉）作觀察葉綠體的材料？3.3.可以推測黑藻細胞中的液泡位置嗎

15、？可以推測黑藻細胞中的液泡位置嗎？4.4.葉綠體為什么會運動？葉綠體為什么會運動？5.5.胞質環(huán)流對于細胞生活的意義何在？胞質環(huán)流對于細胞生活的意義何在？觀察葉綠體和線粒體觀察葉綠體和線粒體分泌泡沿著細胞骨架移動分泌泡沿著細胞骨架移動線粒體沿著細胞骨架移動線粒體沿著細胞骨架移動觀察葉綠體和線粒體 細胞質基質中含有多種無機物和有機物，還有多種酶，細胞質基質中含有多種無機物和有機物，還有多種酶，細胞質流動有利于物質的運輸和細胞器的移動，為細胞細胞質流動有利于物質的運輸和細胞器的移動，為細胞內新陳代謝提供所需要的物質和有關條件。內新陳代謝提供所需要的物質和有關條件。Theinnerlifeinthe

16、cell中視頻截圖觀察洋蔥表皮細胞的質壁分離及質壁分離復原+探究細胞液濃度(浙科版)紫色洋蔥表皮細胞紫色洋蔥表皮細胞質壁分離復原質壁分離復原紫色洋蔥表紫色洋蔥表皮細胞皮細胞紫色洋蔥表皮細胞紫色洋蔥表皮細胞質壁分離質壁分離1.1.細胞發(fā)生質壁分離發(fā)生的條件？細胞發(fā)生質壁分離發(fā)生的條件？2.2.為何選擇紫色洋蔥鱗片葉外表皮做觀察材料？為何選擇紫色洋蔥鱗片葉外表皮做觀察材料？3.3.為什么要先制作正常狀態(tài)的植物細胞裝片，且滴為什么要先制作正常狀態(tài)的植物細胞裝片，且滴加蔗糖溶液、清水都在載物臺上操作？加蔗糖溶液、清水都在載物臺上操作？4.4.如何探究洋蔥表皮細胞液濃度范圍？如何探究洋蔥表皮細胞液濃度范

17、圍？觀察洋蔥表皮細胞的質壁分離及質壁分離復原+探究細胞液濃度(浙科版) 及時了解植物細胞液濃度，對于指導農業(yè)生產及時了解植物細胞液濃度，對于指導農業(yè)生產很有意義。很有意義。 能引起約能引起約50%的細胞發(fā)生初始質壁分離的蔗糖的細胞發(fā)生初始質壁分離的蔗糖濃度就是細胞液的濃度濃度就是細胞液的濃度 初始質壁分離是指細胞的角隅處開始出現細初始質壁分離是指細胞的角隅處開始出現細胞膜及其內部分離開細胞壁的狀態(tài)。胞膜及其內部分離開細胞壁的狀態(tài)。培養(yǎng)洋蔥、適時取根培養(yǎng)洋蔥、適時取根剪取根尖剪取根尖2-3mm（1）解離）解離（2）漂洗）漂洗（3）染色）染色（4）制片）制片試劑試劑 作用作用鹽酸鹽酸使細胞分離使細

18、胞分離清水清水防止鹽酸與堿性染料作用，保證防止鹽酸與堿性染料作用，保證正常染色；正常染色；防止鹽酸繼續(xù)起作用，甚防止鹽酸繼續(xù)起作用，甚至破壞細胞。至破壞細胞。堿性堿性染料染料主要染細胞的染色質和染色體。主要染細胞的染色質和染色體。壓片壓片使細胞分散，便于觀察使細胞分散，便于觀察制作并觀察植物細胞有絲分裂的臨時裝片1.臨時玻片制作2.顯微鏡下觀察制作并觀察植物細胞有絲分裂的臨時裝片1.為什么要適時取根？為什么要剪取根尖為什么要適時取根？為什么要剪取根尖2-3mm？2.為什么在顯微鏡下找分生區(qū)細胞？如何找到？為什么在顯微鏡下找分生區(qū)細胞？如何找到？3.制作裝片時，使用何種試劑其作用分別是什么？制作

19、裝片時，使用何種試劑其作用分別是什么？4.視野中個時期細胞數量是否相等？每一時期細胞數占視野中個時期細胞數量是否相等？每一時期細胞數占總細胞數的比例代表了什么？總細胞數的比例代表了什么？適時取根適時取根剪取根尖剪取根尖2-3mm洋蔥根尖分生區(qū)細胞有絲分裂結果圖洋蔥根尖分生區(qū)細胞有絲分裂結果圖1 12 23 34 45 56 67 7制作并觀察植物細胞有絲分裂的臨時裝片低溫誘導植物染色體數目的變化實驗步驟：實驗步驟：1 1洋蔥生根至洋蔥生根至1cm1cm左右時，將整套裝置于左右時，將整套裝置于44低溫誘導培養(yǎng)低溫誘導培養(yǎng)36h36h。2 2剪取根尖剪取根尖0.50.51cm1cm，放入卡諾氏液浸

20、泡，放入卡諾氏液浸泡0.50.51h1h，以固定細，以固定細胞形態(tài)，然后用體積分數為胞形態(tài)，然后用體積分數為95%95%的酒精沖洗的酒精沖洗2 2次。次。3 3制作臨時裝片：解離制作臨時裝片：解離漂洗漂洗染色染色制片制片4 4低倍鏡找到染色體形態(tài)較好的分裂相。視野中既有二倍體低倍鏡找到染色體形態(tài)較好的分裂相。視野中既有二倍體細胞，也有染色體數目發(fā)生改變的細胞。確認某個細胞發(fā)生細胞，也有染色體數目發(fā)生改變的細胞。確認某個細胞發(fā)生染色體數目改變后，再用高倍鏡觀察。染色體數目改變后，再用高倍鏡觀察。對照對照室溫培養(yǎng)室溫培養(yǎng)0處理處理秋水仙素處理秋水仙素處理有絲分裂中期對照組和實驗組的染色體圖低溫誘導

21、植物染色體數目的變化1.1.為什么視野中的細胞染色體數不都加倍？為什么視野中的細胞染色體數不都加倍？2.2.什么時期的細胞分裂相更易于觀察？什么時期的細胞分裂相更易于觀察？3.3.視野中細胞能否繼續(xù)分裂？視野中細胞能否繼續(xù)分裂？探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數量的動態(tài)變化 探究酵母菌種群數量在封閉環(huán)境中隨時間發(fā)生的變化 使用取樣法（間隔）、利用血細胞計數板，顯微鏡下計數思考：思考：1.1.設置不接種酵母菌的無菌葡萄糖溶液這一組設置不接種酵母菌的無菌葡萄糖溶液這一組別的意義在于？別的意義在于？2.2.如何能保證隨機取樣？如何能保證隨機取樣？3.3.計數過程中可能碰到計數過程中可能碰到什么問題？如何科學地

22、什么問題？如何科學地處理？處理？（左上、獨立個體）（左上、獨立個體）4.4.如何算出試管內的細如何算出試管內的細胞總數？胞總數？5.5.還有其他方法能估測還有其他方法能估測細胞中的菌液濃度嗎？細胞中的菌液濃度嗎？（比色法，使用比色計）（比色法，使用比色計）探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數量的動態(tài)變化計數室深計數室深0.1mmABCDEFGHI1234567891011121314151612345678910111213141516171819202122232425計數板平面圖計數板平面圖計數板側面圖計數板側面圖放大放大計數區(qū)共計數區(qū)共9個大格個大格放大放大25個中格個中格16個小格個小格80個小格

23、內細菌數個小格內細菌數放大放大細菌細胞數細菌細胞數/ml=80個小格內細菌數個小格內細菌數/80 x 400 x 104 x 稀釋倍數稀釋倍數計數區(qū)容積？計數區(qū)容積？1mm蓋玻片蓋玻片(先先)0.1mm3經典題：（經典題：（2011海淀海淀0模）模）31顯微鏡是生物學實驗顯微鏡是生物學實驗常用的工具，請回答下列有關問題。常用的工具，請回答下列有關問題。（1）要在顯微鏡下觀察到清晰的物像，首先要保證）要在顯微鏡下觀察到清晰的物像，首先要保證被觀察的標本能夠透光，其次是結構之間有一定被觀察的標本能夠透光，其次是結構之間有一定的對比度。例如，的對比度。例如，觀察葉綠體觀察葉綠體的實驗選擇黑的實驗選擇

24、黑藻葉片為實驗材料，一是因為黑藻葉片藻葉片為實驗材料，一是因為黑藻葉片，二是因為被觀察的主要，二是因為被觀察的主要結構；而在結構；而在制作并觀察植物細胞有絲分裂的臨時裝片制作并觀察植物細胞有絲分裂的臨時裝片的的實驗中，需要對實驗材料進行一些處理，經實驗中，需要對實驗材料進行一些處理，經處理后解決了原始材料不透處理后解決了原始材料不透光的問題，經處理后增大了光的問題，經處理后增大了結構之間的對比度。結構之間的對比度。很薄，細胞層數少很薄，細胞層數少自身有顏色自身有顏色解離和壓片解離和壓片染色染色（2）低倍鏡換高倍鏡后，常出現視野變暗和物像模糊的）低倍鏡換高倍鏡后，常出現視野變暗和物像模糊的現象，

25、請說出一種調亮視野的操作方法和使物像清晰的現象，請說出一種調亮視野的操作方法和使物像清晰的操作方法：操作方法：調節(jié)反光鏡（調節(jié)光圈、調節(jié)電光源的亮調節(jié)反光鏡（調節(jié)光圈、調節(jié)電光源的亮度）；度）；用細準焦螺旋調整焦距用細準焦螺旋調整焦距 光學顯微鏡技術的應用 細胞學方面觀察細胞結構（如細胞器的變化）觀察細胞中目標蛋白質的位置（使用熒光分子標記等） 遺傳學方面觀察染色體（如觀察染色體結構變異、觀察交叉互換現象、觀察染色體數目變異等）觀察細胞形態(tài)（如鐮刀形紅細胞等） 考試說明的要求考試說明的要求生物體內物質的生物體內物質的分離、鑒定技術分離、鑒定技術光合色素的分離光合色素的分離糖、蛋白質、脂肪的鑒定

26、糖、蛋白質、脂肪的鑒定DNA的粗提取與鑒定的粗提取與鑒定檢測生物組織中的油脂檢測生物組織中的油脂檢測生物組織中的糖類和蛋白質檢測生物組織中的糖類和蛋白質光合色素的提取與分離光合色素的提取與分離 DNA的粗提取與鑒定（人教版）的粗提取與鑒定（人教版）二、生物體內物質的分離、鑒定技術表示學生做過的實驗思考思考1.1.分別選擇哪些材料來進行實驗？分別選擇哪些材料來進行實驗？2.2.如何確定反應后的顏色就是還原性糖檢測后的顏色？如何確定反應后的顏色就是還原性糖檢測后的顏色？（用指（用指示劑檢測葡萄糖溶液）示劑檢測葡萄糖溶液）3.3.雙縮脲試劑和斐林試劑的異同（成分、使用方法、雙縮脲試劑和斐林試劑的異同

27、（成分、使用方法、鑒定條件等）？鑒定條件等）？4.4.不同組織中某成分含量是否有差異？不同組織中某成分含量是否有差異？( (顏色深淺顏色深淺) )檢測生物組織中的脂肪(油脂)、糖類和蛋白質光合色素的提取與分離實驗原理：實驗原理：1、提取色素的原理：、提取色素的原理：2、分離色素的原理：、分離色素的原理： 葉綠體中的色素是有機物，可以溶解在葉綠體中的色素是有機物，可以溶解在_中中( (如如_、_)_)，所以可以用，所以可以用_或或_等提取葉綠體色素等提取葉綠體色素。用用_分離色素，因為葉綠體中的分離色素，因為葉綠體中的4 4種色種色素在層析液中的素在層析液中的_不同，溶解度高的色素隨不同，溶解度

28、高的色素隨著層析液在濾紙上擴散的速度著層析液在濾紙上擴散的速度_，反之則，反之則_，所以，所以據此原理據此原理4 4種色素就會隨著層析液在濾紙上的擴散而種色素就會隨著層析液在濾紙上的擴散而分離開。分離開。有機溶劑有機溶劑 酒精、丙酮等酒精、丙酮等紙層析法紙層析法無水乙醇無水乙醇 丙酮丙酮溶解度溶解度快快慢慢光合色素的提取與分離思考思考1.1.研磨提取時加入碳酸鈣、二氧化硅、無水乙醇的研磨提取時加入碳酸鈣、二氧化硅、無水乙醇的目的分別是什么？目的分別是什么？2.2.分離時為什么濾液細線不能超過層析液？分離時為什么濾液細線不能超過層析液？3.3.不同季節(jié)的葉片其色素條帶數、顏色深淺是否一致？不同季

29、節(jié)的葉片其色素條帶數、顏色深淺是否一致？DNA的粗提取與鑒定一、粗提取原理：一、粗提取原理：二、鑒定原理：二、鑒定原理：3、DNA遇遇_、_條件下會變成條件下會變成_色色。二苯胺試劑二苯胺試劑沸水浴沸水浴藍藍1、DNA在不同濃度的在不同濃度的_中中_不同。不同。氯化鈉溶液氯化鈉溶液溶解度溶解度2、DNA_酒精溶液，細胞中的某些蛋白質酒精溶液，細胞中的某些蛋白質_酒精溶液。酒精溶液。不溶于不溶于可溶于可溶于1A、根據酶的專一性。使用蛋白酶如嫩肉粉；、根據酶的專一性。使用蛋白酶如嫩肉粉；1B、根據熱穩(wěn)定性。、根據熱穩(wěn)定性。大多數蛋白質不能忍受大多數蛋白質不能忍受6080的高的高溫，而溫，而DNA在

30、在80以上才會變性以上才會變性。DNA的粗提取與鑒定思考思考1.1.使用動物或植物細胞分別使用什么方法破碎使用動物或植物細胞分別使用什么方法破碎細胞？細胞？2.2.加入冷酒精、緩慢攪拌的目的是什么？加入冷酒精、緩慢攪拌的目的是什么？3.3.鑒定鑒定DNADNA時，設置時，設置A A組的目的是什么？組的目的是什么？AB粗提取得到的粗提取得到的DNA進一步粗提取得到的進一步粗提取得到的DNA鑒定結果鑒定結果DNA的粗提取與鑒定實驗操作小結：實驗操作小結：制備雞血細胞液制備雞血細胞液加檸檬酸鈉，靜置或離心加檸檬酸鈉，靜置或離心破碎細胞，釋放破碎細胞，釋放DNADNA 加蒸餾水，同一方向快速加蒸餾水，

31、同一方向快速 通通方向攪拌方向攪拌過濾，除去細胞壁、細胞膜等。過濾，除去細胞壁、細胞膜等。溶解核內溶解核內DNADNA 加入加入NaClNaCl至至2mol/L2mol/L，同一方向，同一方向緩慢攪拌緩慢攪拌DNADNA析出析出 加蒸餾水至加蒸餾水至0.14mol/L0.14mol/L，過，過濾，再溶解到濾，再溶解到2mol/L2mol/L溶液中溶液中除去細胞質中的大部分物質。除去細胞質中的大部分物質。DNADNA初步純化初步純化 與等體積與等體積9595冷卻酒精冷卻酒精混合，析出白色絲狀物混合，析出白色絲狀物除去核蛋白、除去核蛋白、RNARNA、多糖等。、多糖等。DNADNA鑒定鑒定 二苯胺

32、，沸水浴，呈現藍二苯胺，沸水浴，呈現藍色色實驗名稱實驗名稱 選材選材及特點及特點提取分離提取分離原理原理鑒定試劑鑒定試劑/ /方法方法結果結果檢測生物組織中的檢測生物組織中的油脂油脂含量大、含量大、色淺色淺研磨破碎研磨破碎細胞，釋細胞，釋放物質放物質蘇丹蘇丹或或染染液液 特定的顏色反應特定的顏色反應橙黃橙黃或紅或紅色色檢測生物組織中的檢測生物組織中的糖類（淀粉、還原糖類（淀粉、還原性糖）性糖）碘液；碘液；斐林試斐林試劑劑藍色；藍色；磚紅磚紅色沉色沉淀淀檢測生物組織中的檢測生物組織中的蛋白質蛋白質雙縮脲雙縮脲試劑試劑紫色紫色物質物質光合色素的提取與光合色素的提取與分離分離含量大含量大易研磨易研磨

33、提取原理；提取原理；分離原理分離原理4 4條色條色素帶素帶DNADNA的粗提取與鑒定的粗提取與鑒定含量大含量大粗提取；粗提取；進一步粗進一步粗提取提取二苯胺二苯胺試劑試劑溶液溶液變藍變藍色色破碎細胞破碎細胞提取分離提取分離鑒定反應鑒定反應破碎細胞壁、細胞膜、細胞器膜 如：動物細胞低滲漲破、洗滌劑處理等 植物細胞研磨、榨汁等可根據物理或化學性質的差異如：溶解度、熱穩(wěn)定性可根據特定的顏色反應如：二苯胺試劑鑒定DNA、斐林試劑與還原性糖反應產生磚紅色沉淀二、生物體內物質的分離、鑒定技術PCR的概念的概念 PCRPCR（ Polymerase Chain Reaction,Polymerase Cha

34、in Reaction,聚合酶鏈反聚合酶鏈反應）是指在體外，通過特異應）是指在體外，通過特異DNADNA引物延伸（擴增）引物延伸（擴增）核酸分子中某個特定區(qū)域的技術。核酸分子中某個特定區(qū)域的技術。 PCRPCR可在幾小時內，將特定核酸序列擴增百萬倍?？稍趲仔r內，將特定核酸序列擴增百萬倍。 “變性、退火、延伸”1.變性：雙鏈DNA解鏈成為單鏈DNA2.退火：引物與模板的單鏈DNA的特定互補部位相配對和結合3.延伸：以目的基因為模板，合成互補的新DNA鏈DNA片段的PCR擴增（及電泳）DNA片段的PCR擴增（及電泳） DNA聚合酶的催化特點DNA片段的PCR擴增（及電泳）PCR結果的鑒定：1.比

35、色法測DNA含量2.電泳法測DNA片段長度和大致含量DNA片段的PCR擴增（及電泳） 電泳是指帶電顆粒在電場的作用下，向著與其所帶電荷極性相反的電極方向移動。 由于待分離樣品中各種分子帶電性質以及分子大小、形狀等性質的差異，使帶電分子產生不同的遷移速度，從而對樣品進行分離、鑒定或提純的技術。 電泳過程必須在一種支持介質中進行。目前使用得最多的是瓊脂糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠。 蛋白質電泳主要使用聚丙烯酰胺凝膠。DNA片段的PCR擴增（及電泳）電泳槽電泳槽DNA片段的PCR擴增（及電泳）電泳實驗結果觀察電泳結果，發(fā)黃色亮光的為觀察電泳結果，發(fā)黃色亮光的為DNA條帶條帶M，maker，已知不同分子量的

36、，已知不同分子量的DNA對照對照 產物產物 M1000kb2000kbDNA片段的PCR擴增（及電泳）三、調查*調查人群中的遺傳病調查人群中的遺傳病調查轉基因食品發(fā)展的現狀調查體溫的日變化規(guī)律調查青少年中常見的免疫異常（浙科）*模擬用標志重捕法進行種群密度的調查模擬用標志重捕法進行種群密度的調查（浙科）*探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數量的動態(tài)變化（略）*不同群落中土壤動物類群豐度的研究（浙科）調查當地農田生態(tài)系統(tǒng)中的能量流動情況調查社區(qū)、村鎮(zhèn)或學校附近一個淡水區(qū)域的水質（浙科）考試說明的要求調查遺傳學調查：群體調查、家系分析生態(tài)學調查：樣方法、標志重捕法調查人群中的遺傳病遺傳病的群體調查是一項多學科的綜合性調查研究，對于遺傳病的預防有十分重要意義。查清群體中遺傳病的種類、遺傳病的發(fā)病率、致病基因頻率和攜帶者頻率是遺傳病群體調查的重要內容之一。調查人群中的遺傳病 調查目的 調查對象 調查結果 結果分析調查目的(以山東省