選修三1.1DNA重組技術(shù)的基本工具

1、選修選修3 生態(tài)工程生態(tài)工程生物技術(shù)的安全性生物技術(shù)的安全性和倫理問題和倫理問題胚胎工程胚胎工程細(xì)胞工程細(xì)胞工程基因工程基因工程現(xiàn)代生物科技現(xiàn)代生物科技專題專題基因工程得以實(shí)現(xiàn)的基因工程得以實(shí)現(xiàn)的基礎(chǔ)基礎(chǔ)理論理論是什么？是什么？培育抗蟲棉的培育抗蟲棉的操作過程中用到了哪些操作過程中用到了哪些工具？工具？基因工程得以實(shí)現(xiàn)的基因工程得以實(shí)現(xiàn)的基礎(chǔ)基礎(chǔ)理論理論是什么？是什么？有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的生物均以DNA作為遺傳物質(zhì)，且其基本結(jié)構(gòu)相同。各種生物表達(dá)基因共用一套遺傳密碼子（一）（一）“分子手術(shù)刀分子手術(shù)刀”、分布：、分布： 主要在主要在原核生物原核生物中中特異性特異性，即，即識別特定識別特定的的核苷酸序列

2、核苷酸序列， 切割特定切割特定切點(diǎn)。切點(diǎn)。大腸桿菌中的一種限制酶（大腸桿菌中的一種限制酶（EcoREcoR）能能專一識別專一識別GAATTCGAATTC序列，并在序列，并在G G和和A A之間切開。之間切開。 限制限制性核酸內(nèi)切性核酸內(nèi)切酶酶 二、二、DNA重組技術(shù)的基本工具重組技術(shù)的基本工具3 3、舉例：舉例：、作用特點(diǎn)、作用特點(diǎn)：限制酶限制酶（EcoREcoR）的）的作用過程作用過程5 5、切割的具體部位是什么、切割的具體部位是什么? ? 磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵、結(jié)果：、結(jié)果： 產(chǎn)生黏性未端和平末端產(chǎn)生黏性未端和平末端目的基因目的基因（二）（二）“分子分子縫合針縫合針”DNA連接酶連接酶 G

3、CTATAGCTATA將將DNADNA雙鏈雙鏈上的兩個(gè)缺口同時(shí)連接起來。上的兩個(gè)缺口同時(shí)連接起來。連接的是什么化學(xué)鍵連接的是什么化學(xué)鍵? ?磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵（二）（二）“分子分子縫合針縫合針”DNA連接酶連接酶 作用：作用：（二）（二）“分子分子縫合針縫合針”DNA連接酶連接酶 閱讀課本閱讀課本P5自主歸納自主歸納以下內(nèi)容以下內(nèi)容:回顧回顧DNADNA聚合酶的作用聚合酶的作用ATGCATGC以一條以一條DNADNA鏈鏈為模板，將為模板，將單單個(gè)脫氧核苷酸個(gè)脫氧核苷酸通過通過磷酸二酯磷酸二酯鍵鍵形成一條與形成一條與模板鏈互補(bǔ)的模板鏈互補(bǔ)的DNADNA鏈。鏈。（三）（三）分子運(yùn)輸車分子運(yùn)輸車基

4、因進(jìn)入受體細(xì)胞的基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體載體作用：作用：將外源基因送入受體細(xì)胞。將外源基因送入受體細(xì)胞。能自我能自我復(fù)制的復(fù)制的環(huán)狀環(huán)狀DNA。 質(zhì)粒質(zhì)粒 噬菌體的衍生物，噬菌體的衍生物， 動植物病毒等動植物病毒等 1、 下圖為下圖為DNA分子在不同酶的作用分子在不同酶的作用下所發(fā)生的變化下所發(fā)生的變化,圖中依次表示圖中依次表示限制酶、限制酶、DNA聚合酶、聚合酶、DNA連接酶、解旋酶連接酶、解旋酶作作用的正確順序是用的正確順序是() A. B. C. D.C2、pBR322質(zhì)粒是較早構(gòu)建的質(zhì)粒是較早構(gòu)建的質(zhì)粒載體質(zhì)粒載體,其主要結(jié)構(gòu)如圖一所示。其主要結(jié)構(gòu)如圖一所示。 (1)為了為了檢測重組質(zhì)粒

5、是否檢測重組質(zhì)粒是否導(dǎo)入原本無導(dǎo)入原本無ampR和和tetR的大腸桿菌的大腸桿菌,將大腸桿菌在將大腸桿菌在含氨芐青霉素的培含氨芐青霉素的培養(yǎng)基養(yǎng)基上培養(yǎng)上培養(yǎng),得到如得到如圖二的菌落圖二的菌落。將滅菌絨布按到。將滅菌絨布按到圖二圖二培養(yǎng)基上培養(yǎng)基上,使絨布面沾上菌落使絨布面沾上菌落,然后將絨布按到然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)上培養(yǎng),得到得到圖三圖三的結(jié)果的結(jié)果(空圈空圈表示與圖二對照無菌落的位置表示與圖二對照無菌落的位置)。與圖三空圈相對與圖三空圈相對應(yīng)的應(yīng)的圖二中的菌落圖二中的菌落表現(xiàn)型是表現(xiàn)型是,圖三結(jié)果顯圖三結(jié)果顯示示,多數(shù)大腸桿菌多數(shù)大腸桿菌中中導(dǎo)入的是導(dǎo)入的是

6、 。 含氨含氨芐青芐青霉素霉素的培的培養(yǎng)基養(yǎng)基含四環(huán)素含四環(huán)素的培養(yǎng)基的培養(yǎng)基與圖三空圈相對應(yīng)的與圖三空圈相對應(yīng)的圖二中的圖二中的菌落菌落表現(xiàn)型是表現(xiàn)型是 ,圖三結(jié)果顯示圖三結(jié)果顯示,多數(shù)大腸桿菌多數(shù)大腸桿菌中中導(dǎo)入的是導(dǎo)入的是 。 (2)構(gòu)建人工質(zhì)粒時(shí)要有抗性基因構(gòu)建人工質(zhì)粒時(shí)要有抗性基因,以便以便于于 。 鑒別目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞鑒別目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞 pBR322質(zhì)粒質(zhì)粒 2和7能連接形成ACGT TGCA； 4和8能連接形成GAATTC CTTAAG； 3和6能連接形成GCGC CGCG； 1和5能連接形成CTGCAG GACGTC。教材教材P7思考與探究思考與探究1Than

7、k You!1、在基因工程中，切割運(yùn)載體和、在基因工程中，切割運(yùn)載體和含有目的基因的含有目的基因的DNA片段，需使片段，需使用（用（ ）同種限制酶同種限制酶 B. 兩種限制酶兩種限制酶同種連接酶同種連接酶 D. 兩種連接酶兩種連接酶選選我我A 2 2、下列不適合用于基因工程的運(yùn)載體、下列不適合用于基因工程的運(yùn)載體是（是（ ） A A、質(zhì)粒、質(zhì)粒 B B、噬菌體、噬菌體 C C、細(xì)菌、細(xì)菌 D D、病毒、病毒選選我我C3、下列說法正確的是、下列說法正確的是：（：（ ） A、限制酶的切口一定是、限制酶的切口一定是GAATTC堿基序列堿基序列 B、質(zhì)粒是基因工程中唯一的運(yùn)載體、質(zhì)粒是基因工程中唯一的運(yùn)載體 C、重組技術(shù)所用