淺談腫瘤標志物

1、淺談腫瘤標志物淺談腫瘤標志物黃慧瑾2016年5月19日腫瘤標志物（腫瘤標志物（tumor markers，TM) 腫瘤標志物是指在腫瘤發(fā)生和增殖的過程中，由腫瘤細胞合成、釋放或者是機體對腫瘤細胞反應而產(chǎn)生的一類物質(zhì)，這些物質(zhì)在血液、體液及組織中可檢測到，達到一定的水平時能提示某些腫瘤的存在。 腫瘤標志物高與查到癌細胞是兩回事，也不一定腫瘤標志物高與查到癌細胞是兩回事，也不一定是代表患有腫瘤！是代表患有腫瘤！血清腫瘤標志物分類血清腫瘤標志物分類 一、為什么要查腫瘤標記物？一、為什么要查腫瘤標記物？ 我們知道，早期診斷是治愈腫瘤的關(guān)鍵；而有些腫瘤標記物的升高往往早于臨床癥狀的出現(xiàn)，因此腫瘤標記物有

2、助于早期發(fā)現(xiàn)腫瘤跡象，早診斷、早治療，從而提高療效。 比如，我們國家70年代以后在上海等地，通過對大量人群的甲胎蛋白普查，曾檢出不少肝癌特別是小肝癌患者，使很多病人得到了及時手術(shù)切除的機會。二、腫瘤標記物還能用于以下方面二、腫瘤標記物還能用于以下方面 出現(xiàn)腫瘤癥狀或可疑腫物后的鑒別診斷 腫瘤生物特點和疾病階段的判斷 腫瘤治療后的療效觀察和判斷預后 提示腫瘤的復發(fā)、轉(zhuǎn)移腫瘤指標升高是不是肯定就有腫瘤了？腫瘤指標升高是不是肯定就有腫瘤了？ 答案是不一定。 腫瘤標志物不僅存在于惡性腫瘤中，也存在于良性腫瘤、胚胎組織、甚至正常組織中； 腫瘤的診斷不能單獨依靠腫瘤標志物的檢查，需要由臨床檢查、影像檢查、

3、內(nèi)鏡檢查或手術(shù)探查等綜合判斷，而病理診斷是腫瘤診斷的“金標準”腫瘤標記物篩查結(jié)果判讀腫瘤標記物篩查結(jié)果判讀 腫瘤標記物檢查腫瘤標記物檢查陰性陰性： 患相關(guān)惡性腫瘤的概率相對較低； 如有家族史、癌前病變或有癥狀，仍需定期復查,結(jié)合其他檢查； 腫瘤標記物檢查腫瘤標記物檢查陽性陽性： 檢測可能有假陽性或患良性疾病； 優(yōu)先考慮復檢,復檢仍陽性者進一步檢查； 指標輕度升高，不要輕下結(jié)論，持續(xù)觀察腫瘤標志物的動態(tài)變化，如進行性升高，患惡性腫瘤的概率比較高； 中重度升高或多項指標持續(xù)升高，提示腫瘤發(fā)生的可能性很高，必須盡快做醫(yī)學影像學和細胞病理學等檢查； 不同醫(yī)院檢驗科儀器、試劑各不相同，參考值不一定一樣，

4、因此，不能隨意比較不同醫(yī)院測量值的高低。除了惡性腫瘤，引起腫瘤標記物升除了惡性腫瘤，引起腫瘤標記物升高的其他因素包括：高的其他因素包括： 良性疾病良性疾病，如炎癥性疾?。焊闻K良性疾病時，AFP、CA19-9、CEA會升高；腎功能衰竭時2-微球蛋白及CA15-3、CA19-9、CEA和PSA會升高；風濕病時CA19-9濃度可增高； 生理變化生理變化：妊娠時AFP、CA125、HCG會升高； 不良習慣不良習慣：吸煙、酗酒； 檢查引起檢查引起：屢次進行直腸指檢后，PSA值可升高； 服用某些藥物服用某些藥物； 飼養(yǎng)寵物飼養(yǎng)寵物； 此外，抽血過程中的污染、抽血引起的紅細胞破裂、標本保存不當、試劑差異及檢

5、測欠規(guī)范等因素也會干擾檢查結(jié)果。腫瘤標志物升高了，可不可以明確腫瘤標志物升高了，可不可以明確是哪個部位的腫瘤？是哪個部位的腫瘤？ 有時可以，但多數(shù)不能單憑借腫瘤標記物來明確，還需要有時可以，但多數(shù)不能單憑借腫瘤標記物來明確，還需要結(jié)合其他檢查。結(jié)合其他檢查。 一種腫瘤標記物往往與多種惡性腫瘤有關(guān)，以下是一些常見的腫瘤標記物及其所提示可能有腫瘤發(fā)生的臟器： CA19-9 胰腺、胃腸道和肝膽 CA15-3 乳腺、肺、卵巢、肝 CA242 結(jié)直腸、胰腺、卵巢 CA72-4 胃、卵巢、胰腺、乳腺 CA125 卵巢、子宮、胰腺、肝、肺 CA50 胰腺、乳腺、肺、胃腸道和肝膽常見腫瘤的標志物檢測常見腫瘤的

6、標志物檢測 ADVIA Centaur XP全自動化學發(fā)光分析系統(tǒng)檢測原全自動化學發(fā)光分析系統(tǒng)檢測原理理經(jīng)典直接化學發(fā)光方法經(jīng)典直接化學發(fā)光方法 吖啶酯(AE)為放光劑 采用微磁顆粒分離 兩種結(jié)合模式：競爭法夾心法免疫測定免疫測定 抗體 抗原 示蹤/發(fā)光劑：吖啶酯 分離方法：微磁顆粒分離 檢測裝置抗原抗體特意專一結(jié)合是檢測的抗原抗體特意專一結(jié)合是檢測的基礎(chǔ)基礎(chǔ)抗原抗原抗體抗體結(jié)合位點結(jié)合位點發(fā)光劑是檢測的技術(shù)核心發(fā)光劑是檢測的技術(shù)核心AE抗原抗原抗體抗體結(jié)合位點結(jié)合位點吖啶酯簡介吖啶酯簡介提升擴散速率最大程度避免結(jié)合位點的遮蔽提高分析靈敏度堿性磷酸酶哎啶酯 一秒鐘高強度的光釋放使報告結(jié)果更快光

7、釋放光釋放(RLUs)時間時間 (妙妙)12吖啶酯簡介吖啶酯簡介哎啶酯直接化學發(fā)光法的優(yōu)點哎啶酯直接化學發(fā)光法的優(yōu)點 無需額外的信號放大或底物無需額外的信號放大或底物 光的釋放快速光的釋放快速 對溫度和對溫度和pH值的影響不敏感值的影響不敏感 背景干擾最小背景干擾最小微磁顆粒微磁顆粒分離技術(shù)分離技術(shù) 氧化鐵顆粒被吸引至磁場區(qū) 與抗原或抗體發(fā)生共價結(jié)合微磁顆粒(PMP)抗體 用于分離結(jié)合與未結(jié)合的反應物磁場未結(jié)合的AE微磁顆粒分離技術(shù)微磁顆粒分離技術(shù)檢測原理的反應模式檢測原理的反應模式 夾心法 競爭法 抗體捕獲模式夾心法夾心法 步驟步驟 1哎啶酯哎啶酯 (AE)抗體抗體樣品中的分析樣品中的分析物

8、特異性抗原物特異性抗原其它顆粒其它顆粒PMP-抗體抗體-抗原抗原-抗體抗體AE復合物復合物加入與特異性抗體結(jié)合的微磁顆粒PMP，孵育，結(jié)合抗原的PMP再與AE-標記抗體結(jié)合夾心法夾心法 步驟步驟 2MagnetPMP-抗體抗體-抗原抗原-抗體抗體AE復合物復合物比色杯比色杯夾心法夾心法 步驟步驟 3樣品濃度樣品濃度光釋放光釋放(RLUs)加入酸堿試劑啟動化學發(fā)光反應計算濃度夾心法夾心法 步驟步驟 4微磁顆粒微磁顆粒(PMP)抗體抗體樣品抗原樣品抗原AE- 標記抗原標記抗原AE-標記抗原與樣品抗原競爭結(jié)合與PMP共價結(jié)合的有限的抗體結(jié)合位點 磁場磁場PMP- 抗體抗體- 抗原抗原復合物復合物PM

9、P- 抗體抗體- 抗原抗原 AE復合物復合物孵育后將反應混合物置于磁場下，分離并除去未結(jié)合的AE樣品濃度樣品濃度光釋放光釋放(RLUs)加入酸堿啟動化學發(fā)光反應計算濃度AE-標記抗體標記抗體PMP- 標記抗原標記抗原樣品中的分析樣品中的分析物特異性抗原物特異性抗原結(jié)合抗原的PMP與樣品抗原競爭AE-標記抗體上有限的抗原結(jié)合位點 磁場磁場PMP-抗原抗原-抗體抗體AE復合物復合物孵育后將反應混合物置于磁場下，分離并除去未結(jié)合的AE樣品濃度樣品濃度光釋放光釋放(RLUs)加入酸堿試劑啟動化學發(fā)光反應計算濃度競爭法競爭法夾心法夾心法樣品濃度樣品濃度樣品濃度樣品濃度光釋放光釋放(RLUs)光釋放光釋放(RLUs)抗體捕獲模式抗體捕獲模式 分析物是樣品中含有的抗體 采用一種直接針對樣品中抗體的特異性抗體抗體捕獲模式抗體捕獲模式 結(jié)合有抗人類IgM特異性抗體的微磁顆粒（PMP）被加入到樣品中 人類IgM抗體與PMP上結(jié)合的抗人類IgM抗體進行結(jié)合 樣品中的抗體通過磁場作用與可能造成干擾的其它物質(zhì)進行分離抗體捕獲模式抗體捕獲模式 加入對樣品