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1、色譜分析法色譜分析法 色譜分析法色譜分析法是一種常用的物質(zhì)分離分析方法,是一種常用的物質(zhì)分離分析方法,常用于分離常用于分離結(jié)構(gòu)相近結(jié)構(gòu)相近、物理性質(zhì)物理性質(zhì)和和化學(xué)性質(zhì)相化學(xué)性質(zhì)相似似物質(zhì)。物質(zhì)。色譜法體系中:色譜法體系中:一個(gè)相是固定不動(dòng)的,稱(chēng)為一個(gè)相是固定不動(dòng)的,稱(chēng)為固定相固定相;另一相是移動(dòng)的,稱(chēng)為另一相是移動(dòng)的,稱(chēng)為流動(dòng)相流動(dòng)相;濾紙或其它載體作為濾紙或其它載體作為惰性支持物惰性支持物;兩相兩相在在惰性支持物惰性支持物上作相對(duì)運(yùn)動(dòng)。上作相對(duì)運(yùn)動(dòng)。知識(shí)預(yù)備知識(shí)預(yù)備u紙層析法原理紙層析法原理 樣品溶液點(diǎn)在樣品溶液點(diǎn)在濾紙濾紙(惰性支持物惰性支持物)上,做為)上,做為展開(kāi)劑展開(kāi)劑的有機(jī)溶劑自
2、下而上移動(dòng)(的有機(jī)溶劑自下而上移動(dòng)(流動(dòng)相流動(dòng)相),樣品混合物中),樣品混合物中各組分在水(各組分在水(固定相固定相)或有機(jī)溶劑中的)或有機(jī)溶劑中的溶解能力溶解能力各不各不相同,各組分會(huì)在水與有機(jī)溶劑兩相中發(fā)生相同,各組分會(huì)在水與有機(jī)溶劑兩相中發(fā)生溶解分配溶解分配,并隨有機(jī)溶劑的移動(dòng)而并隨有機(jī)溶劑的移動(dòng)而展開(kāi)展開(kāi),達(dá)到,達(dá)到分離分離的目的。的目的。流動(dòng)相和固定相的選擇流動(dòng)相和固定相的選擇.一般來(lái)說(shuō),能溶于水的待分離物質(zhì),選擇一般來(lái)說(shuō),能溶于水的待分離物質(zhì),選擇水水做固定相做固定相(吸吸附在濾紙上附在濾紙上),以與水不混溶的,以與水不混溶的有機(jī)溶劑有機(jī)溶劑做流動(dòng)相做流動(dòng)相1. 流動(dòng)相溶劑對(duì)分離物
3、質(zhì)有適當(dāng)?shù)娜芙舛攘鲃?dòng)相溶劑對(duì)分離物質(zhì)有適當(dāng)?shù)娜芙舛?1)溶解度太大:待分離物質(zhì)會(huì)隨流動(dòng)相跑到濾紙的最前沿溶解度太大:待分離物質(zhì)會(huì)隨流動(dòng)相跑到濾紙的最前沿(2)溶解度太?。捍蛛x物質(zhì)留在固定相附近溶解度太小:待分離物質(zhì)留在固定相附近,分離效果不好分離效果不好 具有細(xì)微縫隙的物質(zhì)或直徑很小的具有細(xì)微縫隙的物質(zhì)或直徑很小的細(xì)管細(xì)管(稱(chēng)毛細(xì)管稱(chēng)毛細(xì)管)與液體接觸時(shí),液體沿與液體接觸時(shí),液體沿細(xì)縫或毛細(xì)管上升的現(xiàn)象稱(chēng)細(xì)縫或毛細(xì)管上升的現(xiàn)象稱(chēng)毛細(xì)現(xiàn)象。毛細(xì)現(xiàn)象。 毛細(xì)現(xiàn)象毛細(xì)現(xiàn)象是物質(zhì)分子間作用力的結(jié)是物質(zhì)分子間作用力的結(jié)果,常見(jiàn)的紙張或毛巾吸水都是毛細(xì)現(xiàn)果,常見(jiàn)的紙張或毛巾吸水都是毛細(xì)現(xiàn)象。象。毛細(xì)現(xiàn)象
4、毛細(xì)現(xiàn)象P8 檢索咨詢(xún)檢索咨詢(xún)流動(dòng)相為什么能自動(dòng)從濾紙底部向頂部展開(kāi)呢?流動(dòng)相為什么能自動(dòng)從濾紙底部向頂部展開(kāi)呢?2、裁紙、裁紙 3、畫(huà)原點(diǎn)、畫(huà)原點(diǎn) 6、展開(kāi)、展開(kāi) 7、顯色、顯色 濾紙不可觸及試管的內(nèi)壁,紙濾紙不可觸及試管的內(nèi)壁,紙條末端浸入展開(kāi)劑約條末端浸入展開(kāi)劑約0.5cm,不不能讓試樣點(diǎn)浸入展開(kāi)劑能讓試樣點(diǎn)浸入展開(kāi)劑 二二、操作方法操作方法1、配制試樣溶液、配制試樣溶液離濾紙末端約離濾紙末端約2cm處用鉛筆處用鉛筆4、點(diǎn)樣、點(diǎn)樣用用毛細(xì)管毛細(xì)管取樣品溶液,輕輕點(diǎn)樣取樣品溶液,輕輕點(diǎn)樣于原點(diǎn)上,晾干,重復(fù)于原點(diǎn)上,晾干,重復(fù)35次。次。斑點(diǎn)直徑需斑點(diǎn)直徑需0.5cm5、取展開(kāi)劑、取展開(kāi)劑
5、不能粘到試管壁上不能粘到試管壁上約約2cm試試樣樣點(diǎn)點(diǎn)如果試樣接觸展開(kāi)劑,樣點(diǎn)里要分離的離子如果試樣接觸展開(kāi)劑,樣點(diǎn)里要分離的離子或者色素就會(huì)進(jìn)入展開(kāi)劑,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。或者色素就會(huì)進(jìn)入展開(kāi)劑,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。觀察與交流觀察與交流: :如何分析下列溶液的成分?如何分析下列溶液的成分? 飽和飽和CuCl2溶液溶液 溶液顏色溶液顏色顯色反應(yīng)顯色反應(yīng)加氫氧化鈉加氫氧化鈉飽和飽和FeCl3溶液溶液 紅褐色沉淀紅褐色沉淀 方法方法綠色綠色藍(lán)色沉淀藍(lán)色沉淀棕黃色棕黃色與過(guò)量氨水生成與過(guò)量氨水生成深藍(lán)色深藍(lán)色溶液溶液與過(guò)量氨水生成與過(guò)量氨水生成紅褐色紅褐色沉淀沉淀與與KSCN生成生成血紅色血紅色溶液溶液與亞鐵氰
6、化鉀生成與亞鐵氰化鉀生成普魯士藍(lán)普魯士藍(lán)色色沉淀沉淀Cu2+與與過(guò)量過(guò)量氨水反應(yīng),先沉淀后沉淀溶解生成了氨水反應(yīng),先沉淀后沉淀溶解生成了Cu(NH3) 42+ ,試寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)中發(fā)生的兩個(gè)反應(yīng)的離子方程式?試寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)中發(fā)生的兩個(gè)反應(yīng)的離子方程式?Cu 2+ +2NH3 .H2O Cu(OH)2 +2 NH4 + Cu(OH)2 + 4NH3 . H2O Cu(NH3) 42+ +2OH+4H2O藍(lán)色沉淀藍(lán)色沉淀深藍(lán)色溶液深藍(lán)色溶液紅褐色沉淀紅褐色沉淀:Fe3+3NH3H2O=Fe(OH)3+3NH4+藍(lán)色溶液藍(lán)色溶液:Cu2+ + 4NH3 . H2O Cu(NH3) 42+4H2O三、紙層析法分
7、離鐵離子和銅離子三、紙層析法分離鐵離子和銅離子1、實(shí)驗(yàn)原理、實(shí)驗(yàn)原理 含有含有Cu2和和Fe3的溶液涂在濾紙一端,丙酮的溶液涂在濾紙一端,丙酮作展開(kāi)劑(流動(dòng)相),在濾紙的毛細(xì)作用下,作展開(kāi)劑(流動(dòng)相),在濾紙的毛細(xì)作用下,展開(kāi)劑攜帶展開(kāi)劑攜帶Cu2和和Fe3沿濾紙纖維向上移動(dòng),沿濾紙纖維向上移動(dòng),由于兩種離子在兩相中溶解能力不同導(dǎo)致移動(dòng)由于兩種離子在兩相中溶解能力不同導(dǎo)致移動(dòng)速度不同。一段時(shí)間后,速度不同。一段時(shí)間后,Cu2和和Fe3距起點(diǎn)距起點(diǎn)的距離會(huì)不同,從而達(dá)到分離的目的。的距離會(huì)不同,從而達(dá)到分離的目的。(1)層析過(guò)程中的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象)層析過(guò)程中的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象(2)氨熏后的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象)氨熏后的實(shí)
8、驗(yàn)現(xiàn)象氯化鐵層,黃色氯化鐵層,黃色 氯化銅層,綠色氯化銅層,綠色 2、實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象、實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象上端出現(xiàn)紅棕色,上端出現(xiàn)紅棕色,下方出現(xiàn)藍(lán)色下方出現(xiàn)藍(lán)色(1)為)為防止水解防止水解,飽和,飽和FeCl3和和CuCl2可加少量可加少量HCl酸化酸化,不影響實(shí)驗(yàn)效果。,不影響實(shí)驗(yàn)效果。3、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)(4)濾紙吸水性很強(qiáng),點(diǎn)樣操作要求迅速。)濾紙吸水性很強(qiáng),點(diǎn)樣操作要求迅速。 等到濾紙完全干燥以后才能再次點(diǎn)樣。等到濾紙完全干燥以后才能再次點(diǎn)樣。(2)氨熏需在通風(fēng)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行。)氨熏需在通風(fēng)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行。(3)層析速度開(kāi)始較快,后逐漸減慢,大約)層析速度開(kāi)始較快,后逐漸減慢,大約10分鐘即可分
9、離完全。分鐘即可分離完全。拓展課題拓展課題12 菠菜的葉綠體中色素的提取和分離菠菜的葉綠體中色素的提取和分離 操作步驟:操作步驟:研磨、取液、點(diǎn)樣、層析研磨、取液、點(diǎn)樣、層析拓展課題拓展課題1 13 3 用粉筆進(jìn)行層析分離用粉筆進(jìn)行層析分離實(shí)驗(yàn)操作要點(diǎn)及主要實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象實(shí)驗(yàn)操作要點(diǎn)及主要實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象 實(shí)驗(yàn)操作要點(diǎn)實(shí)驗(yàn)操作要點(diǎn)(1 1)配制混合液)配制混合液(2 2)點(diǎn)樣)點(diǎn)樣(3 3)層析)層析問(wèn)題與解決問(wèn)題與解決下列關(guān)于紙層析法實(shí)驗(yàn)的說(shuō)法正確的是下列關(guān)于紙層析法實(shí)驗(yàn)的說(shuō)法正確的是( )A.濾紙作為固定相濾紙作為固定相,濾紙上吸附的水作為流動(dòng)相濾紙上吸附的水作為流動(dòng)相B.濾紙作為惰性支持物濾紙作為惰性
10、支持物,濾紙上吸附的水作為流動(dòng)相濾紙上吸附的水作為流動(dòng)相C.濾紙上吸附的水作為固定相濾紙上吸附的水作為固定相,不溶于水的有機(jī)溶劑不溶于水的有機(jī)溶劑作為流動(dòng)相作為流動(dòng)相D.濾紙上吸附的水作為流動(dòng)相濾紙上吸附的水作為流動(dòng)相,不溶于水的有機(jī)溶劑不溶于水的有機(jī)溶劑作為固定相作為固定相c c鞏固應(yīng)用鞏固應(yīng)用:2. 色譜分析法是現(xiàn)代分離實(shí)驗(yàn)技術(shù)中的一種,試回答下列問(wèn)題色譜分析法是現(xiàn)代分離實(shí)驗(yàn)技術(shù)中的一種,試回答下列問(wèn)題 (1)已知兩種液態(tài)有機(jī)色素已知兩種液態(tài)有機(jī)色素A 與與B混合在一起,經(jīng)測(cè)定混合在一起,經(jīng)測(cè)定A的親的親 脂性比脂性比B弱,則下列說(shuō)法正確的是(弱,則下列說(shuō)法正確的是( ) A用溶解過(guò)濾法分離,用溶解過(guò)濾法分離,A比比B難溶于水難溶于水 B. 用重結(jié)晶法分離,用重結(jié)晶法分離,A在水中的溶解度比在水中的溶解度比B大大 C. 用蒸餾法分離,因?yàn)橛谜麴s法分離,因?yàn)锽的熔沸點(diǎn)高的熔沸點(diǎn)高 D. 用紙層析法分離,丙酮為展開(kāi)劑,下端為用紙層析法分離,丙酮為展開(kāi)劑,下端為A,上端為,上端為B(2)紙層析法的原理是()紙層析法的原理是( ) A. 萃取原理萃取原理 B. 毛細(xì)現(xiàn)象毛細(xì)現(xiàn)象 C.
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