藥物分析學(xué)1知識(shí)點(diǎn)

1、藥物分析學(xué)I知識(shí)點(diǎn)名詞解釋?zhuān)?.發(fā)射光譜：物質(zhì)的分子、原子或離子接受外界能量，使其由基態(tài)或低能態(tài)躍遷到高能態(tài)（激發(fā)態(tài)），再由高能態(tài)躍遷回低能態(tài)或基態(tài)，而產(chǎn)生的光譜稱(chēng)為發(fā)射光譜。2.吸收光譜：由電磁輻射通過(guò)某些物質(zhì)時(shí)，物質(zhì)的原子或分子吸收與其能級(jí)躍遷相對(duì)應(yīng)的能量，由基態(tài)或低能態(tài)躍遷到較高的能態(tài)，這種基于物質(zhì)對(duì)輻射能的選擇性吸收而得到的原子或分子光譜為吸收光譜。3.原子光譜：原子核外電子在不同能級(jí)間躍遷而產(chǎn)生的光譜稱(chēng)為原子光譜。4.分子光譜：在輻射能作用下，因分子內(nèi)能級(jí)間的躍遷而產(chǎn)生的光譜稱(chēng)為分子光譜。5.朗伯比爾定律：是均勻、非散射介質(zhì)對(duì)光吸收的基本定律，是分光光度法進(jìn)行定量分析的基礎(chǔ)。 6.摩

2、爾吸光系數(shù)：表示物質(zhì)的濃度為1mol/L、液層厚度為1cm時(shí)溶液的吸光度。7.原子吸收分光光度法：基于氣態(tài)的基態(tài)原子在某特定波長(zhǎng)光的輻射下、原子外層電子對(duì)光的特征吸收這一現(xiàn)象建立起來(lái)的一種光譜分析方法。9.熒光：物質(zhì)的基態(tài)分子受一激發(fā)光源的照射，被激發(fā)至激發(fā)態(tài)后，在返回基態(tài)時(shí)發(fā)射出波長(zhǎng)與入射光相同或較長(zhǎng)的光，稱(chēng)為熒光。11.離子選擇性電極：也稱(chēng)膜電極，能選擇性地響應(yīng)待測(cè)離子的濃度（活度）而對(duì)其他離子不響應(yīng)，或響應(yīng)很弱，其電極電位與溶液中待測(cè)離子活度的對(duì)數(shù)有線性關(guān)系，即遵循能斯特方程式。共振線：在吸收躍遷中，從基態(tài)到任一允許的激發(fā)態(tài)的躍遷都能產(chǎn)生吸收光譜，其中從基態(tài)到第一激發(fā)態(tài)的躍遷最容易發(fā)生，

3、這時(shí)產(chǎn)生的吸收線稱(chēng)為第一共振吸收線。簡(jiǎn)稱(chēng)共振線。猝滅：激發(fā)分子與溶劑分子或其他溶質(zhì)分子間互相作用，發(fā)生能量轉(zhuǎn)移，使熒光或磷光強(qiáng)度減弱甚至消失。振動(dòng)弛豫：在溶液中，受激的溶質(zhì)分子與溶劑分子碰撞而失去過(guò)剩的能量，以10-13到10-11 s的極快速度降至同一電子態(tài)的最低振動(dòng)能級(jí)上,這一過(guò)程為無(wú)輻射躍遷。14.分配系數(shù)：在一定溫度和壓力下，組分在固定相和流動(dòng)相之間分配達(dá)到平衡時(shí)的濃度比值，稱(chēng)為分配系數(shù)。15.容量因子：在一定溫度和壓力下，組分在固定相和流動(dòng)相之間分配達(dá)平衡時(shí)的質(zhì)量比稱(chēng)為容量因子，也稱(chēng)分配比。16.分離度：相鄰兩色譜峰保留值之差與兩組分色譜峰峰寬平均值之比值。17.速率理論：?jiǎn)蝹€(gè)組分粒

4、子在色譜柱內(nèi)固定相和流動(dòng)相間要發(fā)生千萬(wàn)次轉(zhuǎn)移，加上分子擴(kuò)散和運(yùn)動(dòng)途徑等因素，它在柱內(nèi)的運(yùn)動(dòng)是高度不規(guī)則的，是隨機(jī)的，在柱中隨流動(dòng)相前進(jìn)的速率是不均一的。18.正相色譜法：流動(dòng)相極性低而固定相極性高，對(duì)極性強(qiáng)的組分有較大的保留值，常用于分離強(qiáng)極性化合物。19.反相色譜法：是在強(qiáng)極性的流動(dòng)相中加入與被測(cè)離子電荷相反的平衡離子，從而實(shí)現(xiàn)色譜分離的。 20.薄層色譜法：以薄層吸附為固定相，溶劑為流動(dòng)相的分離、分析技術(shù)。21.比移植：是原點(diǎn)至斑點(diǎn)中心的距離與原點(diǎn)至溶劑前沿的距離的比值。26峰高：色譜峰頂點(diǎn)到峰底之間的垂直距離27保留值：表示試樣中各組分在色譜柱中停留的時(shí)間或?qū)⒔M分帶出色譜柱所需流動(dòng)相體積

5、的數(shù)值。原子吸收分光光度法特點(diǎn)：靈敏度高選擇性好精密度高應(yīng)用范圍廣 光源：空心陰極燈（目前應(yīng)用最廣的銳線光源，有一個(gè)被測(cè)元素材料制成的空腔形陰極和一個(gè)鎢制陽(yáng)極）要求發(fā)射輻射的波長(zhǎng)半寬度要明顯小于吸收線的半寬度，輻射強(qiáng)度足夠大，穩(wěn)定性好，使用壽命長(zhǎng)環(huán)境對(duì)熒光的影響溫度的影響、溶劑的影響、溶液PH的影響、猝滅劑的影響（外因）具有共軛雙鍵體系的分子、具有剛性平面結(jié)構(gòu)的分子、苯環(huán)上取代基的類(lèi)型（內(nèi)因）色譜分離過(guò)程是利用試樣中各被分離組分在固定相和流動(dòng)相之間具有不同的溶液和解析能力，或不同的吸附和脫附能力，或其他親和性質(zhì)的差異來(lái)實(shí)現(xiàn)的。按分離原理分類(lèi)型吸附色譜法、分配色譜法、離子交換色譜法、尺寸排阻色譜

6、法、親和色譜法;R=1.5為相鄰兩峰完全分離的標(biāo)志。氣相色譜法：進(jìn)樣系統(tǒng)包括進(jìn)樣器和氣化室。檢測(cè)器分為濃度敏感型和質(zhì)量敏感型兩類(lèi)。熱導(dǎo)檢測(cè)器（濃度型、廣普型）用熱敏元件來(lái)檢測(cè)?；鹧骐x子化檢測(cè)器（質(zhì)量型，專(zhuān)屬）電場(chǎng)作用形成離子流。電子捕獲檢測(cè)器（濃度型、專(zhuān)屬）具有高選擇性高靈敏度只對(duì)含有電負(fù)性元素有響應(yīng)?；鹧婀舛葯z測(cè)器（質(zhì)量型、專(zhuān)屬）對(duì)含有磷、硫的具有高選擇性高靈敏度。問(wèn)答題;1.偏離朗伯比爾定律的因素有哪些？答：偏離朗伯比爾定律的因素有非單色光 最重要的一個(gè)因素；其只適用于稀溶液；光的散射也會(huì)造成比爾定律的偏離；光的折射、溶液中物質(zhì)產(chǎn)生的熒光、非平行光等都可以造成對(duì)比爾定律的偏離。 3.畫(huà)出紫

7、外可見(jiàn)分光光度計(jì)結(jié)構(gòu)方框圖，并注明各部分用途。答：光源：是提供入射光的裝置；單色器：是一種把來(lái)自光源的復(fù)合光分解為單色光，并分離出所需要波段光束的裝置，是分光光度計(jì)的關(guān)鍵部件，其主要組成為入射狹縫、出射狹縫、色散元件和準(zhǔn)直鏡等部分。吸收池：又稱(chēng)為比色皿或比色杯；檢測(cè)器：檢測(cè)光信號(hào)，并將光信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)；信號(hào)顯示系統(tǒng)：一方面可對(duì)分光光度計(jì)進(jìn)行操作控制，另一方面可進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。7.分子處于受激態(tài)后，在去活化過(guò)程中有哪些方式？答：分子處于受激態(tài)后，在去活化過(guò)程中有輻射躍遷和無(wú)輻射躍遷兩種方式。輻射活躍主要指發(fā)射熒光或磷光失去多余能量。無(wú)輻射躍遷指分子以熱的形式失去多余能量，包括振動(dòng)弛豫，內(nèi)轉(zhuǎn)換，系

8、間跨越和猝滅等8.哪些分子結(jié)構(gòu)的物質(zhì)能發(fā)生熒光？影響熒光強(qiáng)弱的因素有哪些？答：具有共軛雙鍵體系的分子、含有脂肪族和脂環(huán)族羰基結(jié)構(gòu)或高共軛雙鍵結(jié)構(gòu)的化合物；具有剛性平面結(jié)構(gòu)的分子、苯環(huán)上取代基的類(lèi)型。影響熒光強(qiáng)弱的因素有溫度、溶劑、溶液PH、猝滅劑等。9.直接電位法用氟電極測(cè)定F-過(guò)程中，為什么一般控制溶液PH值在56范圍內(nèi)？為什么要加入離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)劑？答：氟電極選擇性較高，不受PO43-、CH3COO-、X-、NO3-、SO42-和HCO3-等離子的干擾。但pH較高時(shí)，OH-有干擾，使測(cè)定結(jié)果偏高；當(dāng)pH較低時(shí)，由于形成HF2-而降低了F-活度，使分析結(jié)果偏低，因此測(cè)定時(shí)需控制試液的pH介于5

9、-6之間。10.氣相色譜法有哪些類(lèi)型？其分離原理是什么？答：1.固體固定相：利用吸附劑對(duì)混合物中不同組分吸附性能差異分離。2.液體固定相：利用各組分在液相中分配系數(shù)不同分離；3.液晶固定相：對(duì)不同分子形狀有特殊選擇性而分離。11.保留值有幾種表示方法？答：保留時(shí)間、保留體積、死時(shí)間、死體積、調(diào)整保留時(shí)間、調(diào)整保留體積、相對(duì)保留值、保留指數(shù)等。12.氣相色譜儀的基本結(jié)構(gòu)包括哪幾個(gè)部分？各有什么作用。答：氣相色譜儀的基本結(jié)構(gòu)包括氣路系統(tǒng)（）、進(jìn)樣系統(tǒng)（）、分離系統(tǒng)（）、溫控及檢測(cè)系統(tǒng)（）和記錄系統(tǒng)（）五部分所組成。氣路系統(tǒng)是一個(gè)載氣連續(xù)運(yùn)行的密閉的管路系統(tǒng)；進(jìn)樣系統(tǒng)包括進(jìn)樣器和氣化室兩部分；進(jìn)樣器

10、根據(jù)試樣的狀態(tài)不同，采用不同的進(jìn)樣器。氣化器是將液體或固體試樣瞬間企劃為蒸氣；分離系統(tǒng)由色譜柱組成是色譜儀的核心部分；檢測(cè)系統(tǒng)主要為檢測(cè)器，是色譜儀的關(guān)鍵部件；溫度控制系統(tǒng)：溫度是氣相色譜法最重要的條件，它直接影響色譜柱的選擇性和分離效應(yīng)，并影響檢測(cè)器的靈敏度和穩(wěn)定性等。13.氣相色譜儀常用的檢測(cè)器有哪幾種？各有什么特點(diǎn)？答:常用的檢測(cè)器有四種熱導(dǎo)檢測(cè)器；火焰離子化檢測(cè)器；電子捕獲檢測(cè)器；火焰光度檢測(cè)器。特點(diǎn)：熱導(dǎo)檢測(cè)器特點(diǎn)是結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，穩(wěn)定性好，線性范圍寬，操作簡(jiǎn)便，應(yīng)用范圍廣；對(duì)無(wú)機(jī)物、有機(jī)物都能進(jìn)行檢測(cè)，而且分離出組分不被破壞?；鹧骐x子化檢測(cè)器特點(diǎn)是檢測(cè)器的死體積小，響應(yīng)時(shí)間快、線性范圍寬

11、，對(duì)碳?xì)浠衔镬`敏度高，比熱導(dǎo)檢測(cè)器的靈敏度高102-104倍，特別適于和毛細(xì)管柱匹配。電子捕獲檢測(cè)特點(diǎn)是具有高選擇性和高靈敏度。火焰光度檢測(cè)器特點(diǎn)是對(duì)磷、硫的有機(jī)化合物具有高選擇性和高靈敏度。14.固定液可分為幾類(lèi)？如何選擇固定液？答：通常按固定液的極性和化學(xué)結(jié)構(gòu)來(lái)分類(lèi)。按固定液的極性分類(lèi)：通常用相對(duì)極性表示，把相對(duì)極性0-100分為5級(jí)，每20個(gè)相對(duì)單位為一級(jí)；按固定液化學(xué)結(jié)構(gòu)分類(lèi)：根據(jù)官能團(tuán)的類(lèi)型不同可分為烴類(lèi)、醇和聚醇類(lèi)、硅酮類(lèi)、酯類(lèi)、腈和腈醚類(lèi)、酰胺和聚酰胺類(lèi)、有機(jī)皂土類(lèi)等。選擇固定液：一般根據(jù)“相似性”的原則選擇固定液，即按欲分離組分的極性和化學(xué)結(jié)構(gòu)與固定液相似的原則來(lái)選擇固定液，

12、一般規(guī)律如下：1.分離非極性物質(zhì)，一般選用非極性固定液；2.分離中等極性物質(zhì)，應(yīng)選用中等極性固定液；3.分離強(qiáng)極性物質(zhì)，應(yīng)選用強(qiáng)極性固定液；4.分離非極性和極性混合組分時(shí)，一般選用極性固定液；5.能形成氫鍵的試樣，如醇、酚、胺和水的分離，應(yīng)選用氫鍵型固定液；6.對(duì)于高沸點(diǎn)試樣（尤其是極性強(qiáng)的高沸點(diǎn)組分），由于沸點(diǎn)高，流出困難，宜選用極性較低的固定液；7.對(duì)于含有異構(gòu)體的試樣，主要是含有芳香性異構(gòu)組分，可選用特殊保留作用的有機(jī)皂土和液晶做固定液。第五章 分光光度法第一節(jié) 可見(jiàn)紫外分光光度法一、基本原理波長(zhǎng)200400nm范圍稱(chēng)為紫外光區(qū)，400760nm稱(chēng)為可見(jiàn)光區(qū)。物質(zhì)吸收紫外和可見(jiàn)光區(qū)電磁波

13、而產(chǎn)生的吸收光譜稱(chēng)為紫外可見(jiàn)吸收光譜。1.光源：紫外光區(qū)通常采用氫燈或氘燈，可見(jiàn)光區(qū)采用鎢燈。2.吸收池：玻璃池適用于370nm以上的可見(jiàn)光區(qū)，石英池適用于紫外、可見(jiàn)光區(qū)，通常僅在紫外光區(qū)使用。三、紫外吸收光譜與物質(zhì)結(jié)構(gòu)的關(guān)系：紫外可見(jiàn)吸收光譜屬分子吸收光譜，是由分子的外層價(jià)電子躍遷產(chǎn)生的，也稱(chēng)電子光譜。 當(dāng)分子吸收紫外可見(jiàn)區(qū)的輻射后，產(chǎn)生價(jià)電子躍遷。這種躍遷有三種形式： （1）形成單鍵的電子躍遷。（2）形成雙鍵的電子躍遷。 （3）未成鍵的n電子躍遷。通常，未成鍵的孤對(duì)電子較易激發(fā)，成鍵電子中電子較相應(yīng)的電子具有較高的能量，反鍵電子則相反。故簡(jiǎn)單分子中n* 躍遷需能量最小，吸收帶出現(xiàn)在長(zhǎng)波方向

14、；n*及n* 躍遷的吸收帶出現(xiàn)在較短波段；*躍遷吸收帶則出現(xiàn)在遠(yuǎn)紫外區(qū)。物質(zhì)分子吸收紫外光后，電子躍遷的類(lèi)型為：A. n* B. n* C. * D. * E .* 答案ABCD 四、吸收度的測(cè)定方法 1.對(duì)溶劑的要求：能充分溶解樣品，與樣品無(wú)相互作用，揮發(fā)性小，在測(cè)定波長(zhǎng)處的吸收要符合要求。 2.空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)：將配制溶液用溶劑（空白溶液）裝入?yún)⒈瘸乩铮{(diào)節(jié)儀器，使吸收度為0，去除溶劑和容器吸收、光散射、反射的影響。 3.測(cè)定波長(zhǎng)確證：為提高測(cè)定方法靈敏度，減少測(cè)定誤差，吸收度一般在max處測(cè)定。 4.供試品溶液濃度：使吸收度在0.20.7范圍內(nèi)。 5.儀器的狹縫寬度：以減少狹縫寬度時(shí)，供試品

15、溶液吸收度不再增加為準(zhǔn)。五、應(yīng)用1.鑒別：(1)對(duì)比吸收光譜特征參數(shù)：核對(duì)供試品溶液max、 A是否符合規(guī)定。可同時(shí)用幾個(gè)峰位作為鑒別依據(jù) (2)比較吸收度比值的一致性：吸收峰較多時(shí)，規(guī)定幾個(gè)波長(zhǎng)處吸收度比值作為鑒定標(biāo)準(zhǔn) (3)對(duì)比吸收光譜一致性2.雜質(zhì)檢查 藥物在紫外-可見(jiàn)光區(qū)有明顯吸收，而雜質(zhì)吸收弱；或雜質(zhì)有明顯吸收而藥物無(wú)吸收，可通過(guò)控制吸收度限度來(lái)控制雜質(zhì)量。3.含量測(cè)定 (1)對(duì)照品比較法：供試品溶液和對(duì)照品溶液濃度及測(cè)定條件應(yīng)盡可能一致 (2)吸收系數(shù)法：需對(duì)儀器進(jìn)行嚴(yán)格校正和檢定 (3)計(jì)算分光光度法：通過(guò)數(shù)學(xué)處理消除樣品中干擾組分的干擾第二節(jié) 熒光分析法一、基本原理 熒光的產(chǎn)生

16、：此化學(xué)物質(zhì)能從外界吸收并儲(chǔ)存能量（如光能、化學(xué)能等）而進(jìn)入激發(fā)態(tài)，當(dāng)其從激發(fā)態(tài)再回復(fù)到基態(tài)時(shí)，過(guò)剩的能量可以電磁輻射的形式放射（即發(fā)光）。 熒光發(fā)射的特點(diǎn)是：可產(chǎn)生熒光的分子或原子在接受能量后即刻引起發(fā)光；而一旦停止供能，發(fā)光（熒光）現(xiàn)象也隨之在瞬間內(nèi)消失。 發(fā)射熒光的光量子數(shù)亦即熒光強(qiáng)度，除受激發(fā)光強(qiáng)度影響外，也與激發(fā)光的波長(zhǎng)有關(guān)。各個(gè)熒光分子有其特定的吸收光譜和發(fā)射光譜（熒光光譜），即在某一特定波長(zhǎng)處有最大吸收峰和最大發(fā)射峰。選擇激發(fā)光波長(zhǎng)量接近于熒光分子的最大吸收峰波長(zhǎng)，且測(cè)定光波量接近于最大發(fā)射光波峰時(shí)，得到的熒光強(qiáng)度也最大。 物質(zhì)的激發(fā)光譜和熒光發(fā)射光譜，可以用作該物質(zhì)的定性分析。

17、當(dāng)激發(fā)光強(qiáng)度、波長(zhǎng)、所用溶劑及溫度等條件固定時(shí)，物質(zhì)在一定濃度范圍內(nèi)，其發(fā)射光強(qiáng)度與溶液中該物質(zhì)的濃度成正比關(guān)系，可以用作定量分析。熒光分析法的靈敏度一般較紫外分光光度法或比色法為高，濃度太大的溶液會(huì)有“自熄滅”作用，故熒光分析法應(yīng)在低濃度溶液中進(jìn)行。二、熒光分光光度計(jì)激發(fā)光源激發(fā)光單色器樣品池 發(fā)射光單色器檢測(cè)器數(shù)據(jù)記錄處理 樣品池用低熒光材料制成，四面透光，發(fā)射光方向與激發(fā)光成直角。三、應(yīng)用：熒光分析可用于鑒別和含量測(cè)定。一般采用對(duì)照品比較法測(cè)定含量，靈敏度高、選擇性好，但干擾多、線性范圍窄，多用于需要高靈敏度和允許較大變異性的樣品分析。第六章 色譜法 色譜法是一種物理或物理化學(xué)分離分析方

18、法。先將混合物中各組分分離而后逐個(gè)分析，是分析混合物最有力的手段。具有高靈敏度、高選擇性、高效能、分析速度快、應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點(diǎn)。 色譜過(guò)程是物質(zhì)分子在相對(duì)運(yùn)動(dòng)的兩相(固定相和流動(dòng)相)間分配平衡的過(guò)程，可用分配系數(shù)K和容量因子k描述。1.分配系數(shù)K=Cs/Cm，與組分、固定相和流動(dòng)相性質(zhì)和溫度有關(guān)。2.容量因子kWs/Wm，不僅與組分、固定相和流動(dòng)相性質(zhì)和溫度有關(guān)，還與兩相體積有關(guān)。容量因子不等是色譜分離的先決條件。3.色譜過(guò)程方程：保留時(shí)間與分配系數(shù)關(guān)系tR=t0(1+k)第一節(jié) 薄層色譜法 掌握薄層色譜法的基本原理、操作方法以及在藥物鑒別、檢查中的應(yīng)用。一、基本原理1.吸附薄層色譜：吸附劑對(duì)

19、不同組分A和B具有不同吸附能力，展開(kāi)劑也對(duì)A和B有不同溶解、解吸能力，當(dāng)展開(kāi)劑不斷展開(kāi)， A、B在吸附劑和展開(kāi)劑之間連續(xù)不斷吸附解吸，產(chǎn)生差速遷移得到分離。2.比移值：Rfl/l0，為組分遷移距離與展開(kāi)劑遷移距離之比比移值的最佳范圍是0.30.5，可用范圍是0.20.8。影響比移值因素：被分離物質(zhì)的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)。極性較強(qiáng)的組分Rf較小。薄層板性質(zhì)。吸附劑活性越強(qiáng)，吸附作用就越強(qiáng)，Rf越小。展開(kāi)劑性質(zhì)。極性越強(qiáng)展開(kāi)劑Rf值增大展開(kāi)劑蒸氣飽和度對(duì)Rf也有較大影響。3.分離度：R=2d/(W1+W2)，兩相鄰斑點(diǎn)中心距離與兩斑點(diǎn)平均寬度的比值二、操作方法1.吸附劑和展開(kāi)劑的選擇 (1)吸附劑：常用有硅

20、膠、氧化鋁、聚酰胺、硅藻土等。硅膠、氧化鋁的活性與含水量有關(guān)，含水量高，活性低，吸附力弱；聚酰胺表面的酰胺基可形成氫鍵，選擇性高。 (2)展開(kāi)劑：極性較強(qiáng)的展開(kāi)劑適用于極性較強(qiáng)組分的洗脫；極性較弱的展開(kāi)劑適用于極性較弱組分的洗脫。加入少量酸、堿可以使極性物質(zhì)斑點(diǎn)集中，減少拖尾，提高分離度。選擇一般原則是，分離極性較強(qiáng)組分時(shí)選用活性低的薄層板，以極性強(qiáng)的展開(kāi)劑展開(kāi)。分離弱極性組分時(shí)，宜選用活性高的薄層板，以極性弱的展開(kāi)劑展開(kāi)。調(diào)整待測(cè)組分Rf 0.30.5范圍內(nèi)。2.薄層板制備：1份固定相與3份水混和涂布，110烘30分鐘。3.點(diǎn)樣與展開(kāi)：點(diǎn)樣一般為直徑24mm圓點(diǎn)，距底2.0cm；展開(kāi)距離一般

21、為1015cm。4.斑點(diǎn)定位：有色可直接觀察；有熒光在紫外燈下觀察；噴灑顯色劑使組分顯色。三、應(yīng)用 1.鑒別：比較供試品與對(duì)照品溶液的比移值 2.雜質(zhì)檢查：雜質(zhì)對(duì)照品比較法；高低濃度對(duì)比法第二節(jié) 氣相色譜法和高效液相色譜法一、氣相色譜法： 以氣體為流動(dòng)相的色譜法，具有分離效能高、靈敏度高、樣品用量少、分析速度快等優(yōu)點(diǎn)，不適用于難揮發(fā)和熱穩(wěn)定性差的物質(zhì)分析。(一)基本原理 1.基本概念 色譜峰參數(shù)：峰高或峰面積(用于定量)，峰位(保留值表示，用于定性)，峰寬(用于衡量柱效) 保留值：保留時(shí)間、死時(shí)間、調(diào)整保留時(shí)間 峰寬：標(biāo)準(zhǔn)差、半峰寬、峰寬 2.塔板理論：把組分在兩相間的連續(xù)轉(zhuǎn)移過(guò)程，分解為間歇

22、的在單個(gè)塔板中的分配平衡過(guò)程 理論塔板數(shù) n=5.54(tR/Wh/2)2色譜柱的理論塔板數(shù)越多，柱效越高；同樣長(zhǎng)度中塔板高度越小，柱效越高。3.速率理論：主要說(shuō)明使色譜峰擴(kuò)張而降低柱效的因素范氏方程 H=A+B/+C A為渦流擴(kuò)散項(xiàng)。采用適當(dāng)粒度、均勻的填料并填充均勻可減小渦流擴(kuò)散，開(kāi)管毛細(xì)管柱A0 B為縱向擴(kuò)散系數(shù)。為減小縱向擴(kuò)散可采用較高的載氣流速；或選擇分子量大的重載氣；也可降低柱溫。 C為傳質(zhì)阻抗系數(shù)。在能完全覆蓋載體表面的前提下，應(yīng)適當(dāng)減少固定液用量。范氏方程說(shuō)明填充均勻程度、載體粒度、載氣種類(lèi)、載氣流速、柱溫、固定液層厚度對(duì)柱效的影響。(二)氣相色譜儀 1.氣源：FID常用載氣多

23、為氮?dú)饣蚝?；TCD多用氦氣或氫氣為載氣；ECD多用氮?dú)饣驓鍤?2.進(jìn)樣及汽化系統(tǒng) 3.色譜柱和柱溫箱 4檢測(cè)器 熱導(dǎo)檢測(cè)器TCD：濃度型檢測(cè)器。構(gòu)造簡(jiǎn)單、測(cè)定范圍廣、樣品不破壞，但靈敏度較低。 電子捕獲檢測(cè)器ECD：靈敏度高、選擇性好。對(duì)無(wú)電負(fù)性基團(tuán)的化合物響應(yīng)低。 氫離子火焰檢測(cè)器FID：質(zhì)量型檢測(cè)器。靈敏度高、響應(yīng)快、線性范圍寬，最常用。(三) 應(yīng)用 1.鑒別：利用保留值進(jìn)行鑒別。 2.檢查 (1) 內(nèi)標(biāo)法加校正因子測(cè)定供試品中某個(gè)雜質(zhì)含量 (2) 外標(biāo)法測(cè)定供試品中某個(gè)雜質(zhì)或主成分含量 (3) 加校正因子的主成分自身對(duì)照法 (4) 不加校正因子的主成分自身對(duì)照法 (5) 面積歸一化法：一般不用于微量雜質(zhì)檢查3.含量測(cè)定：外標(biāo)法，內(nèi)標(biāo)法內(nèi)標(biāo)物要求：原樣品中不含有的組分；保留時(shí)間與待測(cè)組分相近，但能完全分離；純度合乎要求。二、高效液相色譜法(一)速率理論：高效液相色譜法中影響柱效主要因素為渦流擴(kuò)散項(xiàng)和傳質(zhì)阻抗項(xiàng)。由于液體黏度比載氣大得多，而且柱溫多為室溫，其縱向擴(kuò)散項(xiàng)很小，可忽略不計(jì)。范氏方程簡(jiǎn)化為 H=A +C(二) 高效液相色譜儀： 1.高壓輸液泵 2.色譜柱：分析型和制備型 3.進(jìn)樣閥 4.檢測(cè)器：固定波長(zhǎng)檢測(cè)器；可變波長(zhǎng)檢測(cè)器；光二極管陣列檢測(cè)器(三)應(yīng)用：與氣相色譜法相似三、色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)方法1