E花環(huán)實(shí)驗(yàn)報(bào)告

1、精品文檔E花環(huán)實(shí)驗(yàn)一.實(shí)驗(yàn)原理人外周血 T 淋巴細(xì)胞表面具有綿羊紅細(xì)胞（SRBC）受體，能夠與 SRBC 結(jié)合形成 花環(huán)樣細(xì)胞團(tuán)（即 E 花環(huán)）。已證實(shí) E 受體是人類 T 細(xì)胞所特有的表面標(biāo)志。當(dāng) T 細(xì)胞與 SRBC 混合后， SRBC 便粘附于 T 細(xì)胞表面，呈現(xiàn)花環(huán)狀。通過花環(huán)形 成檢查 T細(xì)胞的方法， 稱為 E 花環(huán)形成試驗(yàn)。 根據(jù) 花環(huán)形成的多少， 可測知 T 細(xì)胞的數(shù)目，從而間接了解機(jī)體細(xì)胞免疫功能狀態(tài)， 判斷疾病的預(yù)后， 考核藥物 療效等。由于 T細(xì)胞的異質(zhì)性，其對 SRBC 的親和力亦不同，因而 T 細(xì)胞可形 成不同類型的 E 花環(huán)，其中在 4C放置 1 h 以上，所形成的花

2、環(huán)數(shù)代表 T 細(xì)胞總 數(shù)，稱為總花環(huán)（Et 花環(huán)），而淋巴細(xì)胞與 SRBC 混合后不經(jīng) 4 C 作用立即反應(yīng)形 成的花環(huán)稱為活性花環(huán)（Ea 花環(huán)）。二.實(shí)驗(yàn)結(jié)果（用圖示法表示）精品文檔三討論有的細(xì)胞能形成玫瑰花環(huán)的原因：人 T 細(xì)胞膜上具有 CD2 分子，能 夠與SRBC 上的 LFA-3 結(jié)合，從而形成以人 T 細(xì)胞為中心，SRBC 環(huán)繞四周， 形狀如玫瑰花環(huán)的細(xì)胞集團(tuán)，即 E 玫瑰花環(huán)。此外，NK 細(xì)胞膜上也有 CD2 分 子，也能形成玫瑰花環(huán)，但是 NK 細(xì)胞的量非常少，形成玫瑰花環(huán)的數(shù)量也少。有的細(xì)胞不能形成玫瑰花環(huán)的原因：a.人血液中含有單核巨噬細(xì)胞，其表面 沒有CD2 分子，不能與

3、 SRBC 表面的 LFA-3 結(jié)合，因此不能形成玫瑰花環(huán)。b. 實(shí)驗(yàn)中所用血液不夠新鮮，也可能導(dǎo)致不能夠形成玫瑰花環(huán)。c.時(shí)間不夠長，精品文檔導(dǎo)致 T 細(xì)胞表面的 CD2 分子不能夠與 SRBC 上的 LFA-3 充分結(jié)合，因此只有一 部分SRBC 與人 T 細(xì)胞結(jié)合，其余 SRBC 沒能夠與人 T 細(xì)胞結(jié)合形成玫瑰花環(huán)2.SRBC 與淋巴細(xì)胞混合后離心速度不能過高， 在 Et 花環(huán)試驗(yàn)中，置 4C應(yīng)至少1h 以上或過夜。3. 綿羊紅細(xì)胞以保存 1 周內(nèi)最好，超過 2 周則與淋巴細(xì)胞結(jié)合力下降，超過 56 周則不能再用。實(shí)驗(yàn)室的綿羊紅細(xì)胞保存的時(shí)間太長，導(dǎo)致其與淋巴細(xì)胞的結(jié) 合能力下降，所以有的細(xì)胞可以形成 E 花環(huán)，而有的細(xì)胞不可以形成 E 花環(huán)。4. Et 花環(huán)試驗(yàn) SRBC 與淋巴細(xì)胞混合比例以 100 : 1200 : 1 為宜，Ea 花環(huán)試 驗(yàn)中以 10 : 120 : 1 為宜；淋巴細(xì)胞離體后不能超過 6h，否則會(huì)影響花環(huán)形 成率。5溫度對實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響較大，故實(shí)驗(yàn)溫度條件應(yīng)保持一致，從4C取出后