解鉀細(xì)菌的分離、鑒定及解鉀能力的研究——張曉寧

1、論文框架論文框架研究背景與意義研究背景與意義研究方法與內(nèi)容研究方法與內(nèi)容實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析結(jié)論結(jié)論1234研究背景與意義研究背景與意義v我國鉀肥匱乏，約有我國鉀肥匱乏，約有60%60%的耕地缺鉀的耕地缺鉀v國內(nèi)鉀肥的產(chǎn)量遠(yuǎn)不能滿足實(shí)際農(nóng)業(yè)生產(chǎn)需要國內(nèi)鉀肥的產(chǎn)量遠(yuǎn)不能滿足實(shí)際農(nóng)業(yè)生產(chǎn)需要，主要依靠進(jìn)口主要依靠進(jìn)口達(dá)達(dá)200200萬噸之多萬噸之多v鉀鉀肥使用量大，有效利用率低，對環(huán)境造成很肥使用量大，有效利用率低，對環(huán)境造成很大的壓力大的壓力v土壤中含有大量的鉀元素，但大部分的鉀都以土壤中含有大量的鉀元素，但大部分的鉀都以不溶性鉀這一形式存在，無法被植物直接吸收利不溶性鉀這一形式存在，無

2、法被植物直接吸收利用用v解鉀菌能夠解鉀菌能夠破壞鉀礦石的晶格結(jié)構(gòu)，釋放出其破壞鉀礦石的晶格結(jié)構(gòu)，釋放出其中的速效鉀中的速效鉀為植物所吸收利用為植物所吸收利用課題方法與內(nèi)容課題方法與內(nèi)容 v 從土壤中篩選高效解鉀菌，分離純化，并利從土壤中篩選高效解鉀菌，分離純化，并利用用16S rDNA16S rDNA序列分析對該菌株的分類信息進(jìn)行序列分析對該菌株的分類信息進(jìn)行了鑒定。了鑒定。v 通過實(shí)驗(yàn)確定該菌的最適發(fā)酵培養(yǎng)條件：最通過實(shí)驗(yàn)確定該菌的最適發(fā)酵培養(yǎng)條件：最適接種量，最適搖床轉(zhuǎn)速，最適培養(yǎng)溫度，最適接種量，最適搖床轉(zhuǎn)速，最適培養(yǎng)溫度，最適初始適初始pHpH，最適碳源，最適氮源，最適碳源，最適氮源

3、，為解鉀菌，為解鉀菌的大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)提供數(shù)據(jù)支持。的大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)提供數(shù)據(jù)支持。實(shí)驗(yàn)流程實(shí)驗(yàn)流程樣品采集樣品采集解鉀菌富集解鉀菌富集解鉀菌株初篩解鉀菌株初篩解鉀菌株復(fù)篩解鉀菌株復(fù)篩菌株的形態(tài)學(xué)觀察菌株的形態(tài)學(xué)觀察16SrDNA16SrDNA序列分析對比序列分析對比菌株解鉀能力的測定菌株解鉀能力的測定最適發(fā)酵條件探索最適發(fā)酵條件探索菌株篩選結(jié)果菌株篩選結(jié)果 所篩選出的菌株單菌落呈白色，圓形，透明所篩選出的菌株單菌落呈白色，圓形，透明狀，形態(tài)似水滴，表面濕潤且粘稠，菌落直徑狀，形態(tài)似水滴，表面濕潤且粘稠，菌落直徑約為約為0.5cm。 所得菌形態(tài)所得菌形態(tài) 菌株解鉀能力測定菌株解鉀能力測定初篩菌

4、株菌落平板計數(shù)結(jié)果及解鉀能力測定結(jié)果初篩菌株菌落平板計數(shù)結(jié)果及解鉀能力測定結(jié)果 根據(jù)以上數(shù)據(jù)選擇根據(jù)以上數(shù)據(jù)選擇A-5A-5為最優(yōu)解鉀菌種進(jìn)行保存?zhèn)錇樽顑?yōu)解鉀菌種進(jìn)行保存?zhèn)溆谩＝?jīng)計算，用。經(jīng)計算，A-5A-5組中的速效鉀相對增加量為組中的速效鉀相對增加量為37.5%37.5%，最適解鉀條件探索最適解鉀條件探索v最適接種濃度實(shí)驗(yàn)結(jié)果最適接種濃度實(shí)驗(yàn)結(jié)果 最適接種量實(shí)驗(yàn)結(jié)果最適接種量實(shí)驗(yàn)結(jié)果 實(shí)驗(yàn)最終確定最適接種濃度為實(shí)驗(yàn)最終確定最適接種濃度為2%v最適搖床轉(zhuǎn)速實(shí)驗(yàn)結(jié)果最適搖床轉(zhuǎn)速實(shí)驗(yàn)結(jié)果 最適搖床轉(zhuǎn)速實(shí)驗(yàn)結(jié)果最適搖床轉(zhuǎn)速實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)最終確定最適搖床轉(zhuǎn)速為實(shí)驗(yàn)最終確定最適搖床轉(zhuǎn)速為200r/min

5、v最適最適pH實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果 最適最適最適最適pHpH實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果 實(shí)驗(yàn)最終確定最適實(shí)驗(yàn)最終確定最適pHpH為為8 8v最適培養(yǎng)溫度實(shí)驗(yàn)結(jié)果最適培養(yǎng)溫度實(shí)驗(yàn)結(jié)果 最適培養(yǎng)溫度實(shí)驗(yàn)結(jié)果最適培養(yǎng)溫度實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)最終確定最適培養(yǎng)溫度為實(shí)驗(yàn)最終確定最適培養(yǎng)溫度為2828v最佳碳源實(shí)驗(yàn)結(jié)果最佳碳源實(shí)驗(yàn)結(jié)果 最佳碳源實(shí)驗(yàn)結(jié)果最佳碳源實(shí)驗(yàn)結(jié)果碳源蔗糖玉米土豆糖蜜葡萄糖速效鉀含量/(g/mL)0.60.23.440.70.4Ck速效鉀含量/(g/mL)0.50.72.228.91.2解鉀量/(g/mL)0.1-0.51.211.8-0.8 實(shí)驗(yàn)最終確定的最佳碳源是糖蜜實(shí)驗(yàn)最終確定的最佳碳源是糖蜜v最佳氮

6、源實(shí)驗(yàn)結(jié)果最佳氮源實(shí)驗(yàn)結(jié)果 最佳氮源實(shí)驗(yàn)結(jié)果最佳氮源實(shí)驗(yàn)結(jié)果氮源PDA麩皮大豆蛋白胨(NH4)2SO4酪蛋白胨速效鉀含量/(g/mL)38.60.23.440.70.4Ck速效鉀含量/(g/mL)0.50.72.228.91.2解鉀量/(g/mL)0.1-0.51.211.8-0.8最終確定的最佳氮源為最終確定的最佳氮源為(NH(NH4 4) )2 2SOSO4 4結(jié)論結(jié)論v通過菌落、菌體形態(tài)觀察，通過菌落、菌體形態(tài)觀察，16SrDNA序列分析，菌序列分析，菌株株A-3被鑒定為解鉀菌，屬于膠質(zhì)芽孢桿菌被鑒定為解鉀菌，屬于膠質(zhì)芽孢桿菌 （Paenibacillus mucilaginosus)。v過單因素試驗(yàn)，得到最優(yōu)發(fā)酵條件為：最適接種量過單因素試驗(yàn)，得到最優(yōu)發(fā)酵條件為：最適接