芳胺類藥物含量測定

1、 芳胺類藥物含量測定芳胺類藥物含量測定 杜杜 悅悅n非水溶液滴定法非水溶液滴定法n分光光度法分光光度法n鹽酸普魯卡因胺的快速熒光測定鹽酸普魯卡因胺的快速熒光測定n比色法比色法n高效液相色譜法高效液相色譜法n定義：定義：非水滴定是在除水以外的溶劑中進行非水滴定是在除水以外的溶劑中進行的滴定方法。的滴定方法。n適用范圍：適用范圍：有機堿、有機堿（有機堿、有機堿（K10-7）及其）及其鹽類鹽類n溶劑的選擇：溶劑的選擇： 能增強樣品的酸（堿）性；能增強樣品的酸（堿）性； 對試樣的溶解性好；對試樣的溶解性好； 純度高，使用安全，揮發(fā)性小，易回收。純度高，使用安全，揮發(fā)性小，易回收。n n 常用的溶劑常用

2、的溶劑 質子性溶劑質子性溶劑 非質子性溶劑非質子性溶劑 混合溶劑混合溶劑 注意注意 弱堿性藥物弱堿性藥物酸性溶劑酸性溶劑 弱酸性藥物弱酸性藥物堿性溶劑堿性溶劑 n堿性溶劑堿性溶劑 : 受質子受質子 如如 乙二乙二 胺，胺， DMFn酸性溶劑：給質子酸性溶劑：給質子 如如 冰醋酸冰醋酸n無轉移性質子，只起分散無轉移性質子，只起分散和稀釋作用，如和稀釋作用，如 氯仿氯仿n質子性溶劑和非質子性溶劑合質子性溶劑和非質子性溶劑合用，如冰醋酸酸酐用，如冰醋酸酸酐 常用的方法：常用的方法：n非水堿量法非水堿量法在在酸性酸性溶劑中用溶劑中用高氯酸高氯酸滴定劑滴定滴定劑滴定弱堿性弱堿性藥物。藥物。 常用溶劑常用

3、溶劑冰醋酸；冰醋酸； 滴定劑滴定劑高氯酸滴定液；高氯酸滴定液； 指示劑指示劑結晶紫；結晶紫；n非水酸量法非水酸量法在在堿性堿性溶劑中用溶劑中用甲醇鈉甲醇鈉滴定劑滴定滴定劑滴定弱酸弱酸性藥物。性藥物。 常用溶劑：乙二胺、二甲基甲酰胺；常用溶劑：乙二胺、二甲基甲酰胺； 滴定劑：甲醇鈉滴定液滴定劑：甲醇鈉滴定液 指示劑：麝香草酚藍指示劑：麝香草酚藍 鹽酸利多卡因的非水滴定鹽酸利多卡因的非水滴定原理：原理：側鏈烴胺的側鏈烴胺的叔氨基叔氨基有有弱堿性弱堿性，在冰醋酸中，在冰醋酸中，與高氯酸可以進行酸堿滴定。與高氯酸可以進行酸堿滴定。Hg(Ac)22NHCOCH2N(C2H5)2.HCLCH3CH3NHC

4、OCH2N(C2H5)2.HAcCH3CH3+HClO4NHCOCH2N(C2H5)2.HClO4 CH3CH3NHCOCH2N(C2H5)2.HAcCH3CH3+HAcHgCl2n醋酸汞作用醋酸汞作用： 藥物為藥物為鹽酸鹽鹽酸鹽，高氯酸滴定時有，高氯酸滴定時有氫鹵氫鹵酸酸生成，生成，影響滴定終點影響滴定終點，加入醋酸汞，加入醋酸汞，清除氫鹵酸的干擾。清除氫鹵酸的干擾。n醋酐作用醋酐作用： 有利于增強被測物的堿性。有利于增強被測物的堿性。n非水操作、標定液溫度、滴定終點的確非水操作、標定液溫度、滴定終點的確定定思考題？思考題？本章藥物采用非水滴定的藥物有：鹽酸利多卡因，本章藥物采用非水滴定的藥

5、物有：鹽酸利多卡因，鹽酸丁卡因，鹽酸布比卡因。它們可以用亞硝酸鹽酸丁卡因，鹽酸布比卡因。它們可以用亞硝酸鈉法測定嗎？為什么？鈉法測定嗎？為什么？n應用：應用：對乙酰氨基酚對乙酰氨基酚原料原料及其制劑含量測定及其制劑含量測定n測量方法測量方法： 中國藥典中國藥典(2000版版):百分吸收系數(shù)（百分吸收系數(shù)（E11CM）法）法 原理原理：對乙酰氨基酚在對乙酰氨基酚在0.4NaOH溶液中，于溶液中，于 257nm處有最大吸收。處有最大吸收。 USP(24)：對照品比較法：對照品比較法 原理：原理：對乙酰氨基酚在甲醇水混合溶劑中，對乙酰氨基酚在甲醇水混合溶劑中，于于244nm處測處測A。優(yōu)點：優(yōu)點：較

6、亞硝酸鈉滴定法靈敏度高，操作簡單。較亞硝酸鈉滴定法靈敏度高，操作簡單。中國藥典中國藥典(2000版版):百分吸收系數(shù)（百分吸收系數(shù)（E11CM）法）法方法方法： 本品本品40mg0.4NaOH50ml 250ml，搖勻，精，搖勻，精密量取密量取5ml，0.4NaOH10ml 100ml,257nm處測處測A。E11cm 715 計算：計算：A= E1%cmCL C% = A / E1%cm 水A 50100 1000 715 40樣品樣品%A FE1%cm W USP(24)：對照品比較法：對照品比較法方法：方法： 分別配置供試品和對照品，在同樣條件下測分別配置供試品和對照品，在同樣條件下測A

7、，計算含量。，計算含量。 計算：計算：A樣樣/A標標 = C樣樣/C標標 樣品樣品%= A樣樣/A標標 C標標F/W100% 比較比較：USP(24)：消除其它成分、儀器和溶劑等對光的反射消除其它成分、儀器和溶劑等對光的反射和吸收帶來的測定誤差；需要有標準品；多次測和吸收帶來的測定誤差；需要有標準品；多次測定。定。Ch P(2000):無需標準品；測定一次；儀器等誤差大。無需標準品；測定一次；儀器等誤差大。熒光分析法熒光分析法原理：原理： 物質受光照射后，發(fā)射出熒光，在一定濃度物質受光照射后，發(fā)射出熒光，在一定濃度范圍內，當激發(fā)光強度等外界條件一定時，物質范圍內，當激發(fā)光強度等外界條件一定時，

8、物質的熒光強度與濃度成正比關系。的熒光強度與濃度成正比關系。特點：特點： 靈敏度高，專屬性好。靈敏度高，專屬性好。 本身或與熒光衍生劑作用產生熒光本身或與熒光衍生劑作用產生熒光 低低濃度溶液中進行濃度溶液中進行 須做須做空白空白對照對照 exemn1光源光源n2單色光器單色光器1n3、6狹縫狹縫n4樣品池樣品池n5單色光器單色光器2n7檢測器檢測器吸收池吸收池 ；儀器裝置成直角；儀器裝置成直角注意：注意：F測紫外吸光度測紫外吸光度Fnm激發(fā)光譜激發(fā)光譜熒光光譜熒光光譜測定方法：測定方法： 標準對照法（一點法）標準對照法（一點法）irrb Cr 標準曲線法（標準曲線法（y=bxa） 由標準曲線或

9、回歸方程求出由標準曲線或回歸方程求出C樣，再樣，再根據根據F，W求出樣品求出樣品%。注意：注意： 靈敏度高，干擾因素多，因此多采用靈敏度高，干擾因素多，因此多采用標準品對照法標準品對照法. 鹽酸普魯卡因胺的快速熒光測定：鹽酸普魯卡因胺的快速熒光測定：n原理：原理： 芳伯氨基熒胺芳伯氨基熒胺熒光物質熒光物質測定測定exex 400nm, 400nm, emem485nm485nm處熒光強度。處熒光強度。CONHCH2CH2N(C2H5)2NH2+oooCOOHNOHOCONHCH2CH2N(C2H5)2 計算：計算： 標準曲線法標準曲線法 注意：注意： 反應條件：反應條件：7.57.5( (磷酸

10、鹽緩沖液磷酸鹽緩沖液) ) 本法也適用于普魯卡因胺制劑的測定，若測定濃本法也適用于普魯卡因胺制劑的測定，若測定濃度大于度大于0.25ug/ml0.25ug/ml2.5ug/ml2.5ug/ml的注射液時，可用水的注射液時，可用水適當稀釋后測定。適當稀釋后測定。 優(yōu)點：優(yōu)點： 與芳伯氨基重氮化法比較與芳伯氨基重氮化法比較靈敏度高靈敏度高，操作簡單操作簡單. .n原理：原理：有色物質溶液的顏色深淺與濃度有一定有色物質溶液的顏色深淺與濃度有一定關系，且有色物質在可見光區(qū)有一定吸收，關系，且有色物質在可見光區(qū)有一定吸收，通過測定通過測定A A來測定物質濃度。來測定物質濃度。n方法：方法： （1）重氮化

11、偶合反應重氮化偶合反應有色偶氮染料有色偶氮染料 特點特點: :專屬性專屬性低低，凡能重氮化的有機化合，凡能重氮化的有機化合物均可以。物均可以。 （2）經縮合反應生成有色絡合物經縮合反應生成有色絡合物 以鹽酸普魯卡因為例介紹：以鹽酸普魯卡因為例介紹：n原理：原理：n方法：方法：標準曲線法標準曲線法n特點：特點：專屬性強，準確。適合于鹽酸普魯卡因專屬性強，準確。適合于鹽酸普魯卡因及其制劑，普魯卡因青霉素及其注射劑的測定。及其制劑，普魯卡因青霉素及其注射劑的測定。腎上腺素、青霉素、焦亞硫酸鈉、硝基苯及氯腎上腺素、青霉素、焦亞硫酸鈉、硝基苯及氯甲酚等不干擾。甲酚等不干擾。COOCH2CH2N(C2H5)2+SO3Na2O+H2O NOHOHSO3Na+NaHSO4OHO