實驗三根系活力的測定

1、2022-4-151實驗三：根系活力的測定 （一）（一）實驗目的實驗目的及意義及意義 （二）（二）實驗原理實驗原理 （三）（三）實驗步驟實驗步驟 （四）（四）實驗報告實驗報告2022-4-152實驗目的和意義實驗目的和意義 掌握根系活力測定的方法2022-4-153實驗原理實驗原理 氯化三苯基四氮唑（ TTC ）是標準氧化電位為 80 mV 的氧化還原色素，溶于水中成為無色溶液，但還原后即生成紅色而不溶于水的三苯甲 （ TTF ）生成的三苯甲 （ TTF ）比較穩(wěn)定，不會被空氣中的氧自動氧化，所以 TTC 被廣泛用作酶試驗的氫受體，植物根系中脫氫酶所引起的 TTC 還原，可因加入琥珀酸、延胡索

2、酸、蘋果酸得到增強，而被丙二酸、碘乙酸所抑制。所以 TTC 還原量能表示脫氫酶活性，并作為根系活力的指標。2022-4-154實驗材料和器材實驗材料和器材 試劑 乙酸乙酯、石英砂、硫代硫酸鈉粉末、1TTC、1/15mol/LpH7.0磷酸緩沖液、1mol/L硫酸 實驗材料 蒜根 器材 分光光度計、分析天平、恒溫水浴鍋、研缽、漏斗個、移液管、比色管、10ml容量瓶、50ml燒杯2022-4-155實驗步驟實驗步驟（ 2 ）稱取根尖樣品 0.5 g ，放入小燒杯中，加入 0.4 TTC 溶液和磷酸緩沖液（ pH7.0 ）各 5 mL ，使根充分浸沒在溶液內(nèi)，在 37 下暗保溫 1 2 h ，此后立

3、即加入 1 mol/L 硫酸 2 mL ，以停止反應。（與此同時做一空白實驗，先加硫酸，再加根樣品， 37 下暗保溫后不加硫酸，其溶液濃度、操作步驟同上）。 （ 1 ） TTC 標準曲線的制作 取 0.4 TTC 溶液 0.2 mL 放入大試管中，加 9.8 mL 乙酸乙酯，再加少許 Na 2 S 2 O 4 粉末搖勻，則立即產(chǎn)生紅色的 TTF 。此溶液濃度為每毫升含有 TTF 80 g 。分別取此溶液 0.25 mL 、 0.50 mL 、 1.00 mL 、 1.50 mL 、 2.00 mL 置 10 mL 刻度試管中，用乙酸乙酯定容至刻度，即得到含 TTF 20 g 、 40 g 、 80 g 、 120 g 、 160 g 的系列標準溶液，以乙酸乙酯作參比，在 485 nm 波長下測定吸光度，繪制標準曲線。2022-4-156實驗步驟實驗步驟 （ 3 ）把根取出，用濾紙吸干水分，放入研缽中，加乙酸乙酯 3 4 mL ，充分研磨，以提出 TTF 。把紅色提取液移入刻度試管，并用少量乙酸乙酯把殘渣洗滌 2 3 次，皆移入刻度試管，最后加乙酸乙酯使總量為 10 mL ，用分光光度計在波長 485 nm 下比色，以空白試驗作參比測出