生理學試驗學習教案

1、會計學1生理學試驗生理學試驗(shyn)第一頁，共31頁。第一章 總論(zn ln)、目的和要求目的：1.正確使用儀器設(shè)備，初步掌握基本操作技術(shù)(jsh)；2.鞏固生理學基本理論;3.培養(yǎng)觀察、比較、分析和綜合的能力以及獨立思考、解決實際問題的能力;4.為其它實驗課程打下基礎(chǔ)要求：實驗前：預習 復習 預測 實驗時：認真聽講 按步驟操作 人人動手 仔細觀察 勤于思考 愛護動物和設(shè)備實驗后：清潔實驗用品 收集實驗資料 按時交實驗報告第1頁/共31頁第二頁，共31頁。第一章 總論(zn ln)二、實驗結(jié)果的處理1.定量資料，如高低、長短、快慢、輕重(qngzhng)、多少等，以法定計量單位和數(shù)值予以

2、表達。2.在可以記錄到曲線的實驗項目中，在曲線上標寫圖注，如度量標尺及單位、刺激開始和終止的標志、時間標志等。 第2頁/共31頁第三頁，共31頁。第一章 總論(zn ln)三實驗報告1. 【實驗者姓名、班級及學號】2. 【實驗日期及室溫】 3. 【實驗題目】4. 【實驗?zāi)康摹?5. 【實驗原理】 6. 【實驗對象(動物)】 7. 【器材和藥品】 8. 【方法與步驟】 9. 【實驗結(jié)果及分析】 10. 【討論】 討論是重點內(nèi)容。實驗中環(huán)境條件、動物個體、藥物劑量等差異，可能出現(xiàn)各種誤差(wch)及非預期性的結(jié)果，應(yīng)客觀分析其產(chǎn)生的原因，盡可能提出個人有價值的見解。 11. 【結(jié)論】一種概括性、原

3、則性、理論性的簡明總結(jié)，不要再具體羅列結(jié)果。有的實驗結(jié)果不能明確地推導出某種理論性的結(jié)論，也可以不寫結(jié)論。 撰寫實驗報告時要強調(diào)獨立思考和進行創(chuàng)造性的理論思維訓練，切忌互相抄襲和盲 目引用書本既定結(jié)論。 第3頁/共31頁第四頁，共31頁。第一章 總論(zn ln)四實驗室規(guī)則(guz) 第4頁/共31頁第五頁，共31頁。第二章 常用(chn yn)儀器 一、 BL-420生物機能實驗系統(tǒng)（一）概述1、用途和組成：BL-420生物機能實驗系統(tǒng)是配置(pizh)在微機上的4通道生物信號采集、放大、顯示、記錄與處理系統(tǒng)。組成：（1）、微機（2）、BL-420系統(tǒng)硬件（3）、TM_WAVE生物信號采集

4、與分析軟件：可同時顯示4通道從生物體內(nèi)或離體器官中探測到的生物電信號或張力、壓力等生物非電信號的波形，并可對實驗數(shù)據(jù)進行存貯、分析及打印，從而對生物機體在不同的生理或藥理實驗條件下所發(fā)生的機能變化加以記錄與分析。 其他實驗附件則可根據(jù)實驗需要進行配置(pizh)，比如，血壓換能器、張力換能器、呼吸換能器、各種引導電極及刺激電極等。 第5頁/共31頁第六頁，共31頁。第二章 常用(chn yn)儀器 2、BL-420系統(tǒng)(xtng)原理 生物(shngw)電信號生物非電信號傳感器引入生物機能信號數(shù)字信號波形顯示、存貯、處理和分析放大、濾波模數(shù)轉(zhuǎn)換第6頁/共31頁第七頁，共31頁。第二章 常用(c

5、hn yn)儀器 （二）、BL-420F系統(tǒng)操作1、BL-420F系統(tǒng)前面板說明(shumng)CH1、CH2、CH3、CH4：生物信號輸入接口（可連接引導電極、壓力傳感器、 張力傳感器等）全導聯(lián)心電輸入口(ECG): 用于輸入全導聯(lián)心電信號記滴/觸發(fā)輸入：觸發(fā)輸入接口用于在刺激觸發(fā)方式下，外部觸發(fā)器通過這個輸入 口觸發(fā)系統(tǒng)采樣刺激輸出：刺激輸出接口（旁邊標注方波標識）監(jiān)聽輸出：監(jiān)聽輸出口（旁邊標注喇叭標識）第7頁/共31頁第八頁，共31頁。第二章 常用(chn yn)儀器 2、軟件(run jin)啟動3、軟件(run jin)主界面第8頁/共31頁第九頁，共31頁。第二章 常用(chn y

6、n)儀器 4、開始實驗（1）、從 “輸入信號”菜單中設(shè)定，然后選擇 “開始”命令按鈕； 當您為某個輸入通道選擇了一種輸入 信號類型之后，這個實驗通道的相應(yīng) 參數(shù)就被設(shè)定好了，這些參數(shù)包括(boku)： 采樣率、增益、時間常數(shù)、濾波、掃 描速度等。第9頁/共31頁第十頁，共31頁。第二章 常用(chn yn)儀器 （2）、從“實驗項目”菜單中選擇，在每一組分類實驗項目中又包含有若干個具體的實驗?zāi)K。選擇一個具體實驗?zāi)K后，系統(tǒng)自動完成(wn chng)相關(guān)的軟硬件參數(shù)設(shè)置，直接開始實驗。第10頁/共31頁第十一頁，共31頁。第二章 常用(chn yn)儀器 5、暫停、停止實驗6、打開存貯的數(shù)據(jù)文

7、件（數(shù)據(jù)反演）（三）、BL-420系統(tǒng)軟件其他重要功能介紹1、定標2、數(shù)據(jù)處理與測量3、添加文字標記(bioj)：實驗標記(bioj)編輯框位于頂部窗口。頂部窗口由4部分組成，他們分別是：當前選擇通道的光標測量數(shù)據(jù)顯示區(qū)，刺激按鈕，特殊實驗標記(bioj)編輯以及采樣率選擇按鈕。 第11頁/共31頁第十二頁，共31頁。第二章 常用(chn yn)儀器 添加(tin ji)文字標記方法:（1）從實驗標記組合框中選擇一組系統(tǒng)預先設(shè)定好的標記組；（2）在實驗標記編輯組合框中直接輸入任意的文字標記（不要超過30個字），按 “Enter”鍵確認。 在需要添加(tin ji)標記的波形處單擊鼠標左鍵。第1

8、2頁/共31頁第十三頁，共31頁。第二章 常用(chn yn)儀器 4、分時復用區(qū) 在主界面右邊包含有一個分時復用區(qū)，區(qū)域內(nèi)包含有五個分時復用區(qū)域：控制參數(shù)調(diào)節(jié)區(qū)顯示參數(shù)調(diào)節(jié)區(qū)通用信息顯示區(qū)專用信息顯示區(qū) 刺激參數(shù)調(diào)節(jié)區(qū) 通過(tnggu)分時復用區(qū)底部的切換按鈕進行切換。第13頁/共31頁第十四頁，共31頁。第二章 常用(chn yn)儀器 分時復用區(qū)中的控制參數(shù)調(diào)節(jié)區(qū)是設(shè)置硬件參數(shù)以及調(diào)節(jié)掃描速度的區(qū)域，非常重要。對應(yīng)(duyng)于每一個通道有一個控制參數(shù)調(diào)節(jié)區(qū) 。第14頁/共31頁第十五頁，共31頁。第二章 常用(chn yn)儀器 5、刺激器刺激參數(shù)調(diào)節(jié)區(qū)中各參數(shù)的意義： 延時：刺激

9、脈沖發(fā)出之前的初始延時（范圍：06s，單位：ms）。波間隔：雙刺激或串刺激中兩個脈沖波之間的時間(shjin)間隔（范圍：06s，單位：ms）。延時2：在連續(xù)刺激中，連續(xù)刺激脈沖之間的時間(shjin)間隔，可與延時相等，也可以不等 （范圍：06s，單位：ms），在顯示中，該參數(shù)將被換算為頻率。波寬：刺激脈沖的寬度（范圍：02000ms，單位：ms）。強度1：單刺激、串刺激中的刺激脈沖強度，或雙刺激中第一個刺激脈沖的強度（范圍 0100V，單位：V）。當刺激模式為電流刺激時，表示第一個刺激脈沖的電流 強度（范圍020mA，單位：mA）。強度2：雙刺激中第二個刺激脈沖的強度（范圍0100V，單位

10、：V）。當刺激模式為電 流刺激時，表示第二個刺激脈沖的電流強度（范圍020mA，單位：mA）。第15頁/共31頁第十六頁，共31頁。第二章 常用(chn yn)儀器 刺激參數(shù)區(qū)由上至下分為3個部分：基本信息、程控信息、波形(b xn)編輯 。第16頁/共31頁第十七頁，共31頁。第二章 常用(chn yn)儀器 6、數(shù)據(jù)共享：將實驗數(shù)據(jù)應(yīng)用于Word、Excel中等。 數(shù)據(jù)提取是指從原始實驗數(shù)據(jù)中以某種形式（如圖形、BL-420格式數(shù)據(jù)、通用文本格式數(shù)據(jù)等）提取出一段或多段數(shù)據(jù)，它是數(shù)據(jù)共享的基礎(chǔ)(jch)。數(shù)據(jù)提取方式包括：（1）數(shù)據(jù)導出：將一段反演實驗波形的原始數(shù)據(jù)以文本形式提取出來，并存

11、入到文本文件中，這樣便于其他應(yīng)用程序，如SPSS，SAS應(yīng)用。（2）數(shù)據(jù)剪輯：將一段或多段反演實驗波形的原始采樣數(shù)據(jù)按BL-420的數(shù)據(jù)格式提取出來，并存入到BL-420格式文件中。這樣可以有效地降低冗余數(shù)據(jù)。（3）圖形剪輯：將從通道顯示窗口中選擇的一段波形連同數(shù)據(jù)一起以圖形的方式發(fā)送到Windows操作系統(tǒng)的一個公共數(shù)據(jù)區(qū)內(nèi)，以便將這塊圖形粘貼到BL-420E+軟件的剪輯窗口中或任何可以顯示圖形的Window應(yīng)用軟件如Word、Excel或畫圖中。 （4）區(qū)間測量數(shù)據(jù)結(jié)果的導出：導出處理后的結(jié)果數(shù)據(jù)。當使用區(qū)間測量進行數(shù)據(jù)測量時，區(qū)間測量的結(jié)果將直接寫入到Excel文件中，同時，這些數(shù)據(jù)也以

12、resultn.txt（n代表通道號）文件名存貯為標準的Windows文本文件。第17頁/共31頁第十八頁，共31頁。第二章 常用(chn yn)儀器 二、換能器 換能器又稱傳感器，是指將機體生理活動的非電信號(xnho)轉(zhuǎn)換成與之有確定函數(shù)關(guān)系的電信號(xnho)的裝置。1、壓力換能器適用范圍：測量血壓、心內(nèi)壓、顱內(nèi)壓、胸腔內(nèi)壓、胃腸內(nèi)壓、眼內(nèi)壓等。原理：將壓力的變化轉(zhuǎn)換為電阻率的變化。使用：將換能器與主機接好后，啟動并預熱1020min。2、張力換能器適用范圍：記錄肌肉收縮曲線。原理：將張力信號(xnho)轉(zhuǎn)換成電信號(xnho)輸入。使用方法：（1）換能器的安裝方向（2）用畢后，從架上將

13、換能器卸下，但不要用超負荷力拆卸第18頁/共31頁第十九頁，共31頁。第二章 常用(chn yn)儀器 三、生理學實驗常用器械與用途(yngt)1.蛙類手術(shù)器械剪刀：粗剪刀、眼科剪鑷子 ：眼科鑷金屬探針： 用于破壞蛙腦和脊髓玻璃分針： 用于分離神經(jīng)和血管等組織 鋅銅弓： 用于刺激神經(jīng)肌肉標本，檢查其興奮性蛙板： 15cm20cm的軟質(zhì)木板，板中央放置一玻璃片。制備蛙類標本時應(yīng)在清潔的玻璃板上操作。木板用于蛙的固定，可用圖釘或大頭針將蛙腿釘在木板上蛙釘培養(yǎng)皿第19頁/共31頁第二十頁，共31頁。第二章 常用(chn yn)儀器 2.哺乳類手術(shù)器械（1）手術(shù)刀（2）剪刀 （3）鑷子(ni zi)

14、（4）止血鉗（5）動脈夾 （6）氣管插管 （7）血管插管 第20頁/共31頁第二十一頁，共31頁。第三章 實驗(shyn)動物基本操作技術(shù) （一）常用實驗動物 （二）動物實驗基本技術(shù)（三）實驗動物常用手術(shù)方法(fngf) （四）實驗動物的采血方法(fngf)（五）實驗動物的給藥途徑和方法(fngf)（六）實驗動物的處死方法(fngf)第21頁/共31頁第二十二頁，共31頁。第四章 各論 實驗一 蟾蜍坐骨神經(jīng)腓腸肌標本制備【目的】練習并掌握具有正常興奮收縮功能的蛙類坐骨神經(jīng)腓腸肌標本的制備?！驹怼客茴惖哪承┗旧顒雍蜕砉δ芘c哺乳類動物有相似之處而且(r qi)其離體組織的生活條件比較簡單

15、，易于控制和掌握。來源也較豐富，因此在生理學實驗，尤其是細胞生理學的某些實驗中，常用蛙或蟾蜍的坐骨神經(jīng)腓腸肌標本來觀察神經(jīng)肌肉的興奮性、刺激與反應(yīng)的規(guī)律及肌肉收縮的特點等?！緦嶒瀸ο蟆矿蛤??！酒鞑呐c藥品】蛙類手術(shù)器械、紗布、手術(shù)絲線、滴管、任氏液。第22頁/共31頁第二十三頁，共31頁。第四章 各論 【方法與步驟】1破壞腦和脊髓： 用粗剪剪去蟾蜍的上頜及頭部，然后搗毀脊髓，蟾蜍的四肢松軟、呼吸運動消失，表明腦脊髓已被完全破壞。2剪除軀干上部及內(nèi)臟：在骶髂關(guān)節(jié)水平以上0.51cm處剪斷脊柱，沿脊柱兩側(cè)剪開腹壁，使其頭與內(nèi)臟自然下垂，沿兩側(cè)剪除其頭部及內(nèi)臟，僅留下肢、骶骨、脊柱及由脊柱發(fā)出的坐骨神

16、經(jīng)。3去皮：左手捏住脊柱的斷端（注意不要接觸神經(jīng)），右手捏住皮膚的邊緣，向下剝掉全部后肢的皮膚，將標本置于盛有任氏液的培養(yǎng)皿中。4. 分離兩后肢：將蟾蜍置于蛙板上，用粗剪刀沿正中線將脊柱分為兩半再從恥骨聯(lián)合中央剪開，使兩腿完全分開。將標本浸入盛有任氏液的培養(yǎng)皿中。5. 游離坐骨神經(jīng)：取一后肢放于蛙板的玻璃板上，兩端用蛙釘在蛙板上固定。用玻璃分針沿脊柱內(nèi)側(cè)游離坐骨神經(jīng)，并于近脊柱處穿線結(jié)扎。再向下循坐骨神經(jīng)溝游離出坐骨神經(jīng)大腿部分，然后從脊柱根部將坐骨神經(jīng)剪斷，手執(zhí)細線將神經(jīng)輕輕提起，剪斷其所有的小分支，并將神經(jīng)一直游離至腘窩。6制備坐骨神經(jīng)小腿標本：將游離干凈的坐骨神經(jīng)搭于腓腸肌上，在膝關(guān)節(jié)周

17、圍剪掉全部大腿肌肉，并用粗剪刀將附著在股骨上的組織刮干凈，然后在股骨的中部剪去上段股骨。7制備坐骨神經(jīng)腓腸肌標本：將上述坐骨神經(jīng)小腿標本在跟腱處穿線結(jié)扎后剪斷跟腱。游離腓腸肌至膝關(guān)節(jié)處，然后沿膝關(guān)節(jié)將小腿其余部分剪掉。8檢查標本的興奮性：用經(jīng)任氏液濕潤的銅鋅弓迅速接觸坐骨神經(jīng)，如腓腸肌發(fā)生明顯的收縮(shu su)，表明標本的興奮性良好，即可將標本置于盛有干凈任氏液的培養(yǎng)皿中待用。 第23頁/共31頁第二十四頁，共31頁。第四章 各論 【注意事項】1.破壞腦和脊髓時，不要(byo)將蟾蜍頭部對著自己和別人的面部，以防蟾酥濺入眼內(nèi)。2.標本制備過程中盡可能避免損傷神經(jīng)，不可用力牽拉或用金屬器械鉗

18、夾神經(jīng)。3.隨時滴加任氏液保持神經(jīng)濕潤，并將暫時不用的標本置于任氏液中備用。 第24頁/共31頁第二十五頁，共31頁。第四章 各論 實驗二 閾刺激、閾上刺激與最大刺激【目的】在保持足夠的刺激時間(脈沖波寬)不變的條件下，觀察對蟾蜍坐骨神經(jīng)的刺激強度(脈沖振幅)與腓腸肌收縮之間的關(guān)系?！驹怼恳粭l神經(jīng)是由許多興奮性不同的神經(jīng)纖維所組成，保持足夠的刺激時間不變，剛能引起其中興奮性較高的神經(jīng)纖維產(chǎn)生興奮，表現(xiàn)為受這些神經(jīng)纖維支配的肌纖維發(fā)生收縮，此時的刺激強度即為這些神經(jīng)纖維的閾強度，具有此強度的刺激叫閾刺激。隨著刺激強度的不斷增加，有較多的神經(jīng)纖維興奮，肌肉的收縮反應(yīng)也相應(yīng)逐步增大，強度超過閾值的

19、刺激叫閾上刺激，當閾上刺激強度增大到某一值時，神經(jīng)中所有纖維均興奮、此時肌肉作最大的收縮，再繼續(xù)增強刺激強度，肌肉收縮反應(yīng)不再繼續(xù)增大。具有引起肌肉最大收縮的最小刺激強度的刺激稱為最大刺激?！緦嶒瀸ο蟆矿蛤堋！酒鞑呐c藥品(yopn)】蛙類手術(shù)器械、紗布、手術(shù)絲線、滴管、任氏液、BL-420生物機能實驗系統(tǒng)、肌槽、張力換能器、鐵支架、雙凹夾。第25頁/共31頁第二十六頁，共31頁。第四章 各論 【方法與步驟】1.制備坐骨神經(jīng)腓腸肌標本。2.固定標本：將坐骨神經(jīng)腓腸肌標本的股骨殘端固定于肌槽的小孔內(nèi)，將坐骨神經(jīng)置于肌槽的刺激(cj)電極上，使坐骨神經(jīng)腓腸肌標本固定于肌槽。腓腸肌跟腱的結(jié)扎線與張力換

20、能器的應(yīng)變片相連，將張力換能器固定于鐵支架的雙凹夾上。3.儀器連接：（1）張力換能器的插頭插入生物信號記錄分析系統(tǒng)的信號輸入插座，打開計算機啟動生物信號記錄處理系統(tǒng)，點擊菜單“實驗項目”下“肌肉神經(jīng)實驗”，選定“刺激(cj)強度與反應(yīng)關(guān)系”，根據(jù)實驗需要選擇參數(shù)，實驗方式選擇“程控”。（2）肌槽上的刺激(cj)電極的插頭插入生物信號記錄分析系統(tǒng)的刺激(cj)輸出插孔。【實驗項目】改變刺激(cj)強度，記錄肌肉的收縮張力曲線。1.閾刺激(cj)：用弱刺激(cj)開始肌肉無收縮反應(yīng)，隨著刺激(cj)強度的加大，當刺激(cj)剛能引起腓腸肌收縮的刺激(cj)強度為閾強度（閾值），強度達到閾值的刺激(

21、cj)為閾刺激(cj)。2.最大刺激(cj)：刺激(cj)強度逐步增大，肌肉收縮幅度隨之加大，直到五個收縮幅度不再隨刺激(cj)強度的增大而升高，剛使收縮曲線達到最高幅度的最小刺激(cj)強度的刺激(cj)，即為最大刺激(cj)。第26頁/共31頁第二十七頁，共31頁。第四章 各論 【實驗結(jié)果及分析(fnx)】畫圖、標注【討論】【結(jié)論】第27頁/共31頁第二十八頁，共31頁。第四章 各論 實驗三 骨骼肌的單收縮、復合收縮和強直收縮【目的】在保持刺激強度不變的條件(tiojin)下，觀察對蟾蜍坐骨神經(jīng)的刺激頻率與腓腸肌收縮形式之間間的關(guān)系?！驹怼看碳さ念l率不同，肌肉收縮的形式也不相同。用頻率不同而強度相同的閾上刺