中藥制劑檢測技術(shù)第四章 雜質(zhì)檢查

1、 一、雜質(zhì)的定義雜質(zhì)的定義 一般是指無醫(yī)療作用且能影響制劑質(zhì)量的或?qū)θ梭w產(chǎn)生危害作用的物質(zhì)。 二、雜質(zhì)檢查的意義雜質(zhì)檢查的意義 為了確保中藥制劑的安全性，中國藥典2005年版對雜質(zhì)檢查做出重要修訂，收載了原子吸收分光光度法（AAS）、電感耦合等離子體質(zhì)譜法（ICPMS）等先進(jìn)技術(shù)，對重金屬、砷鹽等有害物質(zhì)進(jìn)行檢測；增加了有機(jī)磷類農(nóng)藥、除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量的檢查項目。 三、雜質(zhì)的來源三、雜質(zhì)的來源 中藥制劑中的雜質(zhì)主要來源于三個方面：一是由中藥材原料中帶入；二是在生產(chǎn)制備過程中引入；三是貯存過程中受外界條件的影響使中藥制劑的理化性質(zhì)改變而產(chǎn)生的。 四、雜質(zhì)的分類四、雜質(zhì)的分類 中藥制劑的雜質(zhì)分為

2、一般雜質(zhì)和特殊雜質(zhì)兩類。 1.一般雜質(zhì)一般雜質(zhì) 指自然界中分布比較廣泛，普遍存在于藥材之中，易在中藥制劑的生產(chǎn)過程中引入的雜質(zhì)。 如泥沙（硅酸鹽）、重金屬、砷鹽、有機(jī)氯類農(nóng)藥、甲醇、酸、堿、氯化物、硫酸鹽、鐵鹽等。它們的檢查方法均在中國藥典附錄中加以規(guī)定。 2.特殊雜質(zhì)特殊雜質(zhì) 指在制劑生產(chǎn)和貯存過程中，可能引入或產(chǎn)生的某種（類）特有雜質(zhì)，而非大多數(shù)制劑普遍存在的。這類雜質(zhì)被列入中國藥典中有關(guān)品種檢查項下。 如，大黃流浸膏中的土大黃苷、阿膠中的揮發(fā)性堿性物質(zhì)和附子理中丸中的烏頭堿等。 五、雜質(zhì)的限量檢查五、雜質(zhì)的限量檢查 在不影響療效和不產(chǎn)生毒副作用的前提下，允許制劑中的雜質(zhì)在一定限度范圍內(nèi)存

3、在。因此，中國藥典規(guī)定的雜質(zhì)檢查均為限量檢查。 六、雜質(zhì)限量六、雜質(zhì)限量 是指藥品中所含雜質(zhì)的最大允許量，通常用百分之幾（%）或百萬分之幾（ppm）來表示。 雜質(zhì)限量公式：雜質(zhì)最大允許量 樣品量雜質(zhì)限量（ppm）=100%（106)七、雜質(zhì)檢查方法七、雜質(zhì)檢查方法（一）比較分析法（比色法） 即取一定量與被檢雜質(zhì)相同的純物質(zhì)或其他對照品配制成標(biāo)準(zhǔn)溶液，與一定量供試品溶液，在相同實驗條件下，比較反應(yīng)結(jié)果（如顏色深淺），從而確定制劑中雜質(zhì)的含量是否超過規(guī)定的限度。重金屬、砷鹽、烏頭堿等雜質(zhì)檢查即采用該法。 由于樣品（S）中所含雜質(zhì)的含量是通過與雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行比較來確定的，雜質(zhì)的最大允許量也就是雜質(zhì)

4、標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積（V）與其濃度（C）的乘積，因此雜質(zhì)限量（L）可按下式計算： 計算實例（P137） 1.阿膠中砷鹽限度的計算 2.黃連上清丸重金屬檢查時，所需標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液體積的計算。S SV V C C100% （106)L % （ppm） = =準(zhǔn)確測定法 采用重量法、儀器分析法等測定雜質(zhì)的準(zhǔn)確含量，并與雜質(zhì)限量比較做出判斷?；曳郑嗌常⑥r(nóng)殘、鉛等有害元素、甲醇等雜質(zhì)的檢查均采用此法。靈敏度測定法 該法不用標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行對比分析，而是在供試品溶液中加入檢測試劑，在一定條件下，觀察有無反應(yīng)發(fā)生，即以該反應(yīng)的靈敏度來控制雜質(zhì)限量。 如肉桂油中重金屬檢查。（P138） 一、意義一、意義 灰分檢查主要是

5、控制藥材和中藥制劑中泥沙等雜質(zhì)的含量，對于保證藥品品質(zhì)和潔凈度有著重要意義。1. 1.總灰分總灰分 系指樣品經(jīng)高溫?zé)胱疲茐姆纸夂?，剩下的非揮發(fā)性灰燼 。較純凈的藥材或制劑，其總灰分主要為生理灰分生理灰分即藥品本身所含的各種鹽類 （例如夏枯草中的鉀鹽，大黃、甘草、紅花中的草酸鈣等，故生理灰分不屬于雜質(zhì)。），以及少量允許存在的外來無機(jī)雜質(zhì)（泥沙等）。 在生理灰分相對穩(wěn)定相對穩(wěn)定的前提下，藥品具有一定的總灰分含量限度。如果總灰分含量超限，則說明藥品含有過多的泥沙（主含硅酸鹽）等外來雜質(zhì)。 二、灰分檢查二、灰分檢查 包括總灰分檢查和酸不溶性灰分檢查。 2. 2.酸不溶性灰分酸不溶性灰分 系指總灰分加

6、鹽酸處理后，得到的不溶于鹽酸的灰分。由于草酸鈣等生理灰分可溶于稀鹽酸，而泥沙（主要為硅酸鹽）等外來無機(jī)雜質(zhì)難溶于稀鹽酸，因此，對于那些生理灰分含量差異較大，特別是在組織中含草酸鈣較多的中藥（例如大黃），酸不溶性灰分能更準(zhǔn)確反映其中泥砂等雜質(zhì)的摻雜程度。三、總灰分測定法三、總灰分測定法 1. 測定原理： 供試品在500600高溫?zé)胱疲蛊渲杏袡C(jī)物全部氧化分解成二氧化碳、水等逸出，而無機(jī)成分生成灰分殘渣，根據(jù)殘渣重量，即可計算出供試品中的總灰分的含量。 2. 操作方法 供試品粉碎，過二號篩，混合均勻，取供試品25g（如需測定酸不溶性灰分，可取供試品35g），置熾灼至恒重恒重的坩堝中，稱定重量（準(zhǔn)確

7、至0.01g）緩緩熾熱，注意避免燃燒，至完全炭化時，逐漸升高溫度至500600，使完全灰化并至恒重。根據(jù)殘渣重量，計算供試品中總灰分的含量（%）。3. 注意事項 測定前，坩堝應(yīng)洗凈，干燥至恒重（連續(xù)兩次干燥或熾灼后的重量差異在0.3mg以下）。供試品熾灼后也要至恒重。 取供試品23g（35g），可用托盤天平（感量0.1g）； 稱定重量（準(zhǔn)確至0.01g），應(yīng)使用分析天平（感量0.001g）。 移動坩堝應(yīng)使用坩堝鉗，不得徒手操作；稱量操作應(yīng)準(zhǔn)確無誤，否則影響測定結(jié)果。. 對馬福爐的使用要嚴(yán)格按操作規(guī)程操作。 如供試品不易灰化，可將坩堝放冷，加熱水或10%硝酸銨溶液2ml，使殘渣濕潤，然后置水浴上

8、蒸干，殘渣照前法熾灼，至坩堝內(nèi)容物完全灰化。 熾灼操作時，實驗人員不得離去，并注意防止供試品燃燒或引起其它事故。4.計算 總灰分含量（ % ）= M1/M 100% M 為熾灼前供試品的重量，g M1 為熾灼后供試品的重量，g 5. 結(jié)果判斷 將計算結(jié)果與藥品標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較，低于或等于限度的，總灰分符合規(guī)定；高于限度的，則不符合規(guī)定。 四、酸不溶性灰分測定法四、酸不溶性灰分測定法 1.測定原理 供試品在500600高溫?zé)胱?，使其中有機(jī)物完全氧化分解逸出，往殘留灰分中加入稀鹽酸，溶解其中的草酸鈣等生理灰分，濾去酸水，得到難溶性殘渣（酸不溶性灰分），根據(jù)殘渣重量，即可計算出供試品中酸不溶性灰分的含量

9、。 2.操作方法 按上述總灰分測定法制備供試品的總灰分。取所得的灰分，在坩堝中加入稀鹽酸約10ml，用表面皿覆蓋坩堝，置水浴上加熱10分鐘，表面皿用熱水5ml沖洗，洗液并入坩堝中，用無灰濾紙濾過，坩堝內(nèi)的殘渣用水洗于濾紙上，并洗滌至洗液不顯氯化物反應(yīng)為止。濾渣連同濾紙移至同一坩堝中，干燥，熾灼至恒重。根據(jù)殘渣重量計算供試品中酸不溶性灰分的含量（%）。3.注意事項(同總灰分測定法)4. 計算(同總灰分測定法)5. 結(jié)果判斷(同總灰分測定法)五、應(yīng)用實例（五、應(yīng)用實例（P141P141） 1.阿膠的總灰分測定 2.九味羌活丸的酸不溶性灰分測定 九味羌活丸是由羌活等九味中藥制成的水丸，其中黃芪、甘草

10、和地黃等多種根類藥材，易帶入泥沙等雜質(zhì)。因此中國藥典規(guī)定了酸不溶性灰分檢查。第二節(jié)第二節(jié) 重金屬檢查法重金屬檢查法（Heavy Metal Test） 一、重金屬定義一、重金屬定義 系指在實驗條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉作用顯色的金屬雜質(zhì)。藥品中常見的重金屬有鉛、汞、砷、鎘、銅等，由于鉛較易帶入藥品中，且對人體危害較大，故進(jìn)行重金屬檢查時常以鉛鉛為代表。 二、檢查意義二、檢查意義 重金屬毒性較大，易積蓄，可導(dǎo)致機(jī)體 嚴(yán)重中毒癥狀。為保證藥品的安全性，中國藥典加強了重金屬檢查力度，對某些中成藥尤其是含礦物類中藥的品種，規(guī)定了重金屬檢查項目。 例如阿膠的重金屬限量不得過30ppm，黃連上清丸的重金

11、屬限量不得過25ppm，地奧心血康的重金屬不得過20ppm。 中國藥典收載了四種重金屬檢查法，即第一法（硫代乙酰胺法）、第二法（熾灼法）、第三法（硫化鈉法）、第四法（微孔濾膜法）。標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液的制備 稱取硝酸鉛硝酸鉛0.160g，置1000ml量瓶中，加硝酸5ml與水50ml溶解后，用水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。臨用前，精密量取貯備液10ml，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得（每1ml相當(dāng)于10g的Pb）。 （一）第一法（硫代乙酰胺法） 本法適用于供試品不需有機(jī)破壞，在酸性溶液中顯色的重金屬限量檢查。 1. 1.測定原理測定原理 硫代乙酰胺在弱酸條件下水解，產(chǎn)生硫化氫，可與供試

12、品中重金屬離子生成有色的金屬硫化物的均勻混懸液，再與一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液經(jīng)同法處理所呈顏色進(jìn)行對照比較，檢查藥品中重金屬是否超限。三、檢查方法三、檢查方法pH3.5CH3CSNH2+H2OCH3CONH2+ H2SPb2+ + H2SPbS (棕黑)+2H+2.2.操作方法操作方法 取25ml納氏比色管兩支，甲管中加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量與醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml后，加水或各藥品項下規(guī)定的溶劑稀釋成25ml，制得對照品溶液。乙管中加入按各藥品項下規(guī)定的方法制成的供試品溶液25ml；再在甲乙兩管中分別加硫代乙酰胺試液各2ml，搖勻，放置2分鐘，同置白紙上，自上向下透視，比較兩管顏色深淺。3.3.主

13、要注意事項（主要注意事項（P143P143）（1）若供試品溶液有顏色，可用外消色法排除其干擾，即在甲管中滴加少量的稀焦糖溶液或其他無干擾的有色溶液，使之與乙管顏色一致。（稀焦糖溶液制備法見P143）（2）標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液應(yīng)在臨用前精密量取標(biāo)準(zhǔn)鉛貯備液稀釋配制，以防硝酸鉛水解而造成誤差，配制標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液應(yīng)使用不含鉛的玻璃儀器。4.4.結(jié)果判斷結(jié)果判斷 乙管中顯出的顏色比甲管淺或接近，則重金屬限量檢查符合規(guī)定，若乙管中顯出的顏色比甲管深，則重金屬限量檢查不符合規(guī)定。圖甲管 乙管甲管 乙管 （二）、第二法（熾灼法）（二）、第二法（熾灼法） 本法適用于供試品需有機(jī)破壞，在酸性溶液中顯色的重金屬限量檢查。大多數(shù)

14、中成藥采用此法檢查重金屬。 1. 1.測定原理測定原理： 供試品先經(jīng)高溫?zé)胱剖褂袡C(jī)物分解，重金屬被游離出來。再與硫代乙酰胺水解產(chǎn)生的硫化氫生成有色金屬硫化物的均勻混懸液，與一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液經(jīng)同法處理所呈顏色進(jìn)行比較，從而判斷供試品中重金屬是否超限。2.2.操作方法操作方法（1）供試品溶液的制備 取供試品一定量，緩緩熾灼至完全炭化，放冷，加硫酸0.51.0ml，使恰濕潤，用低溫加熱至硫酸除盡后，加硝酸0.5ml，蒸干，至氧化氮蒸氣除盡后，放冷，在500600熾灼使完全灰化，放冷，加鹽酸2ml，置水浴上蒸干后加水15ml，滴加氨試液至對酚酞指示液顯中性，再加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml，微熱溶

15、解后，移置納氏比色管（乙管）中，加水稀釋成25ml，即得。 （2）對照品溶液的制備 取配制供試品溶液的試劑，置瓷皿中蒸干后，加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml與水15ml，微熱溶解后，移置納氏比色管（甲管）中，加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量，再用水稀釋成25ml，即得。 （3）檢查法 在甲乙兩管中分別加硫代乙酰胺試液各2ml，搖勻，放置2分鐘，同置白紙上，自上向下透視，乙管中顯出顏色與甲管比較，不得更深。 3. 3.注意事項注意事項 （1）熾灼樣品還可采用熾灼殘渣檢查法（附錄J）規(guī)定的方法。 （2）灼燒樣品時，溫度必須控制在500600。加入硫酸和硝酸可促使有機(jī)物完全分解,且加熱使二者揮盡，否則影響測定。

16、（3）制備對照品溶液時，取配制供試品溶液的試劑，是指等量吸取配制供試品溶液時所用的硫酸、硝酸、鹽酸和氨試液等試劑。目的在于消除這些試劑可能夾帶的重金屬對測定的干擾。（4）其他注意事項見第一法（硫代乙酰胺法）4.4.結(jié)果判斷結(jié)果判斷 乙管中顯出的顏色比甲管淺或接近，則重金屬限量檢查符合規(guī)定，若乙管中顯出的顏色比甲管深，則重金屬限量檢查不符合規(guī)定。( (三三) )第三法（硫化鈉法）第三法（硫化鈉法） 本法適用于能溶于堿而不溶于稀酸（或在稀酸中即生成沉淀）的藥品中的重金屬限量檢查。 1. 1.測定原理測定原理： 在堿性條件下，某些重金屬的溶解度增大，滴加硫化鈉試液，可與重金屬離子生成有色硫化物的均勻

17、混懸液，與一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液經(jīng)同法處理所呈顏色進(jìn)行對比，檢查供試品中重金屬是否超限。 Pb2+ + Na2S PbS + 2Na+2.2.操作方法操作方法 取供試品適量，加氫氧化鈉試液5ml與水20ml溶解后，置納氏比色管中，加硫化鈉試液5滴，搖勻，與一定量的標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液同樣處理后的顏色比較，不得更深。 3. 3. 結(jié)果判斷結(jié)果判斷 乙管中顯出的顏色比甲管淺或接近，則重金屬限量檢查符合規(guī)定，若乙管中顯出的顏色比甲管深，則重金屬限量檢查不符合規(guī)定 ( (四四) )、第四法（微孔濾膜法）、第四法（微孔濾膜法） 本法適用于溶液顏色較深或重金屬限量較低的品種。 1. 1.測定原理：測定原理： 用微孔濾膜過

18、濾，使重金屬硫化物沉淀富集成色斑，通過供試品斑點與標(biāo)準(zhǔn)鉛斑的色澤比較，檢查供試品中重金屬是否超限。 2.2.操作方法操作方法 （1）標(biāo)準(zhǔn)鉛斑的制備 精密量取標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量，置小燒杯中，用水或各藥品項下規(guī)定的溶劑稀釋成10ml，加入醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml與硫代乙酰胺試液1.0ml，搖勻，放置10分種，用50ml注射器轉(zhuǎn)移至微孔濾膜裝置（濾器)中進(jìn)行壓濾(濾速約為每分鐘1ml)，濾畢，取下濾膜，放在濾紙上干燥，即得。A為濾器上蓋部分，入口處應(yīng)能與50ml注射器緊密連接；B為連接頭；C主墊圈（外徑10mm，內(nèi)徑6mm）；D為濾膜，直徑10mm，孔徑3.0m，用前經(jīng)在水中浸泡24小時以上；

19、E為尼龍墊網(wǎng)（孔徑不限），直徑10mm；F為濾器下部，出口處套上一合適橡皮管。 （2）檢查法 取按各藥品項下規(guī)定方法制成的供試品溶液10ml，加入醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml與硫代乙酰胺試液1.0ml，搖勻，放置10分種，用50ml注射器轉(zhuǎn)移至濾器中進(jìn)行壓濾(濾速約為每分鐘1ml)，濾畢，取下濾膜，放在濾紙上干燥。將生成的供試品斑點與標(biāo)準(zhǔn)鉛斑比較，不得更深。 3. 3.注意事項注意事項 （1）若供試溶液有顏色或渾濁，應(yīng)用濾膜進(jìn)行預(yù)濾，如濾膜上有污染，即換濾膜再濾，直至濾膜不再染色；然后取濾液10ml，按規(guī)定加入的醋酸鹽緩沖液和硫代乙酰胺試液反應(yīng)顯色，移至濾器中進(jìn)行壓濾，制成供試品斑點。 （

20、2）壓濾時，應(yīng)讓注射器內(nèi)管自然下降，產(chǎn)生的壓力比較均勻，使過濾速度達(dá)到每分鐘1ml左右；對于較黏稠的樣品溶液，可施加一均勻壓力使達(dá)到該速度，以保證色斑色調(diào)的均勻性。濾過時如濾器中存在氣泡則會影響色斑質(zhì)量，故在安裝輔助濾板、濾膜和墊圈時應(yīng)以水排除氣泡。4.4.結(jié)果判斷結(jié)果判斷 供試品斑點顏色比標(biāo)準(zhǔn)鉛斑的顏色淺或接近，則重金屬檢查符合規(guī)定；供試品生斑點顏色比標(biāo)準(zhǔn)鉛斑的顏色深，則重金屬檢查不符合規(guī)定。 四四、應(yīng)用實例應(yīng)用實例（P148P148） （一）冰片中重金屬檢查 冰片大多為人工合成品，故又稱合成龍腦。在制備過程中可能引入重金屬，因此中國藥典規(guī)定采用第一法對其重金屬進(jìn)行檢查。. （二）地奧心血康

21、中重金屬檢查 地奧心血康的原料藥為薯蕷科植物黃山藥、穿山龍薯蕷的根莖提取物，為淺黃色或淺棕黃色粉末。生產(chǎn)中可能引入重金屬，中國藥典規(guī)定采用第二法檢查重金屬。第三節(jié)第三節(jié) 砷鹽檢查法砷鹽檢查法（Arsenic TestArsenic Test） 一、定義一、定義 砷鹽檢查法系指用于藥品中微量砷鹽（以As計算）的限量檢查方法。 二、意義二、意義 中藥中殘存的三價砷鹽毒性極強，可引起嚴(yán)重的中毒癥，危害生命安全。故中國藥典對某些中藥制劑規(guī)定了砷鹽限量檢查項目，以保證用藥安全。 如阿膠中砷鹽含量不得過3ppm，黃連上清丸中砷鹽含量不得過2ppm。 三、操作方法三、操作方法 中國藥典收載了兩種砷鹽檢查法，

22、即第一法（古蔡氏法）、第二法（二乙基二硫代氨基甲酸銀法）。 標(biāo)準(zhǔn)砷溶液的制備 稱取三氧化二砷0.132g，置1000ml量瓶中，加20%氫氧化鈉溶液5ml溶解后，用適量的稀硫酸中和，再加稀硫酸10ml，用水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。臨用前，精密量取貯備液10ml，置1000ml量瓶中，加稀硫酸10ml，用水稀釋至刻度，搖勻，即得（每1ml相當(dāng)于1g的As）。（一）（一）* *第一法（古蔡氏法）第一法（古蔡氏法）1. 1.測定原理測定原理： 本法系采用鋅和酸作用所產(chǎn)生的初生態(tài)氫與供試品中微量砷鹽（AsO33-）反應(yīng)生成揮發(fā)性砷化氫（AsH3），再與溴化汞試紙（HgBr2）作用生成黃色至棕色砷

23、斑。比較供試品與標(biāo)準(zhǔn)砷溶液在同一條件下所顯的砷斑的顏色深淺，從而檢查藥品中砷鹽是否超限。AsO33- +3Zn +9H+ AsH3 + 3Zn2+ +3H2O AsH3 +2HgBr2 2HBr + AsH（HgBr）2（黃色）AsH3 +3HgBr2 3HBr + As（HgBr）3（棕色）2.2.古蔡氏法測砷裝置古蔡氏法測砷裝置 （P151圖）A.錐形瓶 B.磨口塞（中有一孔） C.導(dǎo)氣管（裝入醋酸鉛棉花60mg） D.有機(jī)玻璃旋塞 E.有機(jī)玻璃樣品 標(biāo)準(zhǔn)砷溶液還原反應(yīng)(25-40 )AsH3 砷斑標(biāo)準(zhǔn)砷 溶液樣品醋酸鉛棉花醋酸鉛棉花 溴化汞試紙溴化汞試紙 H2S 3.3.測定方法測定方法

24、（1）供試品砷斑的制備 樣品的有機(jī)破壞 中成藥一般需先行有機(jī)破壞再測砷。破壞方法有堿破壞法、酸破壞法及直接炭化法等，以氫氧化鈣堿破壞法較為常用。取一定量的供試品，加入等量的無砷氫氧化鈣混勻后，加水濕潤，烘干，在小火上小心熾灼（注意不使內(nèi)容物濺出）至煙霧除盡，移入高溫爐中在500600熾灼至灰化。同時作空白，留做標(biāo)準(zhǔn)砷斑用。 供試品砷斑的制備 將有機(jī)破壞所得灰分（殘渣）放冷，移入A瓶，按各品種項下規(guī)定，加入一定量鹽酸和水溶解，再加碘化鉀試液5ml與酸性氯化亞錫試液5滴，在室溫放置10分鐘后，另鋅粒2g，立即將導(dǎo)氣管C密塞于A瓶上，并將A瓶置2540水浴中，反應(yīng)45分鐘，取出溴化汞試紙，即得。 （

25、2）標(biāo)準(zhǔn)砷斑的制備 將上述空白灰分用鹽酸溶液(5ml鹽酸+21ml水)溶解并移入A瓶中，再精密加入標(biāo)準(zhǔn)砷溶液2ml，照供試品砷斑的制備，自“再加碘化鉀試液5ml”起，依法操作，即得。 4. 4.結(jié)果判斷結(jié)果判斷 供試品砷斑顏色比標(biāo)準(zhǔn)砷斑顏色淺或接近，則砷鹽限量檢查符合規(guī)定；若供試品砷斑顏色比標(biāo)準(zhǔn)砷斑顏色深，則砷鹽限量檢查不符合規(guī)定。 5. 5.主要注意事項主要注意事項（1）砷斑易退色，故供試品砷斑和標(biāo)準(zhǔn)砷斑應(yīng)平行制備，并迅速比色。（2）鋅粒大小影響反應(yīng)速度 ，其直徑以2mm左右（過一號篩）為宜。（3）氯化亞錫與碘化鉀的存在，可促使砷化氫生成反應(yīng)定量完成。（4）醋酸鉛棉花主要是吸收除去H2S 等

26、干擾性雜質(zhì)。應(yīng)按規(guī)定填充 且不易填充得太緊。H2S +Pb（CH3COO）2 PbS +2CH3COOH（5）溴化汞試紙宜用質(zhì)量較好、組織疏松的中速定量濾紙新鮮制備。 （二）第二法（二）第二法（二乙基二硫代氨基甲酸銀法二乙基二硫代氨基甲酸銀法 Ag-DDCAg-DDC法法） 本法可避免目測誤差，靈敏度高，顯色穩(wěn)定，重現(xiàn)性好。 1. 1.測定原理測定原理 利用金屬鋅與酸作用產(chǎn)生新生態(tài)氫，與藥品中的微量亞砷酸鹽反應(yīng)生成具有揮發(fā)性的砷化氫，用Ag-DDC試液吸收，使Ag-DDC還原生成紅色膠態(tài)銀，與同條件下一定量標(biāo)準(zhǔn)砷溶液所產(chǎn)生的紅色膠態(tài)銀在510nm處測吸收度，進(jìn)行比較，以判定砷鹽的含量是否限量。

27、 反應(yīng)式 2. 2. Ag-DDCAg-DDC法測砷裝置法測砷裝置 3. 3.測定方法測定方法 （1）標(biāo)準(zhǔn)砷對照液的制備： 精密量取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液5ml，置A瓶中，加鹽酸5ml與水21ml，再加碘化鉀試液5ml與酸性氯化亞錫試液5滴，在室溫放置10分鐘后，加鋅粒2g，立即將導(dǎo)氣管C與A瓶密塞，使生成的砷化氫氣體導(dǎo)入已精密加入5mlAg-DDC試液的D管中，并將A瓶置2540水浴中反應(yīng)45分鐘，取出D管，添加氯仿至刻度，混勻，即得。（2）檢查法： 取照各藥品項下規(guī)定方法制成的供試液，置A瓶中，照標(biāo)準(zhǔn)砷對照液的制備，自“再加碘化鉀試液5ml”起，依法操作。將所得溶液與標(biāo)準(zhǔn)砷對照液同置白色背景上，從D管

28、上方向下觀察、比較，所得溶液的顏色不得比標(biāo)準(zhǔn)砷對照液更深。必要時，可將所得溶液轉(zhuǎn)移至1cm吸收池中，用適宜的分光光度計或比色計在510nm波長處以Ag-DDC試液作空白，測定吸收度，與標(biāo)準(zhǔn)砷對照液按同法測得的吸收度比較，不得更大。（1）反應(yīng)的溫度和時間 本法在2540水浴中反應(yīng)45分鐘為宜。在此溫度下，有部分氯仿?lián)]發(fā)損失，故在比色前應(yīng)添加氯仿至5.00ml，搖勻后再進(jìn)行比色測定。二乙基二硫代氨基甲酸銀試液在配制后兩周內(nèi)穩(wěn)定，因該試液呈淺黃綠色，應(yīng)考慮背景補償，測吸收度時要用此試液作空白。（2）醋酸鉛棉花 取脫脂棉，浸入醋酸鉛試液與水的等溶混合液中，濕透后，擠壓除去過多的溶液，并使疏松，在100以下溫度干燥后，置玻璃塞瓶中，在干燥處保存。 5. 5.應(yīng)用實例應(yīng)用實例 （1）黃連上清丸中的砷鹽檢查 本品含