第十一章天然藥物的研究開(kāi)發(fā)

1、第十一章第十一章 天然藥物的開(kāi)發(fā)天然藥物的開(kāi)發(fā)第一節(jié)第一節(jié) 概概 述述 2l2l世紀(jì)已經(jīng)到來(lái)世紀(jì)已經(jīng)到來(lái), ,在新的世紀(jì)在新的世紀(jì), ,具有我國(guó)傳統(tǒng)文化具有我國(guó)傳統(tǒng)文化特色和獨(dú)特優(yōu)勢(shì)的中藥，正面臨著前所未有的發(fā)特色和獨(dú)特優(yōu)勢(shì)的中藥，正面臨著前所未有的發(fā)展機(jī)遇和挑戰(zhàn)展機(jī)遇和挑戰(zhàn)：一方面一方面，隨著社會(huì)的發(fā)展，人，隨著社會(huì)的發(fā)展，人類疾病譜已悄然發(fā)生改變，醫(yī)療模式已由單純的類疾病譜已悄然發(fā)生改變，醫(yī)療模式已由單純的疾病治療轉(zhuǎn)變?yōu)轭A(yù)防、保健、治療、康復(fù)相結(jié)合疾病治療轉(zhuǎn)變?yōu)轭A(yù)防、保健、治療、康復(fù)相結(jié)合的模式，各種替代醫(yī)學(xué)和傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)正發(fā)揮著越來(lái)的模式，各種替代醫(yī)學(xué)和傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)正發(fā)揮著越來(lái)越大的作用。生存環(huán)

2、境的不斷惡化，人類越大的作用。生存環(huán)境的不斷惡化，人類“回歸回歸自然自然”的呼聲越來(lái)越高，傳統(tǒng)醫(yī)藥倍受青睞。的呼聲越來(lái)越高，傳統(tǒng)醫(yī)藥倍受青睞。另一方面另一方面，隨著全球經(jīng)濟(jì)一體化進(jìn)程的加快，特別是隨著全球經(jīng)濟(jì)一體化進(jìn)程的加快，特別是我國(guó)已經(jīng)正式加入我國(guó)已經(jīng)正式加入WTOWTO，中國(guó)醫(yī)藥市場(chǎng)融入國(guó)際醫(yī)藥大市場(chǎng)的廣，中國(guó)醫(yī)藥市場(chǎng)融入國(guó)際醫(yī)藥大市場(chǎng)的廣度和深度將進(jìn)一步加劇，將面臨強(qiáng)大跨國(guó)醫(yī)藥集團(tuán)的激烈競(jìng)爭(zhēng)度和深度將進(jìn)一步加劇，將面臨強(qiáng)大跨國(guó)醫(yī)藥集團(tuán)的激烈競(jìng)爭(zhēng)以及日本、韓國(guó)、印度等亞洲國(guó)家傳統(tǒng)醫(yī)藥產(chǎn)品和德國(guó)、法國(guó)以及日本、韓國(guó)、印度等亞洲國(guó)家傳統(tǒng)醫(yī)藥產(chǎn)品和德國(guó)、法國(guó)等歐洲國(guó)家植物藥的巨大沖擊，我國(guó)生產(chǎn)

3、的眾多傳統(tǒng)中藥產(chǎn)品等歐洲國(guó)家植物藥的巨大沖擊，我國(guó)生產(chǎn)的眾多傳統(tǒng)中藥產(chǎn)品由于尚不能符合國(guó)際醫(yī)藥市場(chǎng)的標(biāo)準(zhǔn)和要求，目前僅由于尚不能符合國(guó)際醫(yī)藥市場(chǎng)的標(biāo)準(zhǔn)和要求，目前僅3%3%的國(guó)際的國(guó)際市場(chǎng)銷售份額還有可能進(jìn)一步萎縮。市場(chǎng)銷售份額還有可能進(jìn)一步萎縮。我國(guó)是世界上植物資我國(guó)是世界上植物資源最為豐富的國(guó)家，約有源最為豐富的國(guó)家，約有3000030000余種高等植物。我國(guó)有從熱帶、余種高等植物。我國(guó)有從熱帶、亞熱帶、溫帶到寒帶的多種植物資源，其中特有種占亞熱帶、溫帶到寒帶的多種植物資源，其中特有種占5050以上，以上，其豐富的生物多樣性是世界上其他國(guó)家所不能及的，蘊(yùn)藏著巨其豐富的生物多樣性是世界上其他

4、國(guó)家所不能及的，蘊(yùn)藏著巨大的開(kāi)發(fā)潛力。為從事天然藥物研究提供豐富的研究材料。大的開(kāi)發(fā)潛力。為從事天然藥物研究提供豐富的研究材料。 注冊(cè)分類注冊(cè)分類 1 1、未在國(guó)內(nèi)上市銷售的從中藥、天然藥物中提取的有效成份及其制、未在國(guó)內(nèi)上市銷售的從中藥、天然藥物中提取的有效成份及其制劑。劑。 2 2、未在國(guó)內(nèi)上市銷售的來(lái)源于植物、動(dòng)物、礦物等藥用物質(zhì)制成的、未在國(guó)內(nèi)上市銷售的來(lái)源于植物、動(dòng)物、礦物等藥用物質(zhì)制成的制劑。制劑。 3 3、中藥材的代用品。、中藥材的代用品。 4 4、未在國(guó)內(nèi)上市銷售的中藥材新的藥用部位制成的制劑。、未在國(guó)內(nèi)上市銷售的中藥材新的藥用部位制成的制劑。 5 5、未在國(guó)內(nèi)上市銷售的從中藥

5、、天然藥物中提取的有效部位制成的、未在國(guó)內(nèi)上市銷售的從中藥、天然藥物中提取的有效部位制成的制劑。制劑。 6 6、未在國(guó)內(nèi)上市銷售的由中藥、天然藥物制成的復(fù)方制劑。、未在國(guó)內(nèi)上市銷售的由中藥、天然藥物制成的復(fù)方制劑。 7 7、未在國(guó)內(nèi)上市銷售的由中藥、天然藥物制成的注射劑。、未在國(guó)內(nèi)上市銷售的由中藥、天然藥物制成的注射劑。 8 8、改變國(guó)內(nèi)已上市銷售藥品給藥途徑的制劑。、改變國(guó)內(nèi)已上市銷售藥品給藥途徑的制劑。 9 9、改變國(guó)內(nèi)已上市銷售藥品劑型的制劑。、改變國(guó)內(nèi)已上市銷售藥品劑型的制劑。 1010、改變國(guó)內(nèi)已上市銷售藥品工藝的制劑。、改變國(guó)內(nèi)已上市銷售藥品工藝的制劑。 1111、已有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的中

6、成藥和天然藥物制劑。、已有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的中成藥和天然藥物制劑。 選擇確定作為開(kāi)發(fā)對(duì)象的目標(biāo)化合物選擇確定作為開(kāi)發(fā)對(duì)象的目標(biāo)化合物工業(yè)化探討（大量制備）工業(yè)化探討（大量制備）臨床試驗(yàn)用樣品臨床試驗(yàn)用樣品上市銷售（上市銷售（GSP)現(xiàn)代創(chuàng)新藥物研究開(kāi)發(fā)的大致過(guò)程現(xiàn)代創(chuàng)新藥物研究開(kāi)發(fā)的大致過(guò)程合成合成情報(bào)情報(bào) 提取、結(jié)提取、結(jié) 構(gòu)測(cè)定構(gòu)測(cè)定 活性篩選活性篩選藥理藥理 生化生化特殊毒性特殊毒性 毒毒 性性藥效藥理藥效藥理一般藥理一般藥理藥物動(dòng)態(tài)藥物動(dòng)態(tài)吸收排泄吸收排泄代謝代謝作用機(jī)理作用機(jī)理急性毒性急性毒性亞急性毒性亞急性毒性慢性毒性慢性毒性致畸致畸致癌致癌 致癮致癮生殖毒性生殖毒性 理化學(xué)性質(zhì)、理化學(xué)性

7、質(zhì)、 制定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)穩(wěn)定性穩(wěn)定性配伍變化配伍變化試驗(yàn)方法試驗(yàn)方法試驗(yàn)規(guī)格試驗(yàn)規(guī)格工業(yè)制備方工業(yè)制備方法探討法探討 合成合成提取精制提取精制 發(fā)酵發(fā)酵制劑化探討制劑化探討III期：毒性、藥效（多數(shù)病人，期：毒性、藥效（多數(shù)病人， 多點(diǎn)觀察）多點(diǎn)觀察） II期：毒性、藥效（少數(shù)病人）期：毒性、藥效（少數(shù)病人） I期：毒性（健康人群）期：毒性（健康人群）申請(qǐng)臨床試驗(yàn)申請(qǐng)臨床試驗(yàn)(GCP）申請(qǐng)生產(chǎn)許可申請(qǐng)生產(chǎn)許可(GMP)創(chuàng)新藥物源創(chuàng)新藥物源頭研究階段頭研究階段(GLP) 雜志公開(kāi)發(fā)表雜志公開(kāi)發(fā)表 接受公眾檢驗(yàn)接受公眾檢驗(yàn)申請(qǐng)專利申請(qǐng)專利第二節(jié)第二節(jié) 天然藥物中開(kāi)發(fā)新藥途徑天然藥物中開(kāi)發(fā)新藥

8、途徑 一、經(jīng)驗(yàn)積累一、經(jīng)驗(yàn)積累 中藥的研究離不開(kāi)祖國(guó)醫(yī)學(xué)長(zhǎng)期實(shí)踐所積累的經(jīng)驗(yàn)，是尋找新中藥的研究離不開(kāi)祖國(guó)醫(yī)學(xué)長(zhǎng)期實(shí)踐所積累的經(jīng)驗(yàn)，是尋找新藥的極為重要的源泉和基礎(chǔ)。古代，人類在尋找新藥的漫長(zhǎng)歷史中，藥的極為重要的源泉和基礎(chǔ)。古代，人類在尋找新藥的漫長(zhǎng)歷史中，在親身在親身“嘗試嘗試”中不斷積累各種藥物知識(shí)，即神農(nóng)嘗百草的方法。中不斷積累各種藥物知識(shí)，即神農(nóng)嘗百草的方法。在天然藥物的研究過(guò)程中，要注重經(jīng)典文獻(xiàn)的調(diào)研，如根據(jù)中醫(yī)經(jīng)在天然藥物的研究過(guò)程中，要注重經(jīng)典文獻(xiàn)的調(diào)研，如根據(jù)中醫(yī)經(jīng)驗(yàn)和歷代醫(yī)書(shū)上記載中藥青蒿對(duì)驗(yàn)和歷代醫(yī)書(shū)上記載中藥青蒿對(duì)“截瘧截瘧”有效。東晉葛洪著有效。東晉葛洪著肘后肘后備急

9、方備急方中記載，中記載，“青蒿一握，水二升漬，絞取汁盡服之青蒿一握，水二升漬，絞取汁盡服之”，說(shuō)明，說(shuō)明青蒿中含有抗瘧有效成分，且加熱易破壞，故將青蒿低溫提取獲得青蒿中含有抗瘧有效成分，且加熱易破壞，故將青蒿低溫提取獲得抗瘧有效成分青蒿素，用于抗瘧具有顯著的特點(diǎn)，又通過(guò)構(gòu)效關(guān)系抗瘧有效成分青蒿素，用于抗瘧具有顯著的特點(diǎn)，又通過(guò)構(gòu)效關(guān)系研究合成了新的衍生物，療效顯著提高，且水溶解性更強(qiáng)。研究合成了新的衍生物，療效顯著提高，且水溶解性更強(qiáng)。文獻(xiàn)是前人積累的寶貴經(jīng)驗(yàn)，通過(guò)查閱文獻(xiàn)了解近緣植物的研文獻(xiàn)是前人積累的寶貴經(jīng)驗(yàn)，通過(guò)查閱文獻(xiàn)了解近緣植物的研究概況。只有了解前人成功的經(jīng)驗(yàn)和方法，才能最大限度的

10、借鑒和究概況。只有了解前人成功的經(jīng)驗(yàn)和方法，才能最大限度的借鑒和利用前人的經(jīng)驗(yàn)開(kāi)展新的研究十少走彎路，節(jié)省人力、物力和時(shí)間利用前人的經(jīng)驗(yàn)開(kāi)展新的研究十少走彎路，節(jié)省人力、物力和時(shí)間。 二、偶然發(fā)現(xiàn)二、偶然發(fā)現(xiàn)偶然發(fā)現(xiàn)在新藥研究和發(fā)現(xiàn)中是較常見(jiàn)的，最典型的偶然發(fā)現(xiàn)在新藥研究和發(fā)現(xiàn)中是較常見(jiàn)的，最典型的例子是青霉素的發(fā)現(xiàn)，例子是青霉素的發(fā)現(xiàn)，19281928年，英國(guó)細(xì)菌學(xué)家年，英國(guó)細(xì)菌學(xué)家弗萊明弗萊明一次一次在研究葡萄球菌的實(shí)驗(yàn)中偶然發(fā)現(xiàn)那次培養(yǎng)的細(xì)菌有些菌在研究葡萄球菌的實(shí)驗(yàn)中偶然發(fā)現(xiàn)那次培養(yǎng)的細(xì)菌有些菌落沒(méi)有生長(zhǎng)，仔細(xì)觀察發(fā)現(xiàn)，在這次實(shí)驗(yàn)中，培養(yǎng)基被霉落沒(méi)有生長(zhǎng)，仔細(xì)觀察發(fā)現(xiàn)，在這次實(shí)驗(yàn)中，培

11、養(yǎng)基被霉菌污染所致，后來(lái)從這種霉菌中發(fā)現(xiàn)了能殺滅細(xì)菌的物質(zhì)菌污染所致，后來(lái)從這種霉菌中發(fā)現(xiàn)了能殺滅細(xì)菌的物質(zhì)青霉素，開(kāi)辟了抗生素治療疾病的新領(lǐng)域。青霉素，開(kāi)辟了抗生素治療疾病的新領(lǐng)域。 三、藥物普篩三、藥物普篩 本世紀(jì)初，特別是本世紀(jì)初，特別是30年代以來(lái)，世界各國(guó)開(kāi)展了在特年代以來(lái)，世界各國(guó)開(kāi)展了在特定藥理模型的基礎(chǔ)上篩選藥物的工作，對(duì)天然藥物的篩選，定藥理模型的基礎(chǔ)上篩選藥物的工作，對(duì)天然藥物的篩選，導(dǎo)致了許多新藥的發(fā)現(xiàn)。導(dǎo)致了許多新藥的發(fā)現(xiàn)。藥物的篩選有兩種方法：藥物的篩選有兩種方法： 1 1分離純化得到純品化合物，然后再進(jìn)行活性測(cè)試。分離純化得到純品化合物，然后再進(jìn)行活性測(cè)試。優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)

12、點(diǎn)：(1)目標(biāo)清楚，方法簡(jiǎn)捷，指標(biāo)明確，標(biāo)準(zhǔn)同一。目標(biāo)清楚，方法簡(jiǎn)捷，指標(biāo)明確，標(biāo)準(zhǔn)同一。(2)分得標(biāo)準(zhǔn)品后可進(jìn)行多種藥理活性的測(cè)試。分得標(biāo)準(zhǔn)品后可進(jìn)行多種藥理活性的測(cè)試。缺點(diǎn)：缺點(diǎn)：(1)如果選擇的分離方法不當(dāng)，活性化合物丟失的可能如果選擇的分離方法不當(dāng)，活性化合物丟失的可能性極大。性極大。(2)對(duì)于極微量活性化合物，這種方法很容易漏檢。對(duì)于極微量活性化合物，這種方法很容易漏檢。 2 2在活性篩選方法的指導(dǎo)下進(jìn)行化合物的分離提取在活性篩選方法的指導(dǎo)下進(jìn)行化合物的分離提取(Bioassay Directed Separation)。在供試樣品的活性確定以后，選用簡(jiǎn)易、靈敏、可靠在供試樣品的活性

13、確定以后，選用簡(jiǎn)易、靈敏、可靠的活性測(cè)試方法作指導(dǎo)；在分離的每一階段對(duì)分離所得的的活性測(cè)試方法作指導(dǎo)；在分離的每一階段對(duì)分離所得的各個(gè)組分進(jìn)行活性定量研究和評(píng)價(jià)，跟蹤其中活性的部分。各個(gè)組分進(jìn)行活性定量研究和評(píng)價(jià)，跟蹤其中活性的部分。缺點(diǎn)：缺點(diǎn)：(1)活性測(cè)試的樣品及工作量均大大增加；活性測(cè)試的樣品及工作量均大大增加；(2)要求分離工作者與活性測(cè)試人員兩個(gè)方面的配合。要求分離工作者與活性測(cè)試人員兩個(gè)方面的配合。優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：(1)由于分離過(guò)程中，沒(méi)有化合物類型的框框限制，只由于分離過(guò)程中，沒(méi)有化合物類型的框框限制，只以活性為指標(biāo)進(jìn)行追蹤，故發(fā)現(xiàn)新化合物的可能性很大。以活性為指標(biāo)進(jìn)行追蹤，故發(fā)現(xiàn)新

14、化合物的可能性很大。(2)如果分離過(guò)程的某一階段，如因分離方法或材料選如果分離過(guò)程的某一階段，如因分離方法或材料選擇不當(dāng)，導(dǎo)致活性化合物的分解變化或流散時(shí)，還能迅速擇不當(dāng)，導(dǎo)致活性化合物的分解變化或流散時(shí)，還能迅速查明原因，并可采取相應(yīng)的措施進(jìn)行補(bǔ)救。對(duì)天然活性化查明原因，并可采取相應(yīng)的措施進(jìn)行補(bǔ)救。對(duì)天然活性化合物的分離來(lái)說(shuō)，這是一種較好的方法。合物的分離來(lái)說(shuō)，這是一種較好的方法。 例抑制前列腺素合成酶的藥物篩選例抑制前列腺素合成酶的藥物篩選 追蹤分離天然活性化合物時(shí)的注意事項(xiàng)追蹤分離天然活性化合物時(shí)的注意事項(xiàng) 1 1關(guān)鍵在于選擇、建立先進(jìn)的生物活性測(cè)試方法關(guān)鍵在于選擇、建立先進(jìn)的生物活性測(cè)

15、試方法 天然活性化合物的追蹤分離能否取得成功，關(guān)鍵在于有無(wú)好的生天然活性化合物的追蹤分離能否取得成功，關(guān)鍵在于有無(wú)好的生物活性測(cè)試體系試驗(yàn)?zāi)Ｐ涂梢杂形锘钚詼y(cè)試體系試驗(yàn)?zāi)Ｐ涂梢杂姓w動(dòng)物、器官、組織、細(xì)胞、整體動(dòng)物、器官、組織、細(xì)胞、酶或受體以及體內(nèi)生物活性物質(zhì)酶或受體以及體內(nèi)生物活性物質(zhì)等。近來(lái)并已開(kāi)始注意在基因調(diào)控等。近來(lái)并已開(kāi)始注意在基因調(diào)控水平上建立起新的篩選體系。無(wú)疑，采用整體動(dòng)物進(jìn)行的試驗(yàn)與人水平上建立起新的篩選體系。無(wú)疑，采用整體動(dòng)物進(jìn)行的試驗(yàn)與人比較相近，但是實(shí)驗(yàn)費(fèi)時(shí)費(fèi)錢(qián)，現(xiàn)象復(fù)雜，加以動(dòng)物個(gè)體差異以及比較相近，但是實(shí)驗(yàn)費(fèi)時(shí)費(fèi)錢(qián)，現(xiàn)象復(fù)雜，加以動(dòng)物個(gè)體差異以及病理模型難于建立等因

16、素，作為指導(dǎo)分離過(guò)程的活性篩選方法不太病理模型難于建立等因素，作為指導(dǎo)分離過(guò)程的活性篩選方法不太適宜。目前在實(shí)際工作中多采用的是那些靈敏、簡(jiǎn)便、可用于微量適宜。目前在實(shí)際工作中多采用的是那些靈敏、簡(jiǎn)便、可用于微量樣品的體外活性測(cè)試方法。其中，利用對(duì)酶、受體或體內(nèi)生物活性樣品的體外活性測(cè)試方法。其中，利用對(duì)酶、受體或體內(nèi)生物活性物質(zhì)的抑制或促進(jìn)作用，以及利用基因調(diào)控影響進(jìn)行的活性測(cè)試方物質(zhì)的抑制或促進(jìn)作用，以及利用基因調(diào)控影響進(jìn)行的活性測(cè)試方法因?yàn)楹?jiǎn)便易行又可定量，更是受到青睞，得到越來(lái)越廣泛的應(yīng)用。法因?yàn)楹?jiǎn)便易行又可定量，更是受到青睞，得到越來(lái)越廣泛的應(yīng)用。但是但是有時(shí)這種體外活性測(cè)試方法所得

17、結(jié)果與藥物實(shí)際在體內(nèi)的作用有時(shí)這種體外活性測(cè)試方法所得結(jié)果與藥物實(shí)際在體內(nèi)的作用并不平行，故實(shí)踐中也應(yīng)予以注意并不平行，故實(shí)踐中也應(yīng)予以注意。 2 2確保供試材料具有活性確保供試材料具有活性 這是追蹤這是追蹤分離活性化分離活性化合物的前提。合物的前提。為了確?；顬榱舜_保活性成分離工性成分離工作在可靠的作在可靠的基礎(chǔ)上進(jìn)行，基礎(chǔ)上進(jìn)行，對(duì)供試天然對(duì)供試天然藥物或中藥藥物或中藥有時(shí)須有時(shí)須采用采用多項(xiàng)指標(biāo)、多項(xiàng)指標(biāo)、體內(nèi)外進(jìn)行體內(nèi)外進(jìn)行測(cè)試加以確測(cè)試加以確認(rèn)。認(rèn)。 例例 美國(guó)國(guó)立癌癥研究中心篩選美國(guó)國(guó)立癌癥研究中心篩選抗腫瘤活性抗腫瘤活性植物或動(dòng)物粗提取物方法植物或動(dòng)物粗提取物方法植物粗提取物體外

18、多項(xiàng)指標(biāo)篩選抗腫瘤活性示有抗腫瘤活性有抗腫瘤活性無(wú)抗腫瘤活性體內(nèi)篩選抗腫瘤活性確定抗腫瘤活性或作用機(jī)理有新穎性溶劑分配色譜分離示有新穎性濃縮物跟蹤分離活性成分示有抗腫瘤活性體內(nèi)復(fù)篩抗腫瘤活性有活性無(wú)活性(棄去)本方法的優(yōu)點(diǎn)是：本方法的優(yōu)點(diǎn)是：活性低或含量少的化合物不至于活性低或含量少的化合物不至于丟失丟失增加了檢出新化合物的機(jī)會(huì)；增加了檢出新化合物的機(jī)會(huì)；可能分離得到不同作用機(jī)制的化可能分離得到不同作用機(jī)制的化合物合物 3.3.在眾多生物活性中力求找出最本質(zhì)的作用在眾多生物活性中力求找出最本質(zhì)的作用 天然藥物或中藥在臨床治療上可能作用于多個(gè)靶點(diǎn)，因而具有多種療效，即表現(xiàn)出多方面的活天然藥物或中

19、藥在臨床治療上可能作用于多個(gè)靶點(diǎn)，因而具有多種療效，即表現(xiàn)出多方面的活性。研究者應(yīng)當(dāng)力求找出其中最本質(zhì)的作用，選擇建立反映臨床治療作用特點(diǎn)、且效果與之平行的性。研究者應(yīng)當(dāng)力求找出其中最本質(zhì)的作用，選擇建立反映臨床治療作用特點(diǎn)、且效果與之平行的活性測(cè)試體系，才有可能追蹤分離出目的活性成分或甚至有效成分。活性測(cè)試體系，才有可能追蹤分離出目的活性成分或甚至有效成分。 中藥或天然藥物名稱 生理活性活性篩選體系 目標(biāo)活性物質(zhì) 烏頭 (Aconitum spp.)強(qiáng)心強(qiáng)心、利尿興奮、鎮(zhèn)痛鎮(zhèn)痛Yagi-Hartung法（離體蛙心） 去甲基烏藥堿去甲基烏藥堿 （Higenamine) 烏頭堿類烏頭堿類大黃（R

20、heum coreanum及R. palmatum的雜交種）健胃、緩瀉緩瀉 致瀉活性(小鼠) 番瀉苷番瀉苷 (sennoside)(sennoside) 茵陳蒿 (Artemisia capillaris) 利膽、抗炎 膽汁分泌促進(jìn)作用 茵陳色原酮 (capillarisin)等 貝(日本產(chǎn)) (Babylonia japonica) 口渴、視力減退、瞳孔散大瞳孔散大、言語(yǔ)障礙、便秘 atropine定量法（小鼠散瞳率試驗(yàn)) surugatoxin軟紫草 (Arnebia euchroma) 止血、抗炎抗炎、抗菌、抗病毒、抗癌抗癌前列腺素PGE2生合成抑制活性 arteriolearnibin

21、one arnebifuranone shikonins類類 4 4注意正確比較并判斷各個(gè)餾分的活性注意正確比較并判斷各個(gè)餾分的活性 分離過(guò)程中總是按分離過(guò)程中總是按“等劑量不等強(qiáng)度原則等劑量不等強(qiáng)度原則”對(duì)每一階對(duì)每一階段得到的餾分進(jìn)行活性定量評(píng)估，并與母體作比較，追蹤段得到的餾分進(jìn)行活性定量評(píng)估，并與母體作比較，追蹤活性最強(qiáng)餾分。一般，活性最強(qiáng)餾分。一般，如與母體比較，所得幾個(gè)子體活性如與母體比較，所得幾個(gè)子體活性強(qiáng)弱參差不齊，則示活性分離與物質(zhì)分離平行，預(yù)示可能強(qiáng)弱參差不齊，則示活性分離與物質(zhì)分離平行，預(yù)示可能得到良好的分離效果；得到良好的分離效果；如某個(gè)子體活性顯著增強(qiáng)，則示分如某個(gè)子

22、體活性顯著增強(qiáng)，則示分離過(guò)程中可能除去了某種拮抗作用物質(zhì)；離過(guò)程中可能除去了某種拮抗作用物質(zhì)；如果所得各個(gè)子如果所得各個(gè)子體活性均明顯減弱，則提示活性成分可能分解、流散、或體活性均明顯減弱，則提示活性成分可能分解、流散、或因吸附劑發(fā)生不可逆吸附所致，或因該藥的活性原本為多因吸附劑發(fā)生不可逆吸附所致，或因該藥的活性原本為多組分的綜合作用組分的綜合作用( (相加或相乘相加或相乘) )，故分離后反而導(dǎo)致活性的，故分離后反而導(dǎo)致活性的減弱或喪失。減弱或喪失。具體問(wèn)題宜作具體分析，并在查明原因后采具體問(wèn)題宜作具體分析，并在查明原因后采取相應(yīng)對(duì)策處理。取相應(yīng)對(duì)策處理。 分離過(guò)程中常配合采用各種分離手段以求

23、獲得良好的分離過(guò)程中常配合采用各種分離手段以求獲得良好的分離效果，并應(yīng)盡量避免采用可能導(dǎo)致活性成分分解或不分離效果，并應(yīng)盡量避免采用可能導(dǎo)致活性成分分解或不可逆吸附的方法或試劑?？赡嫖降姆椒ɑ蛟噭?。 四、代謝研究四、代謝研究 (1)藥物的代謝研究結(jié)果又往往給新藥研究提供信息。藥物的代謝研究結(jié)果又往往給新藥研究提供信息。由于藥物的體內(nèi)過(guò)程不同，有些藥物轉(zhuǎn)化后，活性更高，有些轉(zhuǎn)化后則失活，從而可以幫助我們提供新藥設(shè)計(jì)的重要知識(shí)。(2)植物成分的生物轉(zhuǎn)化，可為一些化合物的結(jié)構(gòu)修植物成分的生物轉(zhuǎn)化，可為一些化合物的結(jié)構(gòu)修飾提供思路，提供新穎的先導(dǎo)化合物。飾提供思路，提供新穎的先導(dǎo)化合物。 五、天然藥

24、物的化學(xué)修飾或結(jié)構(gòu)改造五、天然藥物的化學(xué)修飾或結(jié)構(gòu)改造 從天然藥物或中藥中篩選追蹤得到活性化合物只是一從天然藥物或中藥中篩選追蹤得到活性化合物只是一類創(chuàng)新藥物研究的前期階段。類創(chuàng)新藥物研究的前期階段。不少天然活性化合物因?yàn)榇娌簧偬烊换钚曰衔镆驗(yàn)榇嬖谀承┤毕荻y以直接開(kāi)發(fā)利用：在某些缺陷而難以直接開(kāi)發(fā)利用：(1)藥效不理想；藥效不理想；(2)存在一定的毒副作用；存在一定的毒副作用；(3)含量太低，難以從天然原料中取材；含量太低，難以從天然原料中取材；(4)或因結(jié)構(gòu)過(guò)于復(fù)雜，合成也十分困難；或因結(jié)構(gòu)過(guò)于復(fù)雜，合成也十分困難；(5)水溶性差、生物利用度差等等水溶性差、生物利用度差等等因此，我們只能

25、以它們?yōu)橄葘?dǎo)化合物因此，我們只能以它們?yōu)橄葘?dǎo)化合物, ,在經(jīng)過(guò)一系列在經(jīng)過(guò)一系列的化學(xué)修飾或結(jié)構(gòu)改造后，對(duì)得到的衍生物進(jìn)行定量構(gòu)的化學(xué)修飾或結(jié)構(gòu)改造后，對(duì)得到的衍生物進(jìn)行定量構(gòu)-效關(guān)系的比較研究，才有可能發(fā)現(xiàn)比較理想的活性化合物，效關(guān)系的比較研究，才有可能發(fā)現(xiàn)比較理想的活性化合物，并開(kāi)發(fā)成新藥。并開(kāi)發(fā)成新藥。 例例 青蒿素的構(gòu)效關(guān)系研究青蒿素的構(gòu)效關(guān)系研究 六、其他領(lǐng)域的研究六、其他領(lǐng)域的研究 (1)在新藥的研究中在新藥的研究中，深入深入開(kāi)展藥物作用機(jī)制的研究，也開(kāi)展藥物作用機(jī)制的研究，也能為新藥的發(fā)現(xiàn)提供重要的線索能為新藥的發(fā)現(xiàn)提供重要的線索。(2)利用藥物的毒副作用發(fā)現(xiàn)新藥。利用藥物的毒副

26、作用發(fā)現(xiàn)新藥。 實(shí)例一實(shí)例一 紫杉醇的發(fā)現(xiàn)紫杉醇的發(fā)現(xiàn) 1971年：提取分離，結(jié)構(gòu)確定，活性確認(rèn)1975-76年：在多種瘤株上實(shí)驗(yàn)有效；1977年：臨床前研究；1979年：作用機(jī)理探明；1982年：期臨床實(shí)驗(yàn)；1985-86年：期臨床實(shí)驗(yàn)(卵巢癌)；1986年：紫杉醇側(cè)鏈的全合成；1988年：紫杉醇半合成；1990-93年：側(cè)鏈合成方法的改進(jìn)；1992年：FDA批準(zhǔn)；1994年：首次全合成。 紅豆杉莖12kg濃縮物95%乙醇提取氯仿-甲醇萃取水層(棄去) 氯仿30管液滴逆流層析8-18管(14g,T/C=30%,23mg/kg)400管液滴逆流層析170-189管 (2.4g,T/C=16%,

27、15mg/kg)析出Taxol(0.5g,T/C=24%,5mg/kg)加苯研磨10974321HOCOCH3OOCOC C C OOHH HNHCOOCH3COOOHOHOHH研究實(shí)例二研究實(shí)例二 喜樹(shù)堿的發(fā)現(xiàn)喜樹(shù)堿的發(fā)現(xiàn) 喜樹(shù)原料12kg熱正己烷提取正己烷提取物植物殘?jiān)?無(wú)活性,棄去)乙醇提取用4倍體積的氯仿+1/4體積的5%含水乙醇處理氯仿層(222g)(高活性)水層氯仿處理氯仿層(32g)水層(高活性)(低活性)NNOOOOHABCDF12310987654141211181920211716第三節(jié)第三節(jié) 天然藥物化學(xué)研究方法天然藥物化學(xué)研究方法 在開(kāi)展某一天然藥物的研究中，研究開(kāi)始前

28、，必須進(jìn)在開(kāi)展某一天然藥物的研究中，研究開(kāi)始前，必須進(jìn)行充分的調(diào)查研究。這其中包括行充分的調(diào)查研究。這其中包括實(shí)地調(diào)查，資源調(diào)研實(shí)地調(diào)查，資源調(diào)研和文獻(xiàn)調(diào)研和文獻(xiàn)調(diào)研三個(gè)方面。三個(gè)方面。 實(shí)地調(diào)查實(shí)地調(diào)查 包括臨床療效的考察和實(shí)際應(yīng)用效果(民間使用情況)：(1)由于影響植物藥功效的因素較多，在確定其功效的基礎(chǔ)上第一步就是確定品種類別，由于植物或中藥同名異物和同物異名現(xiàn)象較多；植物的科、屬不同，成分各異，藥效作用也有很大差別，品種的鑒別、鑒定顯得尤為重要，如果品種沒(méi)有鑒別準(zhǔn)確，實(shí)驗(yàn)結(jié)果很難會(huì)有好的重現(xiàn)性。(2)考察其生長(zhǎng)環(huán)境，采收季節(jié)，加工與炮制方法等，這些因素都會(huì)影響藥物的療效。同時(shí)，這些因素

29、的考察，還會(huì)為研究有效成分的提取、分離方法提供參考。 .資源調(diào)查資源調(diào)查 植物的生長(zhǎng)環(huán)境、資源分布、品種的多少植物的生長(zhǎng)環(huán)境、資源分布、品種的多少都是研究天然藥物要考慮的因素。對(duì)于資源少的植物藥材，都是研究天然藥物要考慮的因素。對(duì)于資源少的植物藥材，在研究的開(kāi)始階段，就要考慮到如何解決資源缺乏的問(wèn)題。在研究的開(kāi)始階段，就要考慮到如何解決資源缺乏的問(wèn)題。 文獻(xiàn)調(diào)研文獻(xiàn)調(diào)研 當(dāng)確定了要研究的對(duì)象后，有關(guān)該植物本身當(dāng)確定了要研究的對(duì)象后，有關(guān)該植物本身的研究；相關(guān)近緣植物的研究等都可以通過(guò)文獻(xiàn)的調(diào)研得的研究；相關(guān)近緣植物的研究等都可以通過(guò)文獻(xiàn)的調(diào)研得到解決，通過(guò)文獻(xiàn)的調(diào)研，可以了解該植物中或其近緣植

30、到解決，通過(guò)文獻(xiàn)的調(diào)研，可以了解該植物中或其近緣植物中所含有的化合物類別，研究方法，為接下來(lái)的研究提物中所含有的化合物類別，研究方法，為接下來(lái)的研究提供研究思路和啟示。供研究思路和啟示。 二、植物化學(xué)分預(yù)試二、植物化學(xué)分預(yù)試 預(yù)試預(yù)試就是利用各類化學(xué)成分的溶解特征、化學(xué)反應(yīng)特就是利用各類化學(xué)成分的溶解特征、化學(xué)反應(yīng)特征來(lái)初步判斷某類化學(xué)成分有無(wú)的預(yù)備性試驗(yàn)。征來(lái)初步判斷某類化學(xué)成分有無(wú)的預(yù)備性試驗(yàn)。植物中化學(xué)成分復(fù)雜，類型繁多，在研究植物有效成植物中化學(xué)成分復(fù)雜，類型繁多，在研究植物有效成分時(shí)，無(wú)論是重復(fù)文獻(xiàn)方法制備已知成分或是探索未知成分時(shí)，無(wú)論是重復(fù)文獻(xiàn)方法制備已知成分或是探索未知成分，在

31、提取分離之前都應(yīng)對(duì)樣品中所含成分及特性，存在分，在提取分離之前都應(yīng)對(duì)樣品中所含成分及特性，存在狀態(tài)及數(shù)量有初步的或者盡可能全面的了解，然后根據(jù)所狀態(tài)及數(shù)量有初步的或者盡可能全面的了解，然后根據(jù)所含成分的性質(zhì)設(shè)計(jì)化合物提取與分離的具體方法。含成分的性質(zhì)設(shè)計(jì)化合物提取與分離的具體方法。預(yù)試驗(yàn)的結(jié)果可以幫助我們選擇和建立合理的檢查方法，預(yù)試驗(yàn)的結(jié)果可以幫助我們選擇和建立合理的檢查方法，作為提取過(guò)程中對(duì)特定成分的追蹤和向?qū)?。作為提取過(guò)程中對(duì)特定成分的追蹤和向?qū)А?化學(xué)成分的預(yù)試方法有兩類化學(xué)成分的預(yù)試方法有兩類: :一類為單項(xiàng)預(yù)試法單項(xiàng)預(yù)試法，即根據(jù)工作的需要有重點(diǎn)地從某根據(jù)工作的需要有重點(diǎn)地從某植物

32、中檢查某一類成分植物中檢查某一類成分。如水蒸氣蒸餾法直接檢查揮發(fā)油類成分；用微量升華法檢查葸醌類升華成分；利用強(qiáng)心苷的特征反應(yīng)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)檢查植物中強(qiáng)心苷的存在；利用皂苷的發(fā)泡性和溶血性能檢查皂苷的存在。 另一類方法為系統(tǒng)預(yù)試系統(tǒng)預(yù)試，系統(tǒng)預(yù)試的目的在于盡可能盡可能詳盡而全面的檢查植物中存在的成分。詳盡而全面的檢查植物中存在的成分。 三、化學(xué)成分的分離三、化學(xué)成分的分離 1部位分離部位分離 即利用極性由小到大的各種有機(jī)溶劑連利用極性由小到大的各種有機(jī)溶劑連續(xù)提取，將化學(xué)成分分為極性不同的各個(gè)部位。續(xù)提取，將化學(xué)成分分為極性不同的各個(gè)部位。 部位分離法有許多種，如部位分離法有許多種，如Dragendoff提出的石油醚、乙提出的石油醚、乙醚、氯仿、乙醇、水、酸性水、堿性水七部位法。刈米達(dá)醚、氯仿、乙醇、水、酸性水、堿性水七部位法。刈米達(dá)夫提出的石油醚、苯、醋酸乙酯、乙醇四部位法，夫提出的石油醚、苯、醋酸乙