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1、分子生物學(xué)題型:名詞解釋10*2分;填空35*1分;簡答5*7分;論述1*10分第二章核酸的結(jié)構(gòu)與功能1 .簡述細(xì)胞的遺傳物質(zhì),怎樣證明DNA是遺傳物質(zhì)答:基因?qū)W說:基因作為遺傳因子決定著生物的性狀,并能自我復(fù)制,穩(wěn)定地遺傳給后代。對于DNA是遺傳物質(zhì)的認(rèn)識經(jīng)歷了三個階段:肺炎雙球菌實驗:說明性狀可遺傳給后代;T2噬菌體侵染E.coli135S、32P同位素示蹤法】遺傳物質(zhì)是核酸,不是蛋白質(zhì);DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型:決定DNA分子具有自我復(fù)制和親代向子代傳遞遺傳信息能力。2 .研究DNA的一級結(jié)構(gòu)有什么重要生物學(xué)意義(1)核酸的一級結(jié)構(gòu)是指分子中的脫氧核甘酸/核甘酸的排列順序即堿基排列順序。即一
2、個核甘酸的戊糖3'醇羥基和另一個核甘酸的5'磷酸基形成3',5'-磷酸二酯鍵。(2) DNA分子一級結(jié)構(gòu)定則: 不同物種間DNA堿基組成一般是不同的;同一物種不同組織中的DNA樣品的堿基組成相同;一個物種的DNA堿基組成不會因個體的年齡營養(yǎng)狀況和環(huán)境改變而改變; 任何一個DNA樣品中,A=T,C=G,A+C=T+G,A+C+G+T=100%; 多聚核甘酸均有5'末端和3'末端;一級結(jié)構(gòu)決定了二級結(jié)構(gòu),而二級結(jié)構(gòu)又決定和影響著一級結(jié)構(gòu)的信息功能,兩者處于動態(tài)平衡中;堿基順序就是遺傳信息存儲的分子形式。3.DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)有哪些形式,說明其主要特點和
3、區(qū)別答:(1)穩(wěn)定結(jié)構(gòu)因素:堿基對之間形成的氫鍵;堿基堆積力;正負(fù)電荷作用。(2) 結(jié)構(gòu)特征:主鏈:兩主鏈以反平行方式盤繞,脫氧核糖和磷酸通過3',5磷酸二酯鍵連成骨架,磷酸與核糖主鏈位于螺旋外側(cè),堿基排列在螺旋內(nèi)側(cè)。堿基配對:喋吟與喀咤配對,A、T形成兩個氫鍵,C、G形成三個氫鍵-堿基互補(bǔ);螺旋參數(shù):兩個相鄰堿基對之間繞螺旋軸旋轉(zhuǎn)夾角為36。,旋轉(zhuǎn)一圈包括10個核甘酸;大溝與小溝一r大溝(2.2nm)空間位阻較小,堿基種類差異易于識別,DNA結(jié)構(gòu)蛋白識別雙螺旋結(jié)構(gòu)的特異區(qū)域。位于相毗鄰的雙股之間。匚小溝(1.2nm)位于雙螺旋的互補(bǔ)鏈之間(3)雙螺旋結(jié)構(gòu)類型:-DNA分子的多態(tài)性。B
4、型雙螺旋(B-DNA):生物體內(nèi)絕大多數(shù)DNA以B型雙螺旋形式存在;(右手雙螺旋)A型雙螺旋(A-DNA):右手雙螺旋;Z型雙螺旋(Z-DNA):人工合成,左手雙螺旋。4 .簡述組蛋白有哪五個方面的特點答:(1)真核生物染色體蛋白質(zhì)主要為組蛋白和非組蛋白;(2)組蛋白有5種,含量豐富,是染色體的結(jié)構(gòu)蛋白,為Hi,H2A,H2B,H3和H4;(3)組蛋白在不同物種都具有高度的保守性;(4)組蛋白重要特性:進(jìn)化上極端保守;有組織特異性;肽鏈上的氨基酸分布不對稱;組蛋白有被修飾的現(xiàn)象;富含Lys的組蛋白H5;(5)核小體:真核生物染色質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)單位,由四種組蛋白H2A,H2B,H3和H4構(gòu)成八聚體
5、,作為核小體的核心顆粒,再由DNA纏繞在顆粒表面。5 .簡述細(xì)胞內(nèi)RNA的分布及結(jié)構(gòu)特點答:(1)RNA,通常為單鏈線型分子,在分子內(nèi)可自身回折形成局部的雙螺旋,進(jìn)而折疊不同復(fù)雜度的高度結(jié)構(gòu),除部分RNA外,細(xì)胞中絕大多數(shù)RNA都與蛋白質(zhì)形成核蛋白復(fù)合物。(2)mRNA,存在于細(xì)胞質(zhì)中:分子生物學(xué)A真核生物RNA是單順反子,即每種mRNA分子只編碼一種蛋白質(zhì)信息,原核細(xì)胞的mRNA多為多順反子,即一個mRNA分子含幾種蛋白質(zhì)信息,編碼幾種P50;B一般不穩(wěn)定,代謝活躍,半衰期短;C含量最少,將核內(nèi)DNA轉(zhuǎn)錄至核糖體,指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成;D種類多,作為不同蛋白質(zhì)合成的模板;E5端帽子結(jié)構(gòu)和3'
6、;pd歸mRNA穩(wěn)定性直接相關(guān)。tRNA,A含量相對多,但分子量最少,轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸;B三葉草結(jié)構(gòu)rRNA,A含量最多,非單獨游離存在,與多種小分子蛋白結(jié)合成核糖體顆粒形成;B所有核糖體由大小不同的兩個亞基組成真核:80S(由60S和40S組成);原核:70S(由50S和30S組成)C各種rRNA的一級結(jié)構(gòu)中核甘酸殘基數(shù)及順序都不同,有特定二級結(jié)構(gòu);DrRNA分子內(nèi)含大量的莖環(huán)結(jié)構(gòu)。6 .簡述細(xì)胞內(nèi)RNA的結(jié)構(gòu)特點以及與DNA的區(qū)別答:(1)RNA,通常為單鏈線型分子,在分子內(nèi)可自身回折形成局部的雙螺旋,進(jìn)而折疊不同復(fù)雜度的高度結(jié)構(gòu),除部分RNA外,細(xì)胞中絕大多數(shù)RNA都與蛋白質(zhì)形成核蛋白復(fù)合物。
7、(2)區(qū)別:堿基組成與含量不同:RNA中A、G、C、U,在DNA中A、C、G、F,RNA中有許多稀有堿基或微量堿基,而DNA分子中除個別之外,不存在稀有堿基;RNA分子中核糖為D-核糖,DNA中則為D-2-脫氧核糖;RNA中的堿基不嚴(yán)格遵守Chergaff規(guī)則。絕大多數(shù)RNA分子為多聚核甘酸單鏈,但由于分子內(nèi)的部分互補(bǔ)核甘酸之間通過氫鍵配對形成雙鏈區(qū),故存在局部的雙螺旋。在堿性溶液中,RNA分子較敏感,易被水解為2',3'-環(huán)狀單核甘酸,而DNA由于不能形成2',3'-環(huán)狀單核甘酸磷酸酯,對堿性溶液比較穩(wěn)定,不易被水解;RNA的Tm大大低于DNA,增色效應(yīng)不明顯
8、;根據(jù)中心法則,RNA是遺傳信息的傳遞者和表達(dá)者,大多數(shù)情況下,遺傳信息以DNA到RNA,最后傳遞給蛋白質(zhì),表達(dá)為蛋白質(zhì)或酶;某些RNA病毒以RNA為遺傳信息載體,復(fù)制模板;某些RNA具有催化結(jié)構(gòu),稱為核酶。7 .什么是miRNA,有什么作用?概念:微小RNA(miRNA),指植物和動物細(xì)胞中自然產(chǎn)生的一類小分子RNA。功能:與特異性mRNA的3'-UTR堿基配對,通過阻止這些mRNA的翻譯來使沉默基因而不表達(dá),或?qū)е履承┠繕?biāo)RNA降解。miRNA可通過NB被檢測。8 .檢測核酸變性的定性和定量方法是什么?具體參數(shù)如何?答:(1)概念:凡是破壞雙螺旋結(jié)構(gòu)的作用力的因素都可使DNA雙螺旋
9、解鏈,導(dǎo)致DNA變性;(2)引起變性:加熱極端PH有機(jī)溶劑,尿素和酰胺等。(3)變性的最簡單的定性和定量方法:紫外吸收光譜變化;(4)變性后:溶液粘度下降,沉淀速度增加,浮力密度上升,紫外吸收高;(5)Tm值大小影響因素:DNA均一性、G-C堿基對含量、介質(zhì)中離子強(qiáng)度。9 .核酸的分子雜交一般有幾種類型?它們分別用于檢測哪些物質(zhì)?答:濾膜雜交分類:Southern印跡法:檢測DNA;Northern印跡法:檢測RNA;Western印跡法:檢測蛋白質(zhì),常用抗原-抗體的特異反應(yīng)。第三章基因與基因組的結(jié)構(gòu)與功能1.了解基因命名的原則,符號特征(1)原則:分子生物學(xué)1 .用三個小寫英文斜體字母表示基
10、因的名稱2 .在三個小寫英文斜體字母后面加上一個斜體大寫字母表示其不同的基因型,全部正體表蛋白產(chǎn)物和表型3 .對于質(zhì)粒和其他染色體成分,如果是自然產(chǎn)生的質(zhì)粒,用三個正體字母表示,第一個字母大寫,如C01E1.如果是重組質(zhì)粒,則在兩個大寫字母前加一個p,大寫字母表示構(gòu)建該質(zhì)粒的研究者或單位。4 .對于酵母,一般用三個大寫斜體字母表示基因的功能,后面的數(shù)字表示不同的基因型。(2)符號特征:1 .每個基因的符號具有唯一性2 .基因符號是基因名稱的縮寫,一般不超過6個字母3 .基因符號應(yīng)由阿拉伯?dāng)?shù)字與拉丁字母組成而成4 .基因符號不應(yīng)含標(biāo)點符號5 .基因符號不應(yīng)以G為末端6 .基因符號不涉及其2掌握原
11、核與真核生物基因組的一般特點(1)原核生物基因組的特點:1.基因組通常僅由一條環(huán)狀雙鏈DNA分子組成。2.基因組中只有1個復(fù)制起點。3 .具有操縱子結(jié)構(gòu)。4.細(xì)菌的結(jié)構(gòu)基因一般無重疊現(xiàn)象。5 .原核基因的基因序列是連續(xù)的,無內(nèi)含子結(jié)構(gòu)。6 .編碼區(qū)和非編碼區(qū)(主要是調(diào)控序列)在基因組中約各占50%。7 .基因組中的重復(fù)序列很少。8 .具有編碼同功酶的基因這是一類結(jié)構(gòu)不完全相同,而功能相同的基因。9 .細(xì)菌基因組中存在可移動的DNA序列,包括插入序列和轉(zhuǎn)座子。10 .原核基因的基本結(jié)構(gòu)特點:啟動子、操縱基因、調(diào)控序列、結(jié)構(gòu)基因、終止子。(2)真核生物基因組的特點:1 、基因組分子質(zhì)量大2 、一般
12、有多條線性的染色體,含多個復(fù)制起點。3 、核內(nèi)DNA與蛋白質(zhì)穩(wěn)定結(jié)合,組裝成染色體結(jié)構(gòu)。4 、有核膜,使轉(zhuǎn)錄和翻譯在時空上有分隔。5有大量重復(fù)序列。6 、蛋白質(zhì)基因一般為單拷貝,轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為單順反子mRNA,其基因表達(dá)有眾多調(diào)控因子參與。7 、絕大多數(shù)真核生物基因都含有內(nèi)含子。8)、存在可移動的DNA序列。3 .名詞解釋:重疊基因、斷裂基因、內(nèi)含子、外顯子、假基因、ORF重疊基因:是指具有部分共用核甘酸序列的基因,即同一段DNA攜帶了兩種或兩種以上不同蛋白質(zhì)的編碼信息。斷裂基因:基因內(nèi)部插入了不編碼序列,使一個完整的基因分隔成不連續(xù)的若干區(qū)段,這樣的基因叫做斷裂基因或不連續(xù)基因。外顯子:在不連續(xù)
13、基因中有編碼功能的區(qū)段成為外顯子。內(nèi)含子:內(nèi)含子是一個基因中非編碼DNA片段,它分開相鄰的外顯子。假基因:具有與功能基因相似的序列,但由于有許多突變以致失去了原有的功能,所以假基因是沒有功能的基因。開放閱讀框ORF:是指從起始密碼子起到終止密碼子止的一段連續(xù)的密碼子區(qū)域,它是觀察DNA序列。當(dāng)沒有已知的蛋白質(zhì)產(chǎn)物時,該區(qū)域被稱為可讀框,而當(dāng)確知該可讀框編碼某一確定蛋白質(zhì)時,則稱為編碼區(qū)。一個可讀框是潛在的編碼區(qū)。4 .分別寫出病毒、原核、真核生物基因組的概念和特點,比較它們的異同點。(1)病毒基因組的特點:分子生物學(xué)種類單一;單倍體基因組:每個基因組在病毒中只出現(xiàn)一次;形式多樣;大小不一;基因
14、重疊;動物/細(xì)菌病毒與真核/原核基因相似:內(nèi)含子;具有不規(guī)則的結(jié)構(gòu)基因;基因編碼區(qū)無間隔:通過宿主及病毒本身酶切;無帽狀結(jié)構(gòu);結(jié)構(gòu)基因沒有翻譯起始序列。(2)原核生物基因組的特點:1.基因組通常僅由一條環(huán)狀雙鏈DNA分子組成。2.基因組中只有1個復(fù)制起點。3.具有操縱子結(jié)構(gòu)。4.細(xì)菌的結(jié)構(gòu)基因一般無重疊現(xiàn)象。5 .原核基因的基因序列是連續(xù)的,無內(nèi)含子結(jié)構(gòu)。6 .編碼區(qū)和非編碼區(qū)(主要是調(diào)控序列)在基因組中約各占50%。7 .基因組中的重復(fù)序列很少。8.具有編碼同功酶的基因這是一類結(jié)構(gòu)不完全相同,而功能相同的基因。9.細(xì)菌基因組中存在可移動的DNA序列,包括插入序列和轉(zhuǎn)座子。10.原核基因的基本
15、結(jié)構(gòu)特點:啟動子、操縱基因、調(diào)控序列、結(jié)構(gòu)基因、終止子。(3)真核生物基因組的特點:1)、基因組分子質(zhì)量大2)、一般有多條線性的染色體,含多個復(fù)制起點。3)、核內(nèi)DNA與蛋白質(zhì)穩(wěn)定結(jié)合,組裝成染色體結(jié)構(gòu)。4)、有核膜,使轉(zhuǎn)錄和翻譯在時空上有分隔。5)有大量重復(fù)序列。6)、蛋白質(zhì)基因一般為單拷貝,轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為單順反子mRNA,其基因表達(dá)有眾多調(diào)控因子參與。7)、絕大多數(shù)真核生物基因都含有內(nèi)含子。8)、存在可移動的DNA序列。第四章DNA的復(fù)制1 .什么是DnaA蛋白?DnaA蛋白有哪三個作用?答:DnaA蛋白是DnaA基因的產(chǎn)物,DnaA蛋白是起始因子,它參與DNA復(fù)制的起始有三個作用:一、只與處
16、于負(fù)超螺旋的DNA分子結(jié)合,在ATP參與下,結(jié)合于OriC中的4個9聚體形成起始復(fù)合物;二、促使OriC中的三個富含AT的13聚體重復(fù)序列區(qū)解鏈,也需ATP參與,HU對此過程有促進(jìn)作用;三、引導(dǎo)DnaB-DnaC復(fù)合物進(jìn)入局部解鏈區(qū),形成引發(fā)前體復(fù)合物。2.DNA復(fù)制一般采取哪些方式?答:。形復(fù)制、滾環(huán)式復(fù)制、D-環(huán)式復(fù)制,。形復(fù)制是對雙鏈環(huán)狀分子的雙向復(fù)制;滾環(huán)式復(fù)制是單向復(fù)制,是許多病毒,細(xì)菌因子及真核生物中基因放大的基礎(chǔ),入噬菌體復(fù)制后期,3X174等具有單鏈環(huán)形基因組DNA的E.coli噬菌體采用滾環(huán)復(fù)制機(jī)制,其雙鏈復(fù)制型DNA分子能產(chǎn)生多拷貝的單鏈子代DNA分子。D-環(huán)式復(fù)制又稱取代
17、環(huán)復(fù)制,是單向復(fù)制方式,大多數(shù)線粒體DNA以這種方式復(fù)制。3列出原核生物DNA復(fù)制的酶和蛋白因子體系?(不確定答案)答:DNA聚合酶I、II、III、IV、V;DNA連接酶4DNA聚合酶5'-'的活性有哪三個作用?答:PolI的5'f3'核酸外切酶活性有3個作用:一、作用于雙鏈DNA中的一條單鏈的某個切口處,從5'端水解下單核甘酸或寡核甘酸片段,因此,PolI在切除由紫外線照射而形成的喀咤二聚體中起重要作用;二、用于在體外通過切口平移標(biāo)記DNA探針;三、切除在DNA復(fù)制合成中5'端的RNA引物。5DNA聚合酶III具有哪三個復(fù)制特點從而使其成為D
18、NA復(fù)制主要的酶?答:一、都需要*II板指導(dǎo),以4種脫氧核糖核甘三磷酸作為底物,且需要有3'-OH引物鏈存在,聚合反應(yīng)按5'-3'方向進(jìn)行;二、都具有3'-5'外切酶活性,在聚合過程中起校對作用,但都無5'-3'外切酶活性;三都是多亞基酶,polII和polIII共用了許多亞基,也有些細(xì)微的區(qū)別。6原核生物的SSB蛋白與DNA的結(jié)合表現(xiàn)出怎樣的協(xié)同效應(yīng)?答:SSB蛋白與DNA結(jié)合有明顯的協(xié)同效應(yīng),一個SSB的結(jié)合使其后面的結(jié)合力提高了1000倍,SSB還能特異地促進(jìn)其同源蛋白DNA聚合酶的作用。7真核細(xì)胞中DNA復(fù)制有哪三個水平的調(diào)控?答
19、:一、細(xì)胞生活周期調(diào)控,又稱限制點調(diào)控,即決定細(xì)胞停留在G期還是進(jìn)入S期;二、染色體水平調(diào)控,決定不同染色體或同一染色體不同部位的復(fù)制子按一定順序在S期起始復(fù)制。三、復(fù)制子水平的調(diào)控,決定復(fù)制的起始與否,這種調(diào)控從單細(xì)胞生物到高等生物都是高度保守的。4分子生物學(xué)8簡述端粒的復(fù)制過程?答:端粒的復(fù)制,通過對四膜蟲DNA端粒合成的研究發(fā)現(xiàn),當(dāng)DNA端粒復(fù)制時,端粒酶催化逆向轉(zhuǎn)錄作用以酶中的RNA為模板端粒的單鏈3'-OH為引物,不斷進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄合成,延伸3'-OH端單鏈。在合成一個拷貝的重復(fù)序列后新合成的TG鏈回折并借非標(biāo)準(zhǔn)堿基配對(GG)形成發(fā)夾結(jié)構(gòu),從而調(diào)整了端粒酶的位置,使逆轉(zhuǎn)
20、錄能繼續(xù)下去。當(dāng)3'-OH單鏈延伸到一定長度,3'-OH端作180#回轉(zhuǎn),這時3'一OH單鏈又作為DNA聚合酶的引物,再以DNA中富含G、T鏈為模合成互補(bǔ)的富含C、A的DNA片段,以填補(bǔ)在DNA末端復(fù)制時,因RNA引物被水解后留下的空隙。最后在新合成的DNA5端切去12-16個核甘酸形成完整的DNA末端結(jié)構(gòu)。9簡述細(xì)菌DNA的復(fù)制過程?大腸桿菌染色體DNA的復(fù)制過程分為3個階段:起始、延伸和終止。復(fù)制體:在DNA合成的生長點即復(fù)制叉上,分布著各種各樣與復(fù)制有關(guān)的酶和蛋白質(zhì)因子,它們構(gòu)成的復(fù)合物稱為復(fù)制體。DNA復(fù)制的階段表現(xiàn)在其復(fù)制全結(jié)構(gòu)的變化上一、大腸桿菌的起始步驟簡
21、單描述:P89預(yù)引發(fā):解旋解鏈,形成復(fù)制叉:拓?fù)洚悩?gòu)酶和解鏈酶;單鏈DNA結(jié)合蛋白(SSB);引發(fā)體組裝。引發(fā):在引發(fā)酶的催化下,以DNA鏈為模板,合成一段短的RNA引物。二、復(fù)制的延伸在引物RNA合成基礎(chǔ)上,進(jìn)行DNA鏈的5'3'方向合成,前導(dǎo)鏈連續(xù)地合成出一條長鏈。后隨鏈的模板形成回環(huán)引進(jìn)5'3'方向的合成,形成岡崎片段。引發(fā)體向前移動,解開新的局部雙螺旋,形成新的復(fù)制叉,隨從鏈重新合成RNA引物,繼續(xù)進(jìn)行鏈的延長。去除RNA引物后,片段間形成了空隙,DNA聚合酶作用使各個片段靠近。在連接酶作用下,各片段連接成為一條長鏈。三、復(fù)制的終止復(fù)制叉向前推移,最后在
22、終止區(qū)相遇并停止復(fù)制,復(fù)制體解體,最后前導(dǎo)鏈與隨從鏈分別與各自的模板形成兩個子代DNA分子,到此復(fù)制過程就完成了。第五章DNA的損傷、修復(fù)和基因突變1.什么是DNA的損傷?DNA結(jié)構(gòu)的改變有哪兩種類型?其危害有哪些?概念:DNA損傷是指在生物體生命過程中DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)發(fā)生的任何改變。分類:DNA結(jié)構(gòu)發(fā)生的改變主要分為兩種:單個堿基的改變一一只影響DNA的序列而不影響整體構(gòu)象;雙螺旋結(jié)構(gòu)的異常扭曲對DNA復(fù)制或轉(zhuǎn)錄可產(chǎn)生生理性傷害。2 .化學(xué)因素引起的DNA損傷主要有哪幾種?寫出要點。烷化劑對DNA的損傷有兩類烷化劑:單功能烷化劑、雙功能烷化劑。堿基類似物對DNA的損傷常見的堿基類似物:5-澳
23、尿喀咤(5-BU)、2氫基喋吟(2-AP)在某些植物體的代謝過程中,能產(chǎn)生個別的毒性化合物,其中包括DNA損傷劑3 .什么是SOS應(yīng)急反應(yīng)?SOS反應(yīng)由什么物質(zhì)引起?其意義如何?SOS反應(yīng)是細(xì)胞DNA受到損傷或¥燈系統(tǒng)受到抑色的緊急”況下,為求手存而出現(xiàn)的應(yīng)急效應(yīng)。SOS反應(yīng)包括誘導(dǎo)IDNA損傷修)正變效應(yīng)、I細(xì)向分裂的5制等。細(xì)胞店變可能qSOS反應(yīng)有關(guān)。4 .基因突變的概念是什么?簡要寫出基因突變的幾種類型。什么是突變熱點?概念:基因突變是在基因內(nèi)的遺傳物質(zhì)發(fā)生可遺傳的結(jié)構(gòu)和數(shù)量的變化,通常產(chǎn)生一定的表型。廣義的突變包括刈色體畸變和韭時突變。|遺傳重組也導(dǎo)致可遺傳的變異。突變方式
24、:1、堿基置換2、點突變(轉(zhuǎn)換或顛換)3、插入突變4、移碼突變:DNA序列中堿基增加或減少,使這一位置后的編碼發(fā)生位移(密碼子改變)的現(xiàn)象。分子生物學(xué)轉(zhuǎn)換:一個喋吟被另一個喋吟所替代,或一個喀咤被另一個喀咤所替代。分子生物學(xué)例:ATAATGCCCCCT顛換:一個喋吟被一個喀咤所替代,或一個喀咤被另一個喋吟所替代。例:ATAATCCCTCCA第六章DNA的重組與轉(zhuǎn)座1 .簡述DNA重組的概念與意義。概念:DNA分子內(nèi)或分子間發(fā)生遺傳信息的重新組合,稱為遺傳重組,或基因重排。產(chǎn)物為重組體意義:能迅速增加群體的遺傳多樣性;使有利突變與不利突變分開,通過優(yōu)化組合積累有意義的遺傳信息.分類:根據(jù)對DNA
25、序列和所需蛋白質(zhì)因子的要求,可以把重組分為:同源重組、位點特異重組、轉(zhuǎn)座重組和異常重組。2 .DNA重組包括哪些過程?與DNA重組有關(guān)的酶主要有哪些?一、DNAM組Holliday模型簡要步驟:(1)兩條同源染色體DNA相互靠近并排列;(2)兩個同源DNA分子之一發(fā)生雙鏈斷裂;(3)斷裂后形成單鏈3'游離端,后者侵入到雙鏈DNA內(nèi),尋找同源區(qū)域并配對結(jié)合,產(chǎn)生短的鏈置換區(qū);(4)形成Holliday中間體;(5)通過RuvA和RuvB引發(fā)分支遷移,產(chǎn)生異源雙鏈DNA;(6)通過RuvC形成拆分口,將四鏈DNA復(fù)合體按不同方向拆分,形成片段重組體和拼接重組體。二、與DNA1組有關(guān)的酶:R
26、ecBCEa酸酶(外切核酸酶V)、RecA蛋白、Ruv蛋白(RuvA蛋白和RuvB蛋白)、RuvC蛋白、DNA聚合酶、DNA連接酶。3 .簡述同源重組過程,什么是Holliday模型和分支遷移?什么是RecBCD蛋白?什么是Cro蛋白?它們有什么重要作用?同源重組過程:由兩條同源區(qū)的DNA分子,通過配對、鏈斷裂和在連接而產(chǎn)生的片段之間交換的過程。Holliday模型:同源重組分子模型分支遷移:兩條DNA分子之間形成的交叉點可以沿DNA移動。RecBCDg白:RecBRecCRecD基因的產(chǎn)物;作用:具有DNA解旋酶活性,具有外切雙鏈和單鏈的活性,具有單鏈內(nèi)切核酸酶的活性。Cro蛋白:是cr建因
27、編碼的一種阻遏蛋白,是入噬菌體侵入宿主細(xì)胞后進(jìn)入裂解循環(huán)的關(guān)鍵調(diào)控蛋白。作用:Cro蛋白抑制cI基因的表達(dá)以及從Pl和Pr起始的早期基因轉(zhuǎn)錄,當(dāng)Cro蛋白占優(yōu)勢時噬菌體進(jìn)入繁殖周期,并導(dǎo)致宿主細(xì)胞裂解。4 .特異位點重組有幾種方式,簡要寫出過程。存在:廣泛存在于各類細(xì)胞中,發(fā)生在某個特定的(基因位點)短DNA序列內(nèi),有特別的酶和輔助因子對其識別和作用。方式:結(jié)果決定于重組位點的位置和方向,有4種方式:1 1)重組位點位于不同的DNA分子上,重組發(fā)生單個位點交換2 2)重組位點在不同的DNA分子上發(fā)生雙位點交換3 3)在同一條染色體DNA分子內(nèi),當(dāng)重組位點以反方向存在時重組發(fā)生倒位4 當(dāng)重組位點
28、以相同方向存在同一條染色體DNA分子內(nèi),重組發(fā)生切除。特點:基因重組是相互的,參與重組的兩個DNA片段是雙向互換的。DNA分子可以發(fā)生一次、兩次或多次的片段交換事件。5 .簡述轉(zhuǎn)座子的概念,轉(zhuǎn)座子如何分類?什么是插入序列?(1)轉(zhuǎn)座子:是在基因組中可以移動的一段DNA序列。分子生物學(xué)(2)原核生物轉(zhuǎn)座子類型:插入序列;復(fù)合轉(zhuǎn)座子。(3)最簡單的轉(zhuǎn)座子成為插入序列,簡稱IS因子。IS因子屬于一種較小的轉(zhuǎn)座子,只含有滿足自身轉(zhuǎn)座所需要的因子。6 .轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座的特征有哪些方面?(P129)轉(zhuǎn)座子不以獨立于染色體外的形式存在;能從基因組的一個位點轉(zhuǎn)移到另一個位點;轉(zhuǎn)座過程基本上不依賴與轉(zhuǎn)座子(供體)和
29、靶位點(受體)間的序列同源性;轉(zhuǎn)座子可插入到一個結(jié)構(gòu)基因或調(diào)節(jié)基因內(nèi)引起基因表達(dá)的內(nèi)容改變,如使基因失活轉(zhuǎn)座不依賴recA;轉(zhuǎn)座后靶序列重復(fù);轉(zhuǎn)座子有插入選擇性或區(qū)域性優(yōu)先;轉(zhuǎn)座有排他性;轉(zhuǎn)座有極性效應(yīng);活化臨近的沉默基因。7 .DNA轉(zhuǎn)座引起了什么遺傳學(xué)效應(yīng)?以10-810-3頻率轉(zhuǎn)座引起插入突變;插入位置染色體DNA重排而出現(xiàn)新基因;影響插入位置鄰近基因的表達(dá)使宿主表型改變;轉(zhuǎn)座子插入染色體后引起兩側(cè)染色體畸變;8 .什么是逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子?逆轉(zhuǎn)座子對基因組功能有哪些重要的影響?(P135)(1)逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子:指在轉(zhuǎn)座過程中需要以RNA為中間體,經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄過程再分散到基因組中的一類移動因子。(
30、2)影響:對基因表達(dá)有影響;介導(dǎo)基因重排;在生物進(jìn)化中有重要作用。第七章RNA的轉(zhuǎn)錄合成1 .名詞解釋:轉(zhuǎn)錄、模板鏈、追趕模型、啟動子、上/下游、核心啟動子、啟動子清除轉(zhuǎn)錄:在DNA指導(dǎo)下的RNA合成稱為轉(zhuǎn)錄模板鏈:DNA雙鏈按堿基配對規(guī)律能指引轉(zhuǎn)錄生成RNA的一股單鏈,稱為模板鏈啟動子:RNA聚合酶特異性識別和結(jié)合的DNA序列。含有RNA聚合酶特異性結(jié)合和轉(zhuǎn)錄起始所需要的保守序列位點,啟動子本身不被轉(zhuǎn)錄。核心啟動子:40+20稱為核心啟動子,決定轉(zhuǎn)錄起始的位點。追趕模型:依賴于rho因子的終止子的終止機(jī)制。上下游(查不到)啟動子清除:聚合酶離開啟動子使下一個聚合酶結(jié)合,叫啟動子清除。2 .簡
31、述RNA轉(zhuǎn)錄的一般特點。1 .轉(zhuǎn)錄具有選擇性編碼區(qū)2 .RNA鏈的轉(zhuǎn)錄具有特定起始位點與終止位點,此轉(zhuǎn)錄區(qū)域稱為轉(zhuǎn)錄單位。3 .催化轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的酶是RNA聚合酶4 .被轉(zhuǎn)錄的DNA雙鏈中只有其中一條模板鏈(反義鏈)作為RNA合成的模板。5 .轉(zhuǎn)錄的起始由DNA分子上的啟動子控制。6 .合成RNA的底物是4種5'-核糖核甘三磷酸:5'-ATP、5'-GTP、5'-CTP、5'-UTP。7 .新合成的RNA鏈總是以5'-3'方向進(jìn)行延伸。8 .簡述原核與真核生物基因轉(zhuǎn)錄的差異。1 .原核生物只有一種RNA聚合酶;而真核生物有3種以上的RNA聚合
32、酶。2 .原核生物的初始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物大多數(shù)都是編碼序列,與蛋白質(zhì)的氨基酸序列成線性關(guān)系;而真核生物的初始產(chǎn)物含有內(nèi)含子序列。3 .原核生物的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物直接行使翻譯模板的功能;而真核生物的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物須歷經(jīng)剪接、修飾的轉(zhuǎn)錄后加工成熟過程。分子生物學(xué)4 .原核生物的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA為多順反子,大多數(shù)真核生物的mRNA是單順反子結(jié)構(gòu)。原核生物的RNA轉(zhuǎn)錄與蛋白質(zhì)翻譯相互偶聯(lián),可同時進(jìn)行。5 .細(xì)菌RNA聚合酶的組成、結(jié)構(gòu)、催化特點如何?概念:RNA聚合酶是在DNA模板的指導(dǎo)下,以4種NTP為底物,催化合成新生RNA鏈的酶.。原核生物的RNA聚合酶:亞基分子量36512150618155613二70263310
33、000功能;酶的裝配;與UP和活化因子結(jié)合;催化中心;辨認(rèn)起始點;核生物的RNA聚合酶含有5種類型的亞基。其中仃亞基為起始亞基,控制著起始聚合聚的活性。與酶的復(fù)合體組裝有關(guān);舉例:大腸桿菌(E.coli)的RNA聚合酶是由5種亞基3、3'、和組成的六聚體蛋白質(zhì),分子量為480kD。其中,“233'合稱為核心酶,在試管內(nèi)能催化NTP聚合生成RNA。(T亞基(起始亞基)加上核心'酶(02。'理3)稱為全酶。6 .真核生物的RNA聚合酶是如何分類的?根據(jù)其結(jié)構(gòu)與功能分為哪三類亞基?RNA聚合酶I.RNA聚合酶HRNA聚合酶出7 .真核生物有幾種轉(zhuǎn)錄的啟動子?I型啟動子
34、控制哪種RNA前體基因的轉(zhuǎn)錄?真核生物的三種RNA聚合酶,每一種都有自己的啟動子類型,具體為:1 .RNA聚合酶I的啟動子;即rRNA基因的啟動子,稱I類啟動子。2.1. NA聚合酶H的啟動子;即mRNA基因的啟動子,稱H類啟動子。2.2. NA聚合酶出的啟動子;即tRNA基因的啟動子,稱出類啟動子。I類啟動子分兩部分:P159-40+20稱為核心啟動子,決定轉(zhuǎn)錄起始的位點;156107稱為上游控制元件,影響轉(zhuǎn)錄的頻率。7 .什么是終止子和終止因子?不依賴rho(p)的終止子又稱為什么?有何特點?終止子:是基因DNA分子中決定轉(zhuǎn)錄產(chǎn)3/-OH端、酶分子停止聚合,釋放出已合成RNA分子的位點。終
35、止因子:協(xié)助RNA聚合酶識別終止信號的輔助因子(蛋白質(zhì))則稱為終止因子。(百度)不依賴rho(p)的終止子,又稱為強(qiáng)終止子。特點:無需特異的蛋白質(zhì)就能轉(zhuǎn)錄。8 .比較原核基因的轉(zhuǎn)錄、真核基因轉(zhuǎn)錄有何特點?真核生物的基因轉(zhuǎn)錄類似于E.coli等原核生物,但也存在著以下幾點差異。1)原核算生物只有一種RNA聚合酶參與所有類型的基因轉(zhuǎn)錄,而真核生物有3種以上的RNA聚合酶負(fù)責(zé)不同類型的基因轉(zhuǎn)錄,在細(xì)胞核內(nèi)的定位也不相同。2)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物差異很大。原核生物初始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物大多數(shù)都是編碼序列,與蛋白質(zhì)氨基酸序列基本上呈線性關(guān)系,而真核生物的初始產(chǎn)物有內(nèi)含子序列,成熟的mRNA只占初始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的一小部分。3)真核
36、生物轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物會歷經(jīng)剪接、修飾等轉(zhuǎn)錄后加工成熟過程,而原核生物的初始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物較少經(jīng)過成熟就直接作為成熟的mRNA行使翻譯模板的功能,其他各類RNA則以前體方式合成,然后加工為成熟的rRNA、tRNA等。4)原核生物轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA為多順反子,轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物可直接作為蛋白質(zhì)合成的模板,在轉(zhuǎn)錄合成mRNA的同時蛋白質(zhì)翻譯也在進(jìn)行,即轉(zhuǎn)錄與翻譯相互偶聯(lián)。大多數(shù)真核生物的mRNA是單順反子結(jié)構(gòu),通常一個真核生物的mRNA分子只編碼一個蛋白質(zhì)分子的亞基或只編碼由單肽鏈構(gòu)成的蛋白質(zhì)分子。9 .下列英文縮寫代表什么含義:PIC、TF、PSE、DSE、GTF、TBPPIC:前起始復(fù)合物TF:轉(zhuǎn)錄因子分子生物學(xué)PSE:
37、近端序列元件DSE:遠(yuǎn)端序列元件分子生物學(xué)GTF:通用轉(zhuǎn)錄因子TBP:TATA結(jié)合蛋白(百度)10原核生物RNA轉(zhuǎn)錄歷程歷程:識別模板與結(jié)合;轉(zhuǎn)錄起始;RNA鏈延伸;轉(zhuǎn)錄的終止一、原核生物轉(zhuǎn)錄的起始:(一)轉(zhuǎn)錄起始需解決兩個問題:1. RNA聚合酶必須準(zhǔn)確地結(jié)合在轉(zhuǎn)錄模板的起始區(qū)域。2. DNA雙鏈解開,使其中的一條鏈作為轉(zhuǎn)錄的模板。(二)轉(zhuǎn)錄起始過程P1501 .。因子辨認(rèn)轉(zhuǎn)錄起始點(-35區(qū)的TTGACA序列)2 .RNA聚合酶全酶(a2dEBco)與模板35序列結(jié)合,形成閉合的二元閉合啟動子復(fù)合物。3 .RNA聚合酶向10區(qū)轉(zhuǎn)移,并與之牢固結(jié)合。4 .-10區(qū)DNA雙鏈解開1217bp,
38、形成開放的二5 .在RNA聚合酶眺基催化下形成第一個磷酸二酯鍵,形成三元復(fù)合物(模板酶RNA)。元啟動子復(fù)合物(模板酶)。6 -pppG-OH+NTP>5-pppGpN-OH3'+ppi7 .當(dāng)三元復(fù)合物中RNA長69個核甘酸時,。因子從全酶解離下來,進(jìn)入延長階段。(三)轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物:RNApol成壯律-DNA-pppGpN-OH3'(四)RNA聚合酶有兩個核甘酸結(jié)合位點:一個是起始核昔酸位點;一個是延長核甘酸位點。一般只有喋吟核甘酸填充了起始位點,才能形成第一個磷酸二酯鍵。二、原核生物轉(zhuǎn)錄的延長1 .0亞基脫落,RNA-pol聚合酶核心酶變構(gòu),與模板結(jié)合松弛,沿著DN
39、A模板前移;2 .在核心酶彳用下,NTP不斷聚合,RNA鏈不斷延長。(NMP)n+NTP-(NMP)n+1+PPi3 .堿基配對原則:A-U,T-A,G-C4 .延長中的轉(zhuǎn)錄復(fù)合物也叫轉(zhuǎn)錄空泡。隨著RNA聚合酶前移,轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物RNA不斷移出轉(zhuǎn)錄空泡,已轉(zhuǎn)錄完畢的DNA雙鏈又重新復(fù)合而不再打開。5 .原核生物的轉(zhuǎn)錄和翻譯偶聯(lián)進(jìn)行。三、原核生物轉(zhuǎn)錄的終止和新生RNA鏈的釋放釋放:指RNA聚合酶在DNA模板上停頓下來不再前進(jìn),轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物RNA鏈從轉(zhuǎn)錄復(fù)合物上脫落下來。終止子:提供轉(zhuǎn)錄終止信號的序列稱為終止子。終止信號存在于RNA聚合酶已經(jīng)轉(zhuǎn)錄過的序列之中。原核生物終止子分為兩類:一類是不依賴于p因子的轉(zhuǎn)
40、錄終止(內(nèi)在終止子);一類是依賴p因子的轉(zhuǎn)錄終止;兩類終止子有共同的序列特征:在轉(zhuǎn)錄終止點之前有一段間斷的回文結(jié)構(gòu)。兩類終止子堿基組成的不同點:不依賴p因子回文結(jié)構(gòu)富含G-C下游富含A-T依賴P因子G-C含量較少下游無特征第八章RNA轉(zhuǎn)錄的剪接與加工6 .真核生物基因為什么要進(jìn)行RNA轉(zhuǎn)錄后的加工?有何意義?原因:真核生物基因的初始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物被非編碼序列或區(qū)段分隔開,是不連續(xù)的基因產(chǎn)物。mRNA前體分子必須通過剪接才能產(chǎn)生成熟的mRNA分子。然而絕大數(shù)原核生物的mRNA卻不需加工,仍為初級轉(zhuǎn)錄本的形式。(課本)加工過程:真核生物細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄的RNA原初轉(zhuǎn)錄物要經(jīng)過一系列的變化,具體包括:A5
41、9;端形成帽子;B3端形成一段多聚腺甘酸;C切去內(nèi)含子和連接外顯子(剪接);D反式剪接;E部分核甘酸11分子生物學(xué)修飾;FRNA編輯;GRNA的再編碼;HRNA鏈的斷裂。PPT中概括為:RNA的加工和成熟包括三個方面:RNA的一般加工過程;RNA的剪接作用;RNA的編輯作用7 RNaseP的功能是什么?該酶有何特征?RNaseP:是一種內(nèi)切核酸酶。特征:RNaseP是一種不尋常的酶。它由蛋白質(zhì)和RNA二者組成,分子中RNA有375個堿基長(約130KD),具有催化活性;而蛋白質(zhì)組分要小得多,大約只有20KD。功能:負(fù)責(zé)切割所有tRNA分子的5'端。8 下列英文縮寫代表什么含義:hnRN
42、A、D-RNA、snoRNA、snRNA、snRNPs、siRNAhnRNA核不均一RNAsnoRNA小核仁RNAsnRNA核小RNA、snRNPs核內(nèi)小核糖蛋白siRNA小干擾RNA4解釋下列名詞概念:剪接因子、剪接體剪接體:由核小RNA(snRNA)和蛋白質(zhì)因子(約100多種)動態(tài)組成、識別RNA前體的剪接位點并催化剪接反應(yīng)的核糖核蛋白復(fù)合體。剪接因子:參與剪接的除少數(shù)其他蛋白外,大多數(shù)蛋白質(zhì)是snRNP,統(tǒng)稱為剪接因子。5什么是RNA的編輯?RNA的編輯有什么重要的生物學(xué)意義?概念:RNA編輯(RNAediting)是指修飾或輕微改變mRNA的核甘酸順序,使它們與對應(yīng)的模板DNA的順序有
43、所不同的過程。mRNA的這種編輯作用廣泛存在于原生動物及植物細(xì)胞的線粒體。發(fā)展:近年發(fā)現(xiàn)某些mRNA前體的核甘酸序列需加以改編,才能變成正確的有翻譯活性的模板。RNA編輯的生物學(xué)意義:A改變和補(bǔ)充遺傳信息;B調(diào)控翻譯;如Apo-B基因在腸道的表達(dá),增加基因產(chǎn)物的多樣性。C使基因產(chǎn)物獲得新的結(jié)構(gòu)和功能有利于進(jìn)化:按照基因信息傳遞的理論,這種mRNA的編輯作用無疑是對傳統(tǒng)分子生物學(xué)原理的挑戰(zhàn)。RNA編輯的四種類型簡單編輯:單堿基的轉(zhuǎn)變;插入編輯:插入單個核甘酸;泛編輯:插入或丟失多個尿喀咤核甘酸;多聚腺喋吟編輯:在轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物末端加A。第九章遺傳密碼與蛋白質(zhì)的生物合成1遺傳密碼的基本特性:A方向性:每
44、個密碼子的三個核甘酸是5'一3'方向閱讀,不能倒讀。B連續(xù)性:兩個密碼子之間沒有任何核甘酸加以分隔,即密碼是無標(biāo)點的。C簡并性:18種氨基酸均有2個或多個密碼子,密碼子中有一個核甘酸可以是不同的,這稱為密碼子的簡并性。如:UCUUCCUCAUCG都代表Ser。D通用性:從最簡單的病毒,原核生物,直至人類,都使用同一套遺傳密碼。E變偶性:密碼子與反密碼子配對辨認(rèn)時,有時不完全遵照堿基互補(bǔ)規(guī)律,尤其是密碼子的第三位堿基對反密碼子的第一位堿基,即使不嚴(yán)格互補(bǔ)也能辨認(rèn)配對,這種現(xiàn)象稱為變偶(擺動)。如:U與A、G;G與U、C;I與U、A和Co2 .解釋下列名詞概念:核糖體循環(huán)、SD序列
45、、分泌蛋白、信號肽(1)核糖體循環(huán):指在細(xì)胞內(nèi)構(gòu)成核糖體的大小兩種亞單位(沉淀系數(shù)為50S或60S的大亞單位和30S或40S的小亞單位)與蛋白活體合成開始會合(70S或80S粒子形成),合成后又分離的這一反復(fù)循環(huán)而言(參見核糖體)。(2)SD序列:細(xì)菌的mRNA通常含有一段富有喋吟堿基的序列,稱作SD序列,位于起始AUG序列上游10個堿基左右的區(qū)域,能與細(xì)菌16s核糖體RNA3端反SD序列7個喀咤堿基進(jìn)行互補(bǔ)識別。(3)分泌蛋白:穿過合成所在的細(xì)胞到其它組織細(xì)胞去的蛋白質(zhì),可統(tǒng)稱為分泌性蛋白質(zhì)。(4)信號肽:分泌性蛋白質(zhì)的合成過程與其它蛋白質(zhì)基本一致,但其mRNA上往往要為一段疏水氨基酸10分
46、子生物學(xué)較多的肽編碼。這段肽稱為信號肽(signalpeptide)o3 .下列英文縮寫代表什么含義:IF、eIF、EF-Tu、RF、eRF、UTR、SRP(1) IF:起始因子(2) eIF:細(xì)菌中的起始因子EF-Tu:延伸因子(4) RF:終止釋放因子(5) eRF:釋放因子(6) UTR:非翻譯區(qū),是mRNA分子兩端的非編碼片段。(7) SRP:信號識別蛋白4.真核生物蛋白質(zhì)合成起始與原核生物有哪些區(qū)別?答:真核生物蛋白質(zhì)合成起始與原核生物有幾點區(qū)別:1、真核生物蛋白質(zhì)合成起始于甲硫氨酸,而不是甲酰一甲硫氨酸,起始tRNA攜帶非甲酰化的甲硫氨酸t(yī)RNAiMet;2、真核生物mRNA無SD
47、序列,不以SD序列特征來顯示核糖體應(yīng)該在什么位置翻譯。真核生物mRNA的5'端結(jié)構(gòu)對起始有重要的作用。絕大多數(shù)真核生物mRNA的起始密碼子都為AUG,5'端第一個AUG非起始密碼子的現(xiàn)象占5%10%。5蛋白質(zhì)翻譯后的加工修飾包括哪些內(nèi)容?蛋白質(zhì)合成之后,還需要經(jīng)過加工修飾和折疊才具有生命活性,并通過分泌過程被運(yùn)送到功能部位。翻譯后加工內(nèi)容包括:1 .切去肽鏈合成的起始氨基酸或隨后幾個氨基酸殘基;2 .切除在分泌蛋白或膜蛋白N端的信號肽;3 .氨基酸的共價修飾和形成二硫鍵,包括N端氨基酸的豆蔻酰化、蛋白質(zhì)的乙?;⒘姿峄?、硫酸化和泛素化;4 .蛋白質(zhì)的糖基化5 .蛋白質(zhì)的分選和運(yùn)
48、輸;6 .多聚蛋白的選擇性裂解等。6以大腸桿菌為例,簡述蛋白質(zhì)的合成過程。(可能論述)概述:以mRNA為模板,氨基酸經(jīng)活化獲得的氨酰tRNA為原料,GTP、ATP供能,在核糖體中完成。1 .蛋白質(zhì)生物合成的起始第一,氨酰-tRNA的生成P230;(過程中需要:氨基酰tRNA合成酶)氨基酰tRNA合成酶的專一性:每個氨酰-tRNA合成酶可識別一個特定氨基酸和與此氨基酸對應(yīng)的tRNA特定部位。1個氨基酰tRNA合成酶:活化A.A-活化“-COOH”;消耗2個ATP只有一種甲硫氨酰tRNA合成酶參與tRNAMettRNAiMet每個氨酰-tRNA合成酶在分子大小、亞基組成上都有差異,但他們也有共同特
49、征。P231第二,mRNA分子與核糖體的識別與結(jié)合原核生物存在SD序列(shine-Dalgarno序列),其特征為:1 .位于起始密碼上游10個核甘酸左右。2 .序列富含喋吟(如AGGA/GAGG)的一段序列。3 .能和原核生物16srRNA相應(yīng)的富含喀咤序列互補(bǔ)。4 .在IF3、IF1促進(jìn)下和30S亞基結(jié)合。原核生物的起始蛋白質(zhì)因子2 .蛋白質(zhì)生物合成的延伸(進(jìn)位、轉(zhuǎn)肽、移位)1 .進(jìn)位:核糖體A位上mRNA密碼子所規(guī)定的氨酰-tRNA進(jìn)入核糖體A位上稱為進(jìn)位。參與因子:延長因子EF-Tu(Tu)、EFTs(Ts)、GTP、氨酰tRNA2 .轉(zhuǎn)肽酶轉(zhuǎn)肽酶(大亞基)催化形成肽鍵11分子生物學(xué)肽鍵P:f-met-(肽酰)的a-COO-+A:氨基酰的a-
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