獸醫(yī)實驗室生物安全技術管理規(guī)范

1、獸醫(yī)實驗室生物安全技術管理規(guī)范（2003年10月15日農(nóng)業(yè)部第302號公告發(fā)布） 1 適用范圍 本規(guī)范規(guī)定了獸醫(yī)實驗室生物安全防護的基本原則、實驗室的分級、各級實驗室的基本要求和管理。本規(guī)范為最低要求。 本規(guī)范適用于各級獸醫(yī)實驗室的建設、使用和管理。 2 引用標準 本規(guī)范引用下列文件中的條款作為本規(guī)范的條款。凡注日期的引用文件，其隨后所有的修改（不包括勘誤的內容）或修訂版均不適用于本規(guī)范。凡不注日期的引用文件，其最新版本適用于本規(guī)范。 中華人民共和國動物防疫法（1997） 中華人民共和國進出境動植物檢疫法（1992） 中華人民共和國進出境動植物檢疫法實施條例（1995） 農(nóng)業(yè)轉基因生物安全管理

2、條例（2001國務院304號令） 農(nóng)業(yè)生物基因工程安全管理實施辦法（1996農(nóng)業(yè)部7號令） 實驗動物管理條例（1988國家科委2號令） GB 14925-2001實驗動物環(huán)境與設施 GB/T15481-2000檢測和校準實驗室能力的通用要求 GB/T16803-1997采暖、通風、空調、凈化設備術語 GB/T14295-93空氣過濾器 GB/ 13554-92高效空氣過濾器 GB 50155-92采暖通風與空氣調節(jié)術語標準 GBJ 19-87采暖通風與空氣調節(jié)設計規(guī)范 WS 233-2002微生物和生物醫(yī)學實驗室生物安全通用準則 OIE 2002國際動物衛(wèi)生法典 JCJ 71-90潔凈室施工及

3、驗收規(guī)范 NF EN l2021可呼吸空氣生產(chǎn)標準 3 定義 本規(guī)范采用下列定義： 獸醫(yī)實驗室（Veterinary Laboratory）：一切從事獸醫(yī)病原微生物、寄生蟲研究與使用，以及獸醫(yī)臨床診療和疫病檢疫監(jiān)測的實驗室。 動物（Animal）：本規(guī)范涉及的動物是指家畜家禽和人工飼養(yǎng)、合法捕獲其他動物。 獸醫(yī)微生物（Veterinary Microorganisms）：一切能引起動物傳染病或人畜共患病的細菌、病毒和真菌等病原體。 人畜共患?。╖oonosis）：可以由動物傳播給人并引起人類發(fā)病的傳染性疾病。 外來?。‥xotic Diseases）：在國外存在或流行的，但在國內尚未證實存在或

4、已消滅的動物疫病。 實驗室生物安全防護（Biosafety Containment of Laborato-ries）：實驗室工作人員在處理病原微生物、含有病原微生物的實驗材料或寄生蟲時，為確保實驗對象不對人和動物造成生物傷害，確保周圍環(huán)境不受其污染，在實驗室和動物實驗室的設計與建造、使用個體防護裝置、嚴格遵守標準化的工作及操作程序和規(guī)程等方面所采取的綜合防護措施。 微生物危害評估（Hazard Assessment of Microbes）：對病原微生物或寄生蟲可能給人、動物和環(huán)境帶來的危害所進行的評估。 氣溶膠（Aerosol）：懸浮于氣體介質中粒徑為0.001100的固體、液體微小粒子形

5、成的膠溶狀態(tài)分散體系。 通風櫥（Chemical Hood）：是通過管道直接排出操作化學藥品時所產(chǎn)生的有害或揮發(fā)性氣體、氣溶膠和微粒的通風裝置。 高效空氣過濾器（HEPA，High Efficiency Particulate Air-fil-ter）：在額定風量下，對粒徑大于等于0.3的粒子捕集效率在以上及氣流阻力在以下的空氣過濾器。 物理防護設備（P ）：是用于防止病原微生物逸出和對操作者實施防護的物理或機械設備。 生物安全柜（Biosafety ）：處理危險性微生物時所用的箱形負壓空氣凈化安全設備。分為、和級。 4 實驗室生物安全防護的基本原則 4.1 總則 獸醫(yī)實驗室生物安全防護內容包

6、括安全設備、個體防護裝置和措施（一級防護），實驗室的特殊設計和建設要求（二級防護），嚴格的管理制度和標準化的操作程序與規(guī)程。 獸醫(yī)實驗室除了防范病原體對實驗室工作人員的感染外，還必須采取相應措施防止病原體的逃逸。 對每一特定實驗室，應制定有關生物安全防護綜合措施，編寫各實驗室的生物安全管理手冊，并有專人負責生物安全工作。 生物安全水平根據(jù)微生物的危害程度和防護要求分為個等級，即、級。 有關重組操作和遺傳工程體的生物安全應參照農(nóng)業(yè)生物基因工程安全管理實施辦法執(zhí)行。 4.2 安全設備和個體防護 確保實驗室工作人員不與病原微生物直接接觸的初級屏障。 實驗室必須配備相應級別的生物安全設備。所有可能使病

7、原微生物逸出或產(chǎn)生氣溶膠的操作，必須在相應等級的生物安全控制條件下進行。 實驗室工作人員必須配備個體防護用品（防護帽、護目鏡、口罩、工作服、手套等）。 4.3 實驗室選址、設計和建造的要求 實驗室的選址、設計和建造應考慮對周圍環(huán)境的影響。 實驗室必須依據(jù)所需要的防護級別和標準進行設計和建造，并滿足本規(guī)范中的最低設計要求和運行條件。 動物實驗室除滿足相應生物安全級別要求外，還應隔離，并根據(jù)其相應生物安全級別，保持與中心實驗室的相應壓差。 4.4 生物安全操作規(guī)程 本規(guī)范規(guī)定了不同級別的獸醫(yī)實驗室生物安全操作規(guī)程，必須在各實驗室的生物安全管理手冊中明列，并結合實際制定相應的實施方案。 本規(guī)范對各種

8、病原微生物均有明確的生物危害分類，各實驗室應根據(jù)其操作的對象，制定相應的特殊生物安全操作規(guī)程，并列入其生物安全管理手冊。 4.5 危害性微生物及其毒素樣品的引進、采集、包裝、標識、傳遞和保存 采集的樣品應放入安全的防漏容器內，傳遞時必須包裝結實嚴密，標識清楚牢固，容器表面消毒后由專人送遞或郵寄至相應實驗室。 進口危害性微生物及其毒素樣品時，申請者必須要有與該微生物危害等級相應的生物安全實驗室，并經(jīng)國務院畜牧獸醫(yī)行政管理部門批準。 危害性微生物及其毒素樣品的保存應根據(jù)其危害等級分級保存。 4.6 使用放射性同位素的生物安全防護要求參照放射性同位素與射線裝置放射防護條例執(zhí)行。 4.7 去污染與廢棄

9、物（廢氣、廢液和固形物）處理 去污染包括滅菌（徹底殺滅所有微生物）和消毒（殺滅特殊種類的病原體），是防止病原體擴散造成生物危害的重要防護屏障。 被污染的廢棄物或各種器皿在廢棄或清洗前必須進行滅菌處理；實驗室在病原體意外泄漏、重新布置或維修、可疑污染設備的搬運以及空氣過濾系統(tǒng)檢修時，均應對實驗室設施及儀器設備進行消毒處理。 根據(jù)被處理物的性質選擇適當?shù)奶幚矸椒ǎ绺邏簻缇?、化學消毒、熏蒸、射線照射或焚燒等。 對實驗動物尸體及動物產(chǎn)品應按規(guī)定作無害化處理。 實驗室應盡量減少用水，污染區(qū)、半污染區(qū)產(chǎn)生的廢水必須排入專門配備的廢水處理系統(tǒng)，經(jīng)處理達標后方可排放。 4.8 管理制度 獸醫(yī)實驗室必須建立健

10、全管理制度。 4.9 微生物危害評估 按照微生物危害分為級。在建設實驗室之前，必須對擬操作的病原微生物進行危害評估，結合人和動物對其易感性、氣溶膠傳播的可能性、預防和治療的獲得性等因素，確定相應生物安全水平等級。 5 微生物危害分級 5.1 微生物危害通常分為以下4級 生物危害級：對個體和群體危害程度低，已知的不能對健康成年人和動物致病的微生物。 生物危害級：對個體危害程度為中度，對群體危害較低，主要通過皮膚、粘膜、消化道傳播。對人和動物有致病性，但對實驗人員、動物和環(huán)境不會造成嚴重危害的動物致病微生物，具有有效的預防和治療措施。 生物危害級：對個體危害程度高，對群體危害程度較高。能通過氣溶膠

11、傳播的，引起嚴重或致死性疫病，導致嚴重經(jīng)濟損失的動物致病微生物，或外來的動物致病微生物。對人引發(fā)的疾病具有有效的預防和治療措施。 生物危害級：對個體和群體的危害程度高，通常引起嚴重疫病的、暫無有效預防和治療措施的動物致病微生物。通過氣溶膠傳播的，有高度傳染性、致死性的動物致病微生物；或未知的危險的動物致病微生物。 5.2 根據(jù)對象微生物本身的致病特征確定微生物的危害等級時必須考慮下列因素 微生物的致病性和毒力 宿主范圍 所引起疾病的發(fā)病率和死亡率 疾病的傳播媒介 動物體內或環(huán)境中病原的量和濃度 排出物傳播的可能性 病原在自然環(huán)境中的存活時間 病原的地方流行特性 交叉污染的可能性 獲得有效疫苗、

12、預防和治療藥物的程度 5.3 除考慮特定微生物固有的致病危害外，危害評估還應包括 產(chǎn)生氣溶膠的可能性 操作方法（體外、體內或攻毒） 對重組微生物還應評估其基因特征（毒力基因和毒素基因）、宿主適應性改變、基因整合、增殖力和回復野生型的能力等。 6 獸醫(yī)實驗室的分類、分級及其適用范圍 6.1 分類：獸醫(yī)實驗室分兩類。 是指對病原微生物進行試驗操作時所產(chǎn)生的生物危害具有物理防護能力的獸醫(yī)實驗室。適用于獸醫(yī)微生物的臨床檢驗檢測、分離培養(yǎng)、鑒定以及各種生物制劑的研究等工作。 生物安全動物實驗室 是指對病原微生物的動物生物學試驗研究時所產(chǎn)生的生物危害具有物理防護能力的獸醫(yī)實驗室。也適用于動物傳染病臨床診斷

13、、治療、預防研究等工作。 6.2 分級 上述兩類實驗室，根據(jù)所用病原微生物的危害程度、對人和動物的易感性、氣溶膠傳播的可能性、預防和治療的可行性等因素，其實驗室生物安全水平各分為四級，一級最低，四級最高。 生物安全水平分級依據(jù) 一級生物安全水平（）：能夠安全操作，對實驗室工作人員和動物無明顯致病性的，對環(huán)境危害程度微小的，特性清楚的病原微生物的生物安全水平。 二級生物安全水平（）：能夠安全操作，對實驗室工作人員和動物致病性低的，對環(huán)境有輕微危害的病原微生物的生物安全水平。 三級生物安全水平（）：能夠安全地從事國內和國外的，可能通過呼吸道感染，引起嚴重或致死性疾病的病原微生物工作的生物安全水平。

14、與上述相近的或有抗原關系的，但尚未完全認知的病原體，也應在此種水平條件下進行操作，直到取得足夠的數(shù)據(jù)后，才能決定是繼續(xù)在此種安全水平下工作還是在其它等級生物安全水平下工作。 四級生物安全水平（）：能夠安全地從事國內和國外的，能通過氣溶膠傳播，實驗室感染高度危險，嚴重危害人和動物生命和環(huán)境的，沒有特效預防和治療方法的微生物工作的生物安全水平。與上述相近的或有抗原關系的，但尚未完全認識的病原體也應在此種水平條件下進行操作，直到取得足夠的數(shù)據(jù)后，才能決定是繼續(xù)在此種安全水平下工作還是在低一級安全水平下工作。 動物實驗生物安全水平（） 一級動物實驗生物安全水平（）：能夠安全地進行沒有發(fā)現(xiàn)肯定能引起健康

15、成人發(fā)病的，對實驗室工作人員、動物和環(huán)境危害微小的、特性清楚的病原微生物感染動物工作的生物安全水平。 二級動物實驗生物安全水平（）：能夠安全地進行對工作人員、動物和環(huán)境有輕微危害的病原微生物感染動物的生物安全水平。這些病原微生物通過消化道和皮膚、粘膜暴露而產(chǎn)生危害。 三級動物實驗生物安全水平（）：能夠安全地從事國內和國外的，可能通過呼吸道感染、引起嚴重或致死性疾病的病原微生物感染動物工作的生物安全水平。與上述相近的或有抗原關系的但尚未完全認識的病原體感染，也應在此種水平條件下進行操作，直到取得足夠的數(shù)據(jù)后，才能決定是繼續(xù)在此種安全水平下工作還是在低一級安全水平下工作。 四級動物實驗生物安全水平

16、（）：能夠安全地從事國內和國外的，能通過氣溶膠傳播，實驗室感染高度危險、嚴重危害人和動物生命和環(huán)境的，沒有特效預防和治療方法的微生物感染動物工作的生物安全水平。與上述相近的或有抗原關系的，但尚未完全認知的病原體動物試驗也應在此種水平條件下進行操作，直到取得足夠的數(shù)據(jù)后，才能決定是繼續(xù)在此種安全水平下工作還是在低一級安全水平下工作。 6.3 實驗室致病微生物的生物安全等級（見附表一） 7 實驗室生物安全的物理防護分級和組合 7.1 初級物理防護屏障 實驗室生物安全必須配備初級物理防護屏障，它包括各級生物安全設備和個人防護器具。 7.2 次級物理防護屏障 實驗室的設施結構和通風設計構成次級物理防護

17、屏障。次級物理防護的能力取決于實驗室分區(qū)和室內氣壓，要根據(jù)實驗室的安全要求進行設計。一般把實驗室分為潔凈、半污染和污染三個區(qū)。實驗室保持密閉，通風的氣流方向始終保持：外界潔凈區(qū)半污染區(qū)污染區(qū)外界。三級和四級生物安全水平的實驗室中，污染區(qū)和半污染區(qū)的氣壓相對于大氣壓的壓差分別不應小于和。 7.3 生物安全水平（BSL）的構成 生物安全水平依賴于初級防護屏障、次級防護屏障和操作規(guī)程。三者不同形式的組合構成了個級別生物安全水平，、級安全水平逐級提高，從而構成、級實驗室生物安全。應根據(jù)實驗的生物安全要求進行各種組合的設計。 7.4 各級生物安全實驗室要求 一級生物安全實驗室 指按照標準建造的實驗室，也

18、稱基礎生物實驗室。在建筑物中，實驗室無需與一般區(qū)域隔離。實驗室人員需經(jīng)一般生物專業(yè)訓練。其具體標準、微生物操作、安全設備、實驗室設施要求如下。 .1 標準操作 工作一般在桌面上進行，采用微生物的常規(guī)操作。工作臺面至少每天消毒一次。 工作區(qū)內不準吃、喝、抽煙、用手接觸隱形眼鏡、存放個人物品（化妝品、食品等）。 嚴禁用嘴吸取試驗液體，應該使用專用的移液管。 防止皮膚損傷。 所有操作均需小心，避免外溢和氣溶膠的產(chǎn)生。 所有廢棄物在處理之前用公認有效的方法滅菌消毒。從實驗室拿出消毒后的廢棄物應放在一個牢固不漏的容器內，并按照國家或地方法規(guī)進行處理。 昆蟲和嚙齒類動物控制方案應參照其它有關規(guī)定進行。 .

19、2 特殊操作：無。 .3 安全設備（初級防護屏障） 實驗室可不配置特殊的物理防護設備。 工作時應穿著實驗室專用長工作服。 戴乳膠手套。 可佩戴防護眼鏡或面罩。 .4 實驗室設施（次級防護屏障） 實驗室有控制進出的門。 每個實驗室應有一個洗手池。 室內裝飾便于打掃衛(wèi)生，不用地毯和墊子。 工作臺面不漏水、耐酸堿和中等熱度、抗化學物質的腐蝕。 實驗室內器具安放穩(wěn)妥，器具之間留有一定的距離，方便清掃。 實驗室的窗戶，必須安紗窗。 二級生物安全實驗室 指按照標準建造的實驗室，也稱為基礎生物實驗室。在建筑物中，實驗室無需與一般區(qū)域隔離。實驗室人員需經(jīng)一般生物專業(yè)訓練。其具體標準微生物操作、特殊操作、安全設

20、備、實驗室設施要求如下。 .2 標準操作 工作一般在桌面上進行，采用微生物的常規(guī)操作和特殊操作。 工作區(qū)內禁止吃、喝、抽煙、用手接觸隱形眼鏡和使用化妝品。食物貯藏在專門設計的工作區(qū)外的柜內或冰箱內。 使用移液管吸取液體，禁止用嘴吸取。 操作傳染性材料后要洗手，離開實驗室前脫掉手套并洗手。 制定對利器的安全操作對策（見的避免利器感染）。 所有操作均須小心，以減少實驗材料外溢、飛濺、產(chǎn)生氣溶膠。 每天完成實驗后對工作臺面進行消毒。實驗材料濺出時，要用有效的消毒劑消毒。 所有培養(yǎng)物和廢棄物在處理前都要用高壓蒸汽滅菌器消毒。消毒后的物品要放入牢固不漏的容器內，按照國家法規(guī)進行包裝，密閉傳出處理。 昆蟲

21、和嚙齒類動物的控制應參照其它有關規(guī)定進行。 妥善保管菌、毒種，使用要經(jīng)負責人批準并登記使用量。 .2 特殊操作 操作傳染性材料的人員，由負責人指定。一般情況下受感染概率增加或受感染后后果嚴重的人不允許進入實驗室。例如，免疫功能低下或缺陷的人受感染危險增加。 負責人要告知工作人員工作中的潛在危險和所需的防護措施（如免疫接種），否則不能進入實驗室工作。 操作病原微生物期間，在實驗室入口必須標記生物危險信號，其內容包括微生物種類、生物安全水平、是否需要免疫接種、研究者的姓名和電話號碼、進入人員必須佩戴的防護器具、遵守退出實驗室的程序。 實驗室人員需操作某些人畜共患病病原體時應接受相應的疫苗免疫或檢測

22、試驗（如狂犬病疫苗和皮膚試驗）。 應收集和保存實驗室人員和其他受威脅人的基礎血清，進行試驗病原微生物抗體水平的測定，以后定期或不定期收取血清樣本進行監(jiān)測。 實驗室負責人應制定具體的生物安全規(guī)則和標準操作程序，或制定實驗室特殊的安全手冊。 實驗室負責人對實驗人員和輔助人員要進行針對性的生物危害防護的專業(yè)訓練，定期培訓。必須防止微生物暴露、學會評價暴露危害的方法。 必須高度重視污染利器包括針頭、注射器、玻璃片、吸管、毛細管和手術刀的安全對策（見的避免利器感染）。 培養(yǎng)物、組織或體液標本的收集、處理、加工、儲存、運輸過程，應放在防漏的容器內進行。 操作傳染性材料后，應對使用的儀器表面和工作臺面進行有

23、效的消毒，特別是發(fā)生傳染性材料外溢、濺出，或其它污染時更要嚴格消毒。污染的儀器在送出設施檢修、打包、運輸之前都要給予消毒。 發(fā)生傳染性材料濺出或其它事故要立即報告負責人，負責人要進行恰當?shù)奈：υu價、監(jiān)督、處理，并記錄存檔。 非本實驗所需動物不允許進入實驗室。 .3 安全設備（初級防護屏障） 實驗室內工作必需穿防護工作服。離開實驗室到非工作區(qū)（如餐廳、圖書室和辦公室）之前要脫掉工作服。所有工作服或在實驗室處理或由洗衣房清洗，不準帶回家。 可能接觸傳染性材料和接觸污染表面時要戴乳膠手套。完成傳染性材料工作之后需經(jīng)過消毒處理，方可脫掉手套。待處理的手套不能接觸清潔表面（微機鍵盤、電話等），不能丟棄至

24、實驗室外面。脫掉手套后要洗手。如果手套破損，先消毒后脫掉。 能產(chǎn)生傳染物外溢、濺出和氣溶膠的操作，包括離心、研磨、攪拌、強力震蕩混合、超聲波破碎、打開裝有傳染性材料的容器、動物鼻腔注射、收取感染動物和孵化卵的組織等，都要使用級生物安全柜和物理防護設備。 離心高濃度和大容量的傳染性材料時，如果使用密閉轉頭、帶有安全帽的離心機可在開放的實驗室內進行，否則只能在生物安全柜內進行。 當操作（微生物）不得不在安全柜外面進行時，應采取嚴格的面部安全防護措施（護目鏡、口罩、面罩或其它設施），并防止氣溶膠發(fā)生。 .4 實驗室設施（次級屏障） 設施門要加鎖，限制人員進入。 實驗設施地點離開公共區(qū)。 每個實驗室設

25、一個洗手池。要求設置非手動或自動開關。 實驗室結構要便于清潔衛(wèi)生，禁止使用地毯和墊子。 工作臺面不滲水，應耐酸、堿、耐熱和有機溶劑等。 實驗室家具應預先設計，便于擺放和使用，表面應便于消毒，并在其間留有空隙便于清潔。 生物安全柜的安裝，室內的送、排風要符合物理防護參數(shù)要求。遠離門口、風口和能開的窗戶，遠離室內人員經(jīng)常走動的地方，遠離其它可能干擾的儀器，以保證生物安全柜的氣流參數(shù)和物理防護功能。 建立沖洗眼睛的緊急救護點。 照明適合于室內一切活動，避免反射和耀眼，以免干擾視線。 只要求一般舒適空調，沒有特殊通風要求。但是，新設施應該考慮機械通風系統(tǒng)能夠提供通向室內的單向氣流。如果有通向室外的窗戶

26、，必須安裝紗窗。 三級生物安全實驗室 指按照標準建造的實驗室，也稱為生物安全實驗室。實驗室需與建筑物中的一般區(qū)域隔離。其具體標準微生物操作、特殊操作、安全設備、實驗室設施要求如下。 .1 標準操作 完成傳染性材料操作后，對手套進行消毒沖洗，離開實驗室之前，脫掉手套并洗手。 設施內禁止吃、喝、抽煙，不準觸摸隱形眼鏡和使用化妝品。戴隱形眼鏡的人也要佩戴防護鏡或面罩。食物只能存放在工作區(qū)以外的地方。 禁止用嘴吸取試驗液體，要使用專用的移液管。 一切操作均要小心，以減少和避免產(chǎn)生氣溶膠。 實驗室衛(wèi)生至少每天清潔一次，工作后隨時消毒工作臺面，傳染性材料外溢、濺出污染時要立即消毒處理。 所有培養(yǎng)物、儲存物

27、和其它日常廢棄物在處理之前都要用高壓滅菌器進行有效地滅菌處理。需要在實驗室外面處理的材料，要裝入牢固不漏的容器內，加蓋密封后傳出實驗室。實驗室的廢棄物在送到處理地點之前應消毒、包裝，避免污染環(huán)境。 對內操作的菌、毒種必須由兩人保管，保存在安全可靠的設施內，使用前應辦理批準手續(xù)，說明使用劑量，并詳細登記，兩人同時到場方能取出。試驗要有詳細使用和銷毀記錄。 昆蟲和嚙齒類動物控制應參照其它有關規(guī)定執(zhí)行。 .2 特殊操作 制定安全細則 實驗室負責人要根據(jù)實際情況制定本實驗室特殊而全面的生物安全規(guī)則和具體的操作規(guī)程，以補充和細化本規(guī)范的操作要求，并報請生物安全委員會批準。工作人員必須了解細則，認真貫徹執(zhí)

28、行。 生物危害標志 要在實驗室入口的門上標記國際通用生物危害標志。實驗室門口標記實驗微生物種類、實驗室負責人的名單和電話號碼，指明進入本實驗室的特殊要求，諸如需要免疫接種、佩戴防護面具或其它個人防護器具等。 實驗室使用期間，謝絕無關人員參觀。如參觀必須經(jīng)過批準并在個體條件和防護達到要求時方能進入。 生物危害警告 實驗過程中實驗室或物理防護設備里放有傳染性材料或感染動物時，實驗室的門必須保持緊閉，無關人員一律不得進入。 門口要示以危害警告標志，如掛紅牌或文字說明實驗的狀態(tài)，禁止進入或靠近。 進入實驗室的條件 實驗室負責人要指定、控制或禁止進入實驗室的實驗人員和輔助人員。 未成年人不允許進入實驗室

29、。 受感染概率增加或感染后果嚴重的實驗室工作人員不允許進入實驗室。 只有了解實驗室潛在的生物危害和特殊要求并能遵守有關規(guī)定合乎條件的人才能進入實驗室。 與工作無關的動植物和其它物品不允許帶入實驗室。 工作人員的培訓 對實驗室工作人員和輔助人員要進行與工作有關的定期和不定期的生物安全防護專業(yè)培訓。實驗人員需經(jīng)專門生物專業(yè)訓練和生物安全訓練，并由有經(jīng)驗的專家指導，或在生物安全委員會指導監(jiān)督下工作。 必須學會氣溶膠暴露危害的評價和預防方法。 在實驗室做傳染性工作之前，實驗室負責人要保證和證明，所有工作人員熟練掌握了微生物標準操作和特殊操作，熟練掌握本實驗室設備、設施的特殊操作運轉技術。包括操作致病因

30、子和細胞培養(yǎng)的技能，或實驗室負責人特殊培訓的內容，或包括在安全微生物工作方面具有豐富經(jīng)驗的專家和安全委員會指導下規(guī)定的內容。 避免氣溶膠暴露：一切傳染性材料的操作不可直接暴露于空氣之中，不能在開放的臺面上和開放的容器內進行，都應在生物安全柜內或其它物理防護設備內進行。 需要保護人體和樣品的操作可在室內排放式型生物安全柜內進行。 只保護人體不保護樣品的操作可在級生物安全柜內進行。 如果操作帶有放射性或化學性有害物時應在型生物安全柜。 禁止使用超凈工作臺。 避免利器的感染：對可能污染的利器，包括針頭、注射器、刀片、玻璃片、吸管、毛細吸管和解剖刀等，必須經(jīng)常地采取高度有效的防范措施，必須預防經(jīng)皮膚的

31、實驗室感染。 在實驗室工作，盡量不使用針頭、注射器和其它銳利的器件。只有在必要時，如實質器官的注射、靜脈切開、或從動物體內和瓶子（密封膠蓋）里吸取液體時才能使用，盡量用塑料制品代替玻璃制品。 在注射和抽取傳染性材料時，使用一次性注射器（針頭與注射器一體的）。使用過的針頭在消毒之前避免不必要的操作，如不可折彎、折斷、破損，不要用手直接蓋上原來的針頭帽；要小心地把其放在固定方便且不會刺破的處理利器的容器里，然后進行高壓消毒滅菌。 破損的玻璃不能用手直接操作，必須用機械的方法清除，如刷子、夾子和鑷子等。 污染的清除和消毒 傳染性材料操作完成之后，實驗室設備和工作臺面應用有效的消毒劑進行常規(guī)消毒，特別

32、是傳染材料溢出、濺出其它污染，更要及時消毒。 濺出的傳染性材料的消毒由適合的專業(yè)人員處理和清除，或由其它經(jīng)過訓練和有使用高濃度傳染物工作經(jīng)驗的人處理。 一切廢棄物處理之前都要高壓滅菌，一切潛在的實驗室污物（如，手套、工作服等）均需在處理或丟棄之前消毒。 需要修理、維護的儀器，在包裝運輸之前要進行消毒。 感染性樣品的儲藏運輸 一切感染性樣品如培養(yǎng)物、組織材料和體液樣品等在儲藏、搬動、運輸過程中都要放在不泄漏的容器內，容器外表面要徹底消毒，包裝要有明顯、牢固的標記。 病原體痕跡的監(jiān)測 采集所有實驗室工作人員和其他有關人員的本底血清樣品，進行病原體痕跡跟蹤檢測。依據(jù)被操作病原體和設施功能情況或實際中

33、發(fā)生的事件，定期、不定期采集血清樣本，進行特異性檢測。 醫(yī)療監(jiān)督與保健 在實驗室工作期間對工作者進行醫(yī)療監(jiān)督和保健，對于實驗室操作的病原體，工作人員要接受相應的試驗或免疫接種（如狂犬病疫苗，皮膚試驗）。 暴露事故的處理 當生物安全柜或實驗室出觀持續(xù)正壓時，室內人員應立即停止操作并戴上防護面具，采取措施恢復負壓。如不能及時恢復和保持負壓，應停止實驗，及早按規(guī)程退出。 發(fā)生此類事故或具有傳染性暴露潛在危險的其它事故和污染，當事者除了采取緊急措施外，應立即向實驗室負責人報告，聽候指示，同時報告國家獸醫(yī)實驗室生物安全管理委員會。負責人和當事人應對其事故進行緊急科學、合理的處理。事后，當事人和負責人應提

34、供切合實際的醫(yī)學危害評價，進行醫(yī)療監(jiān)督和預防治療。 實驗室負責人對事件的過程要予以調查和公布，寫出書面報告呈報國家獸醫(yī)實驗室生物安全管理委員會同時抄報實驗室安全委員會并保留備份。 .3 安全設備（初級防護屏障） 防護服裝 實驗室內，工作人員要穿防護性實驗服，如長服裝、短套裝，或有護胸的工作服裝。消毒后清洗，如有明顯的污染應及時換掉，作為污棄物處理。 在實驗室外面不能穿工作服。 防護手套 在操作傳染性材料、感染動物和污染的儀器時必須戴手套，戴雙層為好，必要時再戴上不易損壞的防護手套。 更換手套前，戴在手上消毒沖洗，一次性手套不得重復使用。 生物安全柜 感染性材料的操作，如感染動物的解剖，組織培養(yǎng)

35、、雞胚接種、動物體液的收取等，都應在級以上生物安全柜內進行。 離心、粉碎、攪拌等不能在級生物安全柜內進行的工作可在較大或特制的級生物安全柜內進行。 其它物理防護 當操作不能在生物安全柜內進行時，個人防護（級以上類似防護設備的具體要求）和其它物理防護設備（離心機安全帽，或密封離心機轉頭）并用。 面部保護 污染區(qū)、半污染區(qū)應備有防護面具以便緊急使用，當房間內有感染動物時要戴面具保護。 建立緊急防護工作點。 緊急防護用品 污染區(qū)或半污染區(qū)備用防護面具、沖洗眼睛的器具和藥品等，隨時可用。 .4 實驗室設施（次級防護屏障） 生物安全實驗室里所有病原微生物的操作均在級以上（含級）生物安全柜內進行，其次級屏

36、障標準如下： 建筑結構和平面布局 建筑物抗震能力七級以上，防鼠、防蟲、防盜。 實驗室內凈高應在米以上，管道層凈高宜不低于米。 建筑物內實驗室應與活動不受限制的公共區(qū)域隔開，設置安全門并安裝門鎖，禁止無關人員進入。 進入設施的通道設帶閉門器的雙扇門，其后是更衣室，分成一更室（清潔區(qū)）和二更室（半污染區(qū)），二更室后面為后室或稱緩沖室（半污染區(qū)），進出緩沖室的門應為自動互鎖。如果是多個實驗室共用一個公用的走廊（或緩沖室），則進入每個實驗室宜經(jīng)過一個連鎖的氣閘（鎖）門。 實驗室應有安全通道和緊急出口，并有明顯標識。 半污染區(qū)與清潔區(qū)之間必須設置傳遞窗。 洗刷室、機房等附屬區(qū)域應是清潔區(qū)，但應盡量縮短與

37、實驗室的距離，方便工作。 實驗室內可設密閉觀察窗。 密閉性和內表面 一切設施、設備外表無毛刺、無銳利棱角，盡量減少水平表面面積，便于清潔和消毒。 各種管道通過的孔洞必須密封。 墻和頂棚的表面要光滑，不刺眼、不積塵、不受化學物和常用消毒劑的腐蝕，無滲水、不凝集蒸氣。 地表面應該是一體、防滑、耐磨、耐腐、不反光、不積塵、不漏水，如能按污染區(qū)劃分給予顏色區(qū)別更好。 工作臺面不能滲水，耐中等熱、有機溶劑、酸、堿和常用消毒劑的損害和腐蝕。 實驗室必要的桌椅櫥柜等用具事先設計，便于穩(wěn)妥安放和使用，彼此留有一定空間便于清潔衛(wèi)生，表面消毒方便、耐腐。 消毒滅菌設施 必須安裝雙扉式高壓蒸汽滅菌器，安裝在半污染區(qū)

38、與洗刷室之間。滅菌器的兩個門應互為連鎖，滅菌器應滿足生物安全二次滅菌要求。 污染區(qū)、半污染區(qū)的房間或傳遞窗內可安裝紫外燈。 室內應配制人工或自動消毒器具（如消毒噴霧器、臭氧消毒器）并備有足夠的消毒劑。 一切實驗室內的廢棄物都要分類集中裝在可靠的容器內，都要在設施內進行消毒處理（高壓、化學、焚化、其它處理），儀器的消毒選擇適當?shù)姆椒ǎ鐐鬟f式臭氧消毒柜、環(huán)氧乙烷消毒袋等，如果廢棄物需要傳至實驗室外，應該消毒后并裝入密封容器、包裝。 凈化空調 實驗室污染區(qū)和半污染區(qū)采用負壓單向流全新風凈化空調系統(tǒng)。 污染區(qū)和半污染區(qū)不允許安裝暖氣、分體空調，不可用電風扇。 溫度±、相對濕度。 室內噪聲不

39、超過分貝。 氣流方向始終保證由清潔區(qū)流向污染區(qū)，由低污染區(qū)流向高污染區(qū)。空調系統(tǒng)應安裝壓力無關裝置，以保證系統(tǒng)壓力平衡，排風應采用一用一備自動切換系統(tǒng)。發(fā)生緊急情況時，應關閉送風系統(tǒng)，維持排風，保證實驗室內安全負壓。 供氣需經(jīng)過濾。排出的氣體必須經(jīng)過至少兩級過濾排放，不允許在任何區(qū)域循環(huán)使用。 室內潔凈度高于萬級。 實驗室送風口應在一側的棚頂，出風口應在對面墻體的下部，盡量減少室內氣流死角。保持單向氣流，矢流方式較為合適。 實驗室門口安裝可視裝置，能夠確切表明進入實驗室的氣流方向。 級生物安全柜每年檢測一次。型的排氣可進入室內，型安全柜和級安全柜的排風要通過實驗室總排風系統(tǒng)排出。如果級安全柜是

40、帶有二次過濾、移動式，氣流亦可在室內排氣，但排氣口應靠近室內排風口。 如有其它設備如液體消毒傳遞窗、藥物熏蒸消毒器等的抽氣系統(tǒng)，必須經(jīng)過過濾，并根據(jù)需要更換。 水的凈化處理 每個房間出口附近設置一個非手動開關的洗手池。 污染區(qū)、半污染區(qū)和有可能被污染的供水管道應采取防止回流措施。如有下水，水池或地漏要設置消毒設施。下水下方必須設有水封，并始終充盈消毒劑，水封的排氣應加過濾裝置。可能污染的下水只能排放到消毒裝置內，消毒后再排至公共下水道。如沒有下水排放，或不外排的所有廢水均須收集并高壓處理。潔凈區(qū)域的下水可直接排入公共下水道。 污染物和廢棄物處理 對可能污染的物品和其它廢棄物要放在專用的防止污染

41、擴散或可消毒的容器里，以便消毒或高壓滅菌處理。 實驗室監(jiān)控系統(tǒng) 應對實驗室各種狀態(tài)及設施全面設置監(jiān)控報警點，構成完善的實驗室安全報警系統(tǒng)。 備用電源 非雙路供電情況下，應配有備用電源，在停電時，至少能夠保證空調系統(tǒng)、警鈴、燈光、進出控制和生物安全設備的工作。 照明 照明應適合室內的一切活動，不反射、不刺眼，不影響視線。照明燈最好把燈具的部件裝在頂棚里，或采取減少積塵措施。 通訊 實驗室內外應有適合的通訊聯(lián)系設施（電話、傳真、計算機等），進行無紙化操作。 驗收和年檢 設施和運行必須是指令性的。 實驗室的驗收或年檢應參考標準檢測方法進行密封性測試，其檢測壓力不低于，半小時的小時泄漏率不超過，以保證

42、維護結構的可靠性。 新建設施的功能必須檢測驗收，確認設計和運作參數(shù)合乎要求方能使用。 運行后每年再進行一次檢測確認。 四級生物安全實驗室 指按照標準建造的實驗室，也稱為高度實驗室生物安全。實驗室為獨立的建筑物，或在建筑物內一切其它區(qū)域相隔離的可控制的區(qū)域。 為防止微生物傳播和污染環(huán)境，實驗室必須實施特殊的設計和工藝。在此沒有提到的要求的各條款在中都應做到。 其具體的標準微生物操作、特殊操作、安全設備和實驗室設施要求如下： .1 標準操作 限制進入實驗室的人員數(shù)量。 制定安全操作利器的規(guī)程。 減少或避免氣溶膠發(fā)生。 工作臺面每天至少消毒一次，任何濺出物都要及時消毒。 一切廢棄物在處理前要高壓滅菌

43、。 昆蟲和嚙齒類動物控制按有關規(guī)定執(zhí)行。 嚴格控制菌、毒種（見前）。 .2 特殊操作 人員進入 只有工作需要的人員和設備運轉需要的人員經(jīng)過系統(tǒng)的生物安全培訓，并經(jīng)過批準后方能進入實驗室。負責人或監(jiān)督人有責任慎重處理每一個情況，確定進入實驗室工作的人員。 采用門禁系統(tǒng)限制人員進入。 進入人員由實驗室負責人、安全控制員管理。 人員進入前要告知他們潛在的生物危險，教會他們使用安全裝置。 工作人員要遵守實驗室進出程序。 制定應對緊急事件切實可行的對策和預案。 危害警告 當實驗室內有傳染性材料或感染動物時，在所有的入口門上展示危險標志和普遍防御信號，說明微生物的種類、實驗室負責人和其他責任人的名單和進入

44、此區(qū)域特殊的要求。 負責人職責 實驗室負責人有責任保證，在內工作之前，所有工作人員已經(jīng)高度熟練掌握標準微生物操作技術、特殊操作和設施運轉的特殊技能。這包括實驗室負責人和具有豐富的安全微生物操作和工作經(jīng)驗專家培訓時所提供的內容和安全委員會的要求。 免疫接種 工作人員要接受試驗病原體或實驗室內潛在病原微生物的免疫注射。 血清學監(jiān)督 對實驗室所有工作人員和其他有感染危險的人員采集本底血清并保存，再根據(jù)操作情況和實驗室功能不定期血樣采集。進行血清學監(jiān)督。對致病微生物抗體評價方法要注意適用性。項目進行中，要保證每個階段血清樣本的檢測，并把結果通知本人。 安全手冊 制定生物安全手冊。告知工作人員特殊的生物

45、危險，要求他們認真閱讀并在實際工作當中嚴格執(zhí)行。 技術培訓 工作人員必須經(jīng)過操作最危險病原微生物的全面培訓，建立普遍防御意識，學會對暴露危害的評價方法，學習物理防護設備和設施的設計原理和特點。每年訓練一次，規(guī)程一旦修改要增加訓練次數(shù)。由對這些病原微生物工作受過嚴格訓練和具有豐富工作經(jīng)驗的專家或安全委員會指導、監(jiān)督進行工作。 緊急通道只有在緊急情況下才能經(jīng)過氣閘門進出實驗室。實驗室內要有緊急通道的明顯標識。 在安全柜型實驗室中，工作人員的衣服在外更衣室脫下保存。穿上全套的實驗服裝（包括外衣、褲子、內衣或者連衣褲、鞋、手套）后進入。在離開實驗室進入淋浴間之前，在內更衣室脫下實驗服裝。服裝洗前應高壓

46、滅菌。在防護服型實驗室中，工作人員必須穿正壓防護服方可進入。離開時，必須進入消毒淋浴間消毒。 實驗材料和用品要通過雙扉高壓滅菌器、熏蒸消毒室或傳遞窗送入，每次使用前后對這些傳遞室進行適當消毒。 對利器，包括針頭、注射器、玻璃片、吸管、毛吸管和解剖刀，必須采取高度有效的防范措施。 盡量不使用針頭、注射器和其它銳利的器具。只有在必要時，如實質器官的注射、靜脈切開或從動物體內和瓶子里吸取液體時才能使用，盡量用塑料制品代替玻璃制品。 在注射和抽取傳染性材料時，只能使用鎖定針頭的或一次性的注射器（針頭與注射器一體的）。使用過的針頭在處理之前，不能折彎、折斷、破損，要精心操作，不要蓋上原來的針頭帽；放在固

47、定方便且不會刺破的用于處理利器的容器里。不能處理的利器，必須放在器壁堅硬的容器內，運輸?shù)较緟^(qū)，高壓消毒滅菌。 可以使用套管針管和套管針頭、無針頭注射器和其它安全器具。 破損的玻璃不能用手直接操作，必須用機械的方法清除，如刷子、簸萁、夾子和鑷子。盛污染針頭、銳利器具、碎玻璃等，在處理前一律消毒，消毒后處理按照國家或地方的有關規(guī)定實施。 從拿出活的或原封不動的材料時，先將其放在堅固密封的一級容器內，再密封在不能破損的二級容器里，經(jīng)過消毒劑浸泡或消毒熏蒸后通過專用氣閘取出。 除活體或原封不動的生物材料以外的物品，除非經(jīng)過消毒滅菌，否則不能從拿出。不耐高熱和蒸汽的器具物品可在專用消毒通道或小室內用熏

48、蒸消毒。 完成傳染性材料工作之后，特別是有傳染性材料溢出、濺出或污染時，都要嚴格徹底地滅菌。實驗室內儀器要進行常規(guī)消毒。 傳染性材料濺出的消毒清潔工作，由適宜的專業(yè)人員進行。并將事故的經(jīng)過在實驗室內公示。 建立報告實驗室暴露事故、雇員缺勤制度和系統(tǒng)，以便對與實驗室潛在危險相關的疾病進行醫(yī)學監(jiān)督。對該系統(tǒng)要建造一個病房或觀察室，以便需要時，檢疫、隔離、治療與實驗室相關的病人。 與實驗無關的物品（植物、動物和衣物）不許進入實驗室。 .3 安全設備（初級防護屏障） 在設施污染和半污染工作區(qū)域內的一切操作都應在級生物安全柜內進行。如工作人員穿著具有生命支持通風系統(tǒng)的正壓防護服，可在級生物安全柜內進行實

49、驗操作。 .4 實驗室設施（次級防護屏障） 實驗室有兩種類型：安全柜型，即所有病原微生物的操作均在級生物安全柜內或隔離器進行；防護服型，即工作人員穿正壓防護服工作，操作可在級生物安全柜內進行。也可以在同一設施內穿正壓防護服，并使用級生物安全柜。 安全柜型 建筑物或獨立，或在系統(tǒng)建筑中由一個清潔區(qū)或隔墻把它與其它區(qū)域隔離開。中心實驗室（污染區(qū)）裝有級生物安全柜，實驗室周圍為足夠寬的隔離帶，如環(huán)形走廊（半污染區(qū)）。從隔離帶進出實驗室必須通過一個緩沖間。 在污染區(qū)和半污染區(qū)之間，安裝兩臺以上生物安全型高壓蒸汽滅菌器（一次滅菌），互為備用。 外更衣室（清潔區(qū)）與內更衣室（半污染區(qū)）由淋浴間（清潔區(qū)）隔

50、開，人員進出經(jīng)過淋浴間。在清潔區(qū)與半污染區(qū)之間設置一個通風的雙門傳遞通道，為不可通過更衣室進入實驗室的實驗材料、實驗用品或儀器通過物理屏障時提供通道和消毒。在清潔區(qū)與半污染區(qū)之間同樣安置一臺生物安全型高壓滅菌器，用于二次消毒。 每天工作開始之前，檢查所有物理防護參數(shù)（如壓差）。 實驗區(qū)的墻、地和天棚整體密封，便于熏蒸消毒。內表面耐水和化學制劑、便于消毒。實驗區(qū)任何液體必須排放到有消毒裝置的儲液罐，經(jīng)過有效滅菌達標排放。通風口和在線管道都要安裝過濾器。 工作臺面不滲水，耐中等熱、有機溶劑、酸、堿和常用消毒劑的腐蝕。 實驗室用具事先設計，便于安放穩(wěn)妥和使用，彼此留有一定空間便于清潔衛(wèi)生，桌椅表面易

51、于消毒。 內外更衣室和實驗室進出門附近安裝非手動或自動開關的洗手池。 排風經(jīng)過個串連的過濾，送、排風過濾器安裝應便于消毒和更換。 供水、供氣均安裝防止回流的裝置加以保護。 如果提供水源（消防噴槍），其開關應該是安裝在實驗室外面走廊里，開關自動或非手動。此系統(tǒng)與實驗室區(qū)域供水分配系統(tǒng)分開，配備防止回流裝置。 實驗室進出門自動鎖閉。 實驗室內所有窗戶都必須是封閉窗。 從級安全柜和實驗室傳出的材料必須經(jīng)雙扉高壓滅菌器滅菌。滅菌器與周圍物理屏障的墻之間要密封。滅菌器的門自動連鎖控制，以保證只有在滅菌過程全部完成后才能開啟外門。 從級安全柜或實驗室內要拿出的材料和儀器，不能用高壓滅菌消毒的要通過液體浸泡消毒、氣體熏蒸消毒或同等效果的消毒裝置進行消毒和傳遞。 來自內更衣室（包括廁所）和實驗室內的洗手、地漏、高壓滅菌器的廢水以及其它廢水，在排入公共下水之前，都要使用可靠的方法消毒（熱處理比較合適）。淋浴和清潔區(qū)一側廁所的廢水不需特殊處理就可排入公共下水。所用廢水消毒方法必須具有物理學和生物學的監(jiān)測措施和法規(guī)確認。 非循環(huán)的負壓通風系統(tǒng)，供、排風系統(tǒng)應采用壓力無關裝置保持動態(tài)平衡，保證氣流從最低危險區(qū)向最高危險區(qū)的方向流動。對相鄰區(qū)域的壓差或氣流方向進行監(jiān)測，能進行系統(tǒng)聲光報警。應安裝一套能指示和確認實驗室壓差、適用而可視的氣壓監(jiān)測裝置，其顯示