臨床基因擴(kuò)增PCR試驗(yàn)室質(zhì)量手冊(cè)的書寫

1、臨床基因擴(kuò)增PC岐驗(yàn)室質(zhì)量手冊(cè)的書寫許斌(江蘇省臨床檢驗(yàn)中心)1質(zhì)量管理的歷史1950年代臨床實(shí)驗(yàn)室開始質(zhì)量控制(QualityControl,QC);1980年代參照工業(yè)的GMPf理思路建立良好實(shí)驗(yàn)室實(shí)踐準(zhǔn)則(GoodLaboratoryPractice,GLP;進(jìn)入質(zhì)量保證(Qualityassurance,QA);1990年代實(shí)驗(yàn)室引入質(zhì)量體系認(rèn)證及實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可制度，實(shí)現(xiàn)全面質(zhì)量管理(TQMTotalQualityManagement)質(zhì)量體系認(rèn)證ISO9000(2000版)；實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可ISO/IEC標(biāo)準(zhǔn)17025-2000校準(zhǔn)和檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室資格的通用要求；ISO/DIS標(biāo)準(zhǔn)15189-19

2、99“醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量管理。"2美國臨床實(shí)驗(yàn)室認(rèn)證?發(fā)證機(jī)構(gòu)：HCFA(HealthGareFinancingAdministrations),衛(wèi)生保健署?認(rèn)證依據(jù)，CLOA38行業(yè)認(rèn)可，強(qiáng)制，體系+能力?認(rèn)證中介機(jī)構(gòu)：*JCAHO(JointCommissiononAccreditationofHealthcareOrganizations)衛(wèi)生機(jī)構(gòu)認(rèn)可聯(lián)合委員會(huì)*CAP(CollegeofAmericanPathologist)美國病理家學(xué)會(huì)*COLA(CommissiononOfficeLaboratoryAccred-itation)醫(yī)生實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可委員會(huì)3我國實(shí)驗(yàn)室合格評(píng)定?

3、認(rèn)可*依據(jù)：ISO/IEC17025,15189*國家評(píng)審，自愿，體系+能力?認(rèn)證*依據(jù)：ISO9000:2000版*中介機(jī)構(gòu)，自愿，體系?行業(yè)技術(shù)驗(yàn)收*臨床實(shí)驗(yàn)室管理辦法，江蘇省醫(yī)院檢驗(yàn)科建設(shè)與管理規(guī)范*省、市臨床檢驗(yàn)中心，強(qiáng)制，體系+能力4PCR驗(yàn)收意義及驗(yàn)收依據(jù)2002年開始的PC戲驗(yàn)室驗(yàn)收工作開創(chuàng)臨床檢驗(yàn)技術(shù)準(zhǔn)入的先河、推動(dòng)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化建設(shè)、規(guī)范檢測(cè)市場(chǎng)、建立醫(yī)療事故預(yù)防機(jī)制。其依據(jù)為：臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理暫行辦法衛(wèi)醫(yī)發(fā)200210號(hào)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室工作規(guī)范衛(wèi)檢字20028號(hào)關(guān)于成立臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)專家組的通知蘇衛(wèi)醫(yī)200242號(hào)5規(guī)定應(yīng)具有的SOP(13個(gè))儀器設(shè)備的

4、維護(hù)保養(yǎng)程序、儀器設(shè)備的校準(zhǔn)程序、儀器設(shè)備的操作程序、臨床標(biāo)本收集程序、臨床標(biāo)本的處理(核酸純化)程序、臨床標(biāo)本的保存程序、試劑的質(zhì)檢操作程序、消耗品購置驗(yàn)收和儲(chǔ)存程序、廢棄物的處理程序、內(nèi)務(wù)管理程序、室內(nèi)質(zhì)量控制程序、核酸擴(kuò)增及產(chǎn)物分析檢測(cè)的操作程序、抱怨處理程序。6質(zhì)量管理體系6.1定義在質(zhì)量方面指揮和控制組織的管理體系。（QualityManagementSystem）管理體系是指建立方針和目標(biāo)并實(shí)現(xiàn)這些目標(biāo)的體系.實(shí)驗(yàn)室通過把組織機(jī)構(gòu)、職責(zé)、工作程序、質(zhì)量活動(dòng)過程和各類資源、信息等協(xié)調(diào)統(tǒng)一起來所形成的有機(jī)整體即為實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量體系。6。2質(zhì)量體系的文件構(gòu)成第一層：質(zhì)量手冊(cè)（綱領(lǐng)性文件）；

5、第二層：程序性文件（體系要素的規(guī)定）；第三層：作業(yè)指導(dǎo)書（具體項(xiàng)目的操作指導(dǎo)）；第四層：記錄包括表格、簽名、原始記錄、報(bào)告等質(zhì)量記錄和技術(shù)記錄。6.3 質(zhì)量手冊(cè)定義GB/T6583定義：質(zhì)量手冊(cè)是闡明一個(gè)實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量方針，并描述質(zhì)量體系的文件。它既是質(zhì)量體系的表征形式，又是質(zhì)量體系建立和運(yùn)行的綱領(lǐng)。它對(duì)實(shí)驗(yàn)室的組織結(jié)構(gòu)（含職責(zé)）、程序、活動(dòng)能力（過程）和資源作出規(guī)定，是實(shí)驗(yàn)室長期遵循的文件。6。4質(zhì)量手冊(cè)的分類根據(jù)手冊(cè)的內(nèi)容和用途分為二類：質(zhì)量保證手冊(cè)-用于證明，供客戶使用，質(zhì)量管理手冊(cè)一一用于運(yùn)行，供實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部使用.6.5 質(zhì)量手冊(cè)的作用編寫質(zhì)量手冊(cè)的健全和完善質(zhì)量體系的首要環(huán)節(jié)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)室

6、的內(nèi)外因素合理調(diào)整、選擇體系要素，分配和落實(shí)質(zhì)量職責(zé)，理順管理關(guān)系，明確管理責(zé)任，合理安排各類文件的層次，把實(shí)驗(yàn)室積累的經(jīng)驗(yàn)變成法規(guī)性文件。協(xié)調(diào)各工作環(huán)節(jié)的準(zhǔn)則。內(nèi)部質(zhì)量審核的依據(jù)；對(duì)外證實(shí)實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量保證能力，提高客戶的信任度。6。6質(zhì)量手冊(cè)的特征?以客戶為關(guān)注焦點(diǎn)：以病人為中心，為臨床服務(wù)？領(lǐng)導(dǎo)作用：創(chuàng)造使員工能夠充分參與實(shí)現(xiàn)目標(biāo)的環(huán)境?全員參與：各負(fù)其責(zé)?過程方法：將資源和活動(dòng)作為過程進(jìn)行有效管理?管理的系統(tǒng)方法：各個(gè)過程的有效連接?持續(xù)改進(jìn)：根據(jù)實(shí)際不斷完善?基于事實(shí)的決策方法：遵循科學(xué)，實(shí)事求是出報(bào)告?與供方互利的關(guān)系：相互協(xié)作，共同獲利6。7質(zhì)量手冊(cè)的結(jié)構(gòu)?封面?批準(zhǔn)頁：包括實(shí)驗(yàn)室

7、名稱、標(biāo)志，發(fā)行版次，生效日期，批準(zhǔn)人簽名，手冊(cè)編號(hào)，受控狀態(tài)。?實(shí)驗(yàn)室公正性聲明?修訂頁：以表格描述修訂序號(hào)、修訂的章節(jié)條款和簡(jiǎn)要內(nèi)容、批準(zhǔn)人及日期。?目錄：各章節(jié)條款的名稱及頁碼?前言：介紹實(shí)驗(yàn)室的一般情況和手冊(cè)的適用范圍以及手冊(cè)中術(shù)語或縮略語的定義?手冊(cè)的管理：對(duì)手冊(cè)的保存、分發(fā)、評(píng)審、修訂以及保密作出規(guī)定?質(zhì)量方針及目標(biāo)?組織結(jié)構(gòu)及人員責(zé)權(quán)利關(guān)系?要素描述：由系列SO我件對(duì)溯源、人、機(jī)、料、樣、法、測(cè)等質(zhì)量諸要素的陳述?支持性文件：包括實(shí)驗(yàn)室平面圖、人員一覽表、儀器設(shè)備一覽表、引用標(biāo)準(zhǔn)及參考文獻(xiàn)等6.8 標(biāo)準(zhǔn)操作程序StandardOperationalProcedure,簡(jiǎn)稱SOP程

8、序的定義為：為進(jìn)行某項(xiàng)活動(dòng)所規(guī)定的途徑。SOP是臨床實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部以文件的形式對(duì)質(zhì)量活動(dòng)用規(guī)定的方法進(jìn)行連續(xù)而恰當(dāng)?shù)目刂?。?shí)驗(yàn)室的SO的涵蓋所有的質(zhì)量活動(dòng)，包括檢測(cè)或校準(zhǔn)計(jì)劃、管理性程序、技術(shù)性程序、項(xiàng)目操作程序和記錄表格等。由于影響每個(gè)實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量活動(dòng)的條件和因素不一樣，一個(gè)SOP只在某個(gè)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)有效，而不一定適用于其他實(shí)驗(yàn)室6。9標(biāo)準(zhǔn)操作程序的一般要求?對(duì)完成各項(xiàng)質(zhì)量活動(dòng)的方法作出規(guī)定，每個(gè)SOPTB應(yīng)對(duì)一個(gè)或一組相互關(guān)系的活動(dòng)進(jìn)行描述；?每個(gè)SO陟說明該項(xiàng)質(zhì)量各環(huán)節(jié)的輸入、轉(zhuǎn)換和輸出所需的文件、物資、人員、記錄以及它們與有關(guān)活動(dòng)的接口關(guān)系；?規(guī)定開展質(zhì)量活動(dòng)的各個(gè)環(huán)節(jié)的物資、人員、信息和環(huán)境

9、等方面應(yīng)具備的條件；?明確每個(gè)環(huán)節(jié)轉(zhuǎn)換過程中各項(xiàng)因素的要求，即由誰做、做什么、做到什么程序、達(dá)到什么要求，如何控制、形成什么記錄和報(bào)告，以及相應(yīng)的審批手續(xù)；?規(guī)定在質(zhì)量活動(dòng)中需要注意的例外或特殊情況的糾正措施；?SOP應(yīng)簡(jiǎn)練、明確和易懂并且工作人員熟練掌握和嚴(yán)格遵守。6。10推薦PCR實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量手冊(cè)目錄1.質(zhì)量方針和宗旨2.工作制度2.1 實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置、布局及組織結(jié)構(gòu)2.2 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)務(wù)管理制度2。3實(shí)驗(yàn)室的人員配置及管理制度2。4生物防護(hù)與安全制度2.5 實(shí)驗(yàn)室廢棄物處理制度2。6實(shí)驗(yàn)室清潔消毒制度2。7儀器設(shè)備的管理制度2。8儀器、試劑、耗材購置程序及管理制度2.9 臨床標(biāo)本的管理制度2。1

10、0實(shí)驗(yàn)室記錄的管理制度2。11質(zhì)量控制工作管理制度2。12結(jié)果報(bào)告管理制度2.13 崗位責(zé)任制2.14 抱怨制度3。操作指導(dǎo)書（SOP）3.1 消毒標(biāo)準(zhǔn)操作程序3.2 超凈工作臺(tái)使用標(biāo)準(zhǔn)操作程序3.3 超凈工作臺(tái)維護(hù)和保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序3.4 PCF使用標(biāo)準(zhǔn)操作程序3.5 PCR儀維護(hù)和保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序3。6臺(tái)式離心機(jī)使用標(biāo)準(zhǔn)操作程序3。7高速冷凍離心操作標(biāo)準(zhǔn)操作程序3。8移液器使用標(biāo)準(zhǔn)操作程序3.9 加樣器校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序3。10冰箱維護(hù)和保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序3。11電熱恒溫水浴箱操作程序3。12電子天平使用和校正操作程序3.13 可移動(dòng)紫外消毒車使用操作程序3。14溫度計(jì)校準(zhǔn)程序3。15試劑的質(zhì)

11、檢操作程序3。16標(biāo)本唯一標(biāo)識(shí)編號(hào)編制規(guī)則3.17 臨床標(biāo)本的采集及處理操作程序3.18 臨床標(biāo)本的保存程序3.19 乙肝病毒核酸擴(kuò)增熒光檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)操作程序3.20 室內(nèi)質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)操作程序3。21室間質(zhì)評(píng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序4。引用圖表4.1 實(shí)驗(yàn)室組織結(jié)構(gòu)圖4。2實(shí)驗(yàn)室工作人員一覽表4。3人員培訓(xùn)計(jì)劃及培訓(xùn)記錄表4。4主要儀器設(shè)備一覽表4.5臨床送檢標(biāo)本流程圖4。6PCR擴(kuò)增可接受標(biāo)本記錄表4.7 PCR擴(kuò)增拒收標(biāo)本記錄表4.8 室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果記錄表4。9室間質(zhì)控記錄表4。10消耗性材料驗(yàn)收記錄表4.11 試劑驗(yàn)收記錄表4.12 故障處理表4.13 儀器設(shè)備使用記錄表4。14儀器設(shè)備維護(hù)保養(yǎng)記錄表4.

12、15 實(shí)驗(yàn)室清潔消毒記錄表4.16 工作區(qū)溫度、濕度記錄表4。17抱怨記錄表4.18 標(biāo)本超低溫保存記錄表4。19應(yīng)急處理記錄表4。20垃圾處理記錄表4。21冰箱溫度記錄表4.22 水浴箱溫度記錄表4。23移動(dòng)紫外消毒車記錄表4.24 設(shè)備校正記錄表4。25檢測(cè)結(jié)果報(bào)告流程4。26報(bào)告單樣張6.11 文件格式一目的二范圍三職責(zé)四工作流程五引用文件及表格6。12寫作技巧?目的：WHY為什么要開展這項(xiàng)活動(dòng)?范圍:WHAT活動(dòng)涉及的方面?職責(zé)：WHO+WHAT做，誰負(fù)責(zé)?工作流程：列出活動(dòng)順序和細(xì)節(jié)，明確各環(huán)節(jié)“輸入一一轉(zhuǎn)換一-輸出”，即做何事（WHAT、何人做（WHO）何時(shí)做（WHEN、何地做（W

13、HERE）如何做（HOVV?引用文件和表格：開展此項(xiàng)活動(dòng)涉及的文件、標(biāo)準(zhǔn)以及使用的表格、證明文件和記錄保存期7評(píng)審中常見問題7.1 手冊(cè)文件不全，無系統(tǒng)性；質(zhì)量要素描述不全；格式不對(duì)；與實(shí)際工作脫節(jié)；無現(xiàn)行有效性（無手簽，各區(qū)無相應(yīng)手冊(cè)）；記錄不全、不規(guī)范7.2 人員人員檔案：每人一個(gè)檔案袋，有關(guān)資格證書（如上崗證）、培訓(xùn)、技能和經(jīng)歷等培訓(xùn)計(jì)劃及實(shí)施記錄：每人有年度、季度、月的培訓(xùn)內(nèi)容及實(shí)施記錄；內(nèi)容包括外出學(xué)習(xí)、進(jìn)彳,內(nèi)部質(zhì)量手冊(cè)學(xué)習(xí)、業(yè)務(wù)學(xué)習(xí)、新項(xiàng)目引進(jìn)等。7.3 設(shè)施與環(huán)境通風(fēng)、紫外、清潔、消毒的程序及記錄、生物安全防護(hù)的程序及記錄、生物垃圾的處理。7.4 儀器設(shè)備采購程序及驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)；校

14、準(zhǔn)程序及狀態(tài)標(biāo)識(shí)，使用、維護(hù)、保養(yǎng)的程序及記錄；檔案：每個(gè)與檢測(cè)質(zhì)量相關(guān)的設(shè)備均應(yīng)建檔，內(nèi)容包括：設(shè)備的名稱；制造商名稱、型號(hào)、序號(hào)或其它唯一性標(biāo)識(shí)；接收日期和啟用日期；）目前放置地點(diǎn)；接收時(shí)的狀態(tài)（例如全新的、經(jīng)改裝的）；儀器使用說明書或其復(fù)印件；校準(zhǔn)和/或檢測(cè)的日期和結(jié)果以及下次校準(zhǔn)和/或檢測(cè)的日期；迄今所進(jìn)行的維護(hù)和今后維護(hù)計(jì)劃的細(xì)節(jié)；損壞、故障、改裝或修理的歷史。7.5 料（試劑、耗品）采購程序及領(lǐng)用記錄，質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)、程序及記錄，應(yīng)急程序；缺貨、試劑變質(zhì)；室內(nèi)質(zhì)控品.7.6 樣（品）標(biāo)本唯一編號(hào)，年月日項(xiàng)目順序號(hào)；標(biāo)本采集標(biāo)準(zhǔn)操作程序；標(biāo)本接受（拒收）標(biāo)準(zhǔn)、交接記錄；標(biāo)本保存、銷毀的程序及記錄；標(biāo)本處理標(biāo)準(zhǔn)操作程序7。6（方）法方法學(xué)的有效性-依據(jù)；SOP-合理性一一生搬硬套；分區(qū)操作的協(xié)作-流程合理；質(zhì)控點(diǎn)的安排-提取效率、擴(kuò)增效率；基線的調(diào)整一一CT值、本底