土壤微生物多樣性及其研究方法綜述

1、JournalofAnhuiAgriSci2011，39（28）：1727417276，17278安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，責(zé)任編輯金蘋責(zé)任校對況玲玲土壤微生物多樣性及其研究方法綜述蔡晨秋，唐麗，龍春林（中央民族大學(xué)生命與環(huán)境科學(xué)學(xué)院，北京100081）摘要圍繞土壤微生物多樣性的內(nèi)涵，可將土壤微生物多樣性分為遺傳多樣性、功能多樣性、物種多樣性和生態(tài)多樣性4個(gè)研究層面；另將土壤微生物多樣性的主要研究方法歸為3類，即：傳統(tǒng)平板培養(yǎng)法、生物化學(xué)方法和分子生物學(xué)方法，并分別對各方法進(jìn)行介紹和評(píng)述，最后提出該領(lǐng)域研究的發(fā)展趨勢。關(guān)鍵詞微生物多樣性；PLFA；FISH；PCR；宏基因組學(xué)中圖分類號(hào)S1543文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼

2、A文章編號(hào)05176611（2011）281727403SoilMicrobialDiversityandItsResearchMethodsCAIChen-qiuetal（CollegeofLifeandEnvironmentalSciences，MinzuUniversityofChina，Beijing100081）AbstractThisarticlefocusesontheintensionofsoilmicrobialdiversity，dividessoilmicrobialdiversityintofourresearchlevels：geneticdi-functionald

3、iversity，speciesdiversityandecologicaldiversityThearticledividesthemainresearchmethodsintothreecategories：con-versity，ventionalflatmethod，biochemicalmethodandmolecularbiologymethod，thenintroducesandreviewsthemrespectivelyandlooksforwardtothetrendofdevelopmentintheendKeywordsMicrobialdiversity；PLFA；F

4、ISH；PCR；Metagenomics土壤是最豐富的微生物資源庫，其微生物數(shù)量龐大、生態(tài)功能活躍。近年來，由于人口的增加、自然資源的過度開發(fā)、環(huán)境污染的加劇以及外來物種的入侵，土壤微生物多樣性受到強(qiáng)烈干擾。土壤微生物多樣性的研究涉及土壤學(xué)、微生物學(xué)及生態(tài)學(xué)，該項(xiàng)研究能對探索自然生命機(jī)制、應(yīng)對全球氣候變化、治理各類環(huán)境污染及維持生態(tài)服務(wù)功能等作為整個(gè)生物多樣性研究的重方面產(chǎn)生重要意義。然而，要組成部分，由于土壤微生物的復(fù)雜性和研究技術(shù)不完善等原因，土壤微生物多樣性的全球性研究僅有不到20年的時(shí)間。從國內(nèi)外研究現(xiàn)狀來看，微生物多樣性研究正處于實(shí)踐積累13物的多樣性在基因水平上更為突出，不同種群間

5、的遺傳物質(zhì)和基因表達(dá)具有很大差異10。除了組成核酸分子的堿基數(shù)DNA復(fù)制中出現(xiàn)的堿基量的巨大性和排列順序的多樣性外，對變化、雙鏈/單鏈DNA、雙鏈/單鏈RNA等多種遺傳形式的存在，轉(zhuǎn)導(dǎo)、轉(zhuǎn)化和接合等微生物特有的基因重組現(xiàn)象，使微生物遺傳多樣性大大擴(kuò)展11。該水平上微生物多樣性的研12究要求高質(zhì)量地獲得生物大分子，對生物大分子進(jìn)行基因?qū)用娴牟僮鞑⑦M(jìn)行精細(xì)的程序化檢測12生理多樣性。生理多樣性可分為生理結(jié)構(gòu)和生理功能的多樣性。微生物的細(xì)胞組分和形態(tài)結(jié)構(gòu)有廣泛差異，體現(xiàn)了其生理結(jié)構(gòu)的多樣性。微生物細(xì)胞的生化組成成分或其可作為生物標(biāo)志物細(xì)胞外分泌產(chǎn)物具有類屬特異性，13和理論框架構(gòu)建階段4。隨著研究方

6、法的改進(jìn)，特別是分子生物學(xué)技術(shù)向生態(tài)學(xué)滲透，土壤微生物學(xué)的研究愈發(fā)深入。1土壤微生物多樣性概述土壤微生物多樣性指生命體在遺傳、種類和生態(tài)系統(tǒng)層次上的變化，它代表著微生物群落的穩(wěn)定性，也反映土壤生態(tài)機(jī)制和土壤脅迫對群落的影響個(gè)層次上綜合表述能多樣性765。而生理功能多樣性則包括代謝類型和功能活性等的多樣性，例如不同的微生物群落對特定底物的利用有不同的特征。該水平上微生物多樣性的研究依賴于在特定條件下對微生物的觀察、對細(xì)胞組分的分析以及對生化反應(yīng)的程度、底物、位置等的測定。13物種多樣性微生物物種多樣性主要指微生物物種構(gòu)成、數(shù)量的豐富性。而物種的差異主要體現(xiàn)在遺傳物質(zhì)和生理特征的差異上，所以對該層

7、面的研究，在具體的試驗(yàn)里還需以遺傳和生理多樣性的研究方法作為認(rèn)識(shí)工具。14生態(tài)多樣性生態(tài)多樣性可分為生態(tài)結(jié)構(gòu)以及生態(tài)功能多樣性。前者包括生境分布廣泛性和種群、群落結(jié)構(gòu)的多后者主要指微生物與其他生物和非生物環(huán)境間的關(guān)樣性，系11，14。Delong認(rèn)為生物多樣遺傳（基因）多樣性和生態(tài)系統(tǒng)多樣性3性應(yīng)從物種多樣性、。王剛等對土壤微生物群落多樣性進(jìn)提出3個(gè)組成要素：遺傳多樣性、物種多樣性和功行剖析后，。林先貴等認(rèn)為，土壤微生物多樣性存在于基8因、物種、種群以及群落等4個(gè)層面。而Watve等則認(rèn)為，土壤微生物多樣性可細(xì)致劃分為生長繁殖速度多樣性、營養(yǎng)生活方式多樣性、基因多樣性和微生物和代謝類型多樣性、

8、資源開發(fā)利用多樣性等9?，F(xiàn)綜合對已有文獻(xiàn)提出的概念的分析，從微生物生命活動(dòng)層次的角度出發(fā)，筆者將土壤微生物多樣性分為遺傳多樣性、生理多樣性、物種多樣性和生態(tài)多樣性4個(gè)方面。11遺傳多樣性土壤微生物的遺傳多樣性是指土壤微生物在基因水平上所攜帶的各類遺傳物質(zhì)和遺傳信息的總和，是微生物多樣性的本質(zhì)和最終反映。與高等生物相比，微生。該層面常需要研究微生物在特定時(shí)空和介質(zhì)中的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、代謝和種群分布等，也即微生物在特定環(huán)境中的對原位檢測有特別要求。生態(tài)多樣性，221土壤微生物多樣性的主要研究方法傳統(tǒng)微生物平板培養(yǎng)法傳統(tǒng)的微生物平板培養(yǎng)法是根據(jù)目標(biāo)微生物選擇相應(yīng)的專性固體培養(yǎng)基進(jìn)行分離培養(yǎng)，然后通過各種

9、微生物的生理生化特征、外觀形態(tài)及其菌落數(shù)來該類方法中使用最多的是平板菌計(jì)測微生物的數(shù)量及其類型，落計(jì)數(shù)法。但是由于自然環(huán)境，尤其是極端環(huán)境中存在大量15，不可培養(yǎng)的微生物（Unculturablemicroorganisms，UCM）作者簡介蔡晨秋（1988），女，河南漯河人，碩士研究生，研究方向：E-mail：xuehai0323126com。微生物生態(tài)學(xué)，06-27收稿日期2011-39卷28期蔡晨秋等土壤微生物多樣性及其研究方法綜述17275傳統(tǒng)的研究方法只能反映極少數(shù)微生物的信息，所測結(jié)果誤差較大，埋沒了大量極有應(yīng)用價(jià)值的微生物資源。因此，傳并且只有與其他先進(jìn)方統(tǒng)培養(yǎng)方法只能作為一種輔

10、助手段，法結(jié)合起來，才能較為客觀而全面地反映土壤微生物群落結(jié)構(gòu)的真實(shí)信息2216得結(jié)果需采用一定的統(tǒng)計(jì)方法進(jìn)行分析。Biolog微平板法描述的只是土壤中快速生長型或富營而不能反映土壤中生長緩慢的微生物養(yǎng)微生物類群的活性，pH等方面的改信息。另外，由于培養(yǎng)環(huán)境如濕度、滲透壓、變都可能引起微生物對碳底物實(shí)際利用能力的改變19。，而生物化學(xué)方法但由于該法可快速、造成一定的誤差。盡管存在不足之處，簡便地獲得大量土壤微生物群落結(jié)構(gòu)和功能多樣性方面的仍被認(rèn)為是一種較好的方法。且在使用Biolog微平板信息，法時(shí)，如結(jié)合其他方法，依然可獲得較全面的結(jié)果。222磷脂脂肪酸譜圖分析法（PLFA）。PLFA常被用

11、于20221Biolog微平板法。Biolog微平板法是測定土壤微生物進(jìn)而用以表征土對95種不同碳源的利用能力及其代謝差異，壤微生物代謝功能多樣性或結(jié)構(gòu)多樣性的方法。利用由95孔將土壤不同單一碳源和1個(gè)對照孔組成的Biolog微平板系統(tǒng)，在一定的溫育時(shí)間內(nèi)，由于不溶液接種到每一個(gè)微平板孔中，同的微生物對不同單一碳源利用程度和強(qiáng)度不同，而發(fā)生不同最終使得每一個(gè)孔的溶液呈現(xiàn)出不同程度的的生化代謝反應(yīng)，微平板中每一孔的顏色變化可通過酶標(biāo)儀測定和記錄下顏色，“代謝指紋”（Metabolic來，這樣便可得到土壤微生物特有的Fingerprint）17。該法最初是用作純種微生物的鑒定18，方常用于表征土壤

12、微生物群落的功能潛力，即被法被改進(jìn)后，用于估計(jì)諸如碳源利用模式等功能多樣性。當(dāng)作此用途時(shí)，接種物是來自土壤微生物群落的混合物（而不是純培養(yǎng)），所表1Table1研究復(fù)雜群落中微生物的多樣性，表征在數(shù)量上占優(yōu)勢的土壤微生物群落，包括不可培養(yǎng)微生物。磷脂是所有活而PLFA是磷脂的組分，其具有細(xì)胞的細(xì)胞膜的基本組分，因此，總PLFA譜中某些結(jié)構(gòu)多樣性和高的生物學(xué)特異性，特征脂肪酸分別對細(xì)菌、真菌和放線菌特異，是特別有效的可用于了解微生物群落結(jié)構(gòu)。PLFA或酯鏈生物標(biāo)記物，PLFA（EL-PLFA）的總量亦被用作土壤樣品中微生物生物量的指示物。PLFA方法表征幾大類微生物的重要脂肪酸見表1。2122表

13、征微生物的磷脂脂肪酸譜圖分析法（PLFA）PLFAsignaturesofmicrobesi、cy和Me分別表示反異（anteiso）、注：a、異（iso）、環(huán)丙基（cyclopropyl）和甲基（methyl）分枝脂肪酸。Note：a，i，cyandMestandforanteiso，iso，cyclopropylandmethyl23231分子生物學(xué)方法基于核酸分子雜交技術(shù)的方法。核酸分子雜交技術(shù)樣品中的微生物進(jìn)行原位檢測23221?；赑CR技術(shù)的方法。PCR是1985年由Mullis發(fā)是20世紀(jì)70年代發(fā)展起來的一種新的分子生物學(xué)技術(shù)，它是根據(jù)核酸分子堿基互補(bǔ)配對的原理，用特異性探針（

14、用放射性同位素和熒光染料標(biāo)記）與待測樣品的DNA或RNA形成雜交分子，結(jié)合了標(biāo)記探針的細(xì)胞就可通過放射自顯影或熒光顯微鏡被檢測出來23明的一種聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)，主要特點(diǎn)是短時(shí)間內(nèi)在實(shí)驗(yàn)室條件下人為地控制并特異擴(kuò)增目的基因或DNA片段，以便于對已知DNA片斷進(jìn)行分析。幾種基于PCR技術(shù)的微生物多樣性研究方法如下。2321擴(kuò)增核糖體基因限制性分析法（ARDAR）。ARDAR23SrD-是基于PCR反應(yīng)選擇性擴(kuò)增rDNA片斷（如16SrDNA、NA、16-23SrDNA片斷），再對擴(kuò)增的rDNA片斷進(jìn)行限制性酶切片斷長度多態(tài)性分析，進(jìn)而對微生物的多樣性進(jìn)行分析。該項(xiàng)技術(shù)是從環(huán)境樣本中獲得高質(zhì)量的微

15、生物總DNA，以總DNA為模板，根據(jù)微生物rDNA序列的保守性設(shè)計(jì)引物，采用PCR技術(shù)將目的rDNA片斷擴(kuò)增出來；選擇25種4堿基識(shí)別位點(diǎn)的限制性內(nèi)切酶，對擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行限制性酶切；選用合。由于它的高度特異性和靈敏24性，近年來被廣泛應(yīng)用于土壤微生物多樣性的研究。該類方法中，熒光原位雜交技術(shù)（FISH）是研究環(huán)境中不可培養(yǎng)微生物群落多樣性最為常用和有效的手段。該技術(shù)是根據(jù)已知微生物不同分類級(jí)別上種群特異的DNA序列，以熒光標(biāo)記的特異寡聚核苷酸片段作為探針，與環(huán)境基因組中DNA分子雜交，檢測該特異微生物種群的存在與豐度25。FISH技術(shù)使直接顯現(xiàn)土壤棲息地微生物成為可能，可用于對土壤17276安徽

16、農(nóng)業(yè)科學(xué)2011年適濃度的瓊脂糖凝膠溶液，進(jìn)行酶切的16SrDNA片斷的電泳，通過酶切圖譜分析菌間的多樣性。如果得到的電泳圖譜中條可以應(yīng)用計(jì)算機(jī)軟件（如GelCompar軟件）進(jìn)行聚類帶較多，分析，得到反映菌株間系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系的聚類分析樹狀圖譜。由于此方法不受菌株是否純培養(yǎng)的限制，不受宿主的干擾，具有特異性強(qiáng)、效率高的特點(diǎn)，因此被廣泛用于微生物，尤其寄生菌的多樣性研究是共生菌、232226（CommunityGenomies），由Handelsman等于1998年提出，定“利用現(xiàn)代基因組技術(shù)直接研究自然狀態(tài)環(huán)境中的微生義為而不需要經(jīng)過分離、培養(yǎng)單一種類的微生物有機(jī)體群落，物”其最初用來定義土壤細(xì)

17、菌混合基因組34。目前，宏基35因組主要指環(huán)境樣品中全部微小生物遺傳物質(zhì)的總和。應(yīng)用于土壤微生物多樣性研究是通過直接提取土壤樣品總DNA，并進(jìn)行限制性內(nèi)切酶酶切，獲得大片斷的DNA后直接然后對文與特定的載體連接構(gòu)建克隆文庫（如BAC文庫），庫進(jìn)行篩選或者直接進(jìn)行高通量測序的分析技術(shù)（如454測序技術(shù)）3637。限制性片段長度多態(tài)性技術(shù)（RFLP）。RFLP是利用限制性內(nèi)切酶特性及電泳技術(shù)，對特定的DNA片段的限根據(jù)片段的大小以及標(biāo)記片段種制性內(nèi)切酶產(chǎn)物進(jìn)行分析，評(píng)價(jià)微生物的群落結(jié)構(gòu)及多樣性。該法與類和數(shù)量的不同，ARDRA法一樣，都是基于DNA多態(tài)性研究微生物多樣性的方法27。Rondon等利

18、用插入大片段DNA的BAC載體，構(gòu)建了270、445和980kb等大小不同的土壤宏基因組文庫，對文庫16SrRNA基因序列的系統(tǒng)發(fā)育學(xué)分析，其結(jié)果表明，文庫中的DNA包含來源于不同系統(tǒng)分類單位下的許多微生物，揭示了微生物極廣泛的多樣性38，是ARDRA法的進(jìn)一步發(fā)展，可用來分析復(fù)雜群落。RFLP反映了DNA水平上的變異，任何DNA序列的改變（如插入、重排、缺失等）都會(huì)改變原有酶切位點(diǎn)所在位置，從而26使兩酶切點(diǎn)間的DNA片段長度發(fā)生變化。該技術(shù)可以。Treusch等從沙地生態(tài)系統(tǒng)和森林土壤中提取DNA構(gòu)建了3個(gè)大片段福斯（Fosmid）質(zhì)?；驇?；對古細(xì)菌存在更豐富的微生物資源；同時(shí)，該研究還

19、發(fā)多樣性研究發(fā)現(xiàn)，現(xiàn)，對古細(xì)菌的研究可以利用除16SrRNA基因以外的功能基因39（如mcrA，amoA，nirk）進(jìn)行分類學(xué)上的研究。是研究微生物多樣性的有效工具。對大量土樣進(jìn)行分析，2323變形梯度凝膠電泳（DGGE）/溫度梯度電泳（TGGE）。DGGE和TGGE是相關(guān)聯(lián)的技術(shù)，二者工作原理是根據(jù)PCR擴(kuò)增的基因或基因片段核苷酸序列的不同進(jìn)行片段的分離。DGGE根據(jù)DNA在不同濃度的變性劑中解鏈行為的不同而從而將片段大小相同而堿基組成導(dǎo)致電泳遷移率發(fā)生變化，不同的DNA片段分開；而TGGE使用固定濃度的尿素和甲酰胺以促進(jìn)DNA解鏈，電泳時(shí)PCR產(chǎn)物是在以線性溫度梯度的凝膠中遷移，而造成不同

20、DNA片段解鏈時(shí)間的差異283小結(jié)土壤微生物作為穩(wěn)定生態(tài)系統(tǒng)、監(jiān)測土壤質(zhì)量變化的敏其多樣性研究在評(píng)價(jià)生態(tài)系統(tǒng)、維護(hù)生態(tài)平衡中發(fā)感指標(biāo)，隨著土壤學(xué)、分子生物學(xué)、生態(tài)學(xué)及其揮了巨大作用。近年來，他相關(guān)學(xué)科理論、技術(shù)和方法的不斷完善，土壤微生物多樣性研究得到了快速發(fā)展，并獲得了一些極有價(jià)值的研究成果。該合理開發(fā)利研究成果為推動(dòng)土壤微生物生態(tài)學(xué)的進(jìn)一步發(fā)展，也為實(shí)現(xiàn)土壤資源的持續(xù)用土壤生物資源開創(chuàng)了廣闊的前景，利用提供科學(xué)依據(jù)。而土壤微生物區(qū)系及多樣性在土壤生態(tài)土壤微生物多樣性的功能與生理生態(tài)學(xué)過系統(tǒng)過程中的作用、土壤微生物多樣性與生態(tài)系統(tǒng)功能的關(guān)系、土壤微生程研究、物多樣性對環(huán)境變化的響應(yīng)以及土壤微

21、生物多樣性的喪失機(jī)制與恢復(fù)研究等將成為該領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。另外，隨著微生物多樣性研究向微觀和宏觀2個(gè)方向拓展，各種研究方法在微生物多樣性各層面的研究中都得到廣基因測序技術(shù)及宏基因組分析技術(shù)是土壤微泛應(yīng)用。其中，生物多樣性研究的前沿。通過對基因組文庫中的基因序列的系統(tǒng)化研究，使土壤微生物的多樣性分析趨于完整客觀。應(yīng)用免培養(yǎng)的新方法和新技術(shù)，可繞過微生物菌種分離培養(yǎng)直接在基因水平上研究、開發(fā)和利用無法培這一技術(shù)難關(guān)，養(yǎng)的微生物資源，有利于揭示不可培養(yǎng)微生物的基因多樣為研究土壤微生物復(fù)雜群落結(jié)構(gòu)提供了重要工具。性，參考文獻(xiàn)1FANGH，DAMODARANPN，CAOMArbuscularmycorrh

22、izalstatusofGlomusplantsintropicalsecondaryforestofXishuangbanna，SouthwestChinaJActaEcologicaSinica，2006，26（12）：417941852CHENZ，WANGXK，DUANXNOzoneeffectsonwheatrootandsoilmicrobialbiomassanddiversityJActaEcologicaSinica，2007，27（5）：180318083KONDAKOVAGV，VERKHOVTSEVANV，OSIPOVGAInvestigationofmicrobialdi

23、versityofundergroundwatersinmonitoringdeephorizonsofscrustJMoscowUniversityBiologicalSciencesBulletin，theEarth2007，62（2）：6975。這2種方法中，同樣大小但來自不同微生物PCR產(chǎn)物會(huì)在凝進(jìn)而被分開。DGGE和TGGE已廣膠的不同位置停止移動(dòng)，群落動(dòng)態(tài)、混合種群中的泛用于微生物群落的遺傳多樣性、基因表達(dá)和細(xì)菌分離中特殊物種多度檢測等的研究中2932。實(shí)際應(yīng)用中，通常用PCR擴(kuò)增SSUrDNA，擴(kuò)增產(chǎn)物用凝膠電泳分離并進(jìn)行分析。目前最常用的分析方法的基本步驟如下：抽提土壤DNA；

24、PCR擴(kuò)增SSUrDNA（16SrD-NA或18SrDNA）；PCR產(chǎn)物的DGGE或TGGE分離及帶譜分析；回收電泳片段；DNA序列測定；將測得的SSUrDNA序列與rDNA序列數(shù)據(jù)庫中已知微生物的rDNA序列相比較；獲得土壤中可能含有的微生物的信息。2324單鏈構(gòu)象多態(tài)性技術(shù)（SSCP）。SSCP是一種基于DNA構(gòu)象差別而進(jìn)行快速、靈敏、有效檢測基因點(diǎn)突變的方經(jīng)高溫法。經(jīng)PCR擴(kuò)增的片段在變性劑或低離子濃度下，DNA單鏈可折疊成一定處理使之解鏈并保持在單鏈狀態(tài)下，在不含變形劑的中性聚丙酰胺凝膠中電泳時(shí)，的空間構(gòu)象，相同長度DNA單鏈因其堿基序列不同，甚至單個(gè)堿基不同，導(dǎo)致形成的構(gòu)象不同，而且

25、單鏈DNA構(gòu)象的變化就引起了遷移率的改變，每條單鏈處于一定的位置，靶DNA中若發(fā)生插入或單個(gè)堿基置換時(shí)，就會(huì)出現(xiàn)脈動(dòng)變位，通過堿基缺失、顯色或顯影后在凝膠上就會(huì)顯示出帶型的差別，即多態(tài)性33。SSCP方法已被成功用于研究根系微生物和高溫堆肥宏基因組學(xué)（Metagenomics）技術(shù)。宏基因組學(xué)也稱的微生物群體組成以及污染條件下的微生物生態(tài)多樣性。233為環(huán)境基因組學(xué)（EnvironmentalGenomies）或群落基因組學(xué)（下轉(zhuǎn)第17278頁）17278安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)2011年39%、13%、20%、87%。這說明與處理相比，處理能形成更多的有效分蘗，也有明顯的增產(chǎn)效果。各處理的結(jié)實(shí)率大小順序

26、為處理處理處理。222濕谷產(chǎn)量。研究表明，處理濕谷產(chǎn)量分別為95520、98490、10641kg/hm2，處理、分別比處理31%，增產(chǎn)113%、處理與處理、之間差異達(dá)到001顯著水平，處理與處理之間差異不顯著。由此可知，處理增產(chǎn)效果明顯。223干谷產(chǎn)量。從濕谷重、干谷重的對比來看，處理186%、181%，水分系數(shù)分別為189%、以處理最小，且處差別很小。處理干谷產(chǎn)量分別為77475、理、80175、87150kg/hm2，處理、分別比處理增產(chǎn)125%、31%，處理比處理增長84%。方差分析結(jié)果表明，處理與處理、之間達(dá)到001水平顯著差異，處理、之間差異不顯著。這說明處理與處理、間有005水平

27、顯著的處理與處理相比增產(chǎn)效果不太明顯。由此可增產(chǎn)效果，處理在提高籽粒的千粒重等方面具有一定的作用。知，224效益比。由于3個(gè)處理中其他成本都一樣，只分析3個(gè)處理的單位面積使用成本，將產(chǎn)量折算成現(xiàn)金計(jì)算效結(jié)果表明處理益比。按糧食市場的中準(zhǔn)收購價(jià)進(jìn)行計(jì)算，284元，、分別比處理增收1061、增長率分別為114%、30%；處理比處理增收837元，增長率為87%。這說明稀土多元水稻分蘗肥有較好的經(jīng)濟(jì)效益及應(yīng)用前景。3小結(jié)與討論田間肥效試驗(yàn)表明，稀土多元水稻分蘗肥含速效氮（氨速效鉀，可直接滿足水稻分蘗期間對氮、鉀養(yǎng)分的需態(tài)氮）、對各種元素的釋放起到長久、求；制成的顆粒外包裹一層輔料，23；由于稀土多元分

28、蘗肥含水稻專用稀土均衡、平穩(wěn)的作用微肥成分，能提供鋅、硼、鎂、稀土等活性成分，促進(jìn)水稻根葉早提高各種酶活性和光合效率，增強(qiáng)抗逆性，從而增加結(jié)生快發(fā)，提高單位產(chǎn)量。試驗(yàn)結(jié)果還表明，稀土多元水實(shí)率和千粒重，稻分蘗肥可滿足水稻分蘗期甚至整個(gè)營養(yǎng)生長期對各種營養(yǎng)形成根葉繁茂植株體，進(jìn)而提高水稻的抗逆性，元素的需求，達(dá)到明顯的增產(chǎn)效果。因此，該專用肥料的應(yīng)用具有比較廣闊的市場前景，值得推廣。參考文獻(xiàn)1徐小華，吾建祥水稻不同施肥方式對養(yǎng)分吸收和肥料利用率的影響J安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2002，30（2）：2642652盛海軍，錢曉晴，王小治集成化肥增效劑對水稻群體質(zhì)量及產(chǎn)量的影J揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報(bào)，2002，23（4）

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