微生物產生的類胡蘿卜素及其工業(yè)化

1、| 維普資訊 h ttp:/倉品與富酵工業(yè)Food and Fermenrauon 】ndutrie?Vul. 2S So. 3| 維普資訊 h ttp:/倉品與富酵工業(yè)Food and Fermenrauon 】ndutrie?Vul. 2S So. 3| 維普資訊 h ttp:/倉品與富酵工業(yè)Food and Fermenrauon 】ndutrie?Vul. 2S So. 3微生物產生的類胡蘿卜素及其工業(yè)化姜文侯生直匾畀中巴老屯冃60U耳牛走科勞卜李.喊辛扛國可毗總直定于僧岳、詞+、西加 興壬品葫卜辜N寺W名衍八干茅俊生料£ P生餐雜異吉曲皇箱哮、命、韋P捽述左 如有艮冊W嘗夠

2、卜常申帀的哥宅疑黑遼九歐產（江苗苜做生物研寬所'乞竭州捫摘要段ft妝£卿冋恨乳拘產士陣嚴胡曹；'! lztt n 業(yè)化倂值"關權詞遂摘爭卜章帚羽賈倚咅產IL |L| 維普資訊 h ttp:/倉品與富酵工業(yè)Food and Fermenrauon 】ndutrie?Vul. 2S So. 3| 維普資訊 h ttp:/倉品與富酵工業(yè)Food and Fermenrauon 】ndutrie?Vul. 2S So. 3類胡蘿b IRC carotenoids ）是Cp類秸化 甘砌策一悻者：砸士*剛薩總負"-扎五”科橫克提專題專龜編號呵 3$七-礙 收犒

3、時 IMjiyb-1205普遍存在于動物、植物、真甫、藻類和細 菌中，呈黃色、橙紅色或紅色的色素已類胡蘿 卜素可分成4個亞族胡蘿卜素如ur.p-.T 胡蘿卜素、番茄紅索卜胡蘿卜醉、如葉黃索，工 米黃質、蝦青索£胡蘿卜欝的酯類'如性阿樸- 薩-胡蘿卜竣酯；胡蘿卜酸如藏紅素胭脂樹口前已戰(zhàn)口然界中分離鑒定出刨0多種 類胡蘿卜素/勺有40多種可為人類代用。已 被多釵國家批庫使用于食品、詞料、化妝品和 藥品的有10多種心其中除產阿樸七-胡蘿 卜醛川阿樸，胡蘿卜酸乙酯卻椅黃質3種 完全由全化學合成制造外，其它均可利用柜 應的融宅物資溫產生，甘類胡蘿卜歳主理功 能的認識不斷深入推動了市場的

4、發(fā)展，化學 合戰(zhàn)和士物來源的予胡蘿卜素*蝦青素、甬黃 索這3種主要類胡蘿卜素的世界市場預測見 表ln| 維普資訊 h ttp:/倉品與富酵工業(yè)Food and Fermenrauon 】ndutrie?Vul. 2S So. 3種類1992 年1朋6年2U0H 年化學臺金卞恂來源化學合硯主物來源化學臺虎生拘來課3胡萌卜家食品501075:沾1LJ6H十胡蘿卜素営莽 和it妝品4515?545屮蝦背素和超裁素120 110210403G51R0單位：百萬董無表1 S種類胡夢卜素世界市場預測| 維普資訊 h ttp:/倉品與富酵工業(yè)Food and Fermenrauon 】ndutrie?Vul

5、. 2S So. 3崇尚自潛的需求和食品工業(yè)、養(yǎng)殖業(yè)迅速 發(fā)展使生物來浪的類胡蘿卜素倍受關注.利用 微生物生產類胡蘿卜素杲荻得生物資源蟄吳 胡蘿卜索的垠重要的雉徑近年這方面研究幵 發(fā)比較活躍.有幾種通過微生物生產的類胡蘿 卜素產品巳向商品化發(fā)展：本丈就除產胡蘿卜 素以外的試它幾種主要類胡蘿卜素研禿和發(fā) 展槪況簡迷如下乜1 番茹紅素Uycopene 1番茹紅素是無環(huán)類胡蘿卜素*疑胡蘿卜素 臺成過程中的中問產物其它類胡蘿卜素的結 構都和它有聯(lián)系，番茹紅嘉經環(huán)化就形嚨肛胡 蘿卜素，嚴近研究董明它具有的同一平面匕更 多共軸取腱的結構在清除苯類基団的反應中 速率攝大.星一種更育效的抗氧化劑【宀二-苞擊扌

6、宜霉 f Bikrsleu trtspvt a '是"種 產莊胡蘿卜素的絲狀真菌.通過改變其主氏荼 件和添抑抑制制的方法，阻斷卜胡蘿卜素生物 合威途徑中最后的2步環(huán)化反應就町祀累產| 維普資訊 h ttp:/倉品與富酵工業(yè)Food and Fermenrauon 】ndutrie?Vul. 2S So. 3| 維普資訊 h ttp:/4.第斯卷 弟日期姜文按等:徴生樹產生的類胡蘿卜素及其工業(yè)比| 維普資訊 h ttp:/| 維普資訊 h ttp:/生番茄紅素?？刂骗h(huán)化的重要條件是pH,中性 偏高有利番茄紅索形成.方法是添加碳酸鈉保 持發(fā)酵液pH6. 6 有關工藝已有專利申 請

7、產SO. 15g/L.些胺類和雜環(huán)裁化合物 如呱咤能抑制需茄紅累環(huán)化陋的活性番茄紅 素產董適到O.7-lg/L,不過.這種抑制機制 一直是用來研究胡勢卜素生物合成途徑而并 非用于生產°在利用細菌方面有一則昭年專 利曾報道用淺紅鏈霉菌9住拠砒曲 沖尿如昇実變株發(fā)酵6d產番茄紅素 0. 5打L刀"2 葉黃* （lutein）葉黃索和含有葉黃養(yǎng)的提取物是烤培食 品貴黃及鱷魚的重要色素*毎年在義國的銷苦 載】.5億美元Q 蛋黃中加的類胡夢卜素 是葉黃嘉而目前標準飼料中含有的類胡蘿卜 素已不繪使家禽及倉蛋達到理想的色洋效果. 因此葉黃嘉及其旅縮物作為家禽色素有商業(yè) 價值，爆近疑現(xiàn)&q

8、uot;葉黃素對EB病毒激活劑 TPA有強烈抑制作用皈，葉黃素在藻類和植物中含疑較多*小球藻 < Chloreila 綠藻 < Chlorcoecum 衣藻 t Chiamydomonis ）* 土壊綠藻 <廠曲刊掙門等藻塑均富含葉黃素培界這些驀類 產生葉黃弒的方法有好幾個專利中請”美國 Grain Piosing公同用土壤綠藻崑酵主產. 干藻粉冠以A-Zanth商品名用作瑪詞料添加 劑，工藝過程是將該藻在含育葡萄糖、衛(wèi)米漿. 尿素、無機鹽的培養(yǎng)基中衛(wèi)8C培養(yǎng)9血培養(yǎng) 過程中適當添抑荊萄糖小J產葉黃索油4 mg/L#由于核蛋白小球藻（Ch/are/fa fiyrenar- 日

9、購沁生長快，耐受較奇葡曲糖含雖的培養(yǎng)基， 被認為是有希望的蘇種*霍夫曼-羅氏化學公 司曾有專利用該藻的一株嗜熱菌種A119 la- gost35C培養(yǎng)4d產葉黃素2O7mg/L.但未工 業(yè)化卩J3 玉米黃Izeaxanthin）就像葉黃素一樣王米黃質也是典型的葉綠體色素不同的是除藻類外在蘭細菌 « Cvtjfl obacleria 1和一些非光合細菌如分枝桿 菌（Mycobacterinm 、歐文氏菌Ern'trua）和黃 桿藺f Flavobaetmtim'也產玉.米黃質*肩者最 理想"經培養(yǎng)可產10-Wmg/L構型的玉米黃質經改良的黃桿菌種發(fā)酵2直就可

10、獲得校高生物攢和較高產疑的玉米黃質E*在 培養(yǎng)基中添加類異戊二晞前體喘米黃質可產 335mg/Lc近一則美國專利報道土壤綠篠 的高產菌株可產玉米黃質0, fi5S Iw/wK重組基因技術為掏寢高產菌株開拓了新 途徑© l-uetke-Brinkhaus報道:先將草生歐文 氏菌herbicolay的基因簇克隆入大腌桿菌 中'經修飾加工后在§0酒酵母I Saccharomyces 力8）細胞中表達。將多余的某些部分刪 除后這種再構建的基因表達的柱牛兒械牛兒 焦瞬酸（GGFP 合成酶的活性從乩鮎増 至 23- 4 n mol/min*把合成番茄1虹素環(huán)化酶原有 的起蛤碼G

11、TQ更換成ATG”并將編碼六氫 番笳紅索合咸酶基因與釀灑酵母瞬酸甘油酸 激酶啟動子融合后用一個整合載悴轉化到酵 母中可產玉米黃質5% 很有應用前景E叭4 角黃素（cantliaxanthin）1950年Haxo在一種朱紅芭雞油菌（Can thareiius cirtTiabiirinits的雷菇中首先發(fā)現(xiàn)角 黃素.至今已在美國等35個國家批準便用全 化學臺成的角苗素價格為1300元丿kg,對JL種產角黃素的微生物進行的研究表明 '最有 希望的是從油田中井離出的短桿菌 vibaeteriwm叩）.到目前為止研究報道協(xié)霧的 是日本油田分離到的一株短桿菌KY4313.研 究工作在該菌種的選育

12、及培養(yǎng)工藝方面取得 進展KY4313菌種用亞硝基甲基薛 （NMU）誘變處理直觀挑選色澤更紅的突變 秣經幾輪重宣選育后突變株的角黃索含量有 明顯提高v從爵生株親本產角黃素37Og/g 干菌量捕10（） g/L提高至490卩時g干菌量* 4 200Pg/L.在工藝方面的試驗表明富馬酸、 咂丁晞二酸、蘋果酸等一幾酸能刺激角黃索形| 維普資訊 h ttp:/48貧品與疑酵工業(yè) Food and Ferinentition Industries Vol. 25 Nn. S成.而一些可能與類胡夢卜素合成有關的物質 如乙酸、亮埶酸、類稻等不起作用從工業(yè)生產 的肅度考慮用怪類（作碳源h麥芽計<0.1%）

13、. 氨鹽、璘酸鹽等無機鹽恥所組成的培養(yǎng)基 培養(yǎng)KY4313可產肅黃索600 g/g干菌量. l-2mg/L.低Mg"培養(yǎng)基用酵母膏替代麥 芽汁能提高危黃素產繪類作碳源時培養(yǎng) 過程中會產生一些有礙生氏的酸類物質采用 定期更新發(fā)酵培養(yǎng)基中的水相1U除去有害產 物”井適當添加煙類以維持發(fā)酵過程中高C/N 比率+這一方法可增加生物星2倍'角黃素眾 高產量可達7mg/L,但這種工藝操作復雜, 應用有一定難度通過進一歩改進培養(yǎng)基，用 富馬酸5%、糖邀幕認麥芽汁6 ，蔗糖酯 1%的培養(yǎng)基可產桶黃霜9. 3mg/L,生物量 12- 6g/h. KY4313雖是目前產軸黃素徵生物 中最好的菌株

14、但其水平仍不足用丁實際生產 中工甬黃素是合成蝦育素的中間體*最近有 專利報道利用產生蝦青素的Phaffio.的突變株產生癰黃素已獲成功譏 用榛桿閑的一個新菌株產生角黃嘉也在美國 申請了專利°叭5 蝦青素（astaxanthin）蝦青素是鮭魚和蝦的主要色素，而且能增 強它們對疾病的抵抗力口蝦青素必須從苴債物 中攝取匚目前所用主要來自化學合成品*因分 子結陶復雜"合成因難合成品價格 2 000美元/k£_，由于在淡水養(yǎng)殖中的潛在市 場*發(fā)展富有競爭力的微生物資源型蝦青素， 引人注目阪最近還發(fā)現(xiàn)蝦青素能更有戲抑制 人血漿脂類過軾比物形成*抗氧化活性高于卩 胡蘿卜素&qu

15、ot;能產宦蝦青嘉的微生物有擔子類真菌：隔 袍伏革菌（F品pg "利用燒類的細菌'乳 主分枝桿菌Mycubaclerium fa城衛(wèi)和短桿 菌 1B rrvi bateri tim ） 4 有隔擔子類的土 Phaffia rhodazyma 各種綠禎匕雨生紅球藻Haemato- coceus f>tuvia/h） I 雪衣藻Chiamydomonas nr- 加屈等前兩類微生物的蝦青素產主量低目 前可考慮用于工業(yè)生產的是后兩類.雨生紅球藻是淡水綠藻有光合自養(yǎng)能 力在有利的生長條件下且游動的雙鞭毛單細 胞形式存在生長條件不利.先去游動形成包 SL形戰(zhàn)包農的過程伴隨著在細胞

16、內脂質小球 中合成并積累大量的蝦青素和其它類胡蘿卜 素積累開始于核周區(qū)，逐步向外圍繼續(xù)含瑩 可達細胞生物凰的2%斗鮎吒，對包曩形成 的環(huán)境、營養(yǎng)條件酸蝦青素合成作了研究，氟 缺乏（耗盡兒添加氯化鈉0. 1托1犧）能引起 或誘發(fā)形成包奏”當磷被消耗芫細胞分裂 受抑或受強光照都能導致蝦青素積累硝酸鉀 <0, 5g/L>和中低水平的磷U01 是形成邑素的最隹營養(yǎng)源"乙酸能促進藻生長 和蝦青素合成，維生«類胡蘿卜累前體如甲輕戊®<MVA）.光職也都有促進生 長和提高蝦青素產哥的作用皿.該鴻生長 繁殖時pH宜中性偏堿#0&0溫度30 Ct 酸性環(huán)境

17、lpH£ 5& 5）和適當提高溫度 宀5有利蝦青素合成.雨生紅球蒸類在此條 件下經管式光照反應器培菲15d產蝦青素18 mg/L叭該蕖無光腔異養(yǎng)培養(yǎng)（添加乙酸）產 生蝦青素最近在日本也有試驗報道山人美國加利福尼亞圣地亞哥Mierobio Resources 公司已研究成功二步笈酵培養(yǎng)雨生紅 球藻規(guī)橫生產蝦青素的工藝過程。將藻培養(yǎng)在 有足量硝酸鉀、磷酸鹽等無機營養(yǎng)的培養(yǎng)基 中tPH7.頭每個階段培養(yǎng)5-7d后：以10倍 體積放大*最終生產階段培養(yǎng)塘體積為4 500 川。當藻細胞達到3-6X 10'/ml時通過降低 氮水平或添加NaCl誘導形成包畫井產生蝦 青素.在臨天池

18、塘中培養(yǎng)要注意防止污染a利 用該漠所生產的蝦青肅商品名対Algaxan Red,含有蝦青素單體（3S.3S1構型"4蝦青 素單酯恥，職酯H譏含1州蝦青素的產品 價格如美元心廠與純合成品相比仍有競爭 力叭干藻中蝦青嘉含量要達到4%需經兒周 的培養(yǎng)周期太長，有幾家公司正加緊研宛縮 短培養(yǎng)周期的方法，已在好兒個她方開始中|維普贄訊 ng www. |49第25卷 第3期姜文侯等：誡空韌產宅的類胡茅卜索及其工業(yè)化|維普贄訊 ng www. |維普贄訊 ng www. |試Q另一種產蝦青素的微生物是肓隔擔子的 Phaffia<,在俄羅斯、日本山區(qū)、美國太平洋丙北地區(qū)生氏的樺樹、樺樹、愷木

19、.白 楊、山茱萸等落葉附流出的軻汁中植存有此 Me 1967年初被分離出來? 1976年止式命名 為P. rhudozyma ,其主物學待性主要有；桔紅 色菌落在細胞單卜位點反復出芽細胞壁含 有木糖.重氮B染色陽性*特肓的JSS rRXA 序列產生欣3R,3Rr構熨的蝦青素為主的墊 胡蘿卜素QP. rhadma野生型菌株的蝦青素產童 低(£500旳要有生產價值蝦青素產率至 少要達到3朝兩F&因此改良菌沖成為實現(xiàn) 工牝主產的首攻目標打寸繭沖誘變處理用甲基 碩酸乙酯(EM5)和亞硝基比較有 效，誘變處理后可選擇對終產物的結構類似物 有抗性的已解除反饋神制的突變株.如對冃-議 羅蘭

20、酮有抗性的突變株產蝦青 素可達到1 oooFg/g>fl對二甲基亞磯有抗性 的突變株蝦青素主成曲是野生株的 2327含星比例也有提高匚茯得對抗霉菌 素A, 種強烈的呼吸抑制劑的抗性產蝦青 素提高到 20002 500/5.用原生質體融合的方法培育P. rhodozy- 祕7高產蚌青素菌株也有報道，Chun成功分 離出該菌的色氨較等虱基酸缺陷熨突變株突 變株經融合產生35牛雜交沖其中有3種雜 交種產蝦青素顯著崗于親本.達到2 0(i0g/fi 親種的DNA含量島于親本2-3倍以上”而 且是單核回復寰變頻率穩(wěn)主V生1 X10-?)oPrevatt的專利是將處于穩(wěn)定期旱期 的原生質球融合15

21、min31聚乙二穆為穩(wěn)定 捌.產生的融合株蝦青索水平達4 500 - 8 600Mg/g.而Adrio等經試驗很難分離岀該 菌的營養(yǎng)缺陷型，認為可能芳其多倍俸或非整 倍體有關X°類胡蘿卜素施自發(fā)熒光熒光對麴值與 P. rhenlozymu細胞內類胡蘿卜素含量呈線性 關系曾發(fā)現(xiàn)熒光顯高值的細咆蝦育隸含址 L5iJ00fxg/gr，il.根據(jù)該特性.An等人研究了 采用熒光活性細胞分類法fluorescence共小 vated cel. sorting FACTS >勵選高產類胡蘿卜 素菌株的新方法，用488 nm激光激發(fā)*類胡蘿 卜素會以一牛特定的波氏發(fā)出熒光.可議恨據(jù) 細胞熒光

22、強弱不同用FACS技杭快速鑒別* 速度達到每分鐘鑒別4300牛細胞試驗用 FACS技術從經NTG誘變的后代群體中挑 選岀極少量的高產細胞株效率可提高10 000 倍。確定一年恰當?shù)奶暨x標準配合使用該技 術*在菌種選育中有一定實用價值。缺點是除 蝦青素外其它類胡蘿卜素也發(fā):熒光，尤其是八 氫番茹紅素和六氫番茹紅索因此蝦青素在類 胡蘿卜家總量屮的比例用此方法不可知J 在利用DNA重組技術方面，能將外源DA 穩(wěn)定地摻入蝦青素產生菌P."必”列“的轉 化系統(tǒng)已經建宜。在代謝的控制研究方面.已建立了生化反 應的線性模型皿，由葡萄糖合成蝦青索最火理 論產呈是 5 mol ): 12 Glucos

23、e 4(>2 十 14 NADPH + 48 NAD= I Astaxanthin 十 32 CO- + 14 NADP- +48 NAD-T12 HQ + 34 H+0口上總反應是各十中間反應的線性組合* 并設定有穩(wěn)定的反應速率，例如為匚典脫氫裁 確化的反應速率設一定值那么HMG-6A 還原酶催化的反應速率是其E倍"若細胞用部 分葡萄糖作電子冷阱(electron sink),氧系數(shù) 不大于4那么蝦青隸最高產量是：3. 83 mol Glucose H-0* 954 mol Ammonia -1-4 mol O2 =0. 213 mal Astaxanthin + 0- 95

24、4 mol Biomass (CsHisO*N > + 0. 682 mol C4 + 12. 67mol H；O欖型認為蝦育素與生物圮的理論比值應 為2 ； 9.這與野生秣1 ； 3 300的實際值相比. 后考比值太低.模型分析推測氧的可利用率是P. rhzyma發(fā)酵生產蝦青素的一卜主要瓶頸. 當氧成為限制因素時葡萄糖會更多形成生物 量而減少蝦青素的合成-。通氣速率不能低 于30m mal/Lh°否則色索合成水平降低，| 維普資訊 h ttp:/50食品與截酵工JRFond and FeriuentatLon Indmirirs VcL E5 Xn, 3代謝流轉向形成較多畀胡

25、蘿卜素$銘?？治稣J為有利生物駅形成的條件不 -定適宜蝦青素合成、要同時達到高生長卒和 蝦青素髙產率有相當堆度“實際情況也是髙產 突變株生氏往桂慢于親株研究了各種營養(yǎng)茶件對發(fā)酵的鄭響碳源 的崽響最顯著、高濃度會抑 制P.Eiw的類胡蘿卜素臺成這說明存 在碳源分解代謝產物阻遏作用。而碳源耗盡又 會造成合成放慢.Meyer等晟近報道在對數(shù)期 總色索令成速率28. 8g/gh穩(wěn)定期降至 lLlg/gh閱"因此”批式笈酵中常用流加 方式供給碳擦另外使用緩慢利用的碳源如蔗 犧r麥芽犧、纖維二糖對色素合成有利【St源也影響P. rkodozyma的生底和色素 形成。對產色素最好的單一的猊源是蛋白

26、膿* 而混合氟糠酵母音1牛肉膏；KNO3=1 ； 1 】1,糧度5&/L產色素最高*撅不足*蝦青嘉 的產鼠降低°測定各種營養(yǎng)要素基質對只 rhudona生長的作用（細胞鼠（克打每克基 質）N 11L 719. 63； PC）/ ；fi7. 2；K；65. St Mfi;l 040：Ca:26R7s這些數(shù)據(jù)說明N是重要 的-其次是Kf皿，為降低成本"必殖因地制宜利用廉價匣材 料。Hanrd用7%-Wi的糖殖作碳源報果良 好生物塑可達14g/L，蝦青霧產量15mg/L < 1. I巴西用甘蔗汁加0,11,尿素和玉米漿作培養(yǎng)甚*產生物星& 2g/L.蝦青素

27、L3mff/g-2南非用葡萄汁培養(yǎng)并添加酵母 膏產蝦青素h35mg/SiJ-3 些研究術平還不 能達到生產要求經試驗*添擁類帖紫羅蘭 酮等化合物作為只rhodozyma合成蝦育嘉的 刺激劑有相當?shù)母弊骷谆蛞鹕笏俾氏?降+或引起代謝途徑改變或抑制蝦肯素合 成.但通過滴加乙酸并保持穩(wěn)定的pH,有 堵?lián)砩锪亢臀r青素的作用二在堵養(yǎng)拮中 添加0.1滋甲徑戊酸CMVAfXr.烯單位” 的前身】可顯著增加蝦青素和類胡蘿卜素總產經試驗 * pH 3. 87* 5 葩圍對 P. rhodoxy- ma主氏影響不大5. 8時牛長最快*pH -5. 0 產蝦青素就高磷酸二氫鉀有較好的pH緩沖 乍用*溫度在22

28、 C時生快連率最高4 12/h）, 適宜產生蚱青素的潟度15-20 C高溫、細胞 停止合成蝦青刺曲巳培養(yǎng)周期3九經十務蘋深k而廣泛的研究.目前世界上 有好T家公司已經或正在利用r, vhozyma 深層發(fā)酵生產蝦音素已冥現(xiàn)商品比在反應器 中的發(fā)酵水平4 OOOmr/r W±.使用的菌慄王 藍是通過化學誘變并采用類異戊烯合成途 徑的抑制劑直觀挑選出來的高產突變襪卜突變 慄存在的一些缺陷如性能不夠穩(wěn)定生長勢和 集殖能力較弱等還需進一步改進6 結家語對結構較簡單的類胡蘿卜素集說*與高度 先進的化學合成相比.生物合成未必是有價值 的途卷=用微生物半產的價值在于生產包括很 多胡蘿卜藕醇在內的那

29、些結構復雜的類胡蘿 卜素*它們出形形色色的舁構體存在于自然界 中若要通過化學含或獲得自熾界中結構夏 雜、構型艇多的類胡蘿卜素就相當困難。類胡 蘿卜素在微生物界的乘統(tǒng)分布便我們明確有 些專門的微生物已進化境展成有能力合成醫(yī) 藥及其它工業(yè)領域有用的類齟蘿卜嘉*通過分 析我們也知道某些生態(tài)小環(huán)境中尚有能合成 類胡蘿卜素的微生物未被認識有潛在冊值的 微生物詵源也有待進，步開發(fā)鬟考文就1 陳麗筠.代謝三>昭質生拘化學，北層：科學 出版社<19SS2 Nells H J, DeLeenhcer A P. J- AppL Bacle- riologF J99I 畀 0=1817*13 Johns

30、en E X、Schroed.tr W 扎?kdvance in Biachemicdl Engineering Eioteehnology * 1595 * 5J i J187 7£4 Mortensen A* J” AgriL, Food Chem, , 199?, 451 B? t2P702R77Nincr L , Rcnaut J i CirotcnDids, In Mirrobi <A. LtchnoJcgy. gad. Vol I, New york； Atadmic|維普資訊 nttp:/|第瀘卷 第3期姜文俺琴權生物產生的英胡蘿卜素及其工業(yè)代51|維普資訊 nt

31、tp:/|維普資訊 nttp:/|Press. 3 975)5 Tsushima M. Biol. Pharm. Bulk * 1955 * 18 6 Ausuh R L- Pure £- Appl. Chem.( 1997 * 6?t in J2173S Medwid R. U S. Patent .537997.1&&59 mura T, Japanese Parent,94152!)7?!? 1P&41<1 Tsubrkura 為"L S- Patent 5496 709> 199611 Kukharchuk V. V, Bull,

32、 Exp, BioL Med* « 19M7,123(3 h2482512 Kobayashi M- Appl. EnvinJn. MicrobiuL i 19yS,S&iS713 Borowitzka M A” J. Appl. phycol. LA91» 3：29S14 Zhang D H, J. AppL PhycoL *19i?79<2jc 14715515 Kobayashi 4, Biotechnol, Utt. . 1S97* IS (fij 1507-509疋 Meyer P 乩 Duprees J C. World Mi-ctobtul. B

33、iotechJioL >193 »3；51417 Cao K J. Agrit'r Food fbem. f 1995 T 43<5 )1396 135918 MJ-ncork I C * WjLJams K M. J, Gen. Mt-crobioL* 132(59919 Meyer F 5* DuPrfii J Appl. Mjcrobiol.BiacechnoL < 1994 40； 78020 Feng T J” J. Ferm. Bioeng- 1994 *2譏4詼21 Harrd N F. Rjotechnol Lett. - 198S . lu

34、t22 Fontana J D. Appl- Biochem, Rjotechno). lW,fiS*-6S：3G=31433 Meyer P S, IjuPretz J Wcr IH Mtcrc-hLol,BioiechnoL .194.10(2178-18324 Flenoe U.S. Patent» 5356810+19425 Meyer P S+ r>uPrecz J ( Biotechnn, Lett 1991 .16:13526 Meyer P S< TJuFreez J C. Bimcchnol, Lett. , L995，17s91927 alo P- BioiechnoL Lett. < 1995» 17(