高考生物試題現(xiàn)代生物科技專題分章節(jié)整理匯編學生版

1、2007年專題1基因工程（理綜II）4下列有關基因工程中限制內(nèi)切酶的描述，錯誤的是A一種限制性內(nèi)切酶只能識別一種特定的脫氧核苷酸序列 B限制性內(nèi)切酶的活性受溫度的影響C限制性內(nèi)切酶能識別和切割RNA D限制性內(nèi)切酶可從原核生物中提取（天津理綜）30（14分）在培育轉(zhuǎn)基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作為標記基因，只有含卡那霉素抗性基因的細胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長。下圖為獲得抗蟲棉的技術(shù)流程。侵染抗蟲基因含kan質(zhì)粒重組質(zhì)粒土壤農(nóng)桿菌含重組質(zhì)粒土壤農(nóng)桿菌 A構(gòu)建導入 B培養(yǎng)選擇轉(zhuǎn)基因抗蟲植株再生植株愈傷組織離體棉花葉片組織 C誘導選擇分化 D檢測請據(jù)圖回答：（1）A過程需要的酶有

2、_。（2）B過程及其結(jié)果體現(xiàn)了質(zhì)粒作為運載體必須具備的兩個條件是_。（3）C過程的培養(yǎng)基除含有必要營養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂和激素外，還必須加入_。（4）如果利用DNA分子雜交原理對再生植株進行檢測，D過程應該用_作為探針。（5）科學家發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因植株的卡那霉素抗性基因的傳遞符合孟德爾遺傳規(guī)律。將轉(zhuǎn)基因植株與_雜交，其后代中抗卡那霉素型與卡那霉素敏感型的數(shù)量比為1：1。若該轉(zhuǎn)基因植株自交，則其后代中抗卡那霉素型與卡那霉素敏感型的數(shù)量比為_。若將該轉(zhuǎn)基因植株的花藥在卡那霉素培養(yǎng)基上作離體培養(yǎng)，則獲得的再生植株群體中抗卡那霉素型植株占_%。（山東理綜）35（8分）生物-現(xiàn)代生物科技專題繼哺乳動物乳腺生物反應器研

3、發(fā)成功后，膀胱生物反應器的研究也取得了一定進展。最近，科學家培育出一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。請回答：（1）將人的生長激素基因?qū)胄∈笫荏w細胞，常用方法是。（2）進行基因轉(zhuǎn)移時，通常要將外源基因轉(zhuǎn)入中，原因是。（3）通常采用技術(shù)檢測外源基因是否插入了小鼠的基因組。（4）在研制膀胱生物反應器時，應使外源基因在小鼠的細胞中特異表達。（5）為使外源基因在后代長期保持，可將轉(zhuǎn)基因小鼠體細胞的轉(zhuǎn)入細胞中構(gòu)成重組細胞，使其發(fā)育成與供體具有相同性狀的個體。該技術(shù)稱為。(北京理綜)2利用外源基因在受體細胞中表達，可生產(chǎn)人類所需要的產(chǎn)品。下列各項中能說明目的基因完成了在受體

4、細胞中表達的是A棉花二倍體細胞中檢測到細菌的抗蟲基因 B大腸桿菌中檢測到人胰島素基因及其mRNAC山羊乳腺細胞中檢測到人生長激素DNA序列 D酵母菌細胞中提取到人干擾素蛋白(江蘇生物)38(8分)單基因遺傳病可以通過核酸雜交技術(shù)進行早期診斷。鐮刀型細胞貧血癥是一種在地中海地區(qū)發(fā)病率較高的單基因遺傳病。已知紅細胞正常個體的基因型為BB、Bb，鐮刀型細胞貧血癥患者的基因型為bb。有一對夫婦被檢測出均為該致病基因的攜帶者，為了能生下健康的孩子，每次妊娠早期都進行產(chǎn)前診斷。下圖為其產(chǎn)前核酸分子雜交診斷和結(jié)果示意圖。(1)從圖中可見，該基因突變是由于引起的。巧合的是，這個位點的突變使得原來正?；虻南拗?/p>

5、酶切割位點丟失。正常基因該區(qū)域上有3個酶切位點，突變基因上只有2個酶切位點，經(jīng)限制酶切割后，凝膠電泳分離酶切片段，與探針雜交后可顯示出不同的帶譜，正?；蝻@示條，突變基因顯示條。 (2)DNA或RNA分子探針要用等標記。利用核酸分子雜交原理，根據(jù)圖中突變基因的核苷酸序列(ACGTGTT)，寫出作為探針的核糖核苷酸序列。 (3)根據(jù)凝膠電泳帶譜分析可以確定胎兒是否會患有鐮刀型細胞貧血癥。這對夫婦4次妊娠的胎兒-lII-4中基因型BB的個體是，Bb的個體是，bb的個體是。(廣東生物)7現(xiàn)有一長度為1000堿基對(by）的DNA分子，用限制性核酸內(nèi)切酶Eco R1酶切后得到的DNA分子仍是1000

6、by，用Kpn1單獨酶切得到400 by和600 by兩種長度的DNA分子，用EcoRI、Kpnl同時酶切后得到200 by和600 by兩種長度的DNA分子。該DNA分子的酶切圖譜正確的是專題2細胞工程一植物細胞工程（理綜II）31（2）若采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，從上述F1番茄葉片取材制備人工種子、繁殖種苗，其過程可簡述為如下5個步驟：番茄葉片葉組織塊愈傷組織有生根發(fā)芽能力的胚狀結(jié)構(gòu)人工種子種苗abcde上述過程中去分化發(fā)生在第_步驟，再分化發(fā)生在第_步驟，從葉組織塊到種苗形成的過程說明番茄葉片細胞具有_。(江蘇生物)42B題很久以前科學家在土壤中發(fā)現(xiàn)了某種細菌能制造一種對昆蟲有毒的蛋白質(zhì)，當

7、時許多人就想把編碼這一蛋白質(zhì)的基因(抗蟲基因)轉(zhuǎn)移到農(nóng)作物中，以降低昆蟲對農(nóng)作物造成的危害。20世紀90年代，美國科學家采用基因工程技術(shù)首次培育出抗蟲玉米新品種。下圖為這一轉(zhuǎn)基因玉米的主要培育過程。(1)獲得特定目的基因的途徑除了從該細菌中直接分離抗蟲基因外，還可以。將目的基因與運載體結(jié)合時必須用酶和DNA連接酶。在基因工程中，常用的運載體有等，而作為運載體必須具備相應的條件，例如應具有以便進行篩選。(2)由轉(zhuǎn)基因玉米細胞經(jīng)過形成愈傷組織，然后發(fā)育成胚狀體和試管苗。若要制備轉(zhuǎn)基因玉米的人工種子，可選擇上述實驗過程中的再包裹合適的等。(廣東生物)4在下列自然現(xiàn)象或科學研究成果中，能為“動物細胞具

8、有全能性”觀點提供直接證據(jù)的是A壁虎斷尾后重新長出尾部 B蜜蜂的未受精卵細胞發(fā)育成雄蜂C用體外培養(yǎng)的皮膚治療燒傷病人 D小鼠腺細胞的自我復制(廣東生物)27菊花的紫花和白花性狀是由一對等位基因控制的，紫色（R）對白色（r）顯性?，F(xiàn)已克隆到控制紫色的基因R，如果你打算利用上述材料開展研究，那么下表選項中，合理的是選項實驗方案實驗目的A用白花植株與紫花植株雜交判斷基因型B將控制開紫花的基因轉(zhuǎn)入其他植物中改變受體植物花的顏色C將R基因轉(zhuǎn)入大腸桿菌并大量表達紫色蛋白生產(chǎn)紫色蛋白用作染料D用紫花雜合子的嫩芽組織培養(yǎng)獲得純合子植株用于育種(廣東生物)41（現(xiàn)代生物科技專題，15分）香蕉原產(chǎn)熱帶地區(qū)，是我國

9、南方重要的經(jīng)濟作物之一。廣東省冬季常受強寒潮和霜凍影響，對香蕉生長發(fā)育影響很大。由香蕉束頂病毒（BBTV，單鏈環(huán)狀DNA病毒）引起的香蕉束頂病，對香蕉生產(chǎn)的危害十分嚴重。當前香蕉栽培品種多為三倍體，由于無性繁殖是香蕉繁育的主要方式，缺少遺傳變異性，因此利用基因工程等現(xiàn)代科技手段提高其種質(zhì)水平，具有重要意義。請根據(jù)上述材料，回答下列問題：（1）簡述香蕉大規(guī)?？焖俜敝臣夹g(shù)的過程。（2）脫毒香蕉苗的獲得，可采用的方法，此方法的依據(jù)是和。（3）建立可靠的BBTV檢測方法可以監(jiān)控脫毒香蕉苗的質(zhì)量，請問可用哪些方法檢測病毒的存在？（列舉兩種方法）（4）在某些深海魚中發(fā)現(xiàn)的抗凍蛋白基因afp對提高農(nóng)作物的抗

10、寒能力有較好的應用價值，該基因可以從這些魚的DNA中擴增得到。試述在提取和純化DNA時影響提純效果的因素及其依據(jù)。（列舉兩點）（5）如何利用afp基因，通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得抗寒能力提高的香蕉植株？在運用轉(zhuǎn)基因香蕉的過程中，在生態(tài)安全方面可能會出現(xiàn)什么問題？（列舉兩點）（6）從細胞工程的角度出發(fā)，簡述一種培育抗寒香蕉品種的方法及其依據(jù)。另外，抑制果膠裂解酶的活性可以延長香蕉果實儲藏期，請描述采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)降低該酶活性的一般過程。(上海生物)13下列有關植物細胞與組織培養(yǎng)的敘述中，錯誤的是A花藥、胚不能作為組織培養(yǎng)的材料B植物細胞具有全能性C外植體是指用于培養(yǎng)的植物組織或器官D外植體可誘導出愈傷

11、組織(上海生物)14一雜合體植株（二倍體）的下列部分，經(jīng)組織培養(yǎng)和秋水仙素處理后可獲得純合體的是A根 B莖 C葉 D花粉二動物細胞工程（寧夏理綜）32B生物選修3現(xiàn)代生物科技專題現(xiàn)有A和B兩個肉牛品種，A品種牛的細胞組成可表示為A細胞核、A細胞質(zhì)，B品種牛則為B細胞核、B細胞質(zhì)。（1）如果要獲得一頭克隆牛，使其細胞由A細胞核和B細胞質(zhì)組成，基本步驟是，從A品種牛體內(nèi)取出體細胞，進行體外培養(yǎng)。然后再從培養(yǎng)細胞中取出_注入B品種牛的_卵母細胞，經(jīng)過某處刺激和培養(yǎng)后，可形成胚胎，該胚胎被稱為_，將該胚胎移入代孕母牛的_中，通過培育可達到目的。（2）一般來說，要想大量獲得這種克隆牛比較難，原因之一是卵

12、母細胞的數(shù)量_，為解決這一問題，可以用_激素處理B品種母牛。（3）克隆牛的產(chǎn)生說明_具有全能性。克隆牛的性狀主要表現(xiàn)_品種牛的特征。由A、B兩品種雜交得到的牛與克隆牛相比，雜交牛細胞核的遺傳物質(zhì)來自_個親本，細胞質(zhì)來自_性親本，克隆牛和雜交牛的遺傳物質(zhì)組成_（相同，不同）。（山東理綜）35（8分）生物-現(xiàn)代生物科技專題繼哺乳動物乳腺生物反應器研發(fā)成功后，膀胱生物反應器的研究也取得了一定進展。最近，科學家培育出一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。請回答：（1）將人的生長激素基因?qū)胄∈笫荏w細胞，常用方法是。（2）進行基因轉(zhuǎn)移時，通常要將外源基因轉(zhuǎn)入中，原因是。（3）

13、通常采用技術(shù)檢測外源基因是否插入了小鼠的基因組。（4）在研制膀胱生物反應器時，應使外源基因在小鼠的細胞中特異表達。（5）為使外源基因在后代長期保持，可將轉(zhuǎn)基因小鼠體細胞的轉(zhuǎn)入細胞中構(gòu)成重組細胞，使其發(fā)育成與供體具有相同性狀的個體。該技術(shù)稱為。（天津理綜）5利用細胞工程方法，以SARS病毒核衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體。下列相關敘述正確的是A用純化的核衣殼蛋白反復注射到小鼠體內(nèi)，產(chǎn)生的血清抗體為單克隆抗體B體外培養(yǎng)單個效應B細胞可以獲得大量針對SARS病毒的單克隆抗體C將等量效應B細胞和骨髓瘤細胞混合，經(jīng)PEG誘導融合后的細胞均為雜交瘤細胞D利用該單克隆抗體與SARS病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合的

14、方法可診斷出病毒感染者(江蘇生物)29動物細胞體外培養(yǎng)時，通常要在培養(yǎng)基中補充一定濃度的某些物質(zhì)。右圖是血清對正常細胞和癌細胞培養(yǎng)影響的實驗結(jié)果。從該圖提供的信息可以獲得的正確結(jié)論有A正常細胞與癌細胞的增殖速率相同B有無血清對正常細胞培養(yǎng)的影響不同C培養(yǎng)基中補充血清有助于正常細胞的培養(yǎng)D培養(yǎng)基中是否補充血清對癌細胞的培養(yǎng)影響不大(上海生物)39A下圖表示用生物工程制備人抗A抗體的過程。請回答下列問題（1）人的紅細胞膜表面有被稱為凝集原的特異_：從免疫學角度看，這種凝集原是_。（2）圖中細胞中1是小鼠體內(nèi)注入人A型血紅細胞后而獲得的_細胞，這種細胞具有產(chǎn)生_的特點，但難以在體外培養(yǎng)。甲培養(yǎng)皿中培

15、養(yǎng)的細胞2，是從患骨髓瘤的小鼠體內(nèi)獲取的骨髓瘤細胞，這種細胞在體外培養(yǎng)時能_，但不會產(chǎn)生抗體。（3）為了能充分發(fā)揮上述兩種細胞各自的特點，經(jīng)特殊處理，在促細胞融合因子的作用下，使兩種細胞發(fā)生融合，形成圖中的細胞3，這種細胞稱為_。把它在乙培養(yǎng)皿中進行培養(yǎng)，則能產(chǎn)生大量的細胞群，這種方法稱為_。（4）過程的主要目的_。通過過程或的培養(yǎng)方法能產(chǎn)生大量_抗體。2008年（08年上海高考題）11制備單克隆抗體所采用的細胞工程技術(shù)包括細胞培養(yǎng)細胞融合胚胎移植細胞核移植A BC D（08年全國卷）4已知某種限制性內(nèi)切酶在一線性DNA分子上有3個酶切位點，如圖中箭頭所指。如果在該線性DNA分子在3個酶切位點

16、上都被該酶切斷，則會產(chǎn)生a、b、c、d四種不同長度的DNA片段?，F(xiàn)有多個上述線性DNA分子，若在每個DNA分子上至少有1個酶切位點被該酶切斷，則從理論上講，經(jīng)該酶酶切后，這些線性DNA分子最多能產(chǎn)生長度不同的DNA片段種類數(shù)是（）A3 B4 C9 D12（08年全國卷）5下列關于細胞工程的敘述，錯誤的是（）A電刺激可誘導植物原生質(zhì)體融合或動物細胞融合B去除植物細胞壁和將動物組織分散成單個細胞均需酶處理C小鼠骨髓瘤細胞和經(jīng)抗原免疫小鼠的B淋巴細胞融合可制備單克隆抗體D某種植物甲乙兩品種雜交后代的染色體數(shù)目相同（08江蘇卷）18下列敘述中錯誤的是A改變NaCl溶液的濃度只能使DNA溶解而不能使其析

17、出B在沸水浴中，DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍色C加鹽和加酒都能抑制微生物的生長D密封瓶口前最好將瓶口通過火焰以防雜菌污染（08江蘇卷）20下列關于植物組織培養(yǎng)的敘述中，錯誤的是A培養(yǎng)基中添加蔗糖的目的是提供營養(yǎng)和調(diào)節(jié)滲透壓B培養(yǎng)基中的生長素和細胞分裂素影響愈傷組織的生長和分化C離體器官或組織的細胞都必須通過脫分化才能形成愈傷組織D同一株綠色開花植物不同部位的細胞經(jīng)培養(yǎng)獲得的愈傷組織基因相同（08年上海高考題）A以重組DNA技術(shù)為核心的基因工程正在改變著人類的生活。請回答下列問題。（1）獲得目的基因的方法通常包括和。（2）切割和連接DNA分子所使用的酶分別是和。（3）運送目的基因進入受體細胞的載體

18、一般選用病毒或，后者的形狀成。（4）由于重組DNA分子成功導入受體細胞的頻率，所以在轉(zhuǎn)化后通常需要進行操作。（5）將人胰島素基因分別導入大腸桿菌與酵母菌，從兩者中生產(chǎn)的胰島素在功能和序列上是相同的。(08年海南高考題)25.（18分）某二倍體植物是雜合體，圖為其花藥中未成熟花粉在適宜的培養(yǎng)基上培養(yǎng)產(chǎn)生完整植株的過程。據(jù)圖回答：（1）圖中表示的是該花粉培養(yǎng)過程中的過程，表示的是過程，X代表的是，表示的是過程，表示的是誘導過程。（2）圖中從愈傷組織形成完整植株的途徑有兩條，具體通過那一條途徑主要取決于培養(yǎng)基成分中的種類及其濃度配比，最后獲得的來源于為成熟花粉的完整植株都稱為植株（甲）。未成熟花粉經(jīng)

19、培養(yǎng)能形成完整植株，說明為成熟花粉具有。（3）對植株進行，才能使其結(jié)實產(chǎn)生后代（乙），否則植株甲只有通過的方式才能產(chǎn)生后代（丙）。乙、丙兩種植株中，能產(chǎn)生可育花粉的是植株，該植株群體中每一植株產(chǎn)生可育花粉的基因組成種類數(shù)為種，該群體植株產(chǎn)生可育花粉的基因組成種類數(shù)為種?；ㄋ幣囵B(yǎng)在育種上的特殊意義是，從而開辟育種新途徑。(08年海南高考題)26、（18分）圖為某種質(zhì)粒表到載體簡圖，小箭頭所指分別為限制性內(nèi)切酶EcoRI、BamHI的酶切位點， ampR為青霉素抗性基因，tctR為四環(huán)素抗性基因，P啟動子，T為終止子，ori為復制原點。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、BamHI在內(nèi)的多種酶

20、的酶切位點。據(jù)圖回答：（1）將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒該表達載體分別用EcoRI酶切，酶切產(chǎn)物用連接酶進行連接后，其中由兩個DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有、三種。若要從這些連接產(chǎn)物中分離出重組質(zhì)粒，需要對這些連接產(chǎn)物進行。（2）用上述3種連接產(chǎn)物與無任何抗藥性的原核宿主細胞進行轉(zhuǎn)化實驗。之后將這些宿主細胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產(chǎn)物是；（3）在上述實驗中，為了防止目的基因和基因和質(zhì)粒表達載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，酶切時應選用的酶是。(08山東理綜生物部分)35、【生物現(xiàn)代生物技術(shù)專題】為擴大可耕地面積，增加糧食產(chǎn)量，黃河三角洲等鹽堿地的開發(fā)利用備受

21、關注。我國科學家應用耐鹽基因培育出了耐鹽水稻新品系。（1）獲得耐鹽基因后，構(gòu)建重組DNA分子所用的限制性內(nèi)切酶作用于圖中的處，DNA連接酶作用于處。（填“a”或“b”）（2）將重組DNA分子導入水稻受體細胞的常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和法。（3）由導入目的基因的水稻細胞培養(yǎng)成植株需要利用技術(shù)。該技術(shù)的核心是和。（4）為了確定耐鹽轉(zhuǎn)基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素標記的作探針進行分子雜交檢測，又要用方法從個體水平鑒定水稻植株的耐鹽性。31、(08北京理綜生物卷)水華可因藍藻爆發(fā)所致?？蒲腥藛T濃度利用某種細菌限制藍藻數(shù)量，相關實驗的示意圖如下。圖中表示實驗步驟。請回答問題從細胞結(jié)構(gòu)的特點與復雜

22、程度看，藍藻屬于細胞；從生態(tài)系統(tǒng)的營養(yǎng)結(jié)構(gòu)上看，藍藻處于；藍藻的代謝類型通常是。引發(fā)水華的藍藻可產(chǎn)生藍藻毒素。藍藻毒素（是、不是）藍藻生長、繁殖所必需的物質(zhì)。藍藻毒素對人是一種致癌因子，可使原癌基因，導致正常細胞發(fā)生癌變。圖中、通常使用的是、中已培養(yǎng)至期的藍藻和溶藻細菌。圖中實驗組在每個培養(yǎng)皿中，如果做三個重復實驗，可采取的做法是：。為完善實驗設計方案，應增設對照組，可采取的做法是：。藍藻通常呈藍綠色，觀察實驗結(jié)果，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)皿中出現(xiàn)褪色空斑，說明藍藻。（08江蘇卷）32（8分）將動物致病菌的抗原基因?qū)腭R鈴薯制成植物疫苗，飼喂轉(zhuǎn)基因馬鈴薯可使動物獲得免疫力。以下是與植物疫苗制備過程相關的圖和表

23、。請根據(jù)以上圖表回答下列問題。（1）在采用常規(guī)PCR方法擴增目的基因的過程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物體內(nèi)的DNA聚合酶，其最主要的特點是。（2）PCR過程中退火（復性）溫度必須根據(jù)引物的堿基數(shù)量和種類來設定。表1為根據(jù)模板設計的兩對引物序列，圖2為引物對與模板結(jié)合示意圖。請判斷哪一對引物可采用較高的退火溫度？_。（3）圖1步驟所用的DNA連接酶對所連接的DNA兩端堿基序列是否有專一性要求？。（4）為將外源基因轉(zhuǎn)入馬鈴薯，圖1步驟轉(zhuǎn)基因所用的細菌B通常為。（5）對符合設計要求的重組質(zhì)粒T進行酶切，。假設所用的酶均可將識別位點完全切開，請根據(jù)圖1中標示的酶切位點和表2所列的識別序列，對以

24、下酶切結(jié)果作出判斷。采用EcoR和Pst酶切，得到_種DNA片斷。采用EcoR和Sma酶切，得到_種DNA片斷。（08江蘇卷）B題。下面是以小鼠為對象進行的研究工作，請分析回答問題。（1）進行小鼠胚胎工程操作時，首先在光控周期下（光照14h，黑暗10h）飼養(yǎng)成年雌鼠，并注射促進性腺激素，目的是。然后從雌鼠輸卵管中取出卵子，在一定條件下培養(yǎng)成熟；并從雄鼠附睪中取出精子，在一定條件下培養(yǎng)一段時間，目的是。再在37，5%CO2條件下，精卵共同作用4h，沖洗后繼續(xù)培養(yǎng)。定時在顯微鏡下觀察胚胎的變化，第5天右以看到胚胎發(fā)生收縮，細胞間隙擴大，接著胚胎內(nèi)部出現(xiàn)裂隙，這是胚胎_期開始的標志。（2）如果體外受

25、精后，在精核與卵核融合之前，用微型吸管除雄核，再用細胞松弛素B處理（作用類似于用秋水仙素處理植物細胞），處理后的受精卵可發(fā)育成小鼠。這種方法在動物新品種選育中的顯著優(yōu)點是。（3）如果將小鼠甲的體細胞核移入小鼠乙的去核卵細胞中，由重組細胞發(fā)育成小鼠丙，則小鼠丙的基因來源于。（4）如果將外源基因?qū)胄∈笫芫眩瑒t外源基因可能隨機插入到小鼠受精卵DNA中。這種受精卵有的可發(fā)育成轉(zhuǎn)基因小鼠，有的卻死亡。請分析因外源基因插入導致受精卵死亡的最可能原因。08年寧夏卷38、【生物-選修3現(xiàn)代生物科技專題】（15分）回答下列有關動物細胞培養(yǎng)的問題：（1）在動物細胞培養(yǎng)過程中，當貼壁細胞分裂生長到細胞表面時，細

26、胞會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細胞的。此時，瓶壁上形成細胞層數(shù)是。要使貼壁的細胞從瓶壁上分離下來，需要用酶處理，可用的酶是。（2）隨著細胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細胞分裂停止，進而出現(xiàn)細胞，但極少數(shù)細胞可以連續(xù)增殖，其中有些細胞會因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變成細胞，該種細胞的黏著性，細胞膜表面蛋白質(zhì)（糖蛋白）的量。（3）現(xiàn)用某種大分子染料，對細胞進行染色時，觀察到死細胞被染色，而活細胞不染色，原因是。（4）檢查某種毒物是否能改變細胞染色體的數(shù)目，最好選用細胞分裂到期的細胞用顯微鏡進行觀察。（5）在細胞培養(yǎng)過程中，通常在條件下保存細胞，因為在這種條件下，細胞中的活性降低，細胞的速率降低。（6）給患者移

27、植經(jīng)細胞培養(yǎng)形成的皮膚組織后，發(fā)生了排斥現(xiàn)象，這是因為機體把移植的皮膚組織當作進行攻擊。（08廣東卷）39.（現(xiàn)代生物科技專題，10分）天然釀酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶類，用作發(fā)酵原料的淀粉需經(jīng)一系列復雜的轉(zhuǎn)化過程才能被利用。研究者從某絲狀真菌中獲取淀粉酶基因并轉(zhuǎn)入釀酒酵母菌，獲得的釀酒酵母工程菌可直接利用淀粉產(chǎn)生酒精。請回答下列問題：（1）將淀粉酶基因切割下來所用的工具是，用將淀粉酶基因與載體拼接成新的DNA分子，下一步將該DNA分子，以完成工程菌的構(gòu)建。（2）若要鑒定淀粉酶基因是否插入釀酒酵母菌，可采用的檢測方法是；若要鑒定淀粉酶基因是否翻譯成淀粉酵，可采用檢測：將該工程菌接種在含淀粉的

28、固體平板培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一定時間后，加入碘液，工程菌周圍出現(xiàn)透明圈，請解釋該現(xiàn)象發(fā)生的原因。（3）如何進一步鑒定不同的轉(zhuǎn)基因工程菌菌株利用淀粉能力的大??？（4）微生物在基因工程領域中有哪些重要作用？2009年專題一基因工程3.（浙江）下列關于基因工程的敘述，錯誤的是 A.目的基因和受體細胞均可來自動、或微生物 B.限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類常用的工具酶 C.人胰島素原基因在大腸桿菌中表達的胰島素原無生物活性 D.載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細胞和促進目的基因的表達32.（福建）（10分）轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過程如圖所示。質(zhì)粒上有Pst、Sma、EcoR、Apa等四種限制酶切

29、割位點。請回答：（1）構(gòu)建含抗病基因的表達載體A時，應選用限制酶，對進行切割。（2）培養(yǎng)板中的卡那霉素會抑制香蕉愈傷組織細胞的生長，欲利用該培養(yǎng)篩選已導入抗病基因的香蕉細胞，應使基因表達載體A中含有，作為標記基因。（3）香蕉組織細胞具有，因此，可以利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導入抗病基因的香蕉組織細胞培育成植株。圖中、依次表示組織培養(yǎng)過程中香蕉組織細胞的。4. （安徽2008年諾貝爾化學獎授予了“發(fā)現(xiàn)和發(fā)展了水母綠色熒光蛋白“的三位科學家。將綠色熒光蛋白基因的片段與目的基因連接起來組成一個融合基因，再將該融合基因轉(zhuǎn)入真核生物細胞內(nèi)，表達出的蛋白質(zhì)就會帶有綠色熒光。綠色熒光蛋白在該研究中的主要作用是A追蹤

30、目的基因在細胞內(nèi)的復制過程B追蹤目的基因插入到染色體上的位置C. 追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)在細胞內(nèi)的分布D追蹤目的基因編碼的蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)。45（廣東理科基礎）錢永健先生因在研究綠色熒光蛋白方面的杰出成就而獲2008年諾貝爾獎。在某種生物中檢測不到綠色熒光，將水母綠色熒光蛋白基因轉(zhuǎn)入該生物體內(nèi)后，結(jié)果可以檢測到綠色熒光。由此可知A該生物的基因型是雜合的B該生物與水母有很近的親緣關系C綠色熒光蛋白基因在該生物體內(nèi)得到了表達D改變綠色熒光蛋白基因的1個核苷酸對，就不能檢測到綠色熒光34（江蘇）(7分)蘇云金桿菌(Bt)能產(chǎn)生具有殺蟲能力的毒素蛋白。下圖是轉(zhuǎn)Bt毒素蛋白基因植物的培育過程示意圖(為

31、抗氨芐青霉素基因)，據(jù)圖回答下列問題。 (1)將圖中的DNA用HindIII、BamH I完全酶切后，反應管中有種DNA片段。 (2)圖中表示HindIII與BamI酶切、DNA連接酶連接的過程，此過程可獲得種重組質(zhì)粒；如果換用Bst I與BamH I酶切，目的基因與質(zhì)粒連接后可獲得種重組質(zhì)粒。(3)目的基因插入質(zhì)粒后，不能影響質(zhì)粒的。 (4)圖中的Ti質(zhì)粒調(diào)控合成的vir蛋白，可以協(xié)助帶有目的基因的TDNA導人植物細胞，并防止植物細胞中對TDNA的降解。 (5)已知轉(zhuǎn)基因植物中毒素蛋白只結(jié)合某些昆蟲腸上皮細胞表面的特異受體，使細胞膜穿孔，腸細胞裂解，昆蟲死亡。而該毒素蛋白對人類的風險相對較小

32、，原因是人類腸上皮細胞。 (6)生產(chǎn)上常將上述轉(zhuǎn)基因作物與非轉(zhuǎn)基因作物混合播種，其目的是降低害蟲種群中的基因頻率的增長速率。39.（廣東生物 A卷）（10分）現(xiàn)代生物科技專題（1）飼料加工過程溫度較高，要求植酸酶具有較好的高溫穩(wěn)定性。利用蛋白質(zhì)工程技術(shù)對其進行改造時，首先必須了解植酸酶的，然后改變植酸酶的，從而得到新的植酸酶。（2）培育轉(zhuǎn)植酸梅基因的大豆，可提高其作為飼料原料磷的利用率。將植酸酶基因?qū)氪蠖辜毎Ｓ玫姆椒ㄊ?。請簡述獲得轉(zhuǎn)基因植株的完整過程。（3）為了提高豬對飼料中磷的利用率，科學家將帶有植酸酶基因的重組質(zhì)粒通過轉(zhuǎn)入豬的受精卵中。該受精卵培養(yǎng)至一定時期可通過方法，從而一次得到多個

33、轉(zhuǎn)基因豬個體。（4）若這些轉(zhuǎn)基因因動、植物進入生態(tài)環(huán)境中，對生態(tài)環(huán)境有何影響？專題二細胞工程35（山東理綜）（8分）（生物一現(xiàn)代生物科技專題）人類在預防與診療傳染性疾病過程中，經(jīng)常使用疫苗和抗體。已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒，該病毒表面的A蛋白為主要抗原，其疫苗生產(chǎn)和抗體制備的流程之一如下圖：請回答：（1）過程代表的是。（2）過程構(gòu)建A基因表過載體時，必須使用和兩種工具酶。（3）過程采用的實驗技術(shù)是，獲得的X是。（4）對健康人進行該傳染病免疫預防時，可選用圖中基因工程生產(chǎn)的所制備的疫苗。對該傳染病疑似患者確診時，可從疑似患者體內(nèi)分離病毒，與已知病毒進行比較；或用圖中的進行特異性結(jié)合檢測

34、。4. (全國理綜1卷)下列關于體細胞雜交或植物細胞質(zhì)遺傳的敘述，錯誤的是A.利用植物體細胞雜交技術(shù)可克服生殖隔離的限制，培育遠源雜種B.不同種植物原生質(zhì)體融合的過程屬于植物體細胞雜交過程C.兩個不同品種的紫茉莉雜交，正交、反交所得F1的表現(xiàn)型一致D.兩個不同品種的紫茉莉雜交，F(xiàn)1的遺傳物質(zhì)來自母本的多于來自父本的1.（浙江）用動、生成體的體細胞進行離體培養(yǎng)，下列敘述正確的是 A.CO2培養(yǎng)箱B.都須用液體培養(yǎng)基 C.都要在無菌條件下進行D.都可體現(xiàn)細胞的全能性32（江蘇）(8分)動物器官的體外培養(yǎng)技術(shù)對于研究器官的生理、病理過程及其機制意義重大。下圖是一個新生小鼠的肝臟小塊培養(yǎng)裝置示意圖。請

35、回答下列問題。(1)肝臟切成小薄片，這有利于肝臟細胞。(2)氣室中充入5C02氣體的主要作用是。(3)培養(yǎng)液中添加抗生素是為了抑制細菌生長，但要注意選擇抗生素的，以保證抗生素對肝臟無害。(4)有機物X有毒性，可誘發(fā)染色體斷裂。利用上圖所示裝置和提供的下列材料用具，探究肝臟小塊對有機物X是否具有解毒作用。材料用具：肝臟小塊，外周血淋巴細胞，淋巴細胞培養(yǎng)液，植物凝集素(刺激淋巴細胞分裂)；顯微鏡，載玻片，蓋玻片，玻璃皿，滴管；吉姆薩染液(使染色體著色)，有機物X溶液等。實驗過程： 在淋巴細胞培養(yǎng)液中加入植物凝集素培養(yǎng)淋巴細胞，取4等份，備用。 利用甲、乙、丙、丁4組上圖所示裝置，按下表步驟操作(“

36、”表示已完成的步驟)。甲乙丙丁步驟一：加人肝臟培養(yǎng)液步驟二：加入有機物X溶液，步驟三：放置肝臟小塊上表中還需進行的操作是。培養(yǎng)一段時間后，取4組裝置中的等量培養(yǎng)液，分別添加到4份備用的淋巴細胞培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)。一段時間后取淋巴細胞分別染色、制片。在顯微鏡下觀察，并對比分析。若丙組淋巴細胞出現(xiàn)異常，而甲組的淋巴細胞正常，則說明。專題三胚胎工程8（江蘇）下列關于哺乳動物胚胎發(fā)育和胚胎工程的敘述，正確的是A卵裂期胚胎中細胞數(shù)目和有機物總量在不斷增加B胚胎分割時需將原腸胚的內(nèi)細胞團均等分割 C胚胎干細胞具有細胞核大、核仁小和蛋白質(zhì)合成旺盛等特點D胚胎干細胞是一類未分化細胞，可從早期胚胎中分離獲取3.（

37、全國理綜2）下列有關哺乳動物個體發(fā)育的敘述，錯誤的是A.胚胎發(fā)育過程中也會出現(xiàn)細胞衰老B.幼鹿經(jīng)過變態(tài)發(fā)育過程長出發(fā)達的鹿角C.胚后發(fā)育過程中伴有細胞分化D.來自原腸胚同一胚層的細胞經(jīng)分化發(fā)育成不同的組織69、（廣東文科基礎）正常精細胞形成精子的過程中，細胞的很多結(jié)構(gòu)退化消失，但保留了大量線粒體，因為線粒體可以合成精子運動所需的 A、乙醇 B、ATP C、胰島素 C、淀粉41（寧夏）【生物選修3現(xiàn)代生物科技專題】（15分）右圖為哺乳動物的胚胎干細胞及其分化的示意圖。請回答：（1）胚胎干細胞是從動物胚胎發(fā)育至_期的內(nèi)細胞團或胎兒的_中分離得到的一類細胞。（2）圖中分化程度最低的干細胞是_。在體外

38、培養(yǎng)條件下，培養(yǎng)液中加入_因子，可誘導該種干細胞向不同類型的組織細胞分化。（3)在機體內(nèi)，皮膚干細胞分化成皮膚細胞是機體細胞中基因_的結(jié)果。（4）某患者不能產(chǎn)生正常的白細胞，通過骨髓移植可以達到治療的目的，骨髓的治療的實質(zhì)是將上圖的_細胞移植到患者體內(nèi)。（5）若要克隆某種哺乳動物，從理論上分析，上述紅細胞、白細胞神經(jīng)細胞中不能選用作為供體的細胞是成熟的_，其原因是_。（6）若某藥物可抑制肝腫瘤細胞NDA的復制，使用該藥物可使肝腫瘤細胞停留在細胞周期的_期。（7）在制備單克隆抗體過程中的細胞融合階段，用_細胞與骨髓細胞融合，經(jīng)多交篩選最終得到能分泌_的雜交瘤細胞。2010年基因工程、生物技術(shù)的安

39、全和倫理問題（10浙江卷）2.在用基因工程技術(shù)構(gòu)建抗除草劑的轉(zhuǎn)基因煙草過程中，下列操作錯誤的是（）A. 用限制性核酸內(nèi)切酶切割煙草茶葉病毒的核酸B. 用DNA連接酶連接經(jīng)切割的抗除草劑基因和載體C. 將重組DNA分子導入原生質(zhì)體D. 用含除草劑的培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)基因煙草細胞（10福建卷）32生物現(xiàn)代生物科技專題(10分)紅細胞生成素(EPO)是體內(nèi)促進紅細胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病由于天然EP0來源極為有限，目前臨床使用的紅細胞生成素主要來自于基因工程技術(shù)生產(chǎn)的重組人紅細胞生成素(rhEPO）期間要生產(chǎn)流程如右圖（1）圖中所指的是技術(shù)。（2）圖中所指的物質(zhì)是，所指的物質(zhì)是。（3

40、）培養(yǎng)重組CHO 細胞時，為便于清除代謝產(chǎn)物，防止細胞嚴物積累對細胞自身造成危害，應定期更換。（4）檢測 rhEPO外活性需用抗rhEPO單克隆抗體。分泌單克隆抗體的細胞，可由rhEPO免疫過的小鼠B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合而成（10全國2）5. 下列敘述符合基因工程概念的是AB淋巴細胞與腫瘤細胞融合，雜交瘤細胞中含有B淋巴細胞中的抗體基因B將人的干擾素基因重組到質(zhì)粒后導入大腸桿菌，獲得能產(chǎn)生人干擾素的菌株C用紫外線照射青霉菌，使其DNA發(fā)生改變，通過篩選獲得青霉素高產(chǎn)菌株D自然界中天然存在的噬菌體自行感染細菌后其DNA整合到細菌DNA上（10廣東卷）22.新技術(shù)的建立和應用對生物學發(fā)展至

41、關重要。下列技術(shù)（或儀器）與應用匹配正確的是A. PCR技術(shù)擴增蛋白質(zhì) B.雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體C.光學顯微鏡觀察葉綠體的基粒 D.花粉離體培養(yǎng)培育單倍體植物（10天津卷）7.（26分）.（14分）下圖是培育表達人乳鐵蛋白的乳腺生物反應器的技術(shù)路線。圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因，ampR表示氨芐青霉素抗性金銀，BamHI、HindIII、SmaI直線所示為三種限制酶的酶切位點。據(jù)圖回答：（1）圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因。篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含的培養(yǎng)基上進行。（2）能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細胞中特異性表達的調(diào)控序列是（填字母代號）。

42、A.啟動子 B. tetR C.復制原點 D. ampR（3）過程可采用的操作方法是（填字母代號）。A.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化 B.大腸桿菌轉(zhuǎn)化 C.顯微注射 D. 細胞融合（4）過程可采用的生物技術(shù)是。（5）對早期胚胎進行切割，經(jīng)過程可獲得多個新個體。這利用了細胞的性。（6）為檢測人乳鐵蛋白是否成功表達，可采用（填字母代號）技術(shù)。A.核酸分子雜交 B.基因序列分析 C.抗原抗體雜交 D. PCR（10江蘇卷）18下列關于轉(zhuǎn)基因植物的敘述。正確的是 A轉(zhuǎn)入到油菜的抗除草劑基因，可能通過花粉傳人環(huán)境中 B轉(zhuǎn)抗蟲基因的植物不會導致昆蟲群體抗性基因擷宰增加 C動物的生長激素基因轉(zhuǎn)人植物后不能表達 D如轉(zhuǎn)基因植物

43、的外源基因來源于自然界，則不存在安全性問題（10江蘇卷）27（8分）下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圈l、圈2中箭頭表示相關限制酶的酶切位點。請回答下列問題：（1）一個圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)Sma 切割前后，分別含有 個游離的磷酸基團。（2）若對圖中質(zhì)粒進行改造，插入的Sma酶切位點越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越 。（3）用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用Srna 切割，原因是 。（4）與只使用EcoR I相比較，使用BamH 和Hind 兩種限制酶同時處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點在于可以防止 。（5）為了獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合，并加入 酶。（6）重組質(zhì)粒中

44、抗生素抗性基因的作用是為了 。（7）為了從cDNA文庫中分離獲取蔗糖轉(zhuǎn)運蛋白基因，將重組質(zhì)粒導入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體，然后在 的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以完成目的基因表達的初步檢測。（10海南卷）26（18分）選修模塊3：現(xiàn)代生物科技專題請回答胚胎工程和基因工程方面的問題：（1）應用胚胎工程技術(shù)可以培育出“試管牛”。試管牛的培育需經(jīng)過體外受精、以及在母體中發(fā)育和產(chǎn)出等過程。（2）在“試管?！钡呐嘤^程中，要使精子和卵母細胞在體外成功結(jié)合，需要對精子進行處理，使其。另外，培養(yǎng)的卵母細胞需要發(fā)育至減數(shù)第二次分裂的中期，該時期在顯微鏡下可觀察到次級卵母細胞和。（3）通常奶牛每次排出一枚卵母細胞，采

45、用激素處理可使其一次排出多枚卵母細胞，常使用的激素是。（4）利用基因工程可以獲得轉(zhuǎn)基因牛，從而改良奶牛的某些性狀?；蚬こ痰乃膫€基本操作步驟是、基因表達載體的構(gòu)建、和。若要獲得的轉(zhuǎn)基因牛分泌的乳汁中含有人干擾素，則所構(gòu)建的基因表達載體必須包括：某種牛乳腺分泌蛋白基因及其啟動子、和復制原點等。將該基因表達載體導入受體細胞所采用的方法是（顯微注射法、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法），為獲得能大量產(chǎn)生人干擾素的轉(zhuǎn)基因牛，該基因表達載體應導入的受體細胞是（受精卵、乳腺細胞）。（10浙江卷）4.下列關于動物細胞培養(yǎng)的敘述，正確的是()A. 培養(yǎng)保留接觸抵制的細胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細胞B. 克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程上多數(shù)細胞

46、的基因型會發(fā)生改變C. 二倍體細胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的D惡性細胞系的細胞可進行傳代培養(yǎng)（10浙江卷）30蘇云金芽孢桿菌產(chǎn)生的毒蛋白能使螟蟲死亡。研究人員將表達這種毒蛋白的抗螟蟲基因轉(zhuǎn)入非糯性抗稻瘟病水稻的核基因組中，培育出一批轉(zhuǎn)基因抗螟水稻。請回答：（1）染色體主要由組成，若要確定抗螟基因是否已整合到水稻的某一染色體上，方法之一是測定該染色體的。（2）選用上述抗螟非糯性水稻與不抗螟糯性水稻雜交得到F1，從F1中選取一株進行自交得到F2，F(xiàn)2的結(jié)果如下表：表現(xiàn)型抗螟非糯性抗螟糯性不抗螟非糯性不抗螟糯性個體數(shù)142485016分析表中數(shù)據(jù)可知，控制這兩對性狀的基因位于染色體上，所選F1植株的

47、表現(xiàn)型為。親本中抗螟非糯性水稻可能的基因型最多有種。（3）現(xiàn)欲試種這種抗螟水稻，需檢驗其是否為純合子，請用遺傳圖解表示檢驗過程（顯、隱性基因分別用B、b表示），并作簡要說明。（4）上表中的抗螟水稻均能抗稻瘟?。沟疚敛轱@性性狀），請簡要分析可能的原因。胚胎工程（2010山東高考理綜）35.【生物-現(xiàn)代生物科技專題】胚胎工程是一項綜合性的動物繁育技術(shù)，可在畜牧業(yè)和制藥業(yè)等領域發(fā)揮重要作用。下圖是通過胚胎工程培育試管牛的過程。（1）從良種母牛采集的卵母細胞，都需要進行體外培養(yǎng)，其目的是_；從良種公牛采集的精子需_后才能進行受精作用。（2）在體外培養(yǎng)受精卵時，除了給予一定量的O2以維持細胞呼吸外，

48、還需要提供_氣體以維持_。（3）圖中過程A稱為_，它在胚胎工程中的意義在于_。（4）研制能夠產(chǎn)生人類白細胞介素的牛乳腺生物反應器，需將目的的基因?qū)肱Ｊ芫?，最常用的導入方法是_；獲得轉(zhuǎn)基因母牛后，如果_即說明目的基因已經(jīng)表達。（10江蘇卷）16下列關于利用胚胎工程技術(shù)繁殖優(yōu)質(zhì)奶羊的敘述錯誤的是 A對受體母羊與供體母羊進行同期發(fā)情處理 B人工授精后的一定時間內(nèi)，收集供體原腸胚用于胚胎分割 C利用胚胎分剖技術(shù)可以獲得兩個基因型完全相同的胚胎 D一次給受體母羊檀人多個胚胎可增加雙胞胎和多胞胎的比例（10江蘇卷）17老年癡呆癥患者的腦血管中有一種特殊的一淀粉樣蛋白體，它的逐漸積累可能導致神經(jīng)元損傷和

49、免疫功能下降某些基因的突變會導致一淀粉樣蛋白體的產(chǎn)生和積累。下列技術(shù)不能用于老年癡呆癥治療的是 A胚胎移植技術(shù) B胚胎干細胞技術(shù) c單克隆抗體技術(shù)D基因治療技術(shù)2011年一、基因工程（2011年江蘇卷）33（8分）請回答基因工程方面的有關問題：(1)利用PCR技術(shù)擴增目的基因，其原理與細胞內(nèi)DNA復制類似（如下圖所示）。圖中引物為單鏈DNA片段，它是子鏈合成延伸的基礎。從理論上推測，第四輪循環(huán)產(chǎn)物中含有引物A的DNA片段所占的比例為。在第輪循環(huán)產(chǎn)物中開始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長的DNA片段。(2)設計引物是PCR技術(shù)關鍵步驟之一。某同學設計的兩組引物（只標注了部分堿基序列）都不合理（如下圖），

50、請分別說明理由。第1組：；第2組：。(3) PCR反應體系中含有熱穩(wěn)定DNA聚合酶，下面的表達式不能正確反映DNA聚合酶的功能，這是因為。(4)用限制酶EcoRV、Mbol單獨或聯(lián)合切割同一種質(zhì)粒，得到的DNA片段長度如下圖(1 kb即1000個堿基對)，請在答題卡的指定位置畫出質(zhì)粒上EcoRV、Mbol的切割位點。（11年北京卷）31.（16分）T-DNA可能隨機插入植物基因組內(nèi)，導致被插入基因發(fā)生突變。用此方法誘導擬南芥產(chǎn)生突變體的過程如下：種植野生型擬南芥，待植物形成花蕾時，將地上部分浸入農(nóng)桿菌（其中的T-DNA上帶有抗除草劑基因）懸浮液中以實現(xiàn)轉(zhuǎn)化。在適宜條件下培養(yǎng)，收獲種子（稱為T1

51、代）。（1）為促進植株側(cè)枝發(fā)育以形成更多的花蕾，需要去除，因為后者產(chǎn)生的會抑制側(cè)芽的生長。（2）為篩選出已轉(zhuǎn)化的個體，需將T代播種在含的培養(yǎng)基上生長，成熟后自交，收獲種子（稱為T代）。（3）為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將T代播種在含的培養(yǎng)基上，獲得所需個體。（4）經(jīng)過多代種植獲得能穩(wěn)定遺傳的抗鹽突變體。為確定抗鹽性狀是否由單基因突變引起，需將該突變體與植株進行雜交，再自交代后統(tǒng)計性狀分離比。（5）若上述T-DNA的插入造成了基因功能喪失，從該突變體的表現(xiàn)型可以推測野生型基因的存在導致植物的抗鹽性。（6）根據(jù)T-DNA的已知序列，利用PCR技術(shù)可以擴增出被插入的基因片段。其過程是：提取植株的DNA，用限制酶處理后，再用將獲得的DNA片段連接成環(huán)（如右圖）以此為模板，從圖中A、B、C、D四種單鏈DNA片斷中選取作為引物進行擴增，得到的片斷將用于獲取該基因的全序列信息。（2011年安徽卷）31.（21分）.（9分）家蠶細胞具有高效表達外源基因能力。將人干擾素基因?qū)爰倚Q細胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取干擾素用于制藥。(1)進行轉(zhuǎn)基因操作前，需用_酶短時處理幼蠶組織，以便獲得單個細胞。(2)為使干擾素基因在家蠶細胞中高效表達，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達載體的_和_之間。(3)采用PCR技術(shù)可驗證干擾素基因是否已經(jīng)導入家蠶細胞。改PCR反應體系的主要成分