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1、文檔可能無(wú)法思考全面,請(qǐng)瀏覽后下載! 微生物檢驗(yàn)標(biāo)本的正確采集及注意事項(xiàng) 正確采集臨床微生物標(biāo)本,直接影響到微生物培養(yǎng)鑒定結(jié)果。據(jù)相關(guān)統(tǒng)計(jì): 微生物標(biāo)本的檢測(cè)誤差來(lái)源: 80%來(lái)源于分析前 20%來(lái)源于分析中和分析后 其它檢驗(yàn)樣本的檢測(cè)誤差來(lái)源: 45%分析前 10%分析中(儀器) ) 45%分析后.檢驗(yàn)標(biāo)本采集質(zhì)量控制的重要性,分析前的誤差來(lái)源所占比例的這個(gè)數(shù)據(jù)是 驚人的,在我們的大型醫(yī)院都存在這個(gè)問 題,而在我們醫(yī)院應(yīng)該不會(huì)低于這個(gè)數(shù)據(jù)??煽康臋z驗(yàn)結(jié)果可以指導(dǎo)臨床診斷治療,為臨床科學(xué)用藥和成功的感染控制提供依據(jù),是正確、合理使用抗菌藥物,延緩細(xì)菌耐藥,減少抗菌藥物濫
2、用和監(jiān)測(cè)醫(yī)院感染的第一步,也是最重要的一步。為此應(yīng)正確采集各種細(xì)菌學(xué)標(biāo)本。一、 血液標(biāo)本的采集 1、 采集方法 (1)75%酒精清潔局部皮膚。 (2)待皮膚干后,再用2%2.5%碘酒從穿刺點(diǎn)中心部位開始消毒,范圍不應(yīng)小于5cm(直徑),且不能用手指觸摸消毒后的皮膚。 (3)皮膚碘酒干后(約1min),穿刺采集血液,采血量成人5-10ml,嬰幼兒1-5ml。 (4)采血后立即在床旁接種培養(yǎng)瓶,并迅速輕搖,充分混勻防止凝固,但又不可劇震以防溶血。 &
3、#160; 2、注意事項(xiàng) (1)懷疑菌血癥應(yīng)盡早采血,體溫上升(38.5)采血可提高陽(yáng)性率,但也要防止因等待而延誤時(shí)機(jī)。 (2)對(duì)已經(jīng)使用抗菌藥物,而又不能停藥者,應(yīng)在抗菌藥物濃度最低時(shí)采集也即在下次用藥前采血。切忌不要在靜滴抗菌藥物的靜脈處采取血標(biāo)本,也不能從靜脈導(dǎo)管及動(dòng)脈插管中取血。 (3)培養(yǎng)基與血液之比以10:1為宜,以稀釋血液中的抗生素,抗體等殺菌物質(zhì);有人主張對(duì)接受抗菌藥物治療的病人,培養(yǎng)基與采血量之比可為20:1或大于這個(gè)比例。 (4)近年研究表明,將血液注入血培養(yǎng)基前,更換針頭反而易導(dǎo)致污染。 (5)每例至少采血兩次,
4、間隔0.5-1h,以利于提高陽(yáng)性率和區(qū)分感染菌與污染菌。 (6)疑為細(xì)菌性心內(nèi)膜炎及布魯氏病的病人,以肘動(dòng)脈或股動(dòng)脈采血為宜,除在發(fā)熱期采血外,并要多次采血(24h 3-4次)和增加采血量(可增加10ml)。(7)采血后立即送檢,如不能立即送檢可置室溫,而不能放置冰箱。(8)如臨床表現(xiàn)很似敗血癥,而血培養(yǎng)多次陰性者,提示考慮厭氧菌和真菌感染的可能。二、呼吸道1、痰標(biāo)本(1)采集方法清晨起床后用涼開水漱口多次,以除去口腔內(nèi)大量雜菌,用力咳出肺深部的膿痰,置于清潔干燥容器中或無(wú)菌管中送檢。痰量極少者可用45 3%-10%的氯化鈉溶液約25ml霧化。對(duì)于咯痰量少的
5、幼兒,可輕輕壓迫胸骨上部的氣管,當(dāng)其咯痰后用無(wú)菌棉棒采集標(biāo)本。6 / 6咳嗽無(wú)力或昏迷病人,可用吸痰管經(jīng)鼻腔或口腔經(jīng)氣管腔內(nèi)吸引痰液送檢。氣管切開者可以深入透氣孔中取痰??捎弥夤茜R直接在病灶部位采集高濃度的病原菌。用無(wú)菌導(dǎo)管經(jīng)鼻腔插入氣管鏡內(nèi),緩慢注入無(wú)菌蒸餾水5ml,取出導(dǎo)管。留取患者在3h內(nèi)咳出的痰液,放入無(wú)菌容器中送檢。胃內(nèi)采痰法。無(wú)自覺癥狀的結(jié)核病人。有時(shí)可把痰誤咽入胃內(nèi),因而可采用胃內(nèi)溶物做結(jié)核菌培養(yǎng),其陽(yáng)性結(jié)果比咯痰高10%左右,該方法于晨起空腹時(shí),把滅菌的胃管,從鼻腔送入胃內(nèi),用20ml注射器抽取胃液。(2)注意事項(xiàng)痰標(biāo)本的采集以晨痰為準(zhǔn),此時(shí)患者痰量較多且含菌量也多。標(biāo)本采集
6、后立即送檢,若不能及時(shí)送檢者,可暫存2-8冰箱。若晚1-2h接種,會(huì)失去苛氧菌,并使得革蘭陰性菌過分生長(zhǎng)??山邮艿臉?biāo)本:痰;支氣管灌洗液,支氣管刷,支氣管活檢;肺吸出物和肺活檢。不能接受的標(biāo)本:唾液;24h留的痰(結(jié)核桿菌培養(yǎng)除外); 痰標(biāo)本的質(zhì)量評(píng)價(jià):(用顯微鏡篩選)在低倍鏡下,檢查鱗狀上皮細(xì)胞,至少10個(gè)視野,集中在有白細(xì)胞處,合格標(biāo)本為白細(xì)胞與鱗狀上皮細(xì)胞比例大于2:1。2、鼻拭子(1)用濕的拭子(生理鹽水);(2)需插兩個(gè)鼻孔;(3)深入3.3cm左右,轉(zhuǎn)動(dòng)4-5次;(4)以上用于診斷金黃色葡萄球菌暴發(fā)時(shí)的鼻帶菌者。3、咽拭子、口腔拭子(1)采集方法(到細(xì)菌室取專用拭子)患者
7、清水漱口后,由檢查者將其舌外拉,用棉拭子將咽后壁或懸雍垂的后側(cè)反復(fù)擦拭數(shù)次;化膿性扁桃體炎、口腔念珠菌病時(shí),直接用棉拭子在病灶部位擦拭;采集完后立即送檢,防止干燥。(2)注意事項(xiàng) 棉拭子應(yīng)避免觸及舌、口腔黏膜和唾液; 采集標(biāo)本前數(shù)小時(shí)不可用消毒藥物漱口或接觸病灶局部。三、胃腸道1、糞便(1)采集方法 選取膿血、黏液糞便2-3g,液體糞便取絮狀物1-2ml。盛于滅菌瓶中或蠟紙盒中及時(shí)送檢。(2)注意事項(xiàng)標(biāo)本要采集新鮮的,陳舊標(biāo)本影響陽(yáng)性檢出率;切忌糞尿混合;若要分離阿米巴,標(biāo)本要立即送檢并注意保溫;運(yùn)送培養(yǎng)基可提高
8、陽(yáng)性率;分離難辨梭菌時(shí)需選不成形或水樣便;霍亂弧菌、大腸桿菌157感染的腹瀉便則為水樣便或血性便;標(biāo)本在病理早期或治療前采集;一般認(rèn)為用抗菌藥三天后,標(biāo)本培養(yǎng)病原菌陰性。2、肛拭子 在無(wú)法獲得糞便的情況下,可用經(jīng)無(wú)菌甘油水或無(wú)菌生理鹽水濕潤(rùn)的肛拭子插入肛門4-5cm(幼兒2-3cm)處,輕輕旋轉(zhuǎn)擦取直腸表面黏液后取出,置運(yùn)送培養(yǎng)基中送檢。六、泌尿道根據(jù)衛(wèi)生部醫(yī)學(xué)感染診斷標(biāo)準(zhǔn)(試行)通知,泌尿系統(tǒng)臨床診斷為:患者出現(xiàn)尿頻、尿急、尿痛等尿路刺激癥狀,或有下腹觸痛、腎區(qū)叩痛、伴或不伴發(fā)熱,并具有下列情況之一:(1)尿檢白細(xì)胞男性5個(gè)/高倍視野,女性10個(gè)/高倍視野,插導(dǎo)尿管患
9、者應(yīng)結(jié)合尿培養(yǎng);(2)臨床已診斷為泌尿道感染,或抗菌治療有效而認(rèn)定的泌尿道感染。1、中段尿(1)采集方法女性 采樣前用肥皂水或0.1%的高錳酸鉀溶液沖洗外陰,用手指江陰唇分開排尿,棄其前段尿,不終止排尿,留取中段尿10ml于滅菌容器內(nèi)。男性 用肥皂水清洗尿道口,或0.1%的碘伏溶液消毒尿道口,滅菌紗布擦干,上翻包皮,棄其前段尿,不終止排尿,留取中段尿10ml于滅菌容器內(nèi)。(2)注意事項(xiàng)導(dǎo)尿雖然可以減少污染,但是多次重復(fù)導(dǎo)尿可以造成逆行性感染,因此近年來(lái)大多采用中段尿。女性病人最好采取膀胱截石位由護(hù)士采取標(biāo)本,減少污染。采集標(biāo)本以晨起第一次尿液為佳
10、。采集標(biāo)本后,若不能在1h內(nèi)送檢,暫放4冰箱,但不能超過8h。若尿液標(biāo)本在室溫下放置超過2h,即使接種培養(yǎng)結(jié)果細(xì)菌數(shù)104 cfu/ml獲103cfu/ml,也不能作為診斷依據(jù),應(yīng)重新留取標(biāo)本送檢。疑為尿道炎時(shí)可將最初3-4ml尿液收集在滅菌容器內(nèi)。該尿中即使有少數(shù)細(xì)菌,如反復(fù)檢查為同一細(xì)菌,也應(yīng)考慮為病原菌。兒童在多數(shù)情況下,僅沖洗外陰是不夠的,故采集標(biāo)本較為困難。如果尿內(nèi)細(xì)菌明顯增多,可以高度懷疑為尿路感染,無(wú)菌則可否定。若細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果為兩種或兩種以上細(xì)菌,需考慮污染可能,建議重新留取標(biāo)本送檢。尿液中不得加入防腐劑,消毒劑否則影響陽(yáng)性檢出率。2、膀胱穿刺采集法避免污染是很困難的,
11、培養(yǎng)結(jié)果與病情不符時(shí),或尿厭氧菌培養(yǎng),或嬰幼兒中段尿采集困難時(shí),可以用恥骨上穿刺膀胱內(nèi)采尿。3、留置導(dǎo)尿者采集法拔去閉式引流的集尿袋,棄去導(dǎo)尿管前段尿液,留無(wú)污染的膀胱內(nèi)尿液10ml送檢。不可從集尿袋下端留取標(biāo)本。七、腦脊液1、采集方法由臨床醫(yī)師以無(wú)菌方法收集腦脊液3-5ml(細(xì)菌1ml,真菌2ml抗酸桿菌2ml,病毒1ml)盛于無(wú)菌試管或小瓶中立即送檢。2、注意事項(xiàng) (1)采集標(biāo)本后立即送檢,因腦膜炎奈瑟菌離體后迅速自溶,肺炎鏈球菌及流感嗜血桿菌也易死亡; (2)疑為上述細(xì)菌感染時(shí),應(yīng)注意保溫,不可置冰箱或低溫保存。八、膽汁 1、十二指腸引流法
12、 在無(wú)菌操作下,將十二指腸導(dǎo)管吞咽至十二指腸乳頭部(距齒65-70cm)時(shí),收集A液(來(lái)自總膽管,為橙黃或金黃色),隨之注入25%硫酸鎂溶液40ml,經(jīng)1-2min后再采取B液(來(lái)自膽囊,為棕黃綠色),隨后收取C液(來(lái)自肝膽管,為檸檬色),一般認(rèn)為B液做細(xì)菌培養(yǎng)意義較大。2、膽囊穿刺法膽囊造影術(shù)時(shí),可同時(shí)采取膽汁。3手術(shù)采取法由總膽管、膽囊直接穿刺采取膽汁。以上采集之標(biāo)本應(yīng)立即送檢,否則置于4冰箱內(nèi),采集時(shí)需小心,避免被唾液、十二指腸液細(xì)菌污染。九、穿刺液標(biāo)本穿刺液包括胸水、腹水、心包液、關(guān)節(jié)液、鞘膜液。1、采集方法由臨床醫(yī)師行穿刺術(shù)抽取。胸腹水可收集5-1
13、0ml,心包液、關(guān)節(jié)液收集2-5ml,置于無(wú)菌含抗凝劑的試管或小瓶中,充分混勻后,立即送檢??鼓齽?0%EDTA二鈉鹽,標(biāo)本與抗凝劑之比10:1。2、注意事項(xiàng)標(biāo)本采集應(yīng)在患者用藥之前或停止用藥1-2天后進(jìn)行;不能立即送檢可置4冰箱保存;疑為淋病性關(guān)節(jié)炎患者的關(guān)節(jié)液,采集后立即送檢,或床旁培養(yǎng)為佳;不能用棉拭子浸蘸標(biāo)本送檢。十、膿汁及病灶分泌物1、傷口表面?zhèn)谑米硬杉椒白⒁馐马?xiàng) 僅限于皮膚與皮下組織,包括手術(shù)切口、褥瘡潰瘍、新生兒臍炎、嬰兒膿瘡病。用無(wú)菌生理鹽水或75%的酒精擦去病灶表面滲液;用無(wú)菌棉拭子抹去較深部的膿汁分泌物或組織送檢;采集褥瘡潰瘍標(biāo)本時(shí)應(yīng)采集褥瘡邊緣的膿性分泌物
14、,拭子放在運(yùn)送培養(yǎng)基中立即送檢,不要采集創(chuàng)口表面的滲液。傷口、膿腫、竇道、壞疽組織采集方法及注意事項(xiàng)閉鎖性膿腫用碘酒和酒精消毒皮膚后,用滅菌注射器穿刺抽取全部膿液送檢,疑為厭氧菌感染時(shí),排去針管內(nèi)空氣將針頭插入滅菌橡膠塞內(nèi)送檢;傷口處若有膿及滲出物要用無(wú)菌棉簽深入各種竇道中擦拭,用小刀刮取,穿刺抽吸或手術(shù)切除獲得深處傷口標(biāo)本;當(dāng)創(chuàng)傷出血時(shí),敷有藥物在2h以內(nèi)及燒傷在12h內(nèi)均不應(yīng)采集標(biāo)本,此時(shí)獲得陽(yáng)性結(jié)果機(jī)會(huì)甚少。采集標(biāo)本注意觀察膿汁及分泌物性狀、色澤、氣味等??蔀榕囵B(yǎng)鑒定提供依據(jù)。燒傷創(chuàng)面燒傷創(chuàng)面需要膿性分泌物,焦痂迅速分離變棕黑、黑或紫羅蘭色,燒傷邊緣水腫?;颊甙l(fā)燒>38或低體溫&l
15、t;36,合并低血壓。用無(wú)菌生理鹽水沖洗傷口創(chuàng)面。由于創(chuàng)面部位不同,細(xì)菌種類也不盡相同,要用滅菌棉拭子采集多個(gè)部位的炎癥區(qū)送檢。采集痂下變黑或變性的不健康區(qū)邊緣或引流液等做定量培養(yǎng)及組織活檢。2、厭氧傷口拭子厭氧專用棉棒或玻璃棒觸及深部膿汁;可用注射器抽吸,排去針管內(nèi)空氣將針頭插入滅菌橡膠塞內(nèi)送檢;立即送檢,送檢過程中必須保持在無(wú)氧條件;不宜做厭氧菌培養(yǎng)的有痰、喉拭子、鼻咽拭子、齒齦拭子、直腸、陰道和宮頸拭子以及回腸、結(jié)腸造瘺術(shù)的流出物,胃、小腸及大腸內(nèi)容物等。3、尿道口分泌物拭子男性用無(wú)菌紗布擦拭和清洗尿道口,然后采取從尿道口溢出的膿性分泌物;采集前列腺液時(shí),先將尿道、膀胱沖洗,然后從肛門用手指按摩前列腺,促使前列腺液溢出;女性病人先用滅菌紗布或棉拭子仔細(xì)擦拭或清洗尿道口,然后從陰道內(nèi)診壓迫尿道,使分泌物溢出;取子宮頸分泌物,先用內(nèi)窺鏡擴(kuò)張陰道,然后從宮頸口用滅菌棉拭子采取分泌物,盡量避免被陰道宮頸附近正常菌群的污染。4、蜂窩織炎用無(wú)菌生理鹽水或酒精消毒皮膚;用細(xì)針在炎癥最顯著處穿刺吸引;抽少量滅菌生理鹽水在針管內(nèi);注入無(wú)菌試管內(nèi)送檢。5、組織標(biāo)本活體組織采取的微量標(biāo)本,可直接接種在培養(yǎng)基內(nèi);表淺組織可直接用棉拭子擦拭、小刀刮去;較大組織塊的表面可采用燒灼或浸入沸水中5
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