實(shí)驗(yàn)_葉綠素的提取和分離

1、葉綠體中色素的提取和分離葉綠體中色素的提取和分離植物進(jìn)行光合作用的場(chǎng)所？植物進(jìn)行光合作用的場(chǎng)所？ 葉綠體葉綠體 一、葉綠體一、葉綠體 形態(tài)：形態(tài)：橢圓球形橢圓球形 結(jié)構(gòu)：結(jié)構(gòu)：外膜、內(nèi)膜、外膜、內(nèi)膜、葉綠體基質(zhì)、葉綠體基質(zhì)、基?；? (由由單層膜單層膜的類囊體垛疊構(gòu)成的類囊體垛疊構(gòu)成) ) 葉綠體內(nèi)的物質(zhì)：葉綠體內(nèi)的物質(zhì)：酶（光合作用有關(guān)）酶（光合作用有關(guān)） 光反應(yīng)的酶光反應(yīng)的酶葉綠體基粒葉綠體基粒 暗反應(yīng)的酶暗反應(yīng)的酶葉綠體基質(zhì)葉綠體基質(zhì)少量少量DNADNA和和RNARNA色素色素一、葉綠體一、葉綠體二、葉綠體色素二、葉綠體色素 分布：分布：葉綠體葉綠體類囊體膜類囊體膜上上 分類：分類：色

2、素色素葉綠素葉綠素類胡蘿卜素類胡蘿卜素葉綠素葉綠素a a（藍(lán)綠色藍(lán)綠色）葉綠素葉綠素b b （黃綠色黃綠色）葉黃素葉黃素（黃色黃色）胡蘿卜素胡蘿卜素（橙黃色橙黃色）二、葉綠體色素 功能：功能：選擇選擇吸收吸收光能，光能，傳遞和轉(zhuǎn)化傳遞和轉(zhuǎn)化光能光能葉綠素：主要吸收主要吸收紅橙光紅橙光和和藍(lán)紫光藍(lán)紫光類胡蘿卜素：主要吸收主要吸收藍(lán)紫光藍(lán)紫光一、實(shí)驗(yàn)原理一、實(shí)驗(yàn)原理葉綠體色素易溶于無水乙醇等有機(jī)溶劑中，可以用無水乙醇提取綠葉中的葉綠體色素。紙層析法不同的葉綠體色素隨層析液在濾紙上擴(kuò)散速度不同。（不同的色素會(huì)在擴(kuò)散過程中分離開來，形成條帶）（不同的色素會(huì)在擴(kuò)散過程中分離開來，形成條帶） 二、實(shí)驗(yàn)步驟

3、二、實(shí)驗(yàn)步驟提取葉綠體色素提取葉綠體色素取取2-32-3片菠菜葉，撕去葉脈，盡量剪碎，放入研缽。片菠菜葉，撕去葉脈，盡量剪碎，放入研缽。向研缽中放入少量向研缽中放入少量石英砂石英砂和和碳酸鈣碳酸鈣，加入，加入一滴管一滴管無無水乙醇水乙醇，邊加無水乙醇邊研磨，進(jìn)行充分地研磨至勻漿狀態(tài)。，邊加無水乙醇邊研磨，進(jìn)行充分地研磨至勻漿狀態(tài)。在玻璃漏斗上放入單層紗布，將研磨液倒入漏斗，在玻璃漏斗上放入單層紗布，將研磨液倒入漏斗，漏斗下端放置培養(yǎng)皿，過濾制備得到濾液。漏斗下端放置培養(yǎng)皿，過濾制備得到濾液?！咀⒆ⅰ縫加石英砂是為了使研磨充分加石英砂是為了使研磨充分p加碳酸鈣是為了防止葉綠體色素被破壞加碳酸鈣是

4、為了防止葉綠體色素被破壞p加入加入CaCOCaCO3 3和石英砂的量均很少，無水乙醇的量不應(yīng)太少和石英砂的量均很少，無水乙醇的量不應(yīng)太少畫線畫線將干燥的定性濾紙制成如右圖將干燥的定性濾紙制成如右圖所示，用鉛筆劃線所示，用鉛筆劃線（已準(zhǔn)備好）（已準(zhǔn)備好）。用用蓋玻片蓋玻片蘸取少量濾液，沿鉛筆線蘸取少量濾液，沿鉛筆線均勻均勻壓出壓出細(xì)線。待濾液干后，細(xì)線。待濾液干后，重復(fù)重復(fù)畫線畫線3-43-4次。次。【注注】p畫濾液線時(shí)盡量畫濾液線時(shí)盡量畫直、畫細(xì)、畫濃畫直、畫細(xì)、畫濃p每次畫完，要等濾液干時(shí)再重復(fù)畫，以防濾液擴(kuò)散開使濾液每次畫完，要等濾液干時(shí)再重復(fù)畫，以防濾液擴(kuò)散開使濾液線過寬，影響結(jié)果線過寬，影響結(jié)果分離葉綠體色素分離葉綠體色素將將4mL4mL層析液層析液倒入層析管中，倒入層析管中，將畫好線的濾紙條固定于右圖裝置中。將畫好線的濾紙條固定于右圖裝置中。10min10min后，將濾紙條取出，后，將濾紙條取出，風(fēng)干。觀察色素帶及其顏色，作好記錄。風(fēng)干。觀察色素帶及其顏色，作好記錄?！咀⒆ⅰ縫放濾液條時(shí)，要避免放濾液條時(shí)，要避免濾液細(xì)線濾液細(xì)線浸沒到浸沒到層析液。不要讓層析液。不要讓濾紙條貼在層析管壁上。濾紙條貼在層析管壁上。p層析液中一些成分易揮發(fā)，要避免開放在空氣中。層析液中一些成分易揮發(fā)，要避免開