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文檔簡介

1、免疫應答主要分為哪幾個階段?1)識別階段 2)活化和增值階段 3)免疫效應中樞免疫器官和外周免疫器官有哪些器官組成?各有什么功能?1)中樞免疫器官:免疫細胞發(fā)生、分化、成熟的場所,如骨髓,胸腺2)外周免疫器官:免疫細胞產(chǎn)生應答的場所。如脾臟,淋巴結,黏膜,扁桃體等。T細胞、B細胞和NK細胞的主要功能分別是什么?1)T細胞: 介導細胞免疫,輔助體液免疫。2)B細胞: 產(chǎn)生體液免疫3)NK細胞:介導天然免疫,發(fā)揮細胞毒作用。根據(jù)作用方式及其特點的不同,機體存在兩類免疫簡述各自的概念和特征?1)先天性免疫或固有性免疫,是個體出生是就具有的天然免疫,可通過遺傳獲得,是機體在長期進化過程中逐漸建立起來的

2、主要針對入侵病原體的天然防御功能。其主要特征是反應迅速,針對外來異物的范圍較廣,不針對某個特定異物抗原,也稱非特異性免疫。2)適應性免疫,是個體出生后,接觸到生活環(huán)境中的多種異物抗原,并在不斷刺激中逐漸建立起來的后天免疫,也稱獲得性免疫。其主要特征是針對某個特定的異物抗原而產(chǎn)生免疫應答,開始的應答過程比較緩慢,一旦建立清除該抗原的效率很高,特異性很強,也稱特異性免疫。簡述抗原抗體反應的原理。答:抗原與抗體能夠特異性結合是基于抗原表位與抗體超變區(qū)分子間的結構互補性與親和性,這種特性是由抗原、抗體分子空間構型所決定的,它們之間的結合是抗原表位與抗體超變區(qū)溝槽分子表面的結合簡述抗原抗體反應的類型。答

3、:抗原抗體反應分為五種類型:顆粒性抗原與相應抗體結合所產(chǎn)生的凝集反應;可溶性抗原與相應抗體結合所產(chǎn)生的沉淀反應;抗原抗體結合后激活補體所致的細胞溶解反應;細菌外毒素或病毒與相應抗體結合所致的中和反應;免疫標記的抗原抗體反應等。什么是帶現(xiàn)象?答:在抗原抗體反應等價帶前后,由于抗體或抗原過量(形成前帶或后帶),上清液中可測出游離的抗體或抗原,形成的沉淀物少,不出現(xiàn)可見反應,這種現(xiàn)象在做血清學試驗時稱為帶現(xiàn)象。影響抗原抗體反應的環(huán)境條件有哪些?在實驗中如何控制這些條件因素?答:環(huán)境條件包括:電解質,酸堿度和溫度。穩(wěn)定條件:電解質:常用O85氯化鈉或各種緩沖液作抗原及抗體的稀釋液及反應液;酸堿度:pH

4、過高或過低都將影響抗原與抗體的理化性質,抗原抗體反應一般在pH為68時進行;溫度:一般以15,40為宜,最佳反應溫度為37。簡述單克隆抗體制備技術的主要步驟。單克隆抗體是應用B細胞雜交瘤技術進行制備的,其主要操作步驟包括抗原免疫、親本細胞的選擇和制備、細胞融合、雜交瘤細胞的篩選和克隆化、雜交瘤細胞體內(nèi)接種或體外增量培養(yǎng)、單克隆抗體的純化與鑒定。試述免疫血清應如何進行純化。免疫血清的純化主要是指提純免疫血清中的IgG并去除無關的雜抗體。提純IgG類抗體的方法有:硫酸胺鹽析法粗提、離子交換層析法和親和層析法,采用親和層析法提取IgG時,可使用純化抗原或葡萄球菌蛋白A交聯(lián)sephamse 4B制成層

5、析柱。另外,還可通過吸附法獲得單價特異性抗血清。方法是將不含特異性抗原的雜抗原與戊二醛等雙功能試劑混合制成固相吸附劑,以吸附免疫血清中的雜抗體,或將雜抗原交聯(lián)于sephamse 4B上,通過親和層析去除雜抗體。敘述雜交瘤技術的基本原理。雜交瘤技術是在細胞融合技術的基礎上,將具有分泌特異性抗體能力的致敏B細胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細胞融合為B細胞雜交瘤。這種雜交瘤細胞具有兩種親本細胞的特性,即既能夠分泌抗體又能在體外長期繁殖,經(jīng)過克隆化后成為單個細胞克隆,分泌的抗體即為單克隆抗體。簡述間接血凝試驗的基本原理。間接血凝試驗是將可溶性抗原(或抗體)吸附于人的0型紅細胞或綿羊、家兔的紅細胞制成抗原

6、致敏的紅細胞,與相應抗體(或抗原)作用,在有電解質存在的條件下,經(jīng)過一定時間可出現(xiàn)肉眼可見的紅細胞凝集現(xiàn)象,又稱被動血凝試驗簡述抗人球蛋白試驗的原理(又稱Coombs試驗)、類型及其在臨床上的應用。Coombs試驗又稱抗人球蛋白試驗,其原理是不完全抗體多半是7S的IgG類抗體,能與相應的抗原牢固結合,但在一般條件下不出現(xiàn)可見反應,利用抗球蛋白抗體作為第二抗體,連接與紅細胞表面抗原結合的特異抗體,可使紅細胞凝集。 Coombs試驗有二種類型:(1)直接Coombs試驗:用于檢測紅細胞結合的不完全抗體。(2)間接Coombs試驗:用于檢測血清中游離的不完全抗體??骨虻鞍自囼炛饕獞糜谀切┓矫妫枯斞?/p>

7、:對于“危險”受體(指曾經(jīng)輸血、肌肉注射過血液制品或母子間血型不合的妊娠而可能產(chǎn)生免疫性血型抗體的人)的配血試驗必須包括各種不完全抗體的檢查,以抗球蛋白法最為可靠。血型抗原抗體的檢查:主要檢查Rh 者,其體內(nèi)是否有抗-D抗體,應用抗球蛋白試驗對外表為D 陰性的供體血液作常規(guī)檢查。最可靠和靈敏的方法是將待檢D 陰性的紅細胞與高效價的不完全抗-D 血清混合,然后加抗球蛋白血清檢查細胞上有無致敏抗體。對新生兒溶血性貧血性疾病的診斷:母體產(chǎn)生的最常見的免疫性抗體為Rh 抗體和ABO 抗體,一般為7S 的IgG,可通過胎盤屏障,作用于胎兒紅細胞,引起新生兒溶血性疾病,可借抗球蛋白試驗檢出而采取預防性措施

8、。對溶血性貧血的研究:獲得性溶血性貧血患者大多數(shù)可借助該方法證實有自身紅細胞的抗體存在。對細菌或立克次體的不完全抗體的檢查。Coombs 試驗還可采用專一性特異性的抗球蛋白的血清,如抗IgG 血清、抗IgM、抗IgA以及抗補體血清等,分析結合于紅細胞上的不完全抗體免疫球蛋白的亞類。什么是協(xié)同凝集試驗?主要用于何種檢測?協(xié)同凝集試驗與間接凝集反應的原理相類似,但所用的載體為金黃色葡萄球菌。這種細菌的細胞壁中含有A蛋白(SPA),SPA 能與特異性抗體IgG 的Fc段結合(IgG3除外)??贵w的F(ab)2 段暴露在葡萄球菌的表面,仍保持與相應抗原特異性結合的特性。當這種葡萄球菌與IgG抗體連接時

9、,就成為抗體致敏的載體顆粒,若與相應抗原接觸,即出現(xiàn)反向間接凝集反應??捎糜诩毦?、病毒、毒素及各種可溶性抗原的檢測。何謂間接凝集反應?將可溶性抗原(或抗體)先吸附或偶聯(lián)于與免疫無關大小適當?shù)念w粒表面,使之成為致敏載體顆粒,然后與相應抗體(或抗原)作用,在適宜電解質存在條件下,出現(xiàn)特異性的凝集現(xiàn)象,稱為間接凝集反應間接凝集反應如何進行分類?各試驗的原理是什么根據(jù)致敏載體用的是抗原或抗體分為正向間接凝集試驗和反向間接凝集試驗;根據(jù)載體種類,分為間接血凝試驗和膠乳間接凝集試驗;根據(jù)反應方式分為間接凝集試驗、間接抑制凝集試驗和協(xié)同凝集試驗。間接凝集試驗是用抗原致敏載體檢測標本中的相應抗體。將可溶性抗原

10、與載體顆粒結合,再與標本中的抗體反應,通過抗體橋聯(lián),形成肉眼可見的凝集顆?;蚰瘔K,為陽性反應。反向間接凝集試驗選用已知特異性抗體致敏載體檢測標本中的相應抗原。用特異性抗體致敏顆粒,與樣品中的待檢抗原反應,通過抗原橋聯(lián),形成肉眼可見的凝集為陽性。臨床上用于檢測HbsAg、AFP 等。間接凝集抑制試驗診斷試劑為已知抗原致敏的顆粒載體及相應的抗體,用于檢測標本中與致敏抗原相同的抗原。將標本與抗體試劑相反應,然后加入致敏抗原,若出現(xiàn)凝集現(xiàn)象,說明標本中不存在相應抗原;如未出現(xiàn)凝集現(xiàn)象,則說明待檢標本中含有相應抗原,凝集反應被抑制。同理,用抗體致敏載體顆粒及相應抗原作為診斷試劑,檢測標本中的抗體,稱為

11、反向間接凝集試驗。協(xié)同凝集試驗與間接凝集反應的原理相似,但所用載體為金黃色葡萄球菌,該菌細胞壁上的SPA 能與特異性抗體的IgG 的Fc 段結合(IgG3除外),抗體的F(ab)2 段暴露在葡萄球菌的表面,仍能與相應抗原特異性結合。當這種葡萄球菌與IgG 抗體連接時,就成為抗體致敏的載體顆粒,若與相應抗原接觸,即出現(xiàn)反向間接凝集反應。間接血凝試驗是以紅細胞作為載體的間接凝集試驗,用已知的抗原或抗體致敏紅細胞,然后與樣品中的抗體或抗原在適宜條件下反應,出現(xiàn)紅細胞凝集者為陽性。根據(jù)紅細胞凝集的程度判斷陽性反應的強弱。膠乳凝集試驗是以聚苯乙烯膠乳微粒作為載體的間接凝集試驗。HAT培養(yǎng)基篩選雜交瘤細胞

12、的機制是什么?答:1.淋巴細胞:不能生長,5到7天死亡;DNA的主要合成途徑被A阻斷2.骨髓瘤細胞:不能生長,5到7天死亡;HGPRT缺乏,DNA合成的旁路途經(jīng)受阻3.骨髓瘤細胞和脾細胞融合形成雜交瘤細胞,可長期生長繁殖。利用淋巴細胞的HGRT將合成為嘌呤堿并最終與一起合成從淋巴細胞獲得產(chǎn)生某種抗體的遺傳信息,從骨髓瘤細胞獲得不斷繁殖的能力簡述免疫系統(tǒng)的三個生理功能。答:免疫系統(tǒng)的三個生理功能為免疫防御、免疫自穩(wěn)、免疫監(jiān)視免疫防御:是機體排斥外來抗原性異物的一種免疫保護功能。該功能正常時,機體可抵御病原微生物及其毒性產(chǎn)物的感染和損害,即抗感染免疫;異常情況下,反應過高會引起超敏反應,反應過低或

13、缺失可發(fā)生免疫缺陷。免疫自穩(wěn):是機體免疫系統(tǒng)維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的一種生理功能。該功能正常時,機體可及時清除體內(nèi)損傷、衰老、變性的細胞和免疫復合物等異物,而對自身成分保持免疫耐受;該功能失調(diào)時,可發(fā)生生理功能紊亂或自身免疫性疾病。免疫監(jiān)視:是機體免疫系統(tǒng)及時識別、清除體內(nèi)突變、畸變細胞和病毒感染細胞的一種生理功能。該功能失調(diào)時,有可能導致腫瘤發(fā)生,或因病毒不能清除而出現(xiàn)持續(xù)感染。決定抗原抗體最佳配比的方法有幾種?(1)抗原稀釋法:將可溶性抗原作一系列倍比稀釋,然后向各管中加入一定濃度的適量抗血清,37反應后,產(chǎn)生的沉淀量隨抗原量變化而不同,以沉淀物最多的管為最適比例管。(2)抗體稀釋法:是將恒定量抗

14、原與不同倍比稀釋的抗體反應,出現(xiàn)沉淀物最多的管為抗體最適比例管。(3)棋盤格法:亦稱方陣法??乖贵w同時稀釋,可一次完成抗原和抗體的滴定,并找出抗原、抗體的最適比。是前二法的結合簡述單向免疫擴散試驗的基本原理和技術要點。(1)原理:待測抗原從局部含有定量抗體的凝膠內(nèi)自由向周圍擴散,抗原抗體特異性結合,在兩者比例合適的部位,形成白色沉淀環(huán),沉淀環(huán)的大小與抗原的濃度呈正相關。(2)技術要點:將抗體和熱融化瓊脂(約50)混合,傾注成平板。待凝固后在瓊脂板上打孔,孔中加入已稀釋的抗原液,和不同濃度的抗原標準品,置3712溫箱,2448h后觀察孔周圍沉淀環(huán)。量取沉淀環(huán)直徑,通過抗原標準品,計算待測抗原的

15、濃度。在雙向免疫擴散試驗中,如何判定結果?雙向免疫擴散中,出現(xiàn)沉淀線,表明存在相應的抗原、抗體,不出現(xiàn)沉淀線則表明缺乏抗原或抗體。沉淀線的形成是根據(jù)抗原抗體兩者比例所致,沉淀線靠近抗原孔,提示抗體含量高;靠近抗體孔,提示抗原含量較多免疫電泳技術的優(yōu)點是什么?免疫電泳有哪些用途?1)優(yōu)點:免疫電泳技術是將免疫擴散和電泳相結合的一種免疫學分析技術,既有抗原抗體反應的高度特異性,又有電泳分離技術的快速、靈敏和高分辨力,廣泛應用于牛物醫(yī)學領域。(2)用途:純化抗原或抗體的成分分析,分析其純度;正常及異常體液中蛋白質成分的分析,如無丙種球蛋白血癥、冷球蛋白血癥、多發(fā)性骨髓瘤、白血病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、肝病

16、等病人的血清蛋白成分的分析,多發(fā)性骨髓瘤血清M蛋白的檢測和鑒定;免疫后不同抗體組分的動態(tài)變化研究對流免疫電泳時,抗體為什么流向負極?大部分蛋白質抗原在堿性溶液中帶負電荷,電泳時從負極向正極泳動,而抗體IgG分子量大,暴露的極性基團較少,在緩沖液中解離的也少,向正極的泳動速度較慢,電泳時由電滲引向負極的液流速度超過了IgG向正極的泳動,帶動抗體流向負極,使抗原和抗體定向對流并發(fā)生反應,出現(xiàn)肉眼可見的沉淀線。簡述火箭免疫電泳的原理和主要用途。(1)原理:火箭免疫電泳是將單向免疫擴散和電泳相結合的技術??乖陔妶鲎饔孟?,在含有適量抗體的瓊脂糖凝膠中向正極泳動,逐漸形成梯度濃度,在抗原抗體比例適當時形

17、成沉淀,隨著抗原量的減少,沉淀帶越來越窄,形成火箭峰樣沉淀,峰形高低與抗原量呈正相關。用已知量標準抗原作對照,繪制標準曲線,根據(jù)檢測樣品沉淀峰的高度可算出待測抗原的含量。(2)主要用途:抗原蛋白定量,如IgA、IgG、IgM和sIgA檢測;C3、C4及其裂解產(chǎn)物檢測;AFP等檢測。免疫濁度測定的基本原理是什么?有哪些類型?(1)基本原理:免疫濁度測定是將液相內(nèi)的沉淀試驗與現(xiàn)代光學儀器和自動分析技術相結合的一項分析技術。當可溶性抗原與相應的抗體特異結合,在二者比例合適、并有一定濃度的電解質存在時,可以形成不溶性的免疫復合物,使反應液出現(xiàn)濁度。這種濁度可用肉眼或儀器測知,并可通過濁度推算出復合物的

18、量,即抗原或抗體的量。(2)類型:按測量方式可分為透射免疫比濁法和散射免疫比濁法。按測定速度可分為速率比濁法和終點比濁法。散射免疫比濁法的基本原理是什么?沿水平軸照射的一定波長的光,在通過溶液時,光線可被其中的免疫復合物粒子顆粒折射,發(fā)生偏轉,產(chǎn)生散射光。根據(jù)Rayle培h散射方程,散射光強度與粒子(免疫復合物)的濃度和體積成正比,通過測量散射光的強度,可計算出待測抗原的濃度。速率散射比濁法中的“速率”是指什么?所謂速率是指單位時間內(nèi)抗原與抗體反應的速度。抗原與抗體結合形成免疫復合物的速度,在每個單位時間內(nèi)是不相同的,在抗體過量的情況下,隨著反應時問的延長,免疫復合物的總量逐漸增加,通常在25

19、s時出現(xiàn)一個反應最快的速率峰。峰值與抗原量呈正相關。免疫濁度測定的反應體系中,為什么必須始終保持抗體過量抗原和抗體的比例是濁度形成的關鍵因素,抗原和抗體必須在一個適當?shù)臐舛炔艜霈F(xiàn)最高結合率。當抗原過量時,由于鉤狀效應,形成的免疫復合物分子小,而且會發(fā)生再解離,使?jié)岫认陆担馍⑸錅p少。當反應液中抗體過量時,免疫復合物的形成隨著抗原量的增加而遞增,光散射的強度也隨之遞增,因此,免疫濁度測定的反應體系中必須始終保持抗體過量,以保證免疫復合物的生成量與濁度的改變一致,這是免疫濁度測定的基本原則。單向瓊脂擴散試驗有那些影響因素?單向擴散試驗有下列影響因素: 抗血清的親和力、特異性、及效價。要求親和力強

20、,特異性好、效價高。注意存放的方法,防止效價下降。 標準曲線必須在每次測定時同時制作,絕不可一次作成,長期應用。 測定時必須加測質控血清,以保證定量的準確性。 有時出現(xiàn)擴散環(huán)呈現(xiàn)兩重的雙環(huán)現(xiàn)象,這是出現(xiàn)了抗原性相同的兩個組分,其擴散率不同,例如重鏈病血清中出現(xiàn)的重鏈和正常的 IgA兩種成分并存,皆與抗IgA 抗體發(fā)生反應,就形成內(nèi)外兩重環(huán)。 在單擴試驗時,有時回出現(xiàn)結果與真實含量不符,這主要出現(xiàn)在 Ig 測定中。如用單克隆抗體或骨髓瘤純抗原免疫動物獲得的抗血清,都存在單一結合價的現(xiàn)象,若用此作為單擴試劑測量正常人的多態(tài)性抗原,則抗體相對過剩,是沉淀圈直徑變小,測量值降低。 測得假陽性升高現(xiàn)象與

21、上面相反,如用多克隆抗體測定單克隆病,則抗原相對過剩(單一抗原決定簇) ,致使沉淀圈呈不相關擴大,從而造成某一成分的偽性增加。 沉淀反應可應用在那些方面?沉淀反應主要應用于體液內(nèi)包括血液、尿液、腦脊液、胸水、淚液、關節(jié)腔液等內(nèi)的蛋白質(如MW1000050000,標本濃度為 1mg/L100g/L)測定,應用最廣泛的是可以準確定量的免疫濁度法,也可用于藥物的測定。 雙向瓊脂擴散試驗的原理是什么?雙向瓊脂擴散試驗的原理為可溶性抗原和抗體在含有一定電解質的瓊脂凝膠板的對應孔中各自向對方擴散,在最適當?shù)谋壤幮纬煽乖贵w沉淀線,根據(jù)沉淀線的位置、形狀及對比關系,可作出對抗原或抗體的定性分析試對沉淀反

22、應各類試驗方法進行評價。沉淀反應可分為單向免疫擴散試驗、雙向免疫擴散試驗、絮狀沉淀試驗、免疫濁度測定等試驗。 單向免疫擴散試驗是一種穩(wěn)定、簡便、不需要特殊設備、一般試驗室都可使用的常規(guī)方法。 雙向免疫擴散試驗簡單易行,結果可靠,特異性高,分辨率高于對流免疫電泳,成本低廉,結果可經(jīng)染色干燥后長期保存;缺點是敏感性較低、擴散緩慢,不能精確定量。 免疫濁度法快速、敏感,最小檢出量可達 ng 水平。檢測范圍廣 缺點是所用抗血清質量要求高,儀器須裝電腦,價格較貴。 絮狀沉淀試驗較實用、簡便、不需要特殊設備一般試驗室都可使用,但須稀釋標本比較麻煩。放射免疫分析技術有何應用?答:放射免疫技術由于其測定的靈敏

23、度高,特異性強,精密度好,而且可對半抗原和抗原測定以及測定儀器設備條件要求不高,因此廣泛用于生物醫(yī)學檢驗。常用于各種激素、微量半抗原、腫瘤標志物、藥物等微量物質的測定。 由于大多數(shù)檢驗項目均有 RIA 或 IRMA 試劑盒供應,目前仍是基層單位對超微量物質測定的主要手段。試述放射免疫分析與免疫放射分析。 答:放射免疫分析(RIA)是放射免疫技術最經(jīng)典的模式。它是以放射性核素標記抗原與反應系統(tǒng)中未標記抗原競爭性結合特異性抗體為基本原理來測定待檢樣品中抗原量的一種分析方法。而免疫放射分析(IRMA)是用放射性核素標記的過量抗體與待檢測抗原直接結合,采用固相免疫吸附載體分離結合與游離標記抗體的非競爭

24、性放射免疫分析。二者的異同點如下: 標記物 RIA 以放射性核素標記抗原;IRMA 則是標記抗體。 反應速率 IRMA 反應速度比RIA 快。 反應原理 RIA 為競爭抑制性結合,反應參數(shù)與待檢抗原量成反相關;IRMA為非競爭結合,反應參數(shù)與待檢抗原成正相關。 特異性 IRMA 特異性較RIA高。 靈敏度和檢測范圍 IRMA測定的靈敏度明顯高于RIA, IRMA標準曲線工作范圍較RIA寬12個數(shù)量級。 其他 RIA 所用抗體為多克隆抗體,對親和力和特異性要求較高,但用量很少;IRMA 為試劑過量的反應,對抗體親和力的要求不及 RIA,但用量大。此外,RIA 可以測量半抗原,但IRMA只能測定至

25、少有兩個以上表位的抗原。試述用于標記的熒光素應具備什么條件?DA用于標記的熒光素應符合以下要求:應具有能與蛋白質分子形成共價鍵的化學基團,結合后不易解離,而未結合者易清除;熒光效率高,與蛋白質結合后,仍能保持較高的熒光效率;熒光色澤與背景組織的色澤對比鮮明;與蛋白質結合后不影響蛋白質原有的生化與免疫學性質;標記方法簡單、安全無毒;與蛋白質的結合物穩(wěn)定,易于保存。試述熒光免疫顯微技術基本原理。DA熒光免疫顯微技術是以熒光顯微鏡為檢測工具,用熒光素標記特異性抗體或抗抗體,檢測固定組織細胞上的抗原或血清中的抗體,常用于定性和定位檢查的一門技術。試述熒光免疫顯微技術的臨床應用。DA臨床常應用于:血清中

26、自身抗體的檢測;各種微生物的快速檢查和鑒定;寄生蟲感染的診斷;白細胞分化抗原的檢測。時間分辨熒光免疫測定法具有哪些優(yōu)點?DA時間分辨熒光免疫測定法具有特異性強,靈敏度高,標準曲線范圍寬,分析速度快,標記物制備較簡便、有效使用期長,無放射性污染等優(yōu)點,因此是很有發(fā)展前途的超微量物質免疫分析技術。目前臨床檢驗中常用的熒光物質有哪些?DA目前臨床檢驗中常用的熒光物質有:四乙基羅丹明、異硫氰酸熒光素、四甲基異硫氰酸羅丹明、Eu3+的螯合物等。簡述熒光抗體的制備及純化方法。DA熒光抗體的制備方法純化方法有透析法、凝膠過濾法、有撐攪拌法及透析法。熒光抗體技術有哪些優(yōu)缺點,在臨床上有哪些應用?熒光抗體技術的

27、優(yōu)點:(1)能做到快速、敏感、定位。(2)Ag 和Ab 的特異性與形態(tài)的檢查結合在一起;缺點:對組織細胞進行微細結構的觀察做不到;標本不能永久保存,熒光有自然消退現(xiàn)象,需及時觀察及對照相;有非特異性熒光的干擾。熒光抗體技術的應用:病毒學方面:病毒鑒定和病毒在感染cell內(nèi)的定位;寄生蟲學方面:用于寄生蟲的診斷(鑒定、分型);免疫學方面:研究、用于自身免疫病的診斷;細菌學方面:菌種鑒定和Ag結構的研究。用于標記的酶應符合哪些要求?DA(1)酶活性高,能對低濃度底物產(chǎn)生較高的催化反應率。(2)具有可與抗原、抗體共價結合的基團,標記后酶活性保持穩(wěn)定,而且不影響標記抗原與抗體的免疫反應性。(3)酶催化

28、底物后產(chǎn)生的信號產(chǎn)物易于判定或測量,且方法簡單、敏感和重復性好。(4)酶活性不受樣品中其他成分(內(nèi)源性酶、抑制物)的影響;用于均相酶免疫測定的酶還要求當抗體與酶標抗原結合后,酶活性可出現(xiàn)抑制或激活。(5)酶、輔助因子及其底物均對人體無危害,理化性質穩(wěn)定,且價廉易得。簡述酶免疫技術的分類。DA(1)酶免疫技術按實際用途,分為酶免疫組化和酶免疫測定兩大類。(2)按抗原抗體反應后是否需將結合的和游離的酶標記物分離,分為均相酶免疫測定和異相酶免疫測定,異相酶免疫測定又可分為固相酶免疫測定和液相酶免疫測定。簡述均相酶免疫測定的原理。DA酶標抗原(AgE)與Ab結合形成AbAgE后,其中的酶(E)活性將減

29、弱或增強。因此,不需對反應液中的AbAgE和AgE進行分離,直接測定反應系統(tǒng)中總酶活性的變化,即可推算出被測樣品中Ag的含量。簡述雙抗體夾心法的原理。DA連接于固相載體上的抗體和酶標抗體,與待檢抗原上兩個不同的抗原決定基結合,形成固相抗體一抗原一酶標抗體復合物。由于反應系統(tǒng)中固相抗體和酶標抗體的量相對于待檢抗原是過量的,因此復合物的形成量與待檢抗原的含量成正比。測定復合物中酶作用于加入的底物后生成的有色物質量,即可確定待檢抗原含量。斑點-ELISA有哪些優(yōu)點?DA(1)NC膜吸附蛋白力強,微量抗原吸附完全,故檢出靈敏度可較普通的EusA高68倍;(2)試劑用量較EusA省10倍;(3)操作簡便

30、,試驗及結果判斷不需特殊設備條件;(4)吸附抗原(抗體)或已有結果的NC膜可長期保存(-20可達半年)。簡述ELISA的基本原理、方法類型及應用。DA(1)基本原理:抗原或抗體預先結合到某種固相載體表面;測定時,將受檢樣品(含待測抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按一定程序與結合在固相載體上的抗原或抗體起反應形成抗原或抗體復合物;反應終止時,固相載體上酶標抗原或抗體被結合量(免疫復合物)即與標本中待檢抗體或抗原的量成一定比例;經(jīng)洗滌去除反應液中其他物質,加入底物進行顯色,最后通過定性或定量分析有色產(chǎn)物量即可確定樣品中待測物質含量。(2)方法類型及應用:雙抗體夾心法:用于檢測抗原,適用于檢測兩個或兩個

31、以上抗原決定基的多價抗原;間接法:用于檢測抗體;競爭法:用于抗原和半抗原的定量測定,也可對抗體進行測定;捕獲法:用于血清中某種抗體亞型成分(如IgM)的測定。簡述酶增強免疫測定技術的原理。DA具抗原及酶活性的Ag-E與Ab結合形成AgAb后,所標的酶(E)因與Ab接觸緊密,空間位阻影響了酶的活性中心,酶活性受到抑制。加入未標記抗原(標準或樣品中的Ag)后,Ag即與Ab叫競爭結合反應系統(tǒng)中限量的Ab形成AgAb復合物,從而使反應液中AgAb*(酶活性被抑制)的比例減少,具酶活性的游離AgE增多。最終測得的酶活性隨著反應體系中未標記抗原(Ag)濃度升高而增強。簡述免疫印跡法的原理。免疫印跡法由SD

32、S-PAGE、蛋白質轉印和酶免疫測定三項技術結合而成??乖鹊鞍讟悠方?jīng)SDS處理后帶負電荷,SDS-PAGE時從陰極向陽極泳動,分子量小者,泳動速度快;將凝膠中已經(jīng)分離的蛋白質條帶在電場作用下轉移至硝酸纖維素膜上;將印有蛋白質條帶的硝酸纖維素膜依次與特異性抗體和酶標第二抗體作用,加入能形成不溶性顯色物的酶反應底物,使區(qū)帶染色;根據(jù)電泳時加入的分子量標準,可確定各組分的分子量。何謂金免疫測定技術?簡述其技術類型及原理。DA金免疫測定技術是指用膠體金顆粒作為標記物進行抗原抗體反應的一類免疫學測定技術,其主要技術類型有斑點金免疫滲濾試驗和斑點金免疫層析試驗。1)斑點金免疫滲濾試驗:在以硝酸纖維素膜為

33、載體并包被了抗原或抗體的滲濾裝置中,依次滴加標本、免疫金及洗滌液,因微孔濾膜貼置于吸水材料上,故溶液流經(jīng)滲濾裝置時與膜上的抗原或抗體快速結合并起到濃縮作用,達到快速檢測目的,陽性反應在膜上呈現(xiàn)紅色斑點。2)斑點金免疫層析試驗:是將膠體金標記技術和蛋白質層析技術相合的以硝酸纖維素膜為載體的固相膜免疫分析技術,滴加在膜一端的標本溶液受載體膜的毛細管作用向另一端移動,猶如層析一般,在移動過程中被分析物與固定于載體膜上某一區(qū)域的抗體或抗原結合而被固相化,無關物則越過該區(qū)域而被分離,然后通過膠體金的呈色條帶來判讀實驗結果。免疫溶血試驗的原理和用途。DA原理是補體能使已被抗體致敏了的紅細胞發(fā)生溶血。免疫溶

34、血試驗所參與的成分有補體,抗原(SRBC)及抗體(溶血素),這三種成分中如有兩種是已知的就可測知第三個成分,稀釋該成分可測定其效價或含量。如溶血素的滴定,溶血空斑試驗,CH50試驗,補體結合試驗,抗補體試驗等。如何進行補體單個成分的測定? DA補體單個成分可測其溶血活性或含量。測定溶血活性應先制備缺乏該補體單個成分的“補體試劑。而后利用免疫溶血試驗的原理,將致敏紅細胞與“補體試劑”混合,再加入待測血清,孵育后,溶血程度與待測血清中的該補體成分的溶血功能有關。測定含量可用已知抗體以單向瓊脂擴散等方法進行。血清免疫球蛋白測定方法有那些?答:單向免疫擴散法:原理,優(yōu)點:簡單,條件要求低,但抗體需要高

35、效價高特異性,靈敏度: mg/ml 免疫比濁法:原理,優(yōu)點:檢測結果準確,精密度高,耗時短,靈敏度高ug/ml免疫球蛋白IgG、IgA、IgM測定有何意義?答:IgG、IgA、IgM均升高則慢性疾病, IgG升高則多為細菌感染導致,新生兒血清IgM升高則常為 宮內(nèi)感染。單一Ig顯著升高則多為免疫增殖?。憾喟l(fā)性骨髓瘤,重鏈病、惡性淋巴瘤。Ig降低則體液免疫缺陷或聯(lián)合免疫缺陷。某患者臨床疑為細胞免疫功能缺陷,應做哪些檢查以協(xié)助診斷?答:從以下幾個方面檢測1)皮膚試驗 ,顯示有遲發(fā)超敏反應能力,表示受試驗者細胞免疫功能完善2)T細胞及其亞群檢測,常采用熒光抗體檢測T細胞表面標志分子CD3,CD4等3

36、)T細胞功能檢測,利用PHA刺激淋巴細胞增殖,轉化來判斷T細胞的功能簡述原發(fā)性吞噬細胞缺陷病的發(fā)病機制主要包括哪幾種?主要包括:吞噬細胞趨化和(或)粘附功能障礙。吞噬和殺菌功能障礙。單核吞噬細胞的特殊異常,如IgG Fc受體缺陷。簡述AIDS的主要免疫學特征?免疫系統(tǒng)的CD4T淋巴細胞受HIV感染,使CD4T細胞受損而減少。單核-巨噬細胞、濾泡樹突狀細胞和朗格漢斯細胞亦可受HIV 感染而受損。進行性細胞免疫缺陷,繼而體液免疫缺陷。B淋巴細胞可克隆激活伴免疫球蛋白增多。簡述體液免疫缺陷的檢測方法?有血清Ig 的測定,常用免疫擴散法和免疫比濁法。分泌型IgA 的測定,用單向免疫擴散或ELISA 等

37、。同種血細胞凝集素測定。特異性抗體產(chǎn)生能力測定,疫苗接種后抗體產(chǎn)生的測定??笽gA抗體的測定,測自身抗體。SmIg測定,檢測B細胞數(shù)量和其成熟程簡述細胞免疫缺陷的檢測方法?有遲發(fā)性皮膚過敏反應試驗,常為初篩試驗。T細胞及其亞群的檢測,為主要的試驗測定CD3、CD4、CD8 分化抗原進行分類鑒定。E 玫瑰花結試驗,現(xiàn)常用CD2 測定所代替。淋巴細胞增殖反應試驗,為體外免疫功能試驗,方法有形態(tài)法和同位素法。T細胞分泌產(chǎn)物功能測定,測定激活的T細胞和單個核細胞分泌的細胞因子。簡述IDD的共同臨床特點?.對病原體的易感性強、常發(fā)生反復感染、嚴重感染,難以治愈。T細胞缺陷易發(fā)生病毒真菌和寄生蟲感染。余缺

38、陷病易發(fā)生細菌感染,尤以化膿感染為主。易發(fā)生惡性腫瘤和并發(fā)自身免疫病。臨床表現(xiàn)和病理損傷有明顯的多樣性,癥狀各異,復雜多樣,主要是累及多系統(tǒng)和多器官所致。簡述IDD的常見發(fā)病原因?遺傳基因異常,常表現(xiàn)為X 連鎖隱性遺傳和常染色體隱性遺傳,顯性遺傳亦有,少見。中樞免疫器官發(fā)育障礙,由遺傳或其他原因所致。免疫細胞內(nèi)在酶的缺陷,如ADA、PNP、G-6-PD 缺乏所致。免疫細胞間調(diào)控機制異常,輔助不足或抑制過剩均可導致免疫缺陷。簡述原發(fā)性B細胞缺陷病的主要免疫學和臨床特征?.本組疾病有三種主要免疫學和臨床特征:全部Ig 缺失或極度降低,如Bruton 綜合征。部分Ig缺失,如選擇性Ig缺陷。Ig量正

39、常,但在抗原刺激后無免疫應答,功能缺陷。敘述AIDS三大標志的主要免疫學檢測?AIDS 檢測主要是病毒標志、免疫標志和相關標志三大類。病毒標志主要是直接分離培養(yǎng)檢測病毒或檢出HIV 組分,P24、gp120 和gp160 的免疫印跡檢測;免疫標志主要是檢測HIV的抗原或抗體及T細胞,HIV抗體用ELISA測定為初篩試驗,確認試驗用免疫印跡法,亦可用PCR法。我國判定標準為:HIV抗體陽性:至少有兩條膜(gp41/gp120/gp160)或至少有一條膜帶與P24 帶同時測定;HIV 抗體陰性:無HIV 抗體特異性條帶出現(xiàn);HIV 抗體可疑:出現(xiàn)特異性抗體帶,但帶型不足以確認陽性者,T 細胞檢測減

40、少,常1.5109/L。CD4+T細胞絕對值下降至(24)109/L,CD4/CD8比值1,還有Ig、免疫復合物等測定;相關標志是指與HIV感染、AIDS病情有關的檢測,如有關微生物檢測、白細胞、ESR等。敘述AIDS的主要發(fā)病機制?AIDS 的主要發(fā)病機制:HIV 感染后,主要是損傷CD4+T 細胞減少和功能缺陷而導致機體細胞免疫功能繼而體液免疫功能全面障礙為其主要的發(fā)病機制。同時還損傷巨噬細胞、樹突狀細胞、B細胞和腦組織小膠質細胞,導致相應的功能障礙。HIV損傷T細胞是通過HIV外膜蛋白gp120 和gp41 與T細胞發(fā)生拈附、溶解、使病毒核心進入靶細胞,在靶細胞內(nèi)進行復制,繁殖,最后以芽

41、生方式破壞細胞膜而移出,進行感染擴散,從而破壞CD4+T細胞,導致免疫缺陷。論述流式細胞術在免疫學中的應用。1.淋巴細胞及其亞型的分析2.淋巴細胞功能的分析3.淋巴造血系統(tǒng)及白血病免疫分型4.腫瘤耐藥基因分析5.AIDS檢測中的應用6.自身免疫病相關HLA分析7.移值免疫中的應用何謂重鏈???重鏈病是由于漿細胞發(fā)生突變和異常增生,致使血清和尿中出現(xiàn)大量游離的無免疫功能的免疫球蛋白重鏈所導致的疾病。何謂輕鏈???輕鏈病是突變的單克隆漿細胞產(chǎn)生的大量輕鏈,血漿中輕鏈含量異常增加,增加的輕鏈從腎臟排泄,血和尿中可查及大量的輕鏈蛋白。何謂免疫球蛋白異常增生性疾?。棵庖咔虻鞍桩惓T錾约膊∈侵赣捎跐{細胞的異

42、常增殖而導致的免疫球蛋白異常增生造成機體病理損傷的一組疾病。何謂漿細胞異常增殖?漿細胞異常增殖通常是指單克隆漿細胞異常增生并伴有單克隆免疫球蛋白或其多肽鏈亞單位合成異常。何謂ANA,簡述熒光免疫組化法(間接法)檢測血清總ANA的原理。ANA即抗核抗體 ,指各種成分的抗體,是一種廣泛存在的自身抗體,可與不同的細胞核反應,無器官特異性和種屬特異性 間接法檢測ANA原理:用小鼠肝切片或印片或HEP2細胞作為細胞核基質抗原,加待測血清,若含有ANA,則與細胞核基質抗原反應,再加熒光素標記的抗抗體(二抗),結合一抗,在熒光顯微鏡下見到細胞核有熒光著色為陽性反應。 ANA有哪些種類,它們在SLE診斷中的價

43、值如何?答:抗核抗體是一種廣泛存在的自身抗體,主要包括,抗DNP抗體,抗DNA抗體, 抗ENA抗體,抗組蛋白抗體。約99%(86%100%)的活動期SLE病人ANA陽性,ANA陰性幾乎可除外SLE的診斷。你知道哪些自身抗體,臨床應用價值如何?答:1)ANA:在未經(jīng)治療的SLE患者中陽性率可達90%以上,其他自身免疫病也可陽性。可作為自身免疫病,尤其是SLE的篩選指標。2)抗Sm抗體:SLE的特征性標志抗體,是SLE重要診斷指標。3)抗dsDNA抗體: SLE的特征性標志抗體,是SLE重要診斷指試述自身免疫病的防治原則。答:自身免疫病的防治原則大致為:(1)預防和控制病原體的感染,避免因自身組織

44、細胞的抗原性發(fā)生改變和交叉抗原誘發(fā)的免疫應答,同時也避免感染引起的抗原提呈細胞和T細胞的激活。(2)使用免疫抑制劑如環(huán)孢霉素A、FK-506、皮質激素、中藥雷公藤治療主要以抗體引起的自身免疫病,用Th2因子治療主要以T細胞引起的身身免疫病。(3)特異性抗體治療,如用抗CD3單抗,抗炎癥性細胞因子單抗等。(4)疫苗激發(fā)免疫耐受。如口服II型膠原等自身預防和治療類風溫關節(jié)炎等試述系統(tǒng)性紅斑狼瘡,自身抗體的檢測。答:疾病診斷相關的主要自身抗體:1抗核抗體2抗DNA抗體3抗磷脂抗體和抗血小板抗體4抗紅細胞抗體5RF 6抗細胞質抗體自身免疫病的共同特征。1.多數(shù)病因不明;2.有遺傳傾向;3.患者以女性居

45、多,并隨年齡增加發(fā)病率有所增加;4.患者血清中游多種自身抗體或自身反應致敏淋巴細胞存在;5.疾病有重疊現(xiàn)象;6.病程一般較長,多遷延為慢性;7.病損局部可發(fā)現(xiàn)淋巴細胞,漿細胞,中性粒細胞等浸潤;8.免疫抑制劑治療可取的一定療效。簡單敘述型超敏反應的特點。答:型超敏反應的特點是: 具有明顯的個體差異和遺傳背景;反應發(fā)生快, 幾秒至幾十分鐘內(nèi)出現(xiàn)癥狀, 恢復也較迅速;由結合在肥大細胞和嗜堿粒細胞上的IgE抗體所介導;通常反應發(fā)生后效應器官出現(xiàn)功能紊亂, 而沒有嚴重的組織細胞損傷;補體不參與該反應。I型超敏反應的免疫學檢驗方法有哪些?1)皮試檢測變應原。2)免疫球蛋白檢測:總IgE和 特異性IgE。

46、3)嗜堿性粒細胞和嗜酸性粒細胞檢測。以血型不合引起的輸血反應為例,簡述型超敏反應靶細胞損傷機制。答:抗ABO血型抗體多為IgM型(1分),當血型不合進行輸血時,血型抗體可與紅細胞表面相應的血型抗原物質結合(1分),通過三個機制溶解紅細胞:抗體和補體介導的紅細胞溶解(2分),免疫調(diào)理作用(1分),ADCC作用試述III型超敏反應發(fā)生機制。 答:III型超敏反應,IC沉積引起組織損傷的機制如下:(1)激活補體IC沉積可激活補體,產(chǎn)生C3a、C5a等過敏毒素,使趨化至局部的肥大細胞、嗜堿粒細胞脫顆粒,釋放組胺等活性介質,造成血管通透性增加、滲出和局部水腫。同時吸引中性粒細胞聚集于IC沉積的部位。(2

47、)中性粒細胞浸潤趨化至IC沉積部位的中性粒細胞在吞噬IC時釋放多種溶酶體酶,使血管基底膜和周圍組織細胞民生損傷,造成以上中性細胞浸潤為主的炎癥。(3)血小板活化IC和C3b可使血小板在局部聚集并活化,釋放血管活性胺類物質,使血管擴張、通盤性增加、加劇局部滲出和水腫,并激活凝血系統(tǒng),形成微血栓,造成局部組織缺血、出血和壞死。Rh血型不符引起的新生兒溶血癥屬于哪一種類型的超敏反應性疾病?試述其發(fā)生機制。答:(1) Rh血型不符引起的新生兒溶血癥為型超敏反應性疾病。(2)Rh血型不符引起的新生兒溶血癥發(fā)生于Rh一母親所懷的Rh胎兒,尤其多見于再次妊娠所分娩的新生兒。當首次妊娠分娩時,胎兒的Rh紅細胞

48、可進入母體,剌激母體產(chǎn)生抗Rh抗體。當再次妊娠仍為Rh胎兒時,母體產(chǎn)生的抗Rh抗體(IgG)即可通過胎盤進入胎兒體內(nèi), 與胎兒Rh紅細胞結合,導致胎兒紅細胞的破壞。從而引起流產(chǎn)或出生后的嚴重溶血現(xiàn)象,甚至死亡。試述型超敏反應的發(fā)生機制答:型超敏反應的發(fā)生機制:型超敏反應是由于變應原再次進入體內(nèi)后引發(fā)的超敏反應,其發(fā)生通常分三個階段:(1)致敏階段 在此階段,變應原進入機體,刺激機體特異的B淋巴細胞,使其增殖分化為漿細胞,漿細胞分泌產(chǎn)生針對特異變應原的IgE抗體,此抗體吸附于肥大細胞和嗜堿性粒細胞上,使機體處于致敏狀態(tài)。(2)發(fā)敏階段 當有相同變應原再次進入機體時,與致敏靶細胞表面的IgE Fa

49、b段超變區(qū)特異性結合,觸發(fā)靶細胞的細胞膜活化,使其脫顆粒及合成新的生物活性介質。(3)效應階段 顆粒中的生物活性介質及新合成的生物活性介質作用于相應的效應器官,引起效應器官病理改變單克隆抗體:是指僅識別單一抗原表位的B細胞雜交瘤產(chǎn)生的同源抗體,具有特異性強、效價高、生物活性單一、理化性狀高度均一等特點。佐劑:是指先于抗原或與抗原一起注入機體,能夠增強機體對該抗原的免疫應答或改變免疫應答類型的物質?;蚬こ炭贵w:是指應用DNA重組及蛋白工程技術對編碼抗體的基因按不同的需要進行改造和裝配,經(jīng)導人適當?shù)氖荏w細胞后重新表達的抗體,主要包括人源化抗體、小分子抗體、雙價特異性抗體和抗體融合蛋白等類型。雙特

50、異性抗體:又稱雙功能抗體,它不同于天然抗體,其兩個抗原結合部位具有不同的特異性,可以同時與兩種不同特異性的抗原發(fā)生結合。滴度(效價):血清標本進行一系列倍比稀釋后進行反應,以出現(xiàn)明顯凝集反應的血清最高稀釋度、即滴度(效價)。凝集反應:凝集反應是指細菌或紅細胞等顆粒性抗原與相應抗體在適當條件下結合形成凝集的現(xiàn)象。現(xiàn)也指顆?;乖蚩贵w與相應抗體或抗原的反應。直接凝集反應:細菌、螺旋體和紅細胞等顆??乖?,在適當電解質參與下可直接與相應抗體結合出現(xiàn)凝集,稱為直接凝集反應。凝集原:指凝集反應中的抗原。凝集素:指凝集反應中的抗體。試管凝集試驗:是在試管內(nèi)顆粒性抗原與相應抗體直接結合,在一定條件下,會出現(xiàn)

51、肉眼可見的凝集現(xiàn)象。間接凝集反應:將可溶性抗原(或抗體)先吸附于適當大小的顆粒性載體表面,然后與相應抗體(或抗原)作用,在適宜的電解質存在的條件下,出現(xiàn)特異性凝集現(xiàn)象稱間接凝集反應或被動凝集反應(passive agglutination test)。沉淀反應:沉淀反應是指可溶性的抗原和抗體特異性結合后,所形成的復合物以沉淀的形式出現(xiàn)。凝膠內(nèi)沉淀試驗:又稱凝膠擴散,是將可溶性抗原與相應抗體分別放人凝膠內(nèi)進行擴散,兩者在比例合適的位置形成肉眼可見的沉淀線或沉淀環(huán)。免疫電泳:是凝膠電泳和凝膠擴散相結合。在電場作用下,位于瓊脂凝膠中的抗原樣品因各組分的電泳遷移率不同而彼此分開形成不同的區(qū)帶。電泳結束

52、后,在瓊脂板中間所挖的長形槽內(nèi)加人相應的抗血清,由于經(jīng)電泳分離后的各種抗原成分在瓊脂中呈放射狀擴散,而抗體呈直線擴散,因而形成的沉淀線多呈弧狀。對流免疫電泳:是在電場作用下的免疫雙擴散??乖蜿枠O移動,而抗體向陰極移動,在一定時間內(nèi),相向移動的抗原和抗體在兩孔間相遇,在濃度比例適當處形成沉淀線。帶現(xiàn)象: 在抗原抗體特異性反應時,生成結合物的量與反應物的濃度有關,當抗原與抗體達到最適比時, 沉淀物形成最多。 如果抗原或抗體極度過剩則無沉淀物形成, 這種現(xiàn)象稱為帶現(xiàn)象。出現(xiàn)在抗原過量時,稱為后帶。出現(xiàn)在抗體過量時,稱為前帶。放射化學純度:指單位標記物中結合于被標記物上的放射性占總放射性的百分率,一

53、般要求大于 90%。比放射性 :指單位化學量標記物中所含的放射性強度,也可理解為每分子被標記物平均所掛放射性原子數(shù)目,常用Ci/g,mCi/mg或Ci/mmol等單位表示。放射免疫分析 :是該類技術最經(jīng)典的模式。它是以放射核素標記抗原與反應系統(tǒng)中未標記的抗原競爭特異性抗體的基本原理來測定待檢樣品中抗原量的一種分析法。熒光免疫技術:是將抗原抗體反應的特異性與熒光物質檢測的敏感性和直觀性結起來的一種免疫分析技術。熒光效率:是指熒光物質將吸收的光能轉變成為熒光的百分率。熒光壽命:指熒光物質被一瞬時光脈沖激發(fā)后產(chǎn)生的熒光隨時間而衰減到一定程度時所用的時間。熒光的淬滅:指熒光分子在某些理化因素作用下、熒

54、光分子的輻射能力受到激發(fā)光較長時間的照射后會減弱的現(xiàn)象。熒光素:是能產(chǎn)生熒光并能作為染料使用的有機化合物。熒光抗體:熒光素與特異性抗體以化學共價鍵的方式結合而成,是免疫熒光技術的關鍵試劑。非均相熒光免疫測定法:在抗原抗體反應后,先把Ab*Ag與Ab*分離,然后測定Ab*Ag或Ab*中的標記物的量,從而推算出標本中的Ag量,該方法稱非均相熒光免疫測定法。均相熒光免疫測定法:在抗原抗體反應后Ab*Ag中的標記物失去熒光特性,則不需進行Ab*Ag與Ab*的分離,可以直接測定游離的Ab*量,從而推算出標本中的Ag量,該方法稱為均相熒光免疫測定法。時間分辨熒光免疫測定:時間分辨熒光免疫測定是用鑭系稀土元素螯合物(如螯合物)標記抗體或抗原,檢測標本中的相應抗原或抗體的熒光免疫測定技術酶免

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