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1、1 .什么是微生物?它包括哪些類群?定義:微生物是指所有形體微小,單細胞或個體結構較為簡單的多細胞,甚至無細胞結構的低等生物的總稱類群;微生物包括無細胞結構生物病毒,亞病毒等;細胞生物中包括原核生物中的古細菌,真細菌,放線菌,藍細菌,枝原體等;包括真核生物中的酵母菌,霉菌,單細胞藻類原生動物等2 .生物有哪五大共性?其中最基本的是哪一個?為什么?微生物五大共性分別是:1:體積小,面積大;2:吸收多,轉(zhuǎn)化快;3:生長旺,繁殖快;4:適應強,易變異;5:分布廣,種類多。其中最基本的特性是體積小,面積大。微生物是一個突出的小體積大面積系統(tǒng),從而賦予它們具有不同于一切大生物的五大共性,因為一個小體積大
2、面積系統(tǒng),必然有一個巨大的營養(yǎng)物質(zhì)吸收面、代謝廢物的排泄面和環(huán)境信息的交換面,故而產(chǎn)生了其余四個共性。巨大的營養(yǎng)物質(zhì)吸收面和代謝廢物的排泄面使微生物具有了吸收多,轉(zhuǎn)化快,生長旺,繁殖快的特點3 .試述微生物學發(fā)展的幾個主要時期,其主要標志及其主要人物?初創(chuàng)期:列文虎克一一微生物學的先驅(qū)1、自制單式顯微鏡,觀察到細菌等微生物的個體;2、出于個人愛好對一些微生物進行形態(tài)描述。奠基期:法國巴斯德一一微生物學的奠基人1、否定了自然發(fā)生學說;2、發(fā)酵由微生物引起;3、推動了免疫學的產(chǎn)生;4、研究牛羊炭疽病、雞霍亂、人類狂犬?。?、發(fā)明巴氏消毒法;6、制作狂犬疫苗、炭疽病疫苗。德國科赫一一細菌學奠基人1、
3、建立了平板分離法、細菌染色、懸滴培養(yǎng)或顯微攝影等技術;2、分離了炭疽芽抱桿菌、結核分枝桿菌和霍亂弧菌等重要病原菌;3、提出并證實病原菌必須遵循的科赫法則。發(fā)展期:E.Buchner一一生物化學奠基人成熟期:J.Watson和F.Crick一一分子生物學奠基人4 .什么是無菌技術?常用的基本工具都有哪些?無菌技術是在醫(yī)療護理操作過程中,保持無菌物品、無菌區(qū)域不被污染、防止病原微生物侵入人體的一系列操作技術。無菌持物鉗、無菌容器、無菌手套。5 .實驗室用固體培養(yǎng)基獲得微生物純培養(yǎng)的方法有哪些?稀釋倒平板特點:菌落分離較為均勻,進行微生物計數(shù)結果相對準確。但操作相對麻煩,熱敏感菌有時易被燙死,而嚴格
4、好氧菌也可能因被固定在培養(yǎng)基中生長受到影響。2、涂布平板法特點:操作相對簡單,是較常使用的常規(guī)方法。但有時會因涂布不均勻使某些部位的菌落不能分開,進行微生物計數(shù)時需對稀釋和涂布過程的操作特別注意,否則不易得到準確的結果。3、平板劃線法特點:操作簡單,多用于對已有純培養(yǎng)的確認和再次分離。應用:這三種方法可用于所有能在固體培養(yǎng)基表面形成菌落的微生物的純培養(yǎng)分離。并且,通過選用適當?shù)倪x擇平板及培養(yǎng)條件,可直接分離各種具有特定生理特征的微生物。和厭氧罐或厭氧手套箱技術結合,這3種方法也可用于獲得各種厭氧菌的純培養(yǎng)。6 .舉例說明富集培養(yǎng)技術的過程富集培養(yǎng):一類使混合微生物群體中某特定微生物比例激增的培
5、養(yǎng)方法。其一可用促進某特定微生物生長繁殖的選擇性培養(yǎng)基或培養(yǎng)條件,其二可用抑制其他微生物生長繁殖的選擇性培養(yǎng)基或培養(yǎng)條件。如用于增殖好氧性自生固氮菌的Ashby無氮培養(yǎng)基,增殖土壤真菌用的Martin培養(yǎng)基等。其三可用連續(xù)培養(yǎng)法,在一定稀釋率下,使比生長速率小的細胞溢出培養(yǎng)器,而比生長速率大的細胞留在培養(yǎng)器中。7 .設計一張表格,比較6大類原核生物的主要特點細菌放線菌藍藻支原體立克次氏體衣原體直徑(um)0.2-0.50.5-13-100.2-0.250.2-0.50.2-0.3可見性光學顯微鏡光學顯微鏡光學顯微鏡光鏡勉強可見光學顯微鏡光鏡勉強可見過濾性不能不能不能能不能能革蘭氏染色陽性或陰性
6、陽性陰性陰性陰性陰性細胞壁堅韌的細胞壁堅韌的細胞壁堅韌的細胞壁缺璧堅韌的細胞壁堅韌的細胞壁繁殖方式二均分裂無性抱子和菌體斷裂二均分裂二均分裂二均分裂二均分裂培養(yǎng)方法人工培養(yǎng)人工培養(yǎng)人工培養(yǎng)人工培養(yǎng)宿主細胞宿主細胞核糖體有有有有有有入侵方式多樣直接昆蟲媒介不清楚L-lys,而是被一8 .說明G劑G-細胞壁的主要構造,及肽聚糖結構的差別成分(占細胞壁干重的%)肽聚糖含量很高(5090)含量很低(10)磷壁酸含量較高(<50)無類脂質(zhì)般無(、2)含量較局(20)蛋白質(zhì)無含量較高G隹田菌G-細菌G-細菌與G修田菌的肽聚糖的差別僅在于:1)四肽尾的底3個氨基酸不是種只有在原核微生物細胞壁上才有的內(nèi)
7、消二氨基庚二酸(m-DAP所代替;2)沒有特殊的肽橋,其前后兩個單體間的連接僅通過甲四肽尾的第4個氨基酸一一D-Ala的竣基與乙四肽尾的第3個氨基酸一一m-DAP的氨基直接相連,因而只形成較為疏稀、機械強度較差的肽聚糖網(wǎng)套。9 .革蘭氏染色的機制和實驗的過程。革蘭氏染色的機制為:通過結晶紫初染和碘液媒染后,在細菌的細胞膜內(nèi)可形成不溶于水的結晶紫與碘的復合物。G+由于其細胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次多和交聯(lián)致密,故遇脫色劑乙醇處理時,因失水而使網(wǎng)孔縮小,再加上它不含類脂,故乙醇的處理不會溶出縫隙,因此能把結晶紫與碘的復合物牢牢留在壁內(nèi),使其保持紫色。反之,G-細菌因其細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖
8、層薄和交聯(lián)度差,遇脫色劑乙醇后,以類脂為主的外膜迅速溶解,這時薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結晶紫與碘復合物的溶出,因此細胞退成無色。這時,在經(jīng)沙黃等紅色染料復染,就使G-細菌呈紅色,而G+ffl菌則仍保留最初的紫色。10 .滲透調(diào)節(jié)皮層膨脹學說是如何解釋芽抱耐熱機制的?滲透調(diào)節(jié)皮層膨脹學說認為:芽抱的耐熱性在于芽抱衣對多價陽離子和水分的透性很差,皮層的離子強度很高,從而使皮層產(chǎn)生極高的滲透壓奪取芽抱核心的水分,結果造成皮層的充分膨脹。而核心部分的細胞質(zhì)卻變得高度失水,因此,具極強的耐熱性。關鍵是芽抱有生命的部位即核心部位的含水量很稀少,為10%-25%因而特別有利于抗熱。11 .名詞解釋:磷壁酸
9、、LPS原核微生物、基內(nèi)菌絲、原體與始體、原生質(zhì)體、芽抱及芽抱萌發(fā)、伴抱晶體、假肽聚糖。磷壁酸是G+ffl菌細胞壁結合在細胞壁上的一種酸性多糖,主要成分為甘油磷酸或核糖醇磷酸。1 .LPS(脂多糖)是位于G-細菌細胞壁最外層的一層較厚的類脂多糖類物質(zhì),由類脂A、核心多糖和O-特異側(cè)鏈3部分組成。2 .原核生物是由原核細胞組成的生物,包括藍細菌、細菌、放線菌、螺旋體、支原體?;鶅?nèi)菌絲是抱子落在固體基質(zhì)表面并發(fā)芽后,不斷伸長、分枝并以放射壯向基質(zhì)表面和內(nèi)層擴展,形成大量色淺、較細的具有吸收營養(yǎng)和排泄代謝廢物功能的菌絲。3 .原體與始體:具有感染力的衣原體細胞稱為原體,呈小球狀,細胞厚壁、致密,不能
10、運動,不生長,抗干旱,有傳染力。原體經(jīng)空氣傳播,一旦遇合適的新宿主,就可通過吞噬作用進入細胞,在其中生長,轉(zhuǎn)化為無感染力的細胞,稱為始體。4 .原生質(zhì)指組成細胞的有生命物質(zhì)的總稱,是物質(zhì)的概念。原生質(zhì)體是組成細胞的一個形態(tài)結構單位。5 .芽抱:某些細菌(芽抱桿菌,梭狀芽抱桿菌,少數(shù)球菌等)在其生長發(fā)育后期,在細胞內(nèi)形成的一個圓形或橢圓形,厚壁,含水量低,抗逆性強的休眠體構造,稱為芽抱。6 .芽抱萌發(fā)時首先發(fā)生吸脹作用,隨之折光性和抗性喪失,繼而呼吸作用開始,顯出代謝活性,芽抱物質(zhì)(干重)的30%變?yōu)榭扇芪镝尦觯瑺I養(yǎng)細胞壁迅速合成,最后,新形成的營養(yǎng)細胞從抱子衣里萌發(fā)出來。萌發(fā)通常有三種方式:赤
11、道脫出,末端脫出,斜出。7 .伴抱晶體是少數(shù)芽抱桿菌(如蘇云金芽抱桿菌)在形成芽抱的同時,會在芽抱旁形成一顆菱形、方形或不規(guī)則形的堿溶性蛋白質(zhì)晶體。8 .假肽聚糖是由N-乙酰葡萄胺和N-乙酰塔羅糖胺糖醛酸以3-1,3-糖昔鍵交替連接而成的,連在后一氨基糖上的肽尾由L-Glu、L-Ala和L、Lys3個L型氨基酸組成,肽橋則由L-Glu1個氨基酸組成。12 .原核微生物鞭毛的結構有哪些?原核生物鞭毛是細胞表面著生的一至數(shù)十條長絲狀、波曲的蛋白質(zhì)附屬物,由基體、構型鞘和鞭毛絲3部分組成,具有推動細菌運動的功能,運動為旋轉(zhuǎn)方式。13 .放線菌的繁殖過程。放線菌主要通過形成無性抱子的方式進行繁殖,也可
12、借菌體分裂片段繁殖。放線菌長到一定階段,一部分氣生菌絲形成抱子絲,抱子絲成熟便分化形成許多抱子,稱為分生抱子。14 .莢膜的功能。抗吞噬作用:莢膜因其親水性及其空間占位、屏障作用,可有效抵抗寄主吞噬細胞的吞噬作用.黏附作用:莢膜多糖可使細菌彼此間粘連,也可黏附于組織細胞或無生命物體表面,是引起感染的重要因素,具有莢膜的S-型肺炎鏈球菌毒力強,有助于肺炎鏈球菌侵染人體;廢水生物處理中的細菌莢膜有生物吸附作用,將廢水中的有機物、無機物及膠體吸附在細菌體表面上.抗有害物質(zhì)的損傷作用:處于細菌細胞最外層,莢膜猶如盔甲可有效保護菌體免受或少受多種殺菌、抑菌物質(zhì)的損傷,如溶菌酶、補體等.抗干燥作用:莢膜多
13、糖為高度水合分子,含水量在95%A上,可幫助細菌抵抗干燥對生存的威脅.當缺乏營養(yǎng)時,莢膜可被利用作碳源和能源,有的莢膜還可作氮源.15 .四種缺壁細胞是怎樣形成的?他們的特點是什么?1、L型細菌,專指在實驗室或者宿主體內(nèi)自發(fā)突變形成的,遺傳性穩(wěn)定的細胞壁缺損菌株,滲透壓敏感,機械強度極差等2、原生質(zhì)體,在人為條件下,比如使用青霉素抑制新細胞壁合成,或者使用溶菌酶水解細胞壁等辦法,得到僅由細胞膜包裹的圓球狀滲透壓敏感細菌,細胞不能分裂,機械強度極差.失去了細胞壁這一重要的滲透屏障,極大的提高了外源基因進入細胞的可能性,可以進行諸如DNAt入和原生質(zhì)體融合等基因工程操作.3、若還還殘留由部分細胞壁
14、,則稱為原生質(zhì)球,和原生質(zhì)體差不多.4、支原體、自然界進化過程中天然存在的無細胞壁原核生物,以出芽方式繁殖,生存方式介于獨立生活和寄生之間,青霉素等針對細胞壁殺傷的抗生物對其無效,但是抑制蛋白質(zhì)合成的抗生素(四環(huán)素,紅霉素等)和破壞含管醇細胞膜結構的抗生素(制霉菌素,兩性霉素等)對其有效.16 .影響細菌大小測量的因素有哪些?1 .系統(tǒng)誤差。2 .調(diào)節(jié)分光計時判斷不準確造成的誤差。3 .譜線有一定寬度,實驗者確定中央位置時引起的主觀誤差。4 .光柵平面與入射光不是絕對垂直引起的誤差。17.酵母菌的繁殖方式有哪些?簡要說明各繁殖方式的特點。兩種。1.有性繁殖:子囊抱子。在營養(yǎng)條件不良的環(huán)境中,一
15、些可進行有性生殖的酵母會產(chǎn)生抱子,在環(huán)境適宜時才萌發(fā)。(這是酵母菌進化出的對惡劣生存環(huán)境的適應能力)。2.無性繁殖:(1)芽殖:成熟的酵母細胞先長出一個小芽,芽體長到一定大小,會與母體細胞分離獨自生長成新個體。此方式最常見。(2)裂殖:借助細胞橫分裂(動物體對體軸成垂直方向分裂的現(xiàn)象)而繁殖。(3)芽裂:母細胞總在在一端出芽,并在芽基處形成隔膜,子細胞呈瓶狀,這種情況很少見。(有時也只稱酵母菌的無性繁殖為出芽生殖。)18.絲狀真菌-霉菌的繁殖方式有哪些?簡要說明各繁殖方式的特點。霉菌有著極強的繁殖能力,而且繁殖方式也是多種多樣的。雖然霉菌菌絲體上任一片段在適宜條件下都能發(fā)展成新個體,霉菌主要依
16、靠產(chǎn)生形形色色的無性或有性抱子進行繁殖。霉菌的無性抱子直接由生殖菌絲的分化而形成,常見的有節(jié)抱子、厚垣抱子、抱囊抱子和分生抱子。霉菌的有性繁殖過程包括質(zhì)配、核配、減數(shù)分裂三個過程,常見的有性抱子卵抱子、接合抱子、子囊抱子、擔抱子。19.列舉絲狀真菌五種特化的營養(yǎng)菌絲形式,并說明其功能。1 .假根:低等真菌的匍匐菌絲與固體基質(zhì)接觸處分化出來的根狀結構,具有固著和吸收營養(yǎng)等功能。2 .匍匐菌絲:毛霉目真菌在固體基質(zhì)上常形成與表面平行,具有延伸功能的菌絲。3 .吸器:某些專性寄生性真菌侵入寄主后,菌絲在寄主細胞間隙蔓延,并側(cè)生出短枝侵入細胞內(nèi)形成指狀、球狀或絲狀的構造,用以吸收細胞內(nèi)的養(yǎng)料。4 .附
17、著胞:許多植物寄生菌在其芽管或老菌絲頂端發(fā)生膨大,并分泌出粘狀物,借以牢固地粘附到宿主表面的結構。5 .附著枝:某些寄生真菌由菌絲細胞生出12個細胞的短枝,將菌絲附著于宿主體上的結構。20 .說明真核微生物鞭毛的結構。由alpha及beta兩種次單元組成的微管蛋白構成的9+2構造(基體為9+0),直徑名勺為0.25微米,有細胞膜包覆,由ATP的能量驅(qū)動動力蛋白擺動鞭毛。21 .什么是大量元素、什么是微量元素。大量元素指含量占生物總重量萬分之一以上的元素,包括C、HON、P、S、K、Ca、Mg等。其中C為最基本元素,C、HQN為基本元素,C、HONP、K這六種元素的含量占到了原生質(zhì)總量的97%稱
18、為主要元素。微量元素指的是人體中存在量極少,低于人體體重0.01%的礦物質(zhì)稱為微量元素。人體每日對微量元素的需要量很少,但對人體來說必不可少。22 .什么叫營養(yǎng)?什么叫營養(yǎng)物?營養(yǎng)物有那些生理功能?糖:提供熱量,也可轉(zhuǎn)化為脂肪貯存。脂肪,熱量高,貯存能量,提供熱量。蛋白質(zhì):基體的主成部分,生命活動的承擔者,畢要時才提供熱量。維生素:需求量不多,但不份基體不能合成,缺少了會患一些病。微量元素:需求量少,但也不要過量,缺少時也會患各種病,過多也不行。23 .什么叫碳源、微生物在碳源利用上有何不同?是微生物生長一類營養(yǎng)物,是含碳化合物。常用的碳源有糖類、油脂、有機酸及有機酸酯和小分子醇。根據(jù)微生物所
19、能產(chǎn)生的酶系不同,不同的微生物可利用不同的碳源。碳源對微生物生長代謝的作用主要為提供細胞的碳架,提供細胞生命活動所需的能量,提供合成產(chǎn)物的碳架。碳源在制作微生物培養(yǎng)基或細胞培養(yǎng)基時有重要的作用,為微生物或細胞的正常生長,分裂提供物質(zhì)基礎。24 .論述營養(yǎng)物質(zhì)進入細胞的幾種方式及過程。單純擴散:由濃度高的地方向濃度低的地方擴散,不需要膜上載體蛋白和ATP促進擴散:不受濃度的限制,需要載體蛋白不需要ATP主動運送:不受濃度的限制,需要載體和ATP基團位移:溶質(zhì)在運送前后會發(fā)生分子結構的變化,需要載體和ATR25 .什么叫培養(yǎng)基?什么是天然培養(yǎng)基?什么叫鑒別培養(yǎng)基,舉一個鑒別培養(yǎng)基的例子和鑒別原理。
20、培養(yǎng)基(Medium)是供微生物、植物組織和動物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料,一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。不同培養(yǎng)基可根據(jù)實際需要,添加一些自身無法合成的化合物,即生長因子。有些微生物,如自養(yǎng)型微生物,不需要碳源,所以上述物質(zhì)只具有一般性。天然培養(yǎng)基也稱復合培養(yǎng)基,是含有化學成分還不清楚或化學成分不恒定的天然有機物,主要取自動物體液或從動物組織分離提取。鑒別培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某種試劑或化學藥品,使培養(yǎng)后會發(fā)生某種變化,從而區(qū)別不同類型的微生物。26 .論述不同微生物在不同條件下丙酮酸的去向。厭氧性微生物:丙酮酸可以生成乳酸或乙醇.好氧性微生物
21、:丙酮酸繼續(xù)氧化分解為水及二氧化碳27 .簡述生物固氮的生化機制。固氮基因是在原核生物的質(zhì)粒中,通過表達形成固氮酶,將N2還原為氨即為生物固氮28 .原核生物細胞壁中肽聚糖的生物合成過程。肽聚糖的生物合成過程復雜,步驟多,而且合成部位幾經(jīng)轉(zhuǎn)移.為此把肽聚糖的生物合成分為細胞質(zhì)中、細胞膜上以及細胞膜外合成3個階段.正因為肽聚糖合成不是在一個地方完成的,所以合成過程中必須要有能夠轉(zhuǎn)運與控制肽聚糖結構元件的載體參與.已知有兩種載體:一種是尿甘二磷酸(UDP,另一種是細菌菇醇.以了解得較清楚的金黃色葡萄球菌的肽聚糖合成為例第一階段:在細胞質(zhì)中合成胞壁酸五肽.這一階段起始于N-乙酰葡糖胺-1-磷酸,它是由葡萄糖經(jīng)過下列反應步驟生成的:自N-乙酰葡糖胺-1-磷酸開始,以后的N-乙酰葡糖胺、N-乙酰胞壁酸以及胞壁酸五肽都是與糖載體UD林目結合.第二階段:在細胞膜上由N-乙酰胞壁酸五肽與N-乙酰葡糖胺合成肽聚糖單體一一雙糖肽亞單位.這一階段中有一種稱為細菌菇醇(Bcp)的脂質(zhì)載體參與,這是一種由11個類異戊二
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