第二講生物藥物的質(zhì)量管理與控制

1、第二章第二章 生物藥物的質(zhì)量管理與生物藥物的質(zhì)量管理與 控制控制 思考題思考題: : 1.1.生物藥物與化學藥物相比生物藥物與化學藥物相比, ,有哪些特性有哪些特性? ? 2. 2. 國家制定國家制定GMP,GCPGMP,GCP的意義何在的意義何在? ?其內(nèi)容包括其內(nèi)容包括 哪些哪些? ? 3.3.生物藥物常用的定量方法有哪些？生物藥物常用的定量方法有哪些？ 4.4.簡述生物藥物開發(fā)中的主要程序。簡述生物藥物開發(fā)中的主要程序。 藥物是藥物是，。因。因此藥物必須要達到一定的此藥物必須要達到一定的 質(zhì)量標準要求，確保病人用藥質(zhì)量標準要求，確保病人用藥的安全有效。生物藥物與一般的化學藥物有較大的區(qū)別

2、，的安全有效。生物藥物與一般的化學藥物有較大的區(qū)別，如：生物藥物大多數(shù)為大分子藥物、相對分子質(zhì)量不是如：生物藥物大多數(shù)為大分子藥物、相對分子質(zhì)量不是 定值、穩(wěn)定性差等，故其質(zhì)量控制和對它有效成分的檢定值、穩(wěn)定性差等，故其質(zhì)量控制和對它有效成分的檢測有它自己的特征。測有它自己的特征。 如：需做熱源質(zhì)檢查、過敏實驗、異常毒性等實驗。如：需做熱源質(zhì)檢查、過敏實驗、異常毒性等實驗。對有效成分的檢測除了對有效成分的檢測除了方法外，還要對制方法外，還要對制品的品的擬定其生物活性擬定其生物活性的檢測。定量的方法也與化學藥物有所不同。的檢測。定量的方法也與化學藥物有所不同。 第一節(jié)第一節(jié) 生物藥物質(zhì)量的評價生

3、物藥物質(zhì)量的評價 一、生物藥物質(zhì)量檢驗的程序與方法一、生物藥物質(zhì)量檢驗的程序與方法 基本程序：基本程序： 取樣取樣鑒別鑒別檢查檢查含量測定含量測定寫出檢驗報告寫出檢驗報告 1 1、取樣：、取樣： 2 2、藥物的鑒別試驗：、藥物的鑒別試驗： 3 3、藥物的雜質(zhì)檢查：、藥物的雜質(zhì)檢查： 4 4、藥物的安全性檢查：、藥物的安全性檢查： 5 5、藥物含量（效價）測定：、藥物含量（效價）測定： 6 6、檢驗報告的書寫：、檢驗報告的書寫： 取樣量取樣量 設樣品總件數(shù)為設樣品總件數(shù)為X X 當當x3x3時，時， 每件取樣；每件取樣； 當當x300 x300時，按隨機取樣；時，按隨機取樣； 當當x x3003

4、00時，按隨機取樣時，按隨機取樣 例：苯甲酸例：苯甲酸 性狀性狀 本品為白色有絲光的鱗片或針狀結晶或結晶性粉本品為白色有絲光的鱗片或針狀結晶或結晶性粉 末；質(zhì)輕；無臭或微臭；在熱空氣中微有揮發(fā)性；水溶液末；質(zhì)輕；無臭或微臭；在熱空氣中微有揮發(fā)性；水溶液 顯酸性反應。顯酸性反應。 本品在乙醇、氯仿或乙醚中易溶，在沸水中溶解，在水本品在乙醇、氯仿或乙醚中易溶，在沸水中溶解，在水 中微溶。中微溶。 熔點熔點 本品的熔點（附錄本品的熔點（附錄 C C）為）為121121124.5124.5。 例：苯甲酸例：苯甲酸 鑒別鑒別 （1 1）取本品約）取本品約0.2g0.2g，加，加4%4%氫氧化鈉溶液氫氧化

5、鈉溶液15ml15ml，振搖，振搖， 濾過，濾液中加三氯化鐵試液濾過，濾液中加三氯化鐵試液2 2滴，即生成赭色沉淀。滴，即生成赭色沉淀。 （2 2）本品的紅外光吸收圖譜應與對照的圖譜）本品的紅外光吸收圖譜應與對照的圖譜( (光譜集光譜集 圖圖) )一致一致雜質(zhì)檢查雜質(zhì)檢查 純度要求即藥物的雜質(zhì)檢查，亦稱限度檢查、純度檢查純度要求即藥物的雜質(zhì)檢查，亦稱限度檢查、純度檢查（Detection of ImpuritiesDetection of Impurities） 一般雜質(zhì)：水、酸堿物等；一般雜質(zhì)：水、酸堿物等； 特殊雜質(zhì)：副產(chǎn)物特殊雜質(zhì)：副產(chǎn)物 熱原的去除：熱原主要是腸科桿菌科所產(chǎn)生的細胞內(nèi)毒

6、素熱原的去除：熱原主要是腸科桿菌科所產(chǎn)生的細胞內(nèi)毒素，在細菌生長或細胞溶解時會釋放出來，主要是細胞壁成，在細菌生長或細胞溶解時會釋放出來，主要是細胞壁成份脂多糖，其性質(zhì)相當穩(wěn)定，即使經(jīng)高壓滅菌也不失活份脂多糖，其性質(zhì)相當穩(wěn)定，即使經(jīng)高壓滅菌也不失活。注射用藥必須無熱原。注射用藥必須無熱原。 從蛋白質(zhì)溶液中除去內(nèi)毒素比較困難，最好的辦法是防止從蛋白質(zhì)溶液中除去內(nèi)毒素比較困難，最好的辦法是防止產(chǎn)生熱原，整個生產(chǎn)過程要在無菌條件下進行，所有層析產(chǎn)生熱原，整個生產(chǎn)過程要在無菌條件下進行，所有層析介質(zhì)在使用前都要先除去熱原，在介質(zhì)在使用前都要先除去熱原，在2828下進行操作。洗下進行操作。洗脫液需先經(jīng)過

7、無菌處理，流出的蛋白質(zhì)溶液也應無菌處理脫液需先經(jīng)過無菌處理，流出的蛋白質(zhì)溶液也應無菌處理，即經(jīng)過，即經(jīng)過0.2m0.2m濾膜過濾。濾膜過濾。 脂多糖帶負電，可以用陰離子交換層析法去除；是疏水的脂多糖帶負電，可以用陰離子交換層析法去除；是疏水的，也可以用疏水層析法，也可以用疏水層析法。類別類別截留顆粒大小截留顆粒大小截留的主要物質(zhì)截留的主要物質(zhì)過濾介質(zhì)過濾介質(zhì)粗濾粗濾 2m 2m酵母、霉菌、動物細酵母、霉菌、動物細胞、植物細胞、固形胞、植物細胞、固形物等物等濾紙、濾布、纖濾紙、濾布、纖維多孔陶瓷、燒維多孔陶瓷、燒結金屬等結金屬等微濾微濾0.20.22m2m細菌、灰塵等細菌、灰塵等微濾膜、微孔陶微

8、濾膜、微孔陶瓷瓷超濾超濾20200.2m0.2m病毒、生物大分子等病毒、生物大分子等超濾膜超濾膜反滲反滲透透 20 20生物小分子、鹽、離生物小分子、鹽、離子子反滲透膜反滲透膜含量測定（含量測定（AssayAssay） 藥物在通過鑒別無誤、檢查合格的基礎上，進行有效成分藥物在通過鑒別無誤、檢查合格的基礎上，進行有效成分含量測定。含量測定。 判斷藥物的質(zhì)量是否符合要求，必須全面考慮鑒別、檢查判斷藥物的質(zhì)量是否符合要求，必須全面考慮鑒別、檢查與含量測定三者的檢驗結果應符合規(guī)定，否則該藥品為不與含量測定三者的檢驗結果應符合規(guī)定，否則該藥品為不合格品。合格品。 涂改方式：劃一條細線，在右上角寫正確數(shù)字

9、，并蓋章簽名。涂改方式：劃一條細線，在右上角寫正確數(shù)字，并蓋章簽名。例例 9.6543 -8.1270 1.5272例例0.1031例例消耗消耗22.31ml張杰張杰22.05ml張杰張杰1.52730.1032張杰張杰 含量測定含量測定 碘液碘液0.1026mol/L9.84259.63470.20780.00 22.95ml%.%.89910010207801026000880609522 符合規(guī)定符合規(guī)定例例檢驗報告書檢驗報告書(省略上半頁省略上半頁)檢驗項目檢驗項目 檢驗標準檢驗標準 檢驗結果檢驗結果 檢驗結論檢驗結論性狀性狀 應白色粉末應白色粉末 白色粉末白色粉末 符合規(guī)定符合規(guī)定鑒

10、別鑒別 應生成黑色應生成黑色 生成黑色生成黑色 符合規(guī)定符合規(guī)定檢查檢查溶液顏色溶液顏色 0.07 =0.02 符合規(guī)定符合規(guī)定440A440A熾灼殘渣熾灼殘渣 0.1% 0.03% 符合規(guī)定符合規(guī)定含量含量 99.0 99.8% 符合規(guī)定符合規(guī)定結論結論 本品經(jīng)檢驗符合（中國藥典本品經(jīng)檢驗符合（中國藥典2000年版）規(guī)定年版）規(guī)定負責人負責人 李力李力 復核人復核人 羅紅羅紅 檢驗人檢驗人 張杰張杰二、藥物的二、藥物的ADME A表示吸收（表示吸收（absorption）；）； D表示分布（表示分布（distribution）；）； M表示代謝（表示代謝（metabolism）；）； E表示

11、排泄（表示排泄（excretion）。）。吸收吸收 圖圖3-4 ，典型時量曲線圖，典型時量曲線圖MTC最小中毒濃度最小中毒濃度 MEC最小有效濃度最小有效濃度第二節(jié)第二節(jié) 藥物質(zhì)量的標準藥物質(zhì)量的標準 為了控制藥品質(zhì)量，對藥品生產(chǎn)、儲存、供應及使為了控制藥品質(zhì)量，對藥品生產(chǎn)、儲存、供應及使用各個環(huán)節(jié)應有一個統(tǒng)一的質(zhì)量標準要求，以便執(zhí)法部門用各個環(huán)節(jié)應有一個統(tǒng)一的質(zhì)量標準要求，以便執(zhí)法部門定期進行監(jiān)控，使藥品質(zhì)量的監(jiān)管工作有法可依。藥品的定期進行監(jiān)控，使藥品質(zhì)量的監(jiān)管工作有法可依。藥品的質(zhì)量標準是藥品生產(chǎn)和管理的依據(jù)，并具有法定的約束力。質(zhì)量標準是藥品生產(chǎn)和管理的依據(jù)，并具有法定的約束力。藥品質(zhì)

12、量標準體系藥品質(zhì)量標準體系二、類別二、類別：三、主要內(nèi)容三、主要內(nèi)容主要內(nèi)容主要內(nèi)容藥典的內(nèi)容藥典的內(nèi)容 藥典藥典(pharmacopoeia)(pharmacopoeia)：是一個國家記載藥品規(guī)格、標準：是一個國家記載藥品規(guī)格、標準的法典。由國家組織的藥典委員會編寫，并由政府頒布實的法典。由國家組織的藥典委員會編寫，并由政府頒布實施，具有法律的約束力。施，具有法律的約束力。 藥典中收載藥效確切、副作用小、質(zhì)量較穩(wěn)定的常用藥物藥典中收載藥效確切、副作用小、質(zhì)量較穩(wěn)定的常用藥物及其制劑，規(guī)定其質(zhì)量標準、制備要求、鑒別、雜質(zhì)檢查及其制劑，規(guī)定其質(zhì)量標準、制備要求、鑒別、雜質(zhì)檢查與含量測定等，作為藥

13、品生產(chǎn)、檢驗、供應與使用的依據(jù)。與含量測定等，作為藥品生產(chǎn)、檢驗、供應與使用的依據(jù)。藥典藥典沿革沿革 建國以來，先后出版了九版藥典，建國以來，先后出版了九版藥典，19531953、19631963、19771977、19851985、19901990、19951995、20002000、20052005和和20102010年版藥典，現(xiàn)行使年版藥典，現(xiàn)行使用的是中國藥典用的是中國藥典 20102010年版年版 。 其英文名稱是其英文名稱是 Chinese PharmacopieaChinese Pharmacopiea，縮寫為，縮寫為Ch.PCh.P（20102010）。）。 組成組成19531

14、953和和19631963年版：一冊；年版：一冊；1977 -20001977 -2000年版：二冊：年版：二冊： 一部中藥材、中成藥；一部中藥材、中成藥； 二部生化藥品、化學藥品、生物制品。二部生化藥品、化學藥品、生物制品。 20052005年版為三冊：一部：中藥；年版為三冊：一部：中藥； 二部：化學藥；二部：化學藥； 三部：生物制品三部：生物制品 內(nèi)容內(nèi)容 1 1 凡例、凡例、 2 2 正文、正文、 3 3 附錄附錄 4 4 索引索引 . .凡例（凡例（General NoticeGeneral Notice）是解釋和使用）是解釋和使用中國藥典中國藥典 正確進行質(zhì)量檢定的基本原則，并把與正

15、文附錄及正確進行質(zhì)量檢定的基本原則，并把與正文附錄及 質(zhì)量檢定有關的共性的問題加以規(guī)定，避免在全書質(zhì)量檢定有關的共性的問題加以規(guī)定，避免在全書 中重復說明。中重復說明。 凡例中有關規(guī)定同樣具有法定約束力。凡例中有關規(guī)定同樣具有法定約束力。 溫度以攝氏度（溫度以攝氏度（）表示）表示 水浴溫度水浴溫度 除另有規(guī)定外，均指除另有規(guī)定外，均指9898 100100； 熱水熱水 系指系指70708080 微溫或溫水微溫或溫水 系指系指40405050 室溫室溫 系指系指10103030 冷水冷水 系指系指2 21010 冰浴冰浴 系指約系指約00 放冷放冷 系指放冷至室溫系指放冷至室溫 . . 正文（正

16、文（MonographysMonographys） 是藥典的主要內(nèi)容，為所收載藥品或制劑的質(zhì)量標準。是藥典的主要內(nèi)容，為所收載藥品或制劑的質(zhì)量標準。 內(nèi)容：名稱、性狀、物化常數(shù)、鑒別、檢查和含量測定等。內(nèi)容：名稱、性狀、物化常數(shù)、鑒別、檢查和含量測定等。 . . 附錄（附錄（AppendixAppendix） 包括制劑通則、通用檢測方法和包括制劑通則、通用檢測方法和指導原則指導原則。記載了制劑。記載了制劑 通則、生物制品通則、一般雜質(zhì)檢查方法、一般鑒別試通則、生物制品通則、一般雜質(zhì)檢查方法、一般鑒別試 驗、有關物理常數(shù)測定法、試劑配制法及光譜法、色譜驗、有關物理常數(shù)測定法、試劑配制法及光譜法、

17、色譜 法等內(nèi)容。法等內(nèi)容。 . . 索引（索引（IndexIndex） 中文索引（漢語拼音索引）和英文名稱索引。中文索引（漢語拼音索引）和英文名稱索引。 中國藥典配套使用的相關書籍：中國藥典配套使用的相關書籍： 臨床用藥須知臨床用藥須知 藥品紅外光譜集藥品紅外光譜集 中藥彩色圖集中藥彩色圖集 中藥薄層彩色圖集中藥薄層彩色圖集 中國藥品通用名中國藥品通用名 一個國家的藥典在一定程度上反映了這個國家藥品生產(chǎn)、一個國家的藥典在一定程度上反映了這個國家藥品生產(chǎn)、醫(yī)療和科學技術的水平。醫(yī)療和科學技術的水平。 我國最早的藥典是唐顯慶我國最早的藥典是唐顯慶4 4年年( (公元公元659659年年) )頒布的

18、頒布的新修本新修本草草（人又稱（人又稱唐本草唐本草），是世界上最早的一部全國性），是世界上最早的一部全國性藥典。藥典。 太平惠民和劑局方太平惠民和劑局方是我國第一部官方頒布的成方規(guī)范。是我國第一部官方頒布的成方規(guī)范。 藥典在一定程度上反映一個國家的醫(yī)藥水平藥典在一定程度上反映一個國家的醫(yī)藥水平 時間收載品種時間收載品種 20102010年年 46154615種種 20052005年年 32103210種種 20002000年年 26912691種種 19951995年年 23752375種種 19901990年年 17511751種種 19851985年年 14891489種種 1977197

19、7年年 19251925種種 19631963年年 13101310種種 19531953年年 531531種種藥典與藥品標準藥典與藥品標準中國中國1 1、國家藥典：、國家藥典： 國家藥典的內(nèi)容一般分為國家藥典的內(nèi)容一般分為三大部分。三大部分。2 2、部頒藥品標準：、部頒藥品標準： 部頒藥品標準的性質(zhì)與藥典相同，也具有法律的約束力。部頒藥品標準的性質(zhì)與藥典相同，也具有法律的約束力。新批準的藥物符合其質(zhì)量標準，經(jīng)過兩年試行期后，方可新批準的藥物符合其質(zhì)量標準，經(jīng)過兩年試行期后，方可直接轉為部頒標準。直接轉為部頒標準。 3 3、地方藥品標準：、地方藥品標準： 藥典與部頒藥品標準所收載的品種，往往不

20、能完全藥典與部頒藥品標準所收載的品種，往往不能完全 滿足各地區(qū)對藥品生產(chǎn)、銷售、使用和管理的需要。因滿足各地區(qū)對藥品生產(chǎn)、銷售、使用和管理的需要。因此，對藥典以外的某地區(qū)的常用藥品、制劑的標準和規(guī)此，對藥典以外的某地區(qū)的常用藥品、制劑的標準和規(guī)格，常制訂地區(qū)性的標準。格，常制訂地區(qū)性的標準。 國內(nèi)生產(chǎn)藥品的質(zhì)量檢驗一般遵守以上三級質(zhì)量標準，進國內(nèi)生產(chǎn)藥品的質(zhì)量檢驗一般遵守以上三級質(zhì)量標準，進口藥品、仿制國外藥品等需要按照國外藥典標準進行檢驗?？谒幤?、仿制國外藥品等需要按照國外藥典標準進行檢驗。 其它國家藥典其它國家藥典 世界上大約有世界上大約有3838個國家有自己的藥典，此外還有國際和區(qū)個國家

21、有自己的藥典，此外還有國際和區(qū)域性藥典。這些藥典無疑對世界醫(yī)藥科學技術交流和國際域性藥典。這些藥典無疑對世界醫(yī)藥科學技術交流和國際貿(mào)易有極大促進作用?，F(xiàn)對主要藥典加以介紹：貿(mào)易有極大促進作用。現(xiàn)對主要藥典加以介紹： 美國藥典美國藥典 簡稱簡稱U.S.PU.S.P， 現(xiàn)行版為現(xiàn)行版為XXXX版版(2003(2003年年) )。 英國藥典英國藥典 簡稱簡稱B.PB.P，現(xiàn)行版為，現(xiàn)行版為20022002年版。年版。 日本藥局方日本藥局方 簡稱簡稱J.PJ.P，現(xiàn)行版為第，現(xiàn)行版為第改正版改正版(2001(2001年年) )。 歐洲藥典歐洲藥典 簡稱簡稱E.PE.P，現(xiàn)行版為第，現(xiàn)行版為第版版(20

22、01(2001年年) )。 國際藥典國際藥典 簡稱簡稱PhPhIntInt，世界衛(wèi)生組織（，世界衛(wèi)生組織（WHOWHO）為了統(tǒng)一）為了統(tǒng)一世界各國藥品的質(zhì)量標準和質(zhì)量控制的方法而編纂的。修世界各國藥品的質(zhì)量標準和質(zhì)量控制的方法而編纂的。修訂中的國際藥典為第三版，共分訂中的國際藥典為第三版，共分5 5卷出版，第卷出版，第1 1卷卷19791979年出年出版，第版，第2 2卷卷19811981年出版，第年出版，第3 3卷卷19881988年出版。年出版。 國際藥典國際藥典對各國無法律約束力，僅供各國編纂藥典時對各國無法律約束力，僅供各國編纂藥典時作為參考標準。作為參考標準。 根據(jù)生物藥物的性質(zhì)和特

23、征，它出用于臨床治療和根據(jù)生物藥物的性質(zhì)和特征，它出用于臨床治療和診斷之外，還用于健康人群的預防接種。許多基因工程藥診斷之外，還用于健康人群的預防接種。許多基因工程藥物，特別是細胞因子藥物都可參與人體機能的精細調(diào)節(jié)。物，特別是細胞因子藥物都可參與人體機能的精細調(diào)節(jié)。在極其微量的情況下就可以產(chǎn)生顯著的效應，任何性質(zhì)和在極其微量的情況下就可以產(chǎn)生顯著的效應，任何性質(zhì)和數(shù)量的偏差都可能貽誤病情，甚至造成嚴重的危害。因此，數(shù)量的偏差都可能貽誤病情，甚至造成嚴重的危害。因此，在藥品的研制、生產(chǎn)、供應以及臨床使用過程中必須的生在藥品的研制、生產(chǎn)、供應以及臨床使用過程中必須的生物藥物及其產(chǎn)品進行嚴格的全面質(zhì)

24、量控制和科學管理。物藥物及其產(chǎn)品進行嚴格的全面質(zhì)量控制和科學管理。第三節(jié)第三節(jié) 生物藥物的科學管理生物藥物的科學管理 一、藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（一、藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（GMPGMP） GMPGMP是是Good Manufacturing PracticeGood Manufacturing Practice的簡稱，即藥品的簡稱，即藥品 生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范。生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范。 ( (一一) )顯著特點：顯著特點： 1 1、藥品與人的健康、疾病和生命有直接的關系，因此在、藥品與人的健康、疾病和生命有直接的關系，因此在生產(chǎn)和使用過程中，不允許有生產(chǎn)和使用過程中，不允許有“萬一萬一” ” 的錯誤。的錯

25、誤。 2 2、藥品從本質(zhì)來說，、藥品從本質(zhì)來說， 對機體是一種異物，因此在使用對機體是一種異物，因此在使用方法上必須給予極大的關注。方法上必須給予極大的關注。 3 3、藥品是用于疾病的預防和治療為目的，多數(shù)是給病人、藥品是用于疾病的預防和治療為目的，多數(shù)是給病人使用的，同正常人比較病人身體較弱，抵抗力不強，對藥使用的，同正常人比較病人身體較弱，抵抗力不強，對藥品的質(zhì)量要求較高。品的質(zhì)量要求較高。 4 4、藥品質(zhì)量在多數(shù)情況下，不能通過外觀進行判斷，這、藥品質(zhì)量在多數(shù)情況下，不能通過外觀進行判斷，這種屬性決定了藥品生產(chǎn)以至使用，必須加強質(zhì)量上的管理。種屬性決定了藥品生產(chǎn)以至使用，必須加強質(zhì)量上的

26、管理。 ( (二二)GMP)GMP總要求：所有醫(yī)藥工業(yè)生產(chǎn)，在投產(chǎn)前，對生產(chǎn)總要求：所有醫(yī)藥工業(yè)生產(chǎn)，在投產(chǎn)前，對生產(chǎn)過程必須規(guī)定明確，所有必要設備必須經(jīng)過檢驗，所有人過程必須規(guī)定明確，所有必要設備必須經(jīng)過檢驗，所有人員必須經(jīng)過適當培訓，要求符合規(guī)定的廠房建筑及裝備，員必須經(jīng)過適當培訓，要求符合規(guī)定的廠房建筑及裝備，使用合格原料，采用經(jīng)過批準的生產(chǎn)方法，而且還必需具使用合格原料，采用經(jīng)過批準的生產(chǎn)方法，而且還必需具有符合條件的倉儲及運輸設施。有符合條件的倉儲及運輸設施。1 1、所有操作方法均應明文規(guī)定，且知道達到預期果。、所有操作方法均應明文規(guī)定，且知道達到預期果。 2 2、提供一切必要的裝備

27、，包括：經(jīng)過培訓在合適人員；、提供一切必要的裝備，包括：經(jīng)過培訓在合適人員； 合適的設備及維修服務；正確的材料、容器簽；經(jīng)過合適的設備及維修服務；正確的材料、容器簽；經(jīng)過 批準的方法；合適的儲存及運輸。批準的方法；合適的儲存及運輸。 3 3、操作方法應書寫成文，用詞簡潔明了。、操作方法應書寫成文，用詞簡潔明了。 4 4、操作人員經(jīng)常培訓，能正確操作。、操作人員經(jīng)常培訓，能正確操作。 （三）（三） GMPGMP的三大要素：的三大要素： 1 1、人為產(chǎn)生的錯誤減小到最低；、人為產(chǎn)生的錯誤減小到最低； 2 2、防止對醫(yī)藥品的污染和低質(zhì)量醫(yī)藥品的產(chǎn)生；、防止對醫(yī)藥品的污染和低質(zhì)量醫(yī)藥品的產(chǎn)生； 3 3

28、、保證產(chǎn)品高質(zhì)量的系統(tǒng)設計。、保證產(chǎn)品高質(zhì)量的系統(tǒng)設計。 19851985年年7 7月月1 1日，我國頒布了藥品管理法，根據(jù)其規(guī)律，日，我國頒布了藥品管理法，根據(jù)其規(guī)律，我國自我國自19881988年開始實施了藥品生產(chǎn)管理規(guī)范制度。根年開始實施了藥品生產(chǎn)管理規(guī)范制度。根據(jù)規(guī)定，自據(jù)規(guī)定，自19981998年年7 7月月1 1日起，我國未取得藥品日起，我國未取得藥品GMPGMP的企業(yè)，的企業(yè)，管理部門不與受理生產(chǎn)新藥的申請；不批準藥品的仿制、管理部門不與受理生產(chǎn)新藥的申請；不批準藥品的仿制、新藥技術的轉讓和進口藥品的分包裝；未取得藥品新藥技術的轉讓和進口藥品的分包裝；未取得藥品GMPGMP認認證

29、的新開辦藥品生產(chǎn)企業(yè)不發(fā)給其藥品生產(chǎn)企業(yè)許可證。證的新開辦藥品生產(chǎn)企業(yè)不發(fā)給其藥品生產(chǎn)企業(yè)許可證。 二、藥品安全試驗規(guī)范（二、藥品安全試驗規(guī)范（GLPGLP） GLPGLP是是Good Laboratory PracticeGood Laboratory Practice的簡稱，即藥品安全試的簡稱，即藥品安全試驗規(guī)范，亦稱藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范。驗規(guī)范，亦稱藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范。 主要內(nèi)容是在規(guī)定試驗條件下，進行藥效、毒性動物試驗主要內(nèi)容是在規(guī)定試驗條件下，進行藥效、毒性動物試驗的準則：對急性，亞急性，慢性毒性試驗，生殖試驗，致的準則：對急性，亞急性，慢性毒性試驗，生殖試驗，致癌，致

30、畸，致突變以及其它毒性試驗等臨床前安全試驗作癌，致畸，致突變以及其它毒性試驗等臨床前安全試驗作出規(guī)定，是保證藥品安全有效的法規(guī)。出規(guī)定，是保證藥品安全有效的法規(guī)。 三、藥物臨床試驗管理規(guī)范（三、藥物臨床試驗管理規(guī)范（GCPGCP） GCPGCP是是Good Clinical PracticeGood Clinical Practice的簡稱，即藥物臨床試驗的簡稱，即藥物臨床試驗管理規(guī)范。管理規(guī)范。 藥品臨床試驗是指在任何人體（病人或健康的志愿者）藥品臨床試驗是指在任何人體（病人或健康的志愿者）進行的藥品系統(tǒng)性研究，以證實或揭示試驗用藥品的作進行的藥品系統(tǒng)性研究，以證實或揭示試驗用藥品的作用及不

31、良反應等。用及不良反應等。 制定制定GCPGCP的目的：保證臨床試驗過程規(guī)范，結果科學可靠，的目的：保證臨床試驗過程規(guī)范，結果科學可靠，保證受試者的權益并保障其安全。保證受試者的權益并保障其安全。制藥工藝：從發(fā)現(xiàn)-藥物上市發(fā)現(xiàn)臨床前臨床毒理注冊生產(chǎn)GLPGCPGMPGLP藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范GCP 藥物臨床試驗質(zhì)量管理規(guī)范GMP 藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范第四節(jié)第四節(jié) 生物藥物常用的定量分析法生物藥物常用的定量分析法1 1、酶法：、酶法： 通常包括兩種類型：通常包括兩種類型：2 2、電泳法：、電泳法： 在電解質(zhì)溶液中，帶電粒子或離子在電場作用下，以在電解質(zhì)溶液中，帶電粒子或離子在電場作用下，以

32、 不同的速率向其所帶電荷相反的方向遷移，基于溶質(zhì)不同的速率向其所帶電荷相反的方向遷移，基于溶質(zhì) 在電場中的遷移速率不同，達到分離的目的在電場中的遷移速率不同，達到分離的目的酶分析法酶分析法終點測定法：終點測定法：原理：先借助酶反應使被測物質(zhì)定量地進行轉變，原理：先借助酶反應使被測物質(zhì)定量地進行轉變，然后在轉化完成后，測定底物、產(chǎn)物或輔酶物質(zhì)然后在轉化完成后，測定底物、產(chǎn)物或輔酶物質(zhì)（第二底物）等的變化量，從而計算出被測物的實（第二底物）等的變化量，從而計算出被測物的實際含量或濃度的一種分析方法。際含量或濃度的一種分析方法。條件：條件：酶的底物特異性酶的底物特異性反應平衡反應平衡反應液中酶的用量

33、反應液中酶的用量反應產(chǎn)物抑制反應產(chǎn)物抑制電泳法（電泳法（electrophoresiselectrophoresis）在電解質(zhì)溶液中，帶電粒子或離子在電場作用下以不在電解質(zhì)溶液中，帶電粒子或離子在電場作用下以不同的速率向其所帶電宿相反方向遷移的現(xiàn)象稱為電同的速率向其所帶電宿相反方向遷移的現(xiàn)象稱為電泳，電泳分離是基于溶質(zhì)在電場中的遷移速度不同而泳，電泳分離是基于溶質(zhì)在電場中的遷移速度不同而進行的分析方法。進行的分析方法。各種生物大分子在一定各種生物大分子在一定pHpH條件下，可以解離成帶電荷條件下，可以解離成帶電荷的離子，在電場中會向相反的電極移動。在分析核酸、的離子，在電場中會向相反的電極移動

34、。在分析核酸、蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)時，電泳是個非常有效的手段。蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)時，電泳是個非常有效的手段。根據(jù)電泳的分離特點，電泳法包括自由界面電泳、區(qū)根據(jù)電泳的分離特點，電泳法包括自由界面電泳、區(qū)帶電泳和高效毛細管電泳等。帶電泳和高效毛細管電泳等。根據(jù)所用支持物的不同分為紙電泳、醋酸纖維素薄膜根據(jù)所用支持物的不同分為紙電泳、醋酸纖維素薄膜電泳、電泳、PAGEPAGE、SDSSDSPAGE PAGE 、瓊脂糖凝膠電泳等。、瓊脂糖凝膠電泳等。自由界面電泳：在一根自由界面電泳：在一根U U形管的溶液中，同種分子形管的溶液中，同種分子的構型及電荷情況基本一致，在電場的影響下，它們的構型及電荷情況基本

35、一致，在電場的影響下，它們逐漸密集而與其它電泳遷移率不同的物質(zhì)之間形成明逐漸密集而與其它電泳遷移率不同的物質(zhì)之間形成明顯界面。顯界面。區(qū)帶電泳：在電泳過程中，應用各種不同的惰性支區(qū)帶電泳：在電泳過程中，應用各種不同的惰性支持介質(zhì)，在電場作用下，使具有不同泳動速度的組持介質(zhì)，在電場作用下，使具有不同泳動速度的組分形成各自區(qū)帶的電泳。如紙電泳、醋酸纖維素薄分形成各自區(qū)帶的電泳。如紙電泳、醋酸纖維素薄膜電泳、聚丙稀酰胺凝膠電泳等等。膜電泳、聚丙稀酰胺凝膠電泳等等。高效毛細管電泳（高效毛細管電泳（HPCEHPCE）：在一根內(nèi)徑為）：在一根內(nèi)徑為50m50m的毛細管中，在高壓電場下進行樣品分離分析的一種

36、的毛細管中，在高壓電場下進行樣品分離分析的一種新型電泳技術。新型電泳技術。常用電泳法的類型及其應用常用電泳法的類型及其應用 紙電泳法：紙電泳法是用濾紙為支持載體的一種電紙電泳法：紙電泳法是用濾紙為支持載體的一種電泳方法，如核苷酸，具有共軛雙鍵的嘌呤或嘧啶堿基，在泳方法，如核苷酸，具有共軛雙鍵的嘌呤或嘧啶堿基，在一定的一定的pHpH條件下，具有強的紫外吸收，電泳后在紫外燈下條件下，具有強的紫外吸收，電泳后在紫外燈下顯示紫色，定位、剪下相應的部位，進行洗脫，在特定波顯示紫色，定位、剪下相應的部位，進行洗脫，在特定波長下測定長下測定A A，按其吸收系數(shù)可計算核苷酸的含量。，按其吸收系數(shù)可計算核苷酸的

37、含量。 醋酸纖維素薄膜電泳法：用醋酸纖維素薄膜作為支醋酸纖維素薄膜電泳法：用醋酸纖維素薄膜作為支持載體的一種電泳方法，已應用于血清蛋白、脂蛋持載體的一種電泳方法，已應用于血清蛋白、脂蛋白等的分離和定量測定。白等的分離和定量測定。 PAGE法：以人工合成的聚丙烯酰胺凝膠作為惰性支法：以人工合成的聚丙烯酰胺凝膠作為惰性支持載體的電泳方法。其分離效果主要取決于分子所帶持載體的電泳方法。其分離效果主要取決于分子所帶電荷與分子大小的比例，也取決于與分子量大小有關電荷與分子大小的比例，也取決于與分子量大小有關的分子篩效應。按電泳槽和凝膠層中的緩沖液體系的分子篩效應。按電泳槽和凝膠層中的緩沖液體系pH和凝膠

38、孔徑大小是否一致分為連續(xù)體系和非連續(xù)體系。和凝膠孔徑大小是否一致分為連續(xù)體系和非連續(xù)體系。 SDSPAGE：根據(jù)大多數(shù)蛋白都能與陽離子表面活：根據(jù)大多數(shù)蛋白都能與陽離子表面活性劑性劑SDS按重量比結合成復合物，使蛋白質(zhì)分子所帶按重量比結合成復合物，使蛋白質(zhì)分子所帶地負電荷遠遠超過天然蛋白分子的負電荷，消除了不地負電荷遠遠超過天然蛋白分子的負電荷，消除了不同蛋白分子的電荷效應，使蛋白分子相對遷移率的大同蛋白分子的電荷效應，使蛋白分子相對遷移率的大小完全取決于亞基分子量的高低，從已知分子量的標小完全取決于亞基分子量的高低，從已知分子量的標準蛋白的對數(shù)荷相對遷移率所作標準曲線中求出供試準蛋白的對數(shù)荷

39、相對遷移率所作標準曲線中求出供試品的分子量。品的分子量。瓊脂糖凝膠電泳瓊脂糖凝膠電泳瓊脂糖是瓊脂糖是D D和和L L半乳糖殘基通過半乳糖殘基通過（1 31 3）和）和（1 41 4）糖苷鍵交替構成的線狀聚合物。糖苷鍵交替構成的線狀聚合物。L L半乳糖殘基在半乳糖殘基在3 3和和6 6位之間位之間形成脫水連接。瓊脂糖鏈形成螺旋纖維，后者再聚合成半徑形成脫水連接。瓊脂糖鏈形成螺旋纖維，后者再聚合成半徑202030nm30nm的超螺旋結構。瓊脂糖凝膠可構成一個直徑從的超螺旋結構。瓊脂糖凝膠可構成一個直徑從50nm50nm到到略大于略大于200nm200nm的三維篩孔的通道。的三維篩孔的通道。 瓊脂糖凝膠電泳可以在很窄的范圍內(nèi)獲得高純度的某種瓊脂糖凝膠電泳可以在很窄的范圍內(nèi)獲得高純度的某種DNADNA片段，或是大小相近的片段，或是大小相近的DNADNA片段。片段。 核酸在溶液中由于它們有磷酸基團而帶負電荷，在電場中核酸在溶液中由于它們有磷酸基團而帶負電荷，在電場中向正極移動。在凝膠電泳中，向正極移動。在凝膠電泳中，DNADNA分子的遷移速度與分子量分子的遷移速度與分子量的對數(shù)值成反比關系。的對數(shù)值成反比關系。 垂直板電垂直板電 泳裝置泳裝置加樣加樣樣品遷樣品遷移方向移方向電泳方向電泳方向