干化學(xué)應(yīng)用-河南醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院(老區(qū))

1、干化學(xué)應(yīng)用干化學(xué)應(yīng)用實驗室專員房圣亞主要內(nèi)容 干化學(xué)原理 V350分析儀的日常保養(yǎng) 常見應(yīng)用問題解析美國美國強生公司是世界上最大的、最具綜合性的醫(yī)療強生公司是世界上最大的、最具綜合性的醫(yī)療保健品保健品制造商，制造商，為消費者、制藥業(yè)和醫(yī)療器材及診斷市場提供全面的專業(yè)化服務(wù)。為消費者、制藥業(yè)和醫(yī)療器材及診斷市場提供全面的專業(yè)化服務(wù)。2010年銷售額達(dá)到675億美元，在全世界的醫(yī)療保健產(chǎn)品生產(chǎn)企業(yè)中名列第一。全球雇員超過12萬。公司總部位于美國新澤西州，擁有多于250家子公司，為57個國家的市場提供產(chǎn)品和專業(yè)化服務(wù)。產(chǎn)品覆蓋制藥、醫(yī)療器材和保健品。在外科縫線、OTC藥品、醫(yī)療器械及診斷領(lǐng)域居于國際

2、領(lǐng)先地位。2010年在財富全球最受景仰的公司評選中，名列第三。全球僅有的五家AAA信用級工業(yè)公司之一。強強生公司生公司3強生強生OCD主要產(chǎn)品主要產(chǎn)品w 安全輸血安全輸血 血型分析血型分析 血液篩查血液篩查w 實驗室診斷實驗室診斷 臨床生化臨床生化 臨床免疫臨床免疫 實驗室自動化實驗室自動化*w ValuMetrix實驗室管理咨詢服務(wù)實驗室管理咨詢服務(wù)*w Veridex腫瘤分子診斷腫瘤分子診斷* * 注冊中注冊中MicroSlide 多涂層薄膜干片技術(shù)多涂層薄膜干片技術(shù)擴(kuò)擴(kuò)散散層層擴(kuò)擴(kuò)散散層層試劑層試劑層試劑層試劑層指示指示劑層劑層指示指示劑層劑層支持支持層層支持支持層層標(biāo)標(biāo)本本MicroS

3、lide多涂層薄膜干片技術(shù)：將所需試劑預(yù)固相在多層薄膜和郵票大小的透明支持基墊之上。當(dāng)血漿，血清，尿液或腦脊液與這些已含化學(xué)物質(zhì)的干式薄膜接觸時發(fā)生反應(yīng)并對反應(yīng)信號進(jìn)行測量。干片分類干片分類干片干片鈉鉀氯膽固醇 甘油三酯總蛋白 白蛋白高密度酯蛋白 脂肪酶 谷丙轉(zhuǎn)氨酶 谷氨酸轉(zhuǎn)移酶堿性磷酸酶 r谷氨酰轉(zhuǎn)酞酶乳酸脫氫酶 肌酸激酶肌酸激酶同工酶 尿素氮肌酐 淀粉酶膽堿脂酶總膽紅素結(jié)合/非結(jié)合膽紅素血氨比色比色/ /速率速率法干片法干片免疫速率免疫速率法干片法干片電極法電極法干片干片指示指示劑層劑層 支持支持層層擴(kuò)擴(kuò)散散層層試劑層試劑層比色比色/速率法干片速率法干片通通過測過測定干片定干片顏顏色色變變

4、化來確定化合物化來確定化合物濃濃度度指示指示劑層劑層 支持支持層層 多孔多孔結(jié)結(jié)構(gòu)，允構(gòu)，允許標(biāo)許標(biāo)本通本通過過 均勻分布均勻分布標(biāo)標(biāo)本本 過濾過濾大分子（蛋白大分子（蛋白質(zhì)質(zhì)，脂肪等），脂肪等） 去除干去除干擾擾物物質(zhì)質(zhì)（溶血，黃疸等）（溶血，黃疸等） 提供反射提供反射測測定的背景定的背景試劑層試劑層擴(kuò)散層擴(kuò)散層比色比色/速率法干片結(jié)構(gòu)速率法干片結(jié)構(gòu)試劑層試劑層擴(kuò)擴(kuò)散散層層 試劑層試劑層指示指示劑層劑層 支持支持層層 包含檢測反應(yīng)所需的酶，緩沖液，催化劑等包含檢測反應(yīng)所需的酶，緩沖液，催化劑等 多層試劑，控制反應(yīng)順序多層試劑，控制反應(yīng)順序比色比色/速率法干片結(jié)構(gòu)速率法干片結(jié)構(gòu)葡萄糖干片葡萄糖

5、干片指示劑層指示劑層擴(kuò)擴(kuò)散散層層 試劑層試劑層 支持支持層層試劑層產(chǎn)試劑層產(chǎn)物與指示物與指示劑層劑層中的中的染料染料結(jié)結(jié)合合時時，形成有色復(fù)合物，形成有色復(fù)合物，其與分析物，其與分析物濃濃度成正比。度成正比。比色比色/速率法干片結(jié)構(gòu)速率法干片結(jié)構(gòu)支持層支持層擴(kuò)擴(kuò)散散層層 試劑層試劑層指示指示劑層劑層 提供反提供反應(yīng)應(yīng)支持基支持基墊墊 允允許許光路自由通光路自由通過過比色比色/速率法干片結(jié)構(gòu)速率法干片結(jié)構(gòu)反射光的測定反射光的測定干干擾擾物物質(zhì)質(zhì)反光背景反光背景成色成色層層生成生成純凈純凈的反射光的反射光光源光源濾濾光片光片接收器接收器比色比色/速率法干片功能演示速率法干片功能演示透射與反射透射與

6、反射透射透射 與與 反射反射尿酸尿酸其他的優(yōu)異抗干擾能力其他的優(yōu)異抗干擾能力 MicroSlide多層涂膜技術(shù)可以針對不同檢測項目使用加以不同成份的薄膜以達(dá)到最佳的檢測結(jié)果某些干片中有清道夫?qū)尤缒蛩嵩噭┤コS他命C 和鎂干片去除鈣的干擾 某些干片試劑層下有半透膜層（如尿素氮）：去除藥物干擾半半透透膜膜尿素氮尿素氮 競競爭性與非爭性與非競競爭性免疫速率反爭性免疫速率反應(yīng)應(yīng)模式模式 需要液體反需要液體反應(yīng)應(yīng)底物底物 地高辛、苯妥因、苯巴比妥、地高辛、苯妥因、苯巴比妥、CRP、 、 卡卡馬馬西平西平免疫速率法干片免疫速率法干片電極法干片電極法干片 離子離子選擇電選擇電極技極技術(shù)術(shù) 直接法直接法測測定

7、兩定兩電電極極間電勢間電勢不同不同 鉀鉀， ，鈉鈉， ，氯氯18鹽橋鹽橋S2S1S3S4aIar離子載體膜離子載體膜M+ ClAgCl Ag離子載體膜離子載體膜M+ ClAgClAgaIarVV干片干片常規(guī)常規(guī)已知濃度液體已知濃度液體(參比液參比液)待測液體待測液體(標(biāo)本標(biāo)本)離子選擇電極離子選擇電極(ISE)鹽橋鹽橋ar電極法干片電極法干片19Electrometer干片在接觸點被穿透測量電壓讀數(shù)通過電壓讀數(shù)計算出分析物的濃度20Aqueous Solution (Serum)水相水相(血清血清)Non-aqueous solution(Lipids, Proteins)非水相非水相(血脂血

8、脂,蛋白質(zhì)蛋白質(zhì))以間接法檢測的容以間接法檢測的容量量以直接法檢測的容以直接法檢測的容量量間接法無法對間接法無法對血脂和血脂和蛋白質(zhì)進(jìn)行校正蛋白質(zhì)進(jìn)行校正.21組成成分組成成分 原始體積原始體積水相水相9.3 ul非水相非水相 0.7 ul總樣本體積總樣本體積 10.0 ul按照血清中按照血清中, 非水相占有的體積約為非水相占有的體積約為7 %計算計算標(biāo)本標(biāo)本22組成成分組成成分 原始體積原始體積稀釋液稀釋液 990.0 ul水相水相 9.3 ul非水相非水相 0.7 ul總樣本體積總樣本體積 1000.0 ul稀釋后的正常人標(biāo)本稀釋后的正常人標(biāo)本(100倍稀釋倍稀釋)稀釋比率稀釋比率 = 最

9、終體積最終體積 / 原始體積原始體積總的血清稀釋比率總的血清稀釋比率 = 1000 / 10 = 100 倍倍水相稀釋比率水相稀釋比率 = (990 + 9.3) / 9.3 = 107.45 倍倍23正常人正常人標(biāo)本標(biāo)本Na=140K = 4.0稀釋稀釋 1:100檢測檢測計算計算Na= 140K = 4.0結(jié)果結(jié)果Na = 130.3K = 3.72單位：單位：mmol/LNa = 140 /107.45100 = 130.3 mmol/LK = 4/107.45100 = 3.72 mmol/L直接離子選擇電極法直接離子選擇電極法檢測檢測間接離子選擇電極法間接離子選擇電極法結(jié)果結(jié)果蛋白質(zhì)

10、增高 脫水 巨球蛋白血癥 多發(fā)性骨髓瘤 高球蛋白血癥 肉芽腫病 某些膠原病血脂增高 甲狀腺機(jī)能減退 腎病綜合癥 糖原過多癥 糖尿病 急性胰腺炎直接法直接法 vs. 間接法間接法 ISE疾病狀態(tài)對標(biāo)本的影響疾病狀態(tài)對標(biāo)本的影響血漿蛋白影響血漿蛋白為部分水溶性，故高濃度的蛋白會造成與血脂類似地影響 4 8 12 160.800.901.00檢測結(jié)果總蛋白直接電極法間接電極法 干式生化系干式生化系統(tǒng)統(tǒng)的抗干的抗干擾擾性（性（黃疸黃疸） ）20018016014012010080604020100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000加入膽紅素 BILIRUBIN

11、( mg/dL)( 最終結(jié)果 /原始結(jié)果)= 結(jié)果離散度 %*CREAASTPHOS# LDH # ALKPCaPROTECO2#MgCHOLGLUALT*TRIG*NA*CL*UREA*CK*AMYL*ALB*URCA*FEDxxxxx Dxxxxxxx 某濕生化系統(tǒng)文件來源于：INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistry instruments- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D

12、.18016014012010080604020100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000BILIRUBIN ADDED ( mg/dL)結(jié)果離散度%PROT*ALB*ALKP*AMYL*AST*ECO2*CA*CHOL*CREAT*GLU*K*LDH*Mg*NA*CL*URCA*UREA*TRIG*CK200VITROS 350 干式生化系干式生化系統(tǒng)統(tǒng)的抗干的抗干擾擾性（性（黃疸黃疸） ）文件來源于：INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistry instrumen

13、ts- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D.20018016014012010080604020100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000加入 脂肪 ( INTRALIPID Added mg/dL)結(jié)果離散度%*BILIURCAPHOSGLUPROTMgCHOLALBCaCREAALKPAST#ALT*UREA*CK*CL*K*GGT*NA*CO2# LDH 109% AT 750 MG/DLCxxxxx 某濕生化系統(tǒng) 干式生化系干式

14、生化系統(tǒng)統(tǒng)的抗干的抗干擾擾性（性（脂血脂血） ）文件來源于：INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistry instruments- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D. 干式生化系干式生化系統(tǒng)統(tǒng)的抗干的抗干擾擾性（性（脂血脂血） ）18016014012010080604020100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000LIPEMIA ( INTRA

15、LIPID Added mg/dL)結(jié)果離散度%*ALB*ALKP*ALT*AMYL*AST*BICARB*BIL*CAL*CK*CL*CHOL*CREAT*GLU*K*LDH*Mg*Na*PHOS*PROT*URCA*UREAVITROS 350200文件來源于：INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistry instruments- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D.200 180

16、16014012010080604020100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000加入 血紅素 (as hemoglobin mg/dL)結(jié)果離散度%Hxxxxx xxx 某濕生化系統(tǒng)T.BILICPKMgALBPHOSUATRIGALTTPALKPGGTAMYL*CL*GLU*CHOL*GLOB*CREAT*D.BILI*BUN*CO2*NA*CA 干式生化系干式生化系統(tǒng)統(tǒng)的抗干的抗干擾擾性性 （ （溶血溶血） ）文件來源于：INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemist

17、ry instruments- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D.18016014012010080604020100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000HEMOLYSATE ADDED (as hemoglobin mg/dL)結(jié)果離散度%*ALKP*AMYL*ECO2*CAL*CK*CL*CREAT*NA*URCA*UREABILIPHOSPROTALBTRIG GLU CHOLMg200VITROS 750強生干式生化系統(tǒng)的抗干

18、擾性（溶血）文件來源于：INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistry instruments- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D.主要內(nèi)容 干化學(xué)原理 V350分析儀的日常保養(yǎng) 常見應(yīng)用問題解析每日保養(yǎng)需要做的保養(yǎng)需要做的保養(yǎng): :清空:廢稀釋杯和廢吸頭箱空試劑盒箱廢干片箱檢查: 加樣架是否臟了有無損壞補充:稀釋杯,吸頭試劑參比液,稀釋液,免疫沖洗液質(zhì)控: 做所有機(jī)上項目的質(zhì)控每日保

19、養(yǎng)清潔加樣架和通道每日保養(yǎng)更更換換各種各種輔輔助助試劑試劑:選擇相應(yīng)的子程序儀器自動準(zhǔn)備放入新的輔助試劑參比液,洗液都是記數(shù)為300滴稀釋液是2-10ML每周保養(yǎng)需要做的保養(yǎng)需要做的保養(yǎng): :清潔:加樣架平臺,加樣架運動軌道吸頭停止位加樣位的樣品杯限位器觸摸屏和鍵盤檢查:加樣臂的運動路徑主控計算機(jī)的空氣濾網(wǎng)每周保養(yǎng)加樣架平臺加樣架運動軌道吸頭停止位加樣位的樣品杯限位器每周保養(yǎng)加樣臂的運動路徑每周保養(yǎng)空氣濾網(wǎng)必要的保養(yǎng)應(yīng)應(yīng)做的保養(yǎng)做的保養(yǎng): :須更換的:保濕劑,干燥劑 反射光度計的燈泡清 潔 : 廢 干 片 通 道 推片尺和干片通道需做的: 用黑白參考片做的光 路校正測試必要的保養(yǎng)必要的保養(yǎng)進(jìn)入

20、Diagnostic-setup/adjust-Reflectometer Iris調(diào)整燈電壓(至8V以下)必要的保養(yǎng)用黑白參考片做的光路校正測試Diagnostic-setup/adjust-Correction Factor輸入黑白參考片的反射系數(shù)按提示將參考片放入孵育盤更新生成的校正系數(shù)主要內(nèi)容 干化學(xué)原理 V350分析儀的日常保養(yǎng) 常見應(yīng)用問題解析45肌酐為什么有時候肌酐不出結(jié)果，報肌酐為什么有時候肌酐不出結(jié)果，報DP,DP,稀釋后結(jié)果反而不高？稀釋后結(jié)果反而不高？常常見應(yīng)見應(yīng)用用問題問題解析解析-肌肌酐酐反應(yīng)原理反應(yīng)原理兩點速率法：滴加樣本后，干片進(jìn)行孵育。反應(yīng)初期樣本重的內(nèi)源性兩點

21、速率法：滴加樣本后，干片進(jìn)行孵育。反應(yīng)初期樣本重的內(nèi)源性肌酸被氧化，所產(chǎn)生的反射信號值在兩個時間點測定，測定的反射強肌酸被氧化，所產(chǎn)生的反射信號值在兩個時間點測定，測定的反射強度差值與樣本中的肌酐度差值與樣本中的肌酐 ( (CREA) CREA) 濃度成正比。濃度成正比。46常常見應(yīng)見應(yīng)用用問題問題解析解析-肌肌酐酐已知干擾物質(zhì)已知干擾物質(zhì)血清和血漿 肌酸：肌酸：肌酐 (CREA) 濃度為 133 mol/L 時，大于 707 mol/L的肌酸濃度將會顯示“DP”代碼（因為提高很多的肌酸濃度可能引起過度的背景密度）。 對于沒有顯示錯誤代碼的樣本，肌酸引起的殘留偏差將小于 13.3 mol/L。 肌酐 (CREA) 濃度為 1237 mol/L時，大于 88 mol/L 的肌酸濃度將會顯示“DP”代碼。 對于沒有顯示錯誤代碼的樣本，肌酸引起的殘留偏差將小于 2%。47肌肌酐酐 常常見應(yīng)見應(yīng)用用問題問題解析解析-肌肌酐酐處理方法稀釋樣本如果肌酐濃度超出系統(tǒng)可報告范圍，或者分析儀顯示“DP”代碼（指示高背景密度，通常是因為肌酸濃度升高所致），則按如下步驟操作：手工樣本稀釋1. 使用 VITROS 7% 牛血清白蛋白溶液稀釋樣本；2. 重新分析；3. 結(jié)果乘以稀釋因