實(shí)驗(yàn)三：細(xì)菌分離接種技術(shù)和培養(yǎng)

1、實(shí)驗(yàn)三實(shí)驗(yàn)三 細(xì)菌分離、接種技術(shù)和培養(yǎng)法細(xì)菌分離、接種技術(shù)和培養(yǎng)法目的要求：目的要求：l 1 1、掌握細(xì)菌分離培養(yǎng)的基本要領(lǐng)和方法。、掌握細(xì)菌分離培養(yǎng)的基本要領(lǐng)和方法。l 2 2、掌握平板劃線、斜面培養(yǎng)基等接種方法。、掌握平板劃線、斜面培養(yǎng)基等接種方法。l 3 3、熟悉細(xì)菌分離培養(yǎng)的環(huán)境和條件。、熟悉細(xì)菌分離培養(yǎng)的環(huán)境和條件。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：實(shí)驗(yàn)內(nèi)容： l1 1、 細(xì)菌劃線分離培養(yǎng)：連續(xù)劃線分離培養(yǎng)法細(xì)菌劃線分離培養(yǎng)：連續(xù)劃線分離培養(yǎng)法分區(qū)劃線分離培養(yǎng)法分區(qū)劃線分離培養(yǎng)法l2 2、 純培養(yǎng)獲得與移植：試管間的斜面移植；純培養(yǎng)獲得與移植：試管間的斜面移植；可疑菌落純培養(yǎng)移植可疑菌落純培養(yǎng)移植l3 3、

2、 液體培養(yǎng)基增菌和培養(yǎng)（示教）液體培養(yǎng)基增菌和培養(yǎng)（示教）l4 4、 半固體培養(yǎng)基穿刺培養(yǎng)（示教）半固體培養(yǎng)基穿刺培養(yǎng)（示教）實(shí)驗(yàn)三實(shí)驗(yàn)三 細(xì)菌分離、接種技術(shù)和培養(yǎng)法細(xì)菌分離、接種技術(shù)和培養(yǎng)法說明：說明： 病原菌的人工培養(yǎng)一般采用病原菌的人工培養(yǎng)一般采用35353737，培養(yǎng)時(shí)間多數(shù)為，培養(yǎng)時(shí)間多數(shù)為181824 h24 h，但有，但有時(shí)需根據(jù)菌種及培養(yǎng)目的作最佳選擇，如細(xì)菌的藥物敏感試驗(yàn)則應(yīng)選用對(duì)數(shù)時(shí)需根據(jù)菌種及培養(yǎng)目的作最佳選擇，如細(xì)菌的藥物敏感試驗(yàn)則應(yīng)選用對(duì)數(shù)期的培養(yǎng)物。將標(biāo)本或培養(yǎng)物劃線接種在固體培養(yǎng)基的表面，因劃線的分散期的培養(yǎng)物。將標(biāo)本或培養(yǎng)物劃線接種在固體培養(yǎng)基的表面，因劃線的分

3、散作用，使許多原混雜的細(xì)菌在固體培養(yǎng)基表面上散開，稱為分離培養(yǎng)。一般作用，使許多原混雜的細(xì)菌在固體培養(yǎng)基表面上散開，稱為分離培養(yǎng)。一般經(jīng)過經(jīng)過181824 h24 h培養(yǎng)后，單個(gè)細(xì)菌分裂繁殖成一堆肉眼可見的細(xì)菌集團(tuán)，稱為培養(yǎng)后，單個(gè)細(xì)菌分裂繁殖成一堆肉眼可見的細(xì)菌集團(tuán)，稱為菌落（菌落（colonycolony）。挑取一個(gè)菌落，移種到另一培養(yǎng)基中，生長(zhǎng)出來的細(xì)菌均）。挑取一個(gè)菌落，移種到另一培養(yǎng)基中，生長(zhǎng)出來的細(xì)菌均為純種，稱為純培養(yǎng)（為純種，稱為純培養(yǎng)（pure culturepure culture）。從混雜的微生物群體中獲得只含有）。從混雜的微生物群體中獲得只含有某一種或某一株微生物的過程

4、稱為微生物的分離與純化。微生物在固體培養(yǎng)某一種或某一株微生物的過程稱為微生物的分離與純化。微生物在固體培養(yǎng)基生長(zhǎng)形成的單個(gè)菌落一般是一個(gè)細(xì)胞繁殖而成的集合體，因此可通過挑取基生長(zhǎng)形成的單個(gè)菌落一般是一個(gè)細(xì)胞繁殖而成的集合體，因此可通過挑取單菌落而獲得一種純培養(yǎng)。單菌落而獲得一種純培養(yǎng)。細(xì)菌分離培養(yǎng)物純培養(yǎng)菌的確定依據(jù)：細(xì)菌分離培養(yǎng)物純培養(yǎng)菌的確定依據(jù)：l1. 1. 觀察細(xì)菌分離培養(yǎng)物所獲得細(xì)菌的菌落特征；觀察細(xì)菌分離培養(yǎng)物所獲得細(xì)菌的菌落特征；l2.2.結(jié)合顯微鏡檢查細(xì)菌分離培養(yǎng)物細(xì)菌形態(tài)特征。結(jié)合顯微鏡檢查細(xì)菌分離培養(yǎng)物細(xì)菌形態(tài)特征。細(xì)菌劃線分離培養(yǎng)細(xì)菌劃線分離培養(yǎng)可疑菌落純培養(yǎng)移植可疑菌落

5、純培養(yǎng)移植1區(qū)(1/10)4區(qū)3區(qū)2區(qū)(1/5)燒接種環(huán)燒接種環(huán)燒接種環(huán)燒接種環(huán)燒接種環(huán)燒接種環(huán)細(xì)菌平板細(xì)菌平板 分離方法分離方法細(xì)菌劃線分離培養(yǎng)細(xì)菌劃線分離培養(yǎng)病料的劃線分離培養(yǎng)病料的劃線分離培養(yǎng)細(xì)菌劃線分離培養(yǎng)細(xì)菌劃線分離培養(yǎng)Streptococcus pyogenes on blood agar, illustration b-hemolysis.Streptococcus pneumoniae on blood agar, illustration a-hemolysis.Staphylococcus aureus on blood agar, illustration b-hemolysis.Staphylococcus epidermidis on blood agar With on hemolysis細(xì)菌純培養(yǎng)細(xì)菌純培養(yǎng)細(xì)菌斜面細(xì)菌斜面 純培養(yǎng)法純培養(yǎng)法細(xì)菌純培養(yǎng)細(xì)菌純培養(yǎng)液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基穿刺培養(yǎng)半固體