飼料添加劑 液態(tài)嗜酸乳桿菌

1、Q/0900TGA泰安市國泰民安生物科技有限公司企業(yè)標準Q/0900 TGA0092016飼料添加劑 液態(tài)嗜酸乳桿菌2016 - 08 - 18發(fā)布2016- 09-18實施泰安市國泰民安生物科技有限公司泰安市國泰民安生物科技有限公司發(fā)布前言本標準按照GB/T 1.1標準化工作導(dǎo)則第1部分：標準的結(jié)構(gòu)和編寫給出的規(guī)則起草。本標準自發(fā)布之日起有效期三年，到期應(yīng)復(fù)審。本標準由泰安市國泰民安生物科技有限公司提出并起草。本標準主要起草人：王旺、李春利。本標準于2016-08-18首次發(fā)布。飼料添加劑 液態(tài)嗜酸乳桿菌1范圍本標準規(guī)定了飼料添加劑液態(tài)嗜酸乳桿菌液體產(chǎn)品的術(shù)語和定義、分類和代號、要求、抽樣、

2、試驗方法、檢驗規(guī)則、標簽、包裝、運輸、貯存和保質(zhì)期。本標準適用于以嗜酸乳桿菌為菌種經(jīng)發(fā)酵、灌裝制成的飼料添加劑液態(tài)嗜酸乳桿菌液體產(chǎn)品。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本標準的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本標準。GB 4789.3 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 大腸菌群計數(shù)GB 4789.5 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 志賀氏菌檢驗GB 4789.10 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 金黃色葡萄球菌檢驗 GB/T 5917.1 飼料粉碎粒度測定 兩層篩篩分法GB/T 6435 飼料中水分的測定GB/T 6682 分析實驗室用

3、水規(guī)格和試驗方法GB 10648 飼料標簽GB/T 13079 飼料中總砷的測定GB/T 13080 飼料中鉛的測定 原子吸收光譜法GB/T 13081 飼料中汞的測定方法GB/T 13082 飼料中鎘的測定方法GB/T 13091 飼料中沙門氏菌的檢驗方法GB/T 13092 飼料中霉菌的檢驗方法GB/T 14699.1 飼料 采樣GB/T 17480 飼料中的黃曲霉毒素B2的測定 酶聯(lián)免疫吸附法GB/T20191 飼料中嗜酸乳桿菌的微生物學(xué)檢驗JJF 1070 定量包裝商品凈含量計量檢驗規(guī)則中華人民共和國獸藥典2005年國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局第75號令定量包裝商品計量監(jiān)督管理辦法3術(shù)語和

4、定義下列術(shù)語和定義適用于本標準。3.1雜菌目標菌以外的菌均視為雜菌。4產(chǎn)品分類和代號產(chǎn)品分類和代號見表1表1 產(chǎn)品分類和代號通用名稱產(chǎn)品代號適用動物飼料添加劑液態(tài)嗜酸乳桿菌GA-10養(yǎng)殖動物飼料添加劑液態(tài)嗜酸乳桿菌GA-11養(yǎng)殖動物5 要求5.1 感官指標 為褐色液體，略有沉淀，無變質(zhì)、異味、異臭，有微生物發(fā)酵的特殊氣味。5.2 PH值 不高于5.05.3 衛(wèi)生指標衛(wèi)生指標見表2 表2 衛(wèi)生指標項目指標黃曲霉毒素B1,g/kg 10.0砷(以總砷計)，mg/kg 2.0鉛（以pb計），mg/kg 20.0汞（以Hg計），mg/kg 0.1鎘(以Cd計)，mg/kg 0.5雜菌率， 0.5大腸菌

5、群，個/kg 1.0×105霉菌總數(shù)，個/kg 2.0×105沙門氏菌（CFU/25克）0致病菌（腸道致病菌及致病性球菌）不得檢出5.4 技術(shù)指標技術(shù)指標見表3 表3 技術(shù)指標產(chǎn)品代號嗜酸乳桿菌，CFU/Ml GA-101.0×108GA-1110.0×1095.5 凈含量符合標簽標注，偏差符合定量包裝商品計量監(jiān)督管理辦法的規(guī)定。6 抽樣6.1組批原料不變，同一配方、同一工藝、同一生產(chǎn)周期連續(xù)生產(chǎn)的產(chǎn)品為一個批次。6.2采樣按照GB/T 14699.1的規(guī)定進行樣品采集。所采樣品具有代表性，避免采樣時交叉感染。采樣工具經(jīng)無菌處理，如已滅菌牛皮紙或廣口瓶、

6、金屬勺和刀。7試驗方法7.1感官指標樣品放置在燒杯內(nèi)，在非直射陽光、光線充足、無異味的環(huán)境中，用眼觀的方法觀察其色澤，用鼻嗅的方法檢查其氣味。7.2 PH值按獸藥典二部附錄PH值測定法的規(guī)定執(zhí)行。7.3黃曲霉毒素B1GB/T 17480規(guī)定執(zhí)行7.4 砷方法1：按GB/T 13079的規(guī)定執(zhí)行(仲裁法)方法2：按中華人民共和國獸藥典的規(guī)定執(zhí)行7.5 鉛方法1：按GB/T 13080的規(guī)定執(zhí)行(仲裁法)方法2：按中華人民共和國獸藥典的規(guī)定執(zhí)行7.6 汞按GB/T 13081的規(guī)定執(zhí)行7.7 鎘按GB/T 13082的規(guī)定執(zhí)行7.8 雜菌率按附錄A的規(guī)定執(zhí)行7.9 大腸菌群按GB 4789.3的規(guī)

7、定執(zhí)行7.10 霉菌總數(shù)按GB/T 13092的規(guī)定執(zhí)行7.11 沙門氏菌按GB/T 13091的規(guī)定執(zhí)行。7.12 志賀氏菌按GB 4789.5 的規(guī)定執(zhí)行。7.13 金黃色葡萄球菌按GB 4789.10規(guī)定執(zhí)行。7.14 嗜酸乳桿菌方法1：按GB/T 20191的規(guī)定執(zhí)行(仲裁法)方法2：按附錄A的規(guī)定執(zhí)行7.15 凈含量按JJF 1070的規(guī)定執(zhí)行。8 檢驗規(guī)則8.1 檢驗分類檢驗分為出廠檢驗和型式檢驗。8.2 出廠檢驗 出場檢驗項目為感官指標、Ph值、嗜酸乳桿菌活菌數(shù)。 檢驗合格的，簽發(fā)“產(chǎn)品質(zhì)量檢驗合格證”。8.3 型式檢驗 型式檢驗項目為本標準“要求”中的全部項目。 型式檢驗每年進

8、行一次。有下列情況之一的必須進行型式檢驗： a)主要原料變化及配方有較大改變，可能影響產(chǎn)品性能時； b)工藝變化、設(shè)備改造后； c)停產(chǎn)6個月以上，重新恢復(fù)生產(chǎn)時； d)行業(yè)主管部門提出進行型式檢驗要求時； e)主成分指標與上次型式檢驗有較大差異時。 型式檢驗由本企業(yè)化驗室檢驗或委托檢驗 。8.4 判定規(guī)則 按照本標準的規(guī)定執(zhí)行。有一項指標不符合本規(guī)則要求，再從雙倍量的包裝中抽取樣品進行復(fù)檢，以復(fù)檢結(jié)果為準。若仍有一項指標不合格，則判該批產(chǎn)品為不合格品。衛(wèi)生指標中的微生物指標不得復(fù)檢，直接判定該批產(chǎn)品為不合格產(chǎn)品。各項技術(shù)指標中的極限數(shù)值采用修約值比較法。 若供需雙方對產(chǎn)品質(zhì)量發(fā)生爭議時，可由

9、雙方協(xié)商，或選定法定機構(gòu)按照本標準進行判定。9 標簽符合GB 10648的要求10 包裝、運輸、貯存和保質(zhì)期10.1 包裝采用聚烯烴塑料瓶內(nèi)包、瓦楞紙箱外包裝。10.2 運輸運輸過程防雨、防潮、防止污染、保持包裝的完整性。10.3 貯存存放在通風(fēng)、干燥、無污染的地方，避免與有毒、有害物質(zhì)混合存放。10.4 保質(zhì)期 在符合運輸、貯存條件的情況下，原包裝產(chǎn)品保質(zhì)期6個月。附錄A (規(guī)范性附錄) 嗜酸乳桿菌及雜菌率的測定A.1原理利用LBS培養(yǎng)基對樣品中嗜酸乳桿菌活菌數(shù)進行梯度稀釋傾注法計數(shù)。A.2培養(yǎng)基和稀釋液除非另有說明，在分析中僅使用確認認為分析純的試劑和符合GB/T 6682規(guī)定的三級水或相

10、當(dāng)純度的水。按本標準規(guī)定的方法配制培養(yǎng)基或購買商品化的產(chǎn)品。 LBS培養(yǎng)基 成分酵母浸粉5.0、胰酪蛋白胨10.0、磷酸二氫鉀6.0、硫酸亞鐵0.034、硫酸鎂0.575、葡萄糖20.0、乙酸鈉25.0、檸檬酸銨2.0、硫酸錳0.12、瓊脂15.0。A 制法稱取LBS培養(yǎng)基84.0g，在吸取吐溫-801ML和冰乙酸1.3ML,加熱攪拌溶解于1000ML蒸餾水中，調(diào)節(jié)PH值5.5（±0.2），當(dāng)日使用，無需高壓滅菌。次日使用，需118高壓滅菌15min.注明：該培養(yǎng)基溶解后有少量沉淀。 稀釋液 成分氯化鈉8.5g、蒸餾水1000ML。 制法稱取氯化鈉8.5g于1000ML蒸餾水中，充分

11、溶解，121高壓滅菌15min.備用。A.3 儀器與設(shè)備 天平：感量：0.01g 振蕩器 高壓滅溫鍋：121 生化培養(yǎng)箱A.4 樣品制備按GB/T 14699.1的規(guī)定，采取有代表性的樣品500ML，從中吸取10.00ML，加入帶玻璃珠的盛有90ML無菌生理鹽水的三角瓶中，置旋轉(zhuǎn)式搖床上200rpm充分振蕩30min,即成木葉的菌懸液，備用。A.5 測定步驟 樣品稀釋用無菌移液管吸取1ML上述母液的菌懸液加入盛有9ML無菌生理鹽水的試管中，混勻成1：102稀釋的菌懸液，這樣依次稀釋，分別得到1：103、1：104、1：109等濃度（每個稀釋度必須更換無菌吸管） 接種混勻在無菌超凈工作臺中,采用

12、無菌操作，用1ML無菌移液管分別吸取1ML不同稀釋度懸液加入已滅菌的培養(yǎng)皿，將事先已滅菌并融化好的LBS培養(yǎng)基倒入上述培養(yǎng)皿中，每個約15-20ML。旋轉(zhuǎn)混勻，靜置凝固。每個樣品取2-3個連續(xù)適宜稀釋度，每一稀釋度重復(fù)2-3次，同時加鹽水對照。 培養(yǎng)將接種好的培養(yǎng)皿放置生化培養(yǎng)箱內(nèi)，蓋好皿蓋，平皿倒置，于37±0.5培養(yǎng)18-24H. 菌落特征菌落表面粗糙，不透明，不閃光，邊緣擴張，圓形或蔓延成波浪形、不規(guī)則形，灰白色或微黃色。 菌落計數(shù) 結(jié)果計算嗜酸乳桿菌活菌數(shù)（CFU/ML）=嗜酸乳桿菌菌落平均數(shù)×稀釋倍數(shù) 菌落計數(shù)辦法只計算符合的菌落。當(dāng)只有一個稀釋度，其菌落在30-300之間時，則以該菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)。若有兩個稀釋度，其菌落在30-300之間時，應(yīng)按兩者菌落總數(shù)之比值來決定，若其比值小于2，計算兩者的平均數(shù)乘以稀釋倍數(shù):若大于2則計數(shù)其中