飼料添加劑 液態(tài)嗜酸乳桿菌

1、Q/0900TGA泰安市國(guó)泰民安生物科技有限公司企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)Q/0900 TGA0092016飼料添加劑 液態(tài)嗜酸乳桿菌2016 - 08 - 18發(fā)布2016- 09-18實(shí)施泰安市國(guó)泰民安生物科技有限公司泰安市國(guó)泰民安生物科技有限公司發(fā)布前言本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T 1.1標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)自發(fā)布之日起有效期三年，到期應(yīng)復(fù)審。本標(biāo)準(zhǔn)由泰安市國(guó)泰民安生物科技有限公司提出并起草。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：王旺、李春利。本標(biāo)準(zhǔn)于2016-08-18首次發(fā)布。飼料添加劑 液態(tài)嗜酸乳桿菌1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了飼料添加劑液態(tài)嗜酸乳桿菌液體產(chǎn)品的術(shù)語和定義、分類和代號(hào)、要求、抽樣、

2、試驗(yàn)方法、檢驗(yàn)規(guī)則、標(biāo)簽、包裝、運(yùn)輸、貯存和保質(zhì)期。本標(biāo)準(zhǔn)適用于以嗜酸乳桿菌為菌種經(jīng)發(fā)酵、灌裝制成的飼料添加劑液態(tài)嗜酸乳桿菌液體產(chǎn)品。2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本標(biāo)準(zhǔn)的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本標(biāo)準(zhǔn)。GB 4789.3 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 大腸菌群計(jì)數(shù)GB 4789.5 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 志賀氏菌檢驗(yàn)GB 4789.10 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 金黃色葡萄球菌檢驗(yàn) GB/T 5917.1 飼料粉碎粒度測(cè)定 兩層篩篩分法GB/T 6435 飼料中水分的測(cè)定GB/T 6682 分析實(shí)驗(yàn)室用

3、水規(guī)格和試驗(yàn)方法GB 10648 飼料標(biāo)簽GB/T 13079 飼料中總砷的測(cè)定GB/T 13080 飼料中鉛的測(cè)定 原子吸收光譜法GB/T 13081 飼料中汞的測(cè)定方法GB/T 13082 飼料中鎘的測(cè)定方法GB/T 13091 飼料中沙門氏菌的檢驗(yàn)方法GB/T 13092 飼料中霉菌的檢驗(yàn)方法GB/T 14699.1 飼料 采樣GB/T 17480 飼料中的黃曲霉毒素B2的測(cè)定 酶聯(lián)免疫吸附法GB/T20191 飼料中嗜酸乳桿菌的微生物學(xué)檢驗(yàn)JJF 1070 定量包裝商品凈含量計(jì)量檢驗(yàn)規(guī)則中華人民共和國(guó)獸藥典2005年國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局第75號(hào)令定量包裝商品計(jì)量監(jiān)督管理辦法3術(shù)語和

4、定義下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。3.1雜菌目標(biāo)菌以外的菌均視為雜菌。4產(chǎn)品分類和代號(hào)產(chǎn)品分類和代號(hào)見表1表1 產(chǎn)品分類和代號(hào)通用名稱產(chǎn)品代號(hào)適用動(dòng)物飼料添加劑液態(tài)嗜酸乳桿菌GA-10養(yǎng)殖動(dòng)物飼料添加劑液態(tài)嗜酸乳桿菌GA-11養(yǎng)殖動(dòng)物5 要求5.1 感官指標(biāo) 為褐色液體，略有沉淀，無變質(zhì)、異味、異臭，有微生物發(fā)酵的特殊氣味。5.2 PH值 不高于5.05.3 衛(wèi)生指標(biāo)衛(wèi)生指標(biāo)見表2 表2 衛(wèi)生指標(biāo)項(xiàng)目指標(biāo)黃曲霉毒素B1,g/kg 10.0砷(以總砷計(jì))，mg/kg 2.0鉛（以pb計(jì)），mg/kg 20.0汞（以Hg計(jì)），mg/kg 0.1鎘(以Cd計(jì))，mg/kg 0.5雜菌率， 0.5大腸菌

5、群，個(gè)/kg 1.0×105霉菌總數(shù)，個(gè)/kg 2.0×105沙門氏菌（CFU/25克）0致病菌（腸道致病菌及致病性球菌）不得檢出5.4 技術(shù)指標(biāo)技術(shù)指標(biāo)見表3 表3 技術(shù)指標(biāo)產(chǎn)品代號(hào)嗜酸乳桿菌，CFU/Ml GA-101.0×108GA-1110.0×1095.5 凈含量符合標(biāo)簽標(biāo)注，偏差符合定量包裝商品計(jì)量監(jiān)督管理辦法的規(guī)定。6 抽樣6.1組批原料不變，同一配方、同一工藝、同一生產(chǎn)周期連續(xù)生產(chǎn)的產(chǎn)品為一個(gè)批次。6.2采樣按照GB/T 14699.1的規(guī)定進(jìn)行樣品采集。所采樣品具有代表性，避免采樣時(shí)交叉感染。采樣工具經(jīng)無菌處理，如已滅菌牛皮紙或廣口瓶、

6、金屬勺和刀。7試驗(yàn)方法7.1感官指標(biāo)樣品放置在燒杯內(nèi)，在非直射陽光、光線充足、無異味的環(huán)境中，用眼觀的方法觀察其色澤，用鼻嗅的方法檢查其氣味。7.2 PH值按獸藥典二部附錄PH值測(cè)定法的規(guī)定執(zhí)行。7.3黃曲霉毒素B1GB/T 17480規(guī)定執(zhí)行7.4 砷方法1：按GB/T 13079的規(guī)定執(zhí)行(仲裁法)方法2：按中華人民共和國(guó)獸藥典的規(guī)定執(zhí)行7.5 鉛方法1：按GB/T 13080的規(guī)定執(zhí)行(仲裁法)方法2：按中華人民共和國(guó)獸藥典的規(guī)定執(zhí)行7.6 汞按GB/T 13081的規(guī)定執(zhí)行7.7 鎘按GB/T 13082的規(guī)定執(zhí)行7.8 雜菌率按附錄A的規(guī)定執(zhí)行7.9 大腸菌群按GB 4789.3的規(guī)

7、定執(zhí)行7.10 霉菌總數(shù)按GB/T 13092的規(guī)定執(zhí)行7.11 沙門氏菌按GB/T 13091的規(guī)定執(zhí)行。7.12 志賀氏菌按GB 4789.5 的規(guī)定執(zhí)行。7.13 金黃色葡萄球菌按GB 4789.10規(guī)定執(zhí)行。7.14 嗜酸乳桿菌方法1：按GB/T 20191的規(guī)定執(zhí)行(仲裁法)方法2：按附錄A的規(guī)定執(zhí)行7.15 凈含量按JJF 1070的規(guī)定執(zhí)行。8 檢驗(yàn)規(guī)則8.1 檢驗(yàn)分類檢驗(yàn)分為出廠檢驗(yàn)和型式檢驗(yàn)。8.2 出廠檢驗(yàn) 出場(chǎng)檢驗(yàn)項(xiàng)目為感官指標(biāo)、Ph值、嗜酸乳桿菌活菌數(shù)。 檢驗(yàn)合格的，簽發(fā)“產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)合格證”。8.3 型式檢驗(yàn) 型式檢驗(yàn)項(xiàng)目為本標(biāo)準(zhǔn)“要求”中的全部項(xiàng)目。 型式檢驗(yàn)每年進(jìn)

8、行一次。有下列情況之一的必須進(jìn)行型式檢驗(yàn)： a)主要原料變化及配方有較大改變，可能影響產(chǎn)品性能時(shí)； b)工藝變化、設(shè)備改造后； c)停產(chǎn)6個(gè)月以上，重新恢復(fù)生產(chǎn)時(shí)； d)行業(yè)主管部門提出進(jìn)行型式檢驗(yàn)要求時(shí)； e)主成分指標(biāo)與上次型式檢驗(yàn)有較大差異時(shí)。 型式檢驗(yàn)由本企業(yè)化驗(yàn)室檢驗(yàn)或委托檢驗(yàn) 。8.4 判定規(guī)則 按照本標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定執(zhí)行。有一項(xiàng)指標(biāo)不符合本規(guī)則要求，再?gòu)碾p倍量的包裝中抽取樣品進(jìn)行復(fù)檢，以復(fù)檢結(jié)果為準(zhǔn)。若仍有一項(xiàng)指標(biāo)不合格，則判該批產(chǎn)品為不合格品。衛(wèi)生指標(biāo)中的微生物指標(biāo)不得復(fù)檢，直接判定該批產(chǎn)品為不合格產(chǎn)品。各項(xiàng)技術(shù)指標(biāo)中的極限數(shù)值采用修約值比較法。 若供需雙方對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量發(fā)生爭(zhēng)議時(shí)，可由

9、雙方協(xié)商，或選定法定機(jī)構(gòu)按照本標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判定。9 標(biāo)簽符合GB 10648的要求10 包裝、運(yùn)輸、貯存和保質(zhì)期10.1 包裝采用聚烯烴塑料瓶?jī)?nèi)包、瓦楞紙箱外包裝。10.2 運(yùn)輸運(yùn)輸過程防雨、防潮、防止污染、保持包裝的完整性。10.3 貯存存放在通風(fēng)、干燥、無污染的地方，避免與有毒、有害物質(zhì)混合存放。10.4 保質(zhì)期 在符合運(yùn)輸、貯存條件的情況下，原包裝產(chǎn)品保質(zhì)期6個(gè)月。附錄A (規(guī)范性附錄) 嗜酸乳桿菌及雜菌率的測(cè)定A.1原理利用LBS培養(yǎng)基對(duì)樣品中嗜酸乳桿菌活菌數(shù)進(jìn)行梯度稀釋傾注法計(jì)數(shù)。A.2培養(yǎng)基和稀釋液除非另有說明，在分析中僅使用確認(rèn)認(rèn)為分析純的試劑和符合GB/T 6682規(guī)定的三級(jí)水或相

10、當(dāng)純度的水。按本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的方法配制培養(yǎng)基或購(gòu)買商品化的產(chǎn)品。 LBS培養(yǎng)基 成分酵母浸粉5.0、胰酪蛋白胨10.0、磷酸二氫鉀6.0、硫酸亞鐵0.034、硫酸鎂0.575、葡萄糖20.0、乙酸鈉25.0、檸檬酸銨2.0、硫酸錳0.12、瓊脂15.0。A 制法稱取LBS培養(yǎng)基84.0g，在吸取吐溫-801ML和冰乙酸1.3ML,加熱攪拌溶解于1000ML蒸餾水中，調(diào)節(jié)PH值5.5（±0.2），當(dāng)日使用，無需高壓滅菌。次日使用，需118高壓滅菌15min.注明：該培養(yǎng)基溶解后有少量沉淀。 稀釋液 成分氯化鈉8.5g、蒸餾水1000ML。 制法稱取氯化鈉8.5g于1000ML蒸餾水中，充分

11、溶解，121高壓滅菌15min.備用。A.3 儀器與設(shè)備 天平：感量：0.01g 振蕩器 高壓滅溫鍋：121 生化培養(yǎng)箱A.4 樣品制備按GB/T 14699.1的規(guī)定，采取有代表性的樣品500ML，從中吸取10.00ML，加入帶玻璃珠的盛有90ML無菌生理鹽水的三角瓶中，置旋轉(zhuǎn)式搖床上200rpm充分振蕩30min,即成木葉的菌懸液，備用。A.5 測(cè)定步驟 樣品稀釋用無菌移液管吸取1ML上述母液的菌懸液加入盛有9ML無菌生理鹽水的試管中，混勻成1：102稀釋的菌懸液，這樣依次稀釋，分別得到1：103、1：104、1：109等濃度（每個(gè)稀釋度必須更換無菌吸管） 接種混勻在無菌超凈工作臺(tái)中,采用

12、無菌操作，用1ML無菌移液管分別吸取1ML不同稀釋度懸液加入已滅菌的培養(yǎng)皿，將事先已滅菌并融化好的LBS培養(yǎng)基倒入上述培養(yǎng)皿中，每個(gè)約15-20ML。旋轉(zhuǎn)混勻，靜置凝固。每個(gè)樣品取2-3個(gè)連續(xù)適宜稀釋度，每一稀釋度重復(fù)2-3次，同時(shí)加鹽水對(duì)照。 培養(yǎng)將接種好的培養(yǎng)皿放置生化培養(yǎng)箱內(nèi)，蓋好皿蓋，平皿倒置，于37±0.5培養(yǎng)18-24H. 菌落特征菌落表面粗糙，不透明，不閃光，邊緣擴(kuò)張，圓形或蔓延成波浪形、不規(guī)則形，灰白色或微黃色。 菌落計(jì)數(shù) 結(jié)果計(jì)算嗜酸乳桿菌活菌數(shù)（CFU/ML）=嗜酸乳桿菌菌落平均數(shù)×稀釋倍數(shù) 菌落計(jì)數(shù)辦法只計(jì)算符合的菌落。當(dāng)只有一個(gè)稀釋度，其菌落在30-300之間時(shí)，則以該菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)。若有兩個(gè)稀釋度，其菌落在30-300之間時(shí)，應(yīng)按兩者菌落總數(shù)之比值來決定，若其比值小于2，計(jì)算兩者的平均數(shù)乘以稀釋倍數(shù):若大于2則計(jì)數(shù)其中