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文檔簡介
1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上醫(yī)用基因工程”(專業(yè)課)復(fù)習(xí)思考題一填空題1.細(xì)菌的移動基因存在著三種類型的轉(zhuǎn)位因子包括 、 、 。2.基因工程的四大里程碑為 、 、 、 。3.基因工程的三大技術(shù)發(fā)明為 、 、 。4.Klenow酶在 情況下,呈現(xiàn)DNA聚合酶活性,在 情況下呈現(xiàn)外切酶活性。5.基因工程常用的載體有 、 、 、 。6.質(zhì)粒分離純化后,經(jīng)瓊脂糖電泳后常有三條帶,它們分別為 、 、 。7理想的質(zhì)粒克隆載體應(yīng)具備以下基本條件,如 、 、 、 。8外源基因在原核細(xì)胞中表達(dá),常用的啟動子有 、 、 、 、 。9.構(gòu)建原核表達(dá)質(zhì)粒載體應(yīng)含有基因表達(dá)的調(diào)控元件為 、 、 、 。10.基因重組的真核
2、表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞后用于篩選陽性克隆的選擇標(biāo)志基因通常為 、 、 、 。11.噬菌體包裝外源性基因的能力控制在野生型噬菌體DNA長度的 %到 %之間。12. 噬菌體的CI蛋白基因插入外源性基因的克隆為 噬菌斑,未插入外源性基因的克隆為 噬菌斑。13.在LacI標(biāo)記基因插入外源基因,經(jīng)IPTG誘導(dǎo),在X-gal培養(yǎng)基中顯 色,為 克隆,未插入基因的克隆顯 色,為 性克隆。14.強終止子的基因轉(zhuǎn)錄終止作用不依賴 因子,弱終止子的基因轉(zhuǎn)錄終止作用要依賴 因子。15.酵母真核表達(dá)載體的常見類型有 、 、 。16.基因序列經(jīng)堿基替代,缺失或插入后,可使遺傳信息產(chǎn)生三種不同的后果,分別為 、 、 。17.基
3、因改造可創(chuàng)造自然界不存在的新基因,采用的方法有 、 、 。18.基因表達(dá)的四大表達(dá)系統(tǒng)分別為 、 、 、 。19.基因工程疫苗的種類包括 、 、 。20.基因工程人源化的小分子抗體的種類有 、 、 、 、 、 。21.基因治療所利用的治療方案為 、 、 、 。22.真核細(xì)胞的基因表達(dá)順式作用元件包括 、 、 、 、 。23.點突變的基因系列在堿基替換中,若為一個嘌呤換成另一個嘌呤或一個嘧啶換成另一個嘧啶者稱 ,若一個嘌呤換成一個嘧啶或一個嘧啶換成一個嘌呤者稱 。24.基因和載體均為平末端時,兩者的連接方法有 , , 。25.基因重組體中,鑒定目的基因的存在與否可采用 法, 法, 法, 法等。二
4、是非判斷題1.DNA連接酶是一種能催化二條DNA鏈之間形成磷酸二酯鍵的酶,因此該酶既可修復(fù)基因序列中的缺口,也可修復(fù)裂口。 ( ) 2.甲基化酶能使DNA序列發(fā)生甲基化,早基化DNA的更為穩(wěn)定,被甲基化的酶切點,不易被酶切割 。 ( )3.DNA聚合酶只能發(fā)生由引物延伸的DNA聚合酶活性。 ( )4.質(zhì)粒提取后,在瓊脂糖電泳出現(xiàn)一條帶時說明質(zhì)粒提取純度高,當(dāng)為三條帶時為純度不高。 ( )5.S1酶具有補平DNA鏈粘性末端的特性。 ( )6COS位點,COS質(zhì)粒,COS細(xì)胞它們均含有用于自身環(huán)化的12個堿基的互補粘性末端。 ( )7.COS位點,COS質(zhì)粒都含有用于載體自身環(huán)化的12個堿基的互補
5、粘性末端 。 ( )8.入噬菌體的插入型載體只有一個單一限制酶切點,替換型載體有2個成對的限制性酶切點。 ( )9.入噬菌體的CI基因插入外源基因的陽性克隆為透明斑,未手稿外源基因 的陰性克隆為混濁斑 。 ( )10.cDNA文庫是包含有細(xì)胞中所有mRNA,因此該文庫能包含細(xì)胞所有的遺傳信息。 ( )11.病毒(噬菌體)及其重組體DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞的過程稱轉(zhuǎn)化。 ( )12.以噬菌體或病毒為載體攜帶外源基因?qū)胨拗骷?xì)胞稱轉(zhuǎn)染。 ( )13.原核細(xì)胞的RNA聚合酶只能識別原核 細(xì)胞的啟動子以催化RNA的合成。 ( )14.點突變時,堿基序列改變,氨基酸編碼序列不改變稱無義突變。 ( )15.原核
6、細(xì)胞和真核細(xì)胞轉(zhuǎn)錄的mRNA均具有與rRNA結(jié)合的SD序列,以利于進(jìn)行有效的轉(zhuǎn)錄。 三不定項選擇題(3分/題,共15分)1.下列哪些基因?qū)儆谝苿踊颍緼.IS B.Tn C. LTR D. LT2.下列生物體的細(xì)胞基因組哪些會有斷裂基因A.動物 B.人 C.細(xì)菌 D.噬菌體3.原核細(xì)胞基因表達(dá)的特點為A.單順反子 B.多順反子 C.轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)譯連續(xù)進(jìn)行 D .轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)譯分開分步進(jìn)行4.真核細(xì)胞基因表達(dá)的特點為A.單順反子 B.多順反子 C.轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)譯連續(xù)進(jìn)行 D .轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)譯分開分步進(jìn)行5.基因工程常用的質(zhì)粒載體為A.F質(zhì)粒 B.R質(zhì)粒 C.Col質(zhì)粒 D.部分R質(zhì)粒和Col質(zhì)粒6.識別基因序列
7、不同,但酶切后產(chǎn)生的粘性末端相同的一類酶為A.同工酶 B.同尾酶 C.同裂酶 D.同位酶7.影響限制性內(nèi)切酶活性的因素有A.DNA純度 B.DNA中GC含量 C.DNA分子結(jié)構(gòu) D.DNA甲基化程度8.DNA連接酶的功能是A.恢復(fù)3-OH與5-P之間的磷酸二酯鍵 B. 恢復(fù)缺口 C.恢復(fù)裂口 D.可使平末端與粘性末端連接9.識別序列相同,但對甲基化切點的敏感性不同的一類酶為A.同工酶 B.同尾酶 C.同裂酶 D.同位酶10.Klenow酶在有dNTP時具有的功能為A.PCR擴增的酶 B.粘末端補平 C.平末端加尾 D.連接銜接物11.逆轉(zhuǎn)錄酶的功能有A.使mRNAcDNA B.可使DNA/RN
8、A雜交鏈中的RNA降解 C.使cDNA雙鏈 D.可以用cDNA單鏈為模板進(jìn)行PCR擴增12.S1酶的功能有A.修平粘性末端 B.切除DNA中的單鏈發(fā)夾結(jié)構(gòu)C.降解單鏈DNA和RNA D.可使3和5端DNA鏈同時降解13.堿性磷酸酶的功能有A.使DNA和RNA鏈的末端磷酸化 B.切除DNA和RNA鏈的5末端C.僅使DNA鏈末端磷酸化 D.僅使DNA鏈5端脫磷酸14.dam甲基化酶能使TCAG序列中的哪個堿基發(fā)生甲基化?A.胞嘧啶 B.胸腺嘧啶 C.腺嘌呤 D.鳥嘌呤15.dcm甲基化酶能使TCAG序列中的哪個堿基發(fā)生甲基化?A.胞嘧啶 B.胸腺嘧啶 C.腺嘌呤 D.鳥嘌呤16.pBR322質(zhì)粒作
9、為基因克隆載體應(yīng)有下列何種調(diào)控元件A.AmPr和Tetr B.ori復(fù)制子 C.LacZ標(biāo)記 D.多克隆位點17. PUC質(zhì)粒作為基因克隆載體應(yīng)有下列何種調(diào)控元件A.AmPr B.ori復(fù)制子 C.LacZ標(biāo)記 D.多克隆位點18.質(zhì)粒提取后經(jīng)電泳應(yīng)屬下列何種條帶?A.1條帶 B.2條帶 C.3條帶 D.4條帶19.質(zhì)粒經(jīng)酶切后電泳應(yīng)屬下列何種條帶?A.1條帶 B.2條帶 C.3條帶 D.4條帶20.COS質(zhì)??寺≥d體應(yīng)具有下列哪些元件A. ori復(fù)制子 B. AmPr C.COS位點 D.多克隆位點21.噬菌體外包裝目的基因片段的大小應(yīng)為A.小于噬菌體DNA的50% B. 小于噬菌體DNA的
10、75%C.大于噬菌體DNA的105% D.為噬菌體DNA的75%105%22目的基因的獲得下列哪些方法為可行?A 化學(xué)合成法 B建cDNA文庫 C建基因組文庫 D基因改造23重組體中的目的基因存在與否可用下列哪些方法?A雙酶切電泳法 B PCR產(chǎn)物電泳法 C核酸探針雜交法 D免疫結(jié)合法24當(dāng)目的基因插入pBR322質(zhì)粒的Tet r區(qū)段,應(yīng)如何篩選陽性克隆?A Tet平板生長Amp平板也長 B Tet平板和Amp平板均不長C Amp平板生長 Tet平板不生長 D Tet平板生長 Amp平板不長25當(dāng)目的基因插入pBR322質(zhì)粒的Amp r區(qū)段,應(yīng)如何篩選陽性克隆?A Tet平板生長 Amp平板也
11、長 B Tet平板和 Amp平板均不長C Amp平板生長Tet平板不長 DTet平板生長Amp平板不長26下列哪些啟動子可由乳糖或IPTG誘導(dǎo)表達(dá)A Lac啟動子 B Trp啟動子 C Tac啟動子 D Lpp啟動子27構(gòu)造原核表達(dá)質(zhì)粒應(yīng)具有下列何種元件A 啟動子 B 終止子 C SD序列 D 遺傳標(biāo)記28構(gòu)建真核表達(dá)質(zhì)粒應(yīng)具有下列何種元件A 啟動子 B 終止子 C SD序列 D 遺傳標(biāo)記29原核細(xì)胞篩選陽性克隆的遺傳標(biāo)記(報告基因)A Ampr B Tet r C neo r D LacZ E TK30真核細(xì)胞篩選陽性克隆的遺傳標(biāo)記(報告基因)A Ampr B Tet r C neo r D
12、 TK E LacZ 四 名詞解釋:移動基因斷裂基因重疊基因假基因同尾酶質(zhì)??滤梗–OS)質(zhì)粒COS位點COS細(xì)胞基因組文庫cDNA文庫轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)導(dǎo)啟動子起始密碼子終止子 粘性末端終止密碼子鋅指結(jié)構(gòu) 載體 PCR. Split gene Genomic DNA Intron Exon transformation 轉(zhuǎn)錄 翻譯 順式作用元件 反式作用因子 transcriton factor 瞬時表達(dá) 穩(wěn)定表達(dá) 亮氨酸拉鏈tk基因基因突變無義突變錯義突變同義突變限制性核酸內(nèi)切酶 基因拼接基因缺失重組病毒載體重組質(zhì)粒型載體基因工程多肽疫苗基因置換基因修正基因修飾基因失活轉(zhuǎn)基因動物動物克隆基因敲除E
13、S細(xì)胞五。問答題1、 什么叫基因?何謂基因的新概念?其主要功能是什么?2、 真核細(xì)胞基因組中的基因常有內(nèi)含子存在,能否在原核細(xì)胞中表達(dá)?能,為什么?不能,為什么?3、 試述DNA分子的結(jié)構(gòu)及其意義。4、 試述cDNA文庫的構(gòu)建過程及其意義。5、 試述基因組文庫的構(gòu)建過程及其意義。6、 什么是限制性核酸內(nèi)切酶?7、 試述雙脫氧末端終止DNA測序法的原理及過程。8、 試?yán)L圖并說明大引物PCR定點誘變法的過程。9、 何謂基因工程的四大里程碑和三大技術(shù)發(fā)明?10、 基因工程常用的載體有哪些?其共同特性如何?11、 作為理想質(zhì)粒載體的基本條件有哪些?12、 什么叫插入失活,舉例說明之?13、如何從所克隆到基因重組體中鑒定目的基因的存在和
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