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1、會計學(xué)1抗酸染色標(biāo)本片抗酸染色標(biāo)本片l分枝桿菌的細胞壁內(nèi)含有大量的脂質(zhì),主要是分枝菌酸脂質(zhì),主要是分枝菌酸,它包圍在肽聚糖的外面,所以分枝桿菌一般不易著色,要經(jīng)過加熱和延長染色時間來促使其著色。但分枝桿菌中的分枝菌酸與染料結(jié)合后,就很難被酸性脫色劑脫色,故名抗抗酸染色酸染色。l齊-尼氏抗酸染色法是在加熱條件下使分枝菌酸與石炭酸復(fù)紅牢固結(jié)合成復(fù)合分枝菌酸與石炭酸復(fù)紅牢固結(jié)合成復(fù)合物物,用鹽酸酒精處理也不脫色。當(dāng)再加堿性美蘭復(fù)染后,分枝桿菌仍然為紅色紅色,而其他細菌及背景中的物質(zhì)為蘭色蘭色。一、抗酸染色原理一、抗酸染色原理 實驗方法:實驗方法:1、細菌涂片標(biāo)本的制備、細菌涂片標(biāo)本的制備 涂片涂片
2、干燥干燥 固定固定3、油鏡觀察油鏡觀察1)初染:)初染:用玻片夾夾持涂片標(biāo)本,滴加石炭酸復(fù)紅2-3滴,在火焰高處徐徐加熱,切勿沸騰,出現(xiàn)蒸汽即暫時離開,若染液蒸發(fā)減少,應(yīng)再加染液,以免干涸,加熱3-5分鐘,待標(biāo)本冷卻后用水沖洗待標(biāo)本冷卻后用水沖洗。2)脫色:)脫色: 3%鹽酸酒精脫色301;用水沖洗。3)復(fù)染復(fù)染:用堿性美蘭溶液復(fù)染1,用水沖洗后用吸水紙吸干。2、染色染色1、涂片包括涂片、干燥、固定三步。、涂片包括涂片、干燥、固定三步。 涂片涂片 干燥干燥 固定固定 石炭酸復(fù)紅維持石炭酸復(fù)紅維持 3-5 5 3%鹽酸酒精鹽酸酒精30 1 美藍復(fù)染美藍復(fù)染1 沖洗沖洗 干燥干燥 油鏡觀察油鏡觀察
3、沖洗沖洗沖洗沖洗初染初染脫色脫色復(fù)染復(fù)染抗酸菌呈紅色抗酸菌呈紅色,常堆積成團,排列無序,偶呈分枝狀生長。背景及非抗酸性細菌呈蘭色。注意事項:1、無菌操作、無菌操作2、菌種管搖勻后取菌、菌種管搖勻后取菌3、涂片均勻、涂片均勻4、初染加熱維持、初染加熱維持35分鐘,勿沸騰燒干分鐘,勿沸騰燒干5、冷卻后沖洗、冷卻后沖洗6、油鏡下從視野中找紅色抗酸菌、油鏡下從視野中找紅色抗酸菌白色念珠菌鉤端螺旋體類炭疽(枯草桿菌)類炭疽(枯草桿菌) 炭疽桿菌炭疽桿菌曲霉l分枝桿菌的細胞壁內(nèi)含有大量的脂質(zhì),主要是分枝菌酸脂質(zhì),主要是分枝菌酸,它包圍在肽聚糖的外面,所以分枝桿菌一般不易著色,要經(jīng)過加熱和延長染色時間來促使其著色。但分枝桿菌中的分枝菌酸與染料結(jié)合后,就很難被酸性脫色劑脫色,故名抗抗酸染色酸染色。l齊-尼氏抗酸染色法是在加熱條件下使分枝菌酸與石炭酸復(fù)紅牢固結(jié)合成復(fù)合分枝菌酸與石炭酸復(fù)紅牢固結(jié)合成復(fù)合物物,用鹽酸酒精處理也不脫色。當(dāng)再加堿性美蘭復(fù)染后,分枝桿菌仍然為紅色紅色,而其他細菌及背
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