衛(wèi)生化學樣品分析的一般步驟

1、本章主要內(nèi)容：本章主要內(nèi)容： 樣品的采集和保存樣品的采集和保存 樣品的處理樣品的處理 分析方法的選擇分析方法的選擇第三章 樣品分析的一般步驟一、概述一、概述二、樣品的采集原則二、樣品的采集原則三、樣品的保存三、樣品的保存四、各類樣品采集方法簡介四、各類樣品采集方法簡介第三章 樣品分析的一般步驟第三章 樣品分析的一般步驟a 總體分布要均勻，采樣才具有代表性。液體樣品要總體分布要均勻，采樣才具有代表性。液體樣品要充分搖勻，如尿樣、鮮奶等。充分搖勻，如尿樣、鮮奶等。b 要正確地確定總體，采樣才具代表性?？傮w為被檢要正確地確定總體，采樣才具代表性?？傮w為被檢驗的驗的具相同屬性的一批物質(zhì)具相同屬性的一批

2、物質(zhì)。不同屬性的物料不能構(gòu)。不同屬性的物料不能構(gòu)成一個總體。成一個總體。例：調(diào)查西安市人口的高血壓發(fā)病率，采樣要不同年例：調(diào)查西安市人口的高血壓發(fā)病率，采樣要不同年齡，不同性別設(shè)定多個采樣點齡，不同性別設(shè)定多個采樣點（一）空氣樣品（一）空氣樣品空氣中污染物空氣中污染物氣態(tài)氣態(tài)塵塵固態(tài)固態(tài)氣體（氣體（SO2、CO、NO、NO2）蒸汽（低沸點有機物，如苯、甲苯）蒸汽（低沸點有機物，如苯、甲苯）霧霧煙煙液態(tài)液態(tài)氣溶膠氣溶膠第三章 樣品分析的一般步驟使其達到能夠進行使其達到能夠進行儀器分析的濃度水平。儀器分析的濃度水平。吸收液（根據(jù)待測組分性質(zhì)選）吸收液（根據(jù)待測組分性質(zhì)選）出氣出氣氣進氣進第三章 樣

3、品分析的一般步驟（2）固體吸附劑阻留法（常用，采樣效率高）固體吸附劑阻留法（常用，采樣效率高） 利用固體吸附劑的吸附作用富集利用固體吸附劑的吸附作用富集有害物質(zhì)有害物質(zhì) 適用范圍：適用范圍：待測組分以氣態(tài)、蒸汽形式存在待測組分以氣態(tài)、蒸汽形式存在 步驟：步驟： 采樣（大量空氣通過采樣管采樣（大量空氣通過采樣管0.10.5 L/min，吸附），吸附） 洗脫（合適的有機溶劑解吸）洗脫（合適的有機溶劑解吸） 測定測定 進氣進氣 連接采樣器連接采樣器 固體吸附劑固體吸附劑 常用吸附劑：常用吸附劑： 活性炭、硅膠、分子篩、聚酰胺等活性炭、硅膠、分子篩、聚酰胺等 洗脫：洗脫：將吸附劑倒入具塞比色管中，用適

4、當?shù)纳倭坑袡C溶劑將吸附劑倒入具塞比色管中，用適當?shù)纳倭坑袡C溶劑 洗脫（洗脫（1 mL左右），然后分析。洗脫液中待測物含量比原空左右），然后分析。洗脫液中待測物含量比原空氣中大大增加，達到了富集的目的。氣中大大增加，達到了富集的目的。第三章 樣品分析的一般步驟 人、動物的體液、排泄物、分泌物、臟器組織等。最人、動物的體液、排泄物、分泌物、臟器組織等。最常測的是血樣、尿樣，其次是毛發(fā)、呼出氣、唾液、糞便常測的是血樣、尿樣，其次是毛發(fā)、呼出氣、唾液、糞便等。等。 1. 尿樣：尿樣：毒物及代謝產(chǎn)物絕大多數(shù)從尿中排出，且尿樣收毒物及代謝產(chǎn)物絕大多數(shù)從尿中排出，且尿樣收集較方便，受檢者易配合，所以應(yīng)用普遍

5、。但受飲食、運集較方便，受檢者易配合，所以應(yīng)用普遍。但受飲食、運動和用藥影響。動和用藥影響。采樣時間采樣時間 ： 24h尿樣（全日尿）：將尿樣（全日尿）：將24h尿全部尿全部收集、混合、量體積，收集、混合、量體積，加幾滴濃加幾滴濃 HNO3防腐。防腐。 班前、班中、班后尿：通過測定，了解機體接觸毒物的班前、班中、班后尿：通過測定，了解機體接觸毒物的情況。情況。 晨尿（常代替晨尿（常代替24h尿）尿） 2. 血樣血樣 血液中有毒物質(zhì)的濃度可反映肌體近期接血液中有毒物質(zhì)的濃度可反映肌體近期接觸毒物的程度，常與機體吸收的毒物呈正相關(guān)，但采樣觸毒物的程度，常與機體吸收的毒物呈正相關(guān)，但采樣麻煩，應(yīng)用不

6、如尿樣普遍。麻煩，應(yīng)用不如尿樣普遍。 采樣方法：采樣方法：少量：從手指、耳垂?。簧倭浚簭氖种?、耳垂取； 0.5ml 以上：肘部抽靜脈血。以上：肘部抽靜脈血。 采樣時間：采樣時間：早餐前；班前、班后。早餐前；班前、班后。 3、毛發(fā)、毛發(fā) 每段毛發(fā)能反映不同時期營養(yǎng)吸收情況和每段毛發(fā)能反映不同時期營養(yǎng)吸收情況和判斷有無有毒元素進入體內(nèi)及其積累程度。判斷有無有毒元素進入體內(nèi)及其積累程度。 采樣方法：采樣方法：取枕部取枕部23 cm內(nèi)的發(fā)段。（可反映近期內(nèi)的發(fā)段。（可反映近期情況）情況）第三章 樣品分析的一般步驟第三章 樣品分析的一般步驟一、樣品處理的目的一、樣品處理的目的二、樣品處理的方法二、樣品處

7、理的方法三、干擾成分的分離三、干擾成分的分離第三章 樣品分析的一般步驟第三章 樣品分析的一般步驟第三章 樣品分析的一般步驟常用的消常用的消化液組合化液組合操作或特點操作或特點適用范圍及注意事項適用范圍及注意事項硝酸硝酸消化消化2. 硝酸硝酸-硫酸硫酸消化法消化法濃濃 HNO3與與 試樣共沸至棕紅試樣共沸至棕紅色氣體冒完，溶液呈無色透色氣體冒完，溶液呈無色透明為止。明為止。 硫酸沸點高（硫酸沸點高（338 C ），不），不易揮發(fā)，與試樣的共沸溫度易揮發(fā)，與試樣的共沸溫度高、時間長，所以消化效果高、時間長，所以消化效果好。好。濃濃 HNO3與與 試樣共沸至較小試樣共沸至較小體積，再補加硫酸，加熱至

8、體積，再補加硫酸，加熱至硫酸白煙冒盡，繼續(xù)消化至硫酸白煙冒盡，繼續(xù)消化至溶液呈無色透明。溶液呈無色透明。 濃濃 HNO3沸點低，消化能力弱沸點低，消化能力弱些，難消化的樣品不易用些，難消化的樣品不易用 小火加熱，延長加熱時間，小火加熱，延長加熱時間，可使消化徹底，并節(jié)省濃可使消化徹底，并節(jié)省濃 HNO3 ，減小空白值。，減小空白值。 加去氮劑尿素、草酸銨等加去氮劑尿素、草酸銨等共沸，使殘留氮氧化物轉(zhuǎn)變成共沸，使殘留氮氧化物轉(zhuǎn)變成一氧化氮揮發(fā)除去。一氧化氮揮發(fā)除去。適用于含量少、易揮發(fā)的微量適用于含量少、易揮發(fā)的微量元素的試樣處理。元素的試樣處理。常用的消化液常用的消化液組合組合操作和注意事項操

9、作和注意事項適用范圍適用范圍 3. 硝酸硝酸-高氯高氯酸消化酸消化 4. 硝酸硝酸-硫酸硫酸-高氯酸高氯酸（或（或H2O2）高氯酸氧化能力強，對脂肪、碳水化合高氯酸氧化能力強，對脂肪、碳水化合物等有機物破壞能力強。物等有機物破壞能力強。 先加硝酸消化，冷卻后再加混酸加熱先加硝酸消化，冷卻后再加混酸加熱消化。消化。 補加硝酸時，補加硝酸時， 應(yīng)將試液離開熱源，冷應(yīng)將試液離開熱源，冷卻后再補加卻后再補加 。因高氯酸高溫下易爆炸，應(yīng)注意：因高氯酸高溫下易爆炸，應(yīng)注意： 通風櫥常清洗；通風櫥常清洗； 補加時應(yīng)將消化液冷卻至補加時應(yīng)將消化液冷卻至5060 C，切記不可高溫下加入。切記不可高溫下加入。 用

10、于消化較用于消化較難消化的樣難消化的樣品品 用于消化難用于消化難消化的樣品消化的樣品第三章 樣品分析的一般步驟 濕消化法注意事項：濕消化法注意事項： 消化必須在通風櫥中進行，因消化過程消化必須在通風櫥中進行，因消化過程中產(chǎn)生大量的酸霧、氮和硫的氧化物，有很強中產(chǎn)生大量的酸霧、氮和硫的氧化物，有很強的刺激性、腐蝕性和毒性。的刺激性、腐蝕性和毒性。 均需小火平穩(wěn)加熱。均需小火平穩(wěn)加熱。第三章 樣品分析的一般步驟方方 法法原原 理理適用范圍適用范圍 溶劑萃取法溶劑萃取法（液液萃?。ㄒ阂狠腿》ǎ┓ǎ?超臨界流體超臨界流體萃取萃取固相萃取法固相萃取法（液固萃取（液固萃取法）法） 利用物質(zhì)在兩種互不相溶的

11、利用物質(zhì)在兩種互不相溶的溶劑中分配情況不同而進行溶劑中分配情況不同而進行分離分離用超臨界流體作萃取劑，從用超臨界流體作萃取劑，從復(fù)雜樣品中分離提取待測組復(fù)雜樣品中分離提取待測組分的提取分析技術(shù)。分的提取分析技術(shù)。利用色譜柱固定相保留被測利用色譜柱固定相保留被測組分，然后少量溶劑將其洗組分，然后少量溶劑將其洗脫下來，達到分離、富集的脫下來，達到分離、富集的方法。方法。 從液體中分離從液體中分離有機物，也可分有機物，也可分離金屬離子離金屬離子分離烴類、脂溶分離烴類、脂溶性化合物（如：性化合物（如：香料）香料）分離富集有機物分離富集有機物方方 法法原原 理理適用范圍適用范圍 揮發(fā)揮發(fā) 蒸餾蒸餾 沉淀

12、、沉淀、共沉淀共沉淀索氏提取索氏提取 離心離心 利用物質(zhì)揮發(fā)性的差異進利用物質(zhì)揮發(fā)性的差異進行分離，使待測組分生成行分離，使待測組分生成揮發(fā)性組分從試樣中逸出揮發(fā)性組分從試樣中逸出利用物質(zhì)利用物質(zhì) 沸點的不同進行沸點的不同進行分離，通過蒸餾，將沸點分離，通過蒸餾，將沸點較低的待測組分蒸出而與較低的待測組分蒸出而與干擾組分分離干擾組分分離溶度積原理溶度積原理 組分在不同溶劑中的溶解組分在不同溶劑中的溶解度不同度不同分子量或密度不同分子量或密度不同分離常溫下有揮發(fā)分離常溫下有揮發(fā)性或經(jīng)處理可變成性或經(jīng)處理可變成揮發(fā)性物質(zhì)的組分揮發(fā)性物質(zhì)的組分 分離沸點不同的有分離沸點不同的有機物機物分離金屬離子分

13、離金屬離子 從固體或粘稠試從固體或粘稠試樣中提取有機物樣中提取有機物分離不同相態(tài)或分分離不同相態(tài)或分子量相差較大的物子量相差較大的物質(zhì)質(zhì) 是衛(wèi)生分析常用的經(jīng)典分離方法是衛(wèi)生分析常用的經(jīng)典分離方法 。 方法：方法：用分液漏斗操作。水層（試液）中加入不相混用分液漏斗操作。水層（試液）中加入不相混溶的有機溶劑。經(jīng)振搖，待測組分進入有機相，不溶于有溶的有機溶劑。經(jīng)振搖，待測組分進入有機相，不溶于有機相的干擾成份尚在水相，與待測組分分離。機相的干擾成份尚在水相，與待測組分分離。水相水相有機相有機相優(yōu)點：優(yōu)點： 設(shè)備簡單；設(shè)備簡單； 操作簡單；分離效果好。操作簡單；分離效果好。缺點：缺點： 使用大量易揮發(fā)

14、且有毒的有機溶劑。使用大量易揮發(fā)且有毒的有機溶劑。 應(yīng)用：應(yīng)用： 如：直接萃取水、尿樣、血樣等液體樣品中有機物污如：直接萃取水、尿樣、血樣等液體樣品中有機物污染物。染物。萃取劑的選擇：萃取劑的選擇： 萃取劑與組分萃取劑與組分“相似相溶相似相溶”，即選和組分極性相，即選和組分極性相近，對組分溶解度大的有機溶劑。近，對組分溶解度大的有機溶劑。 如：蔬菜中滅多威的提取、分離凈化。如：蔬菜中滅多威的提取、分離凈化。試樣均漿、稱重試樣均漿、稱重 乙酸乙酯乙酸乙酯 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā) 蒸餾水溶解蒸餾水溶解 提取提取 除溶劑除溶劑 殘渣殘渣 石油醚萃取石油醚萃取 氯仿萃取氯仿萃取3次次 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā) 定容

15、定容 5mL GC 分析分析 色素雜質(zhì)色素雜質(zhì) 滅多威滅多威 溶劑溶劑 用超臨界流體作萃取劑，從復(fù)雜樣品中分離提取待用超臨界流體作萃取劑，從復(fù)雜樣品中分離提取待測組分的提取分析技術(shù)。測組分的提取分析技術(shù)。l超臨界流體超臨界流體 介于氣體和液體之間的一種非氣態(tài)非液態(tài)的介于氣體和液體之間的一種非氣態(tài)非液態(tài)的物質(zhì)。這類物態(tài)只能在溫度和壓力超過臨界點時才能存在。物質(zhì)。這類物態(tài)只能在溫度和壓力超過臨界點時才能存在。l特性：密度接近液體，易溶解待測組分；粘度、擴散系數(shù)接特性：密度接近液體，易溶解待測組分；粘度、擴散系數(shù)接近氣體，傳質(zhì)速率快。近氣體，傳質(zhì)速率快。l常用超臨界流體：液態(tài)二氧化碳、液態(tài)乙烯、液態(tài)

16、乙烷等。常用超臨界流體：液態(tài)二氧化碳、液態(tài)乙烯、液態(tài)乙烷等。l用二氧化碳作超臨界流體的優(yōu)點：臨界溫度低、易操作、化用二氧化碳作超臨界流體的優(yōu)點：臨界溫度低、易操作、化學性質(zhì)不活潑、無毒、無嗅、無味、無污染。學性質(zhì)不活潑、無毒、無嗅、無味、無污染。第三章 樣品分析的一般步驟盛裝固體顆粒的玻璃管稱為盛裝固體顆粒的玻璃管稱為層析柱層析柱或或色譜柱色譜柱裝在層析柱中的固體顆粒稱為裝在層析柱中的固體顆粒稱為固定相固定相淋洗用的溶劑稱為淋洗用的溶劑稱為洗脫劑洗脫劑或或流動相流動相 如：富集水中有機磷農(nóng)藥。用如：富集水中有機磷農(nóng)藥。用1 L水通過水通過GDX502吸附小柱，農(nóng)藥被吸附，用吸附小柱，農(nóng)藥被吸附

17、，用10 mL丙酮洗脫，緩緩吹氮揮丙酮洗脫，緩緩吹氮揮發(fā)溶劑，用丙酮定容發(fā)溶劑，用丙酮定容5ml，富集倍數(shù)，富集倍數(shù)200倍。倍。 如：分離尿中可的松，尿液通過如：分離尿中可的松，尿液通過C18小柱，可的松及小柱，可的松及尿液中雜質(zhì)均被保留在柱子上，先用尿液中雜質(zhì)均被保留在柱子上，先用2mL CH3OH：H2O（20：80）洗脫雜質(zhì)，再用）洗脫雜質(zhì)，再用2ml CH3OH洗脫可的松，用洗脫可的松，用CH3OH定容定容2ml測定。測定。 第三章 樣品分析的一般步驟第三章 樣品分析的一般步驟 單位：常量組分，單位：常量組分，%。 微量、痕量組分，用微量、痕量組分，用g/g、 ng/g、 pg/g

18、等表示。等表示。 例：有一例：有一2.6g水果樣，測得含水果樣，測得含3.6g鋅鋅 XZn = 3.6(g)/2.6(g) = 1.4(g/g) (g/kg) siimmX 待測組分的質(zhì)量待測組分的質(zhì)量樣品的質(zhì)量樣品的質(zhì)量 1. 用物質(zhì)的量濃度表示，單位為：用物質(zhì)的量濃度表示，單位為：mol/L、mmol/L、mol/L。 2. 若物質(zhì)的相對分子量未知，則可用質(zhì)量濃度表示，若物質(zhì)的相對分子量未知，則可用質(zhì)量濃度表示，單位為：單位為：g/L、mg/L、g/L。 衛(wèi)生檢驗工作中常用質(zhì)量濃度表示分析結(jié)果。衛(wèi)生檢驗工作中常用質(zhì)量濃度表示分析結(jié)果。 Ci = mi/Vs mi、Vs分別代表待測組分的質(zhì)量和試樣的體積。單分別代表待測組分的質(zhì)量和試樣的體積。單位為：位為：g/L、mg/L、g/L。 1. 質(zhì)量體積分數(shù)表示法：每立方米空氣含被測污染質(zhì)量體積分數(shù)表示法：每立方米空氣含被測污