(完整版)血紅蛋白的提取和分離習(xí)題帶答案

1、1課題課題 3 3 血紅蛋白的提取和分離血紅蛋白的提取和分離【學(xué)習(xí)目標(biāo)學(xué)習(xí)目標(biāo)】1、簡述蛋白質(zhì)提取和分離的基本原理2、理解蛋白質(zhì)提取與分離的實驗操作過程【重點與難點重點與難點】重點：蛋白質(zhì)提取和分離的基本原理難點：蛋白質(zhì)提取與分離的實驗操作（凝膠色譜操作）過程【知識鏈接知識鏈接】1. 血紅蛋白存在于何種細(xì)胞？其特性和作用分別是什么？2. 為何不選用雞血做實驗材料？3. 分離不同種類蛋白質(zhì)的依據(jù)是什么？【自主學(xué)習(xí)內(nèi)容一】基礎(chǔ)知識（記憶）【自主學(xué)習(xí)內(nèi)容一】基礎(chǔ)知識（記憶）1._凝膠色譜法：凝膠色譜法也稱彳，是根據(jù)分離蛋白質(zhì)的有效方法。凝膠實際上是一些由構(gòu)成的多孔球體，在小球體內(nèi)部有許多貫穿的通道，

2、相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子通過凝膠時的速度不同，相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)由于能夠路程較移動速度；而相對分子質(zhì)量較大的的蛋白質(zhì)，只能在移動，路，移動速度 O O2緩沖液緩沖液通常是由 12 種緩沖劑（如 NaHCO、（NH）SO）溶解于水中配制3424而成；其作用是 o o3._ 電泳：電泳是指電泳利用了待分離樣品中各分子以及，使帶電分子產(chǎn)生不同的，從而實現(xiàn)樣品中各種分子的分離。兩種常用的電泳方法是和 o在測定蛋白質(zhì)分子量時通常使用，其中 SDS 的作用是，。蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠電泳中的遷移率取決于它以及等因素?！咀灾鲗W(xué)習(xí)內(nèi)容二】實驗操作（【自主學(xué)習(xí)內(nèi)容二】實驗操作（凝膠色譜法）1._ 蛋白

3、質(zhì)的提取和分離一般分四步：、和 o o2樣品處理（1）紅細(xì)胞的洗滌：洗滌紅細(xì)胞的目的采集的血樣要及時通過采用的方法使紅液分層，用膠頭吸管吸出上層透明的黃2色，將下層紅細(xì)胞倒入燒杯，再加入，緩慢攪拌低速離心，如此重復(fù)三次，直到，表明紅細(xì)胞憶洗滌干凈。注意：離心轉(zhuǎn)速及離心時間不能過長，否則，達不到分離效果。（2）血紅蛋白的釋放：原理是當(dāng)外界溶液濃度低于細(xì)胞內(nèi)液濃度時，細(xì)胞，紅細(xì)胞由于沒有的保護，而，釋放出血紅蛋白；使用的試劑。（3）分離血紅蛋白溶液：將攪拌好的混合溶液離心后，試管中的溶液分為 4 層。第一層為無色透明的，第 2 層為白色薄層固體，是，第 3 層是紅色透明的液體,這是，第 4 層是紅

4、細(xì)胞破碎物沉淀物（其他雜質(zhì)，色）。將試管中的液體用濾紙過濾，除去，于分液漏斗中靜置片刻后，分出層的紅色透明液體。（4）透析：取 2mL 的血紅蛋白溶液裝中，將透析袋放入盛有 300mL 的物質(zhì)量濃度為中（pH 為），透析 12h。透析可以去除樣品中的雜質(zhì)，或用于。3.凝膠色譜操作首先要;第二步是，因為，因此裝柱前需要根據(jù)色譜柱的內(nèi)體積計算所需的凝膠量。在裝填凝膠柱時，不得有，避免影響分離效果；第三步?！竞献魈骄俊俊竞献魈骄俊?凝膠色譜分離蛋白質(zhì)的原理是怎樣的？2. 根據(jù)凝膠色譜分離的原理分析，在裝填凝膠時要緊密、均勻的原因。3課題課題 3 3 血紅蛋白的提取和分離當(dāng)堂檢測血紅蛋白的提取和分離當(dāng)

5、堂檢測2.利用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)，最先洗脫的蛋白質(zhì)特點是（）A.相對分子質(zhì)量大的 B.溶解度高的 C.相對分子質(zhì)量小的 D.所帶電荷多的3凝膠色譜法中所用的凝膠化學(xué)本質(zhì)大多是（）A.糖類化合物 B.脂質(zhì) C.蛋白質(zhì) D.核酸4.相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)在凝膠中的進行過程可表示為圖中哪一個（）AKQ【）5用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時，分子量大的蛋白質(zhì)（）A.路程較長，移動速度較慢 B.路程較長，移動速度較快C.路程較短，移動速度較慢 D.路程較短，移動速度較快6.能進入凝膠內(nèi)部通道的蛋白質(zhì)是指（）A.相對分子質(zhì)量大的 B.吸附性高的 C.相對分子質(zhì)量小的 D.溶解度低的7在對蛋白質(zhì)進行洗脫時，使用

6、的試劑是A.蒸餾水 B.生理鹽水 C.緩沖液 D.飽和磷酸鹽溶液8緩沖液的作用是在一定范圍內(nèi)，抵制外界的影響來維持下列哪一項狀態(tài)基本不變的A.溫度 B.pHC.滲透壓 D.氧氣濃度9初步分離血紅蛋白的實驗中用到的緩沖溶液為（）A.HCONaHC0 緩沖液 B.NHOHNHCl 緩沖液23344C.CHCOOHCHCOONa 緩沖液 D.HP0 緩沖液333410.蛋白質(zhì)提取和分離分為哪幾步（）A 樣品處理、凝膠色譜操作、SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳 B.樣品處理、凝膠色譜操作、純化 C.樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定 D.樣品處理、純化、粗分離、純度鑒定11. 血紅蛋白因含有什么物質(zhì)而呈紅色（）

7、A.OB.COC.Mg2+D.血紅素12. 將攪拌好的混合液離心來分離血紅蛋白溶液時，第二層是（）A.甲苯 B.血紅蛋白水溶液 C.脂溶性物質(zhì)的沉淀層 D.其他雜質(zhì)的沉淀13.下列說法不正確的是（）A. 血紅蛋白在釋放時，加蒸餾水到原血液的體積，再加 40%體積的甲苯，充分?jǐn)嚢鐱. 血紅蛋白溶液離心后分為 4 層，第 1 層為白色薄層固體C. 血紅蛋白溶液離心后分為 4 層，第 4 層為暗紅色沉淀物D. 血紅蛋白溶液離心后分為 4 層，第 3 層為紅色透明液體，這是血紅蛋白的水溶液14. 下列操作正確的是（）4A.分離紅細(xì)胞時采用低速長時間離心 B.紅細(xì)胞釋放出血紅蛋白只需要加入蒸餾水就可C.

8、分離血紅蛋白溶液是低速短時間離心 D.透析時要用 20mmol/1 的磷酸緩沖液，透析 12h15. 使用十二烷基硫酸鈉一聚丙烯酰胺電泳過程中，不同蛋白質(zhì)的遷移速度完全取決于A.電荷的多少 B.分子的大小 C.肽鏈的多少 D.分子形狀的差異16洗滌紅細(xì)胞的目的是()A.去除血清 B.去除雜蛋白 C.除去血小板 D.除去水17. 洗滌紅細(xì)胞時，分離所用的方法為()A.低速長時間離心 B.低速短時間離心 C.高速長時間離心 D.高速短時間離心18. SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法中加入 SDS 的作用是()A.增大蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量 B.改變蛋白質(zhì)的形狀C.掩蓋不同種蛋白質(zhì)問的電荷差別 D.減少蛋白

9、質(zhì)的相對分子質(zhì)量19. 下列有關(guān)凝膠色譜法中樣品的加入和洗脫的敘述中，正確的是()A.先加入 1mL 透析后的樣品 B.加樣前要使緩沖液緩慢下降，全部流出C.如果紅色區(qū)帶均勻一致地移動，說明色譜柱制作成功 D.洗脫時可以用緩沖液也可以用清水20. 在下列哪一種條件下生物大分子具有的可解離的基團會帶上正電或負(fù)電()A.一定溫度 B.一定 pHC.定壓強 D.一定容器21. 電泳時帶電粒子在電場的作用下，移動所向的電極的方向與其所帶電荷是()A.相同 B.相反 C.相對 D.相向22. 樣品的加入和洗脫的操作不正確的是()A. 加樣前，打開色譜柱下端的流出口，使柱內(nèi)凝膠面上的緩沖液緩慢下降到凝膠面

10、的下面B. 加樣后，打開下端出口，使樣品滲入凝膠床內(nèi)C. 等樣品完全進入凝膠層后，關(guān)閉下端出口D. 用吸管小心的將 1ml 透析后的樣品加到色譜柱的頂端，不要破壞凝膠面23. 人體正常的血紅蛋白中應(yīng)含有 Fe2+，若誤食亞硝酸鹽，則導(dǎo)致血紅蛋白中的 Fe2+。轉(zhuǎn)化為Fe3+，產(chǎn)生高價鐵血紅蛋白而中毒。服用維生素 C 可解除亞硝酸鹽中毒。在維生素 C 參與的反應(yīng)中()A.亞硝酸鹽是還原劑 B.維生素 C 是氧化劑C.亞硝酸鹽被氧化 D.維生素 C 將 Fe3+還原為 Fe2+24. 加有少量檸檬酸鈉(防止血液凝固)的豬血分裝于標(biāo)號、的試管中，隨后依次加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 0.3%、0.9%和 1.5%

11、的氯化鈉溶液稀釋，30min 后離心。下列敘述中，正確的是()A. 和試管的上清液中有血紅蛋白，沉淀中都有紅細(xì)胞B. 和試管的上清液呈淡黃色，沉淀中均有皺縮的紅細(xì)胞C. 和試管的沉淀中分別有紅細(xì)胞的碎片和皺縮的紅細(xì)胞D. 和試管的上清液是血清(血清與血漿的主要區(qū)別是血清中不含纖維蛋白原)25. 在血紅蛋白的整個提取過程中，不斷用磷酸緩沖液處理的目的是()A.磷酸緩沖液會加速血紅蛋白的提取過程 B.血紅蛋白是一種兩性物質(zhì)，需要酸中和C.防止血紅蛋白被 02氧化 D.讓血紅蛋白處在穩(wěn)定的 pH 范圍內(nèi)，維持其結(jié)構(gòu)和功能526. 下列有關(guān)提取和分離血紅蛋白的程度敘述錯誤的是()A.樣品的處理就是通過

12、一系列操作收集到血紅蛋白溶液B.通過透析可以去除樣品中分子質(zhì)量較大的雜質(zhì)，此為樣品的粗提取C.可通過凝膠色譜法將相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去，即樣品的純化D.可通過 SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定血紅蛋白的純度27選用紅細(xì)胞作分離蛋白質(zhì)的實驗材料，下列是其優(yōu)點的是()A.血紅蛋白是有色蛋白 B.紅細(xì)胞無細(xì)胞核C.紅細(xì)胞蛋白質(zhì)含量高 D.紅細(xì)胞 DNA 含量高28下面關(guān)于對血紅蛋白提取和分離的樣品的處理措施中，不正確的是()A. 采集血樣后要高速短時問離心獲得血細(xì)胞B. 洗滌三次后如上清液仍有黃色，可增加洗滌次數(shù)，否則血漿蛋白無法除凈。C. 在蒸餾水和甲苯的作用下，細(xì)胞破裂，釋放出血紅蛋白D. 釋

13、放血紅蛋白后再經(jīng)過離心，就可以使血紅蛋白和其他雜質(zhì)分離開來29下列有關(guān)提取和分離血紅蛋白的過程的敘述中，不正確的是()A. 樣品的處理就是通過一系列操作收集到血紅蛋白溶液B. 通過透析可以去除樣品中相對分子質(zhì)量較大的雜質(zhì)，此為樣品的粗提取C. 可通過凝膠色譜法將相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去，即樣品的純化D. 可通過 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定血紅蛋白的純度30雄性激素是小分子脂溶性物質(zhì)，很容易穿過細(xì)胞膜。睪丸每天分泌的雄性激素約 7mg，其中約 2呈游離狀態(tài)， 其余在血中與血漿蛋白呈可逆性結(jié)合。 下列有關(guān)雄性激素與血漿蛋白結(jié)合后的作用的敘述中，不正確的是()A使其不容易通過腎臟排出 B.使其不容易進入細(xì)胞C.使其有效濃度處于特定水平 D.抑制雄性激素發(fā)揮作用31.紅細(xì)胞含有大量的血紅蛋白，紅細(xì)胞的機能主要是由血紅蛋白完成，血紅蛋白的主要功能是攜帶氧氣或二氧化碳，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液進行實驗，來提取和分離血紅蛋白，請回答下列有關(guān)問題：(1)_ 血紅蛋白提取和分離的程度可分為四步：、和。(2)實驗前取新鮮的血液，要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉，取血回來，馬上進行離心，收集血紅蛋白溶液。加入檸檬酸鈉的目的是。以上