(完整版)血紅蛋白的提取和分離習(xí)題帶答案

1、1課題課題 3 3 血紅蛋白的提取和分離血紅蛋白的提取和分離【學(xué)習(xí)目標(biāo)學(xué)習(xí)目標(biāo)】1、簡述蛋白質(zhì)提取和分離的基本原理2、理解蛋白質(zhì)提取與分離的實(shí)驗(yàn)操作過程【重點(diǎn)與難點(diǎn)重點(diǎn)與難點(diǎn)】重點(diǎn)：蛋白質(zhì)提取和分離的基本原理難點(diǎn)：蛋白質(zhì)提取與分離的實(shí)驗(yàn)操作（凝膠色譜操作）過程【知識鏈接知識鏈接】1. 血紅蛋白存在于何種細(xì)胞？其特性和作用分別是什么？2. 為何不選用雞血做實(shí)驗(yàn)材料？3. 分離不同種類蛋白質(zhì)的依據(jù)是什么？【自主學(xué)習(xí)內(nèi)容一】基礎(chǔ)知識（記憶）【自主學(xué)習(xí)內(nèi)容一】基礎(chǔ)知識（記憶）1._凝膠色譜法：凝膠色譜法也稱彳，是根據(jù)分離蛋白質(zhì)的有效方法。凝膠實(shí)際上是一些由構(gòu)成的多孔球體，在小球體內(nèi)部有許多貫穿的通道，

2、相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子通過凝膠時(shí)的速度不同，相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)由于能夠路程較移動(dòng)速度；而相對分子質(zhì)量較大的的蛋白質(zhì)，只能在移動(dòng)，路，移動(dòng)速度 O O2緩沖液緩沖液通常是由 12 種緩沖劑（如 NaHCO、（NH）SO）溶解于水中配制3424而成；其作用是 o o3._ 電泳：電泳是指電泳利用了待分離樣品中各分子以及，使帶電分子產(chǎn)生不同的，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離。兩種常用的電泳方法是和 o在測定蛋白質(zhì)分子量時(shí)通常使用，其中 SDS 的作用是，。蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠電泳中的遷移率取決于它以及等因素?！咀灾鲗W(xué)習(xí)內(nèi)容二】實(shí)驗(yàn)操作（【自主學(xué)習(xí)內(nèi)容二】實(shí)驗(yàn)操作（凝膠色譜法）1._ 蛋白

3、質(zhì)的提取和分離一般分四步：、和 o o2樣品處理（1）紅細(xì)胞的洗滌：洗滌紅細(xì)胞的目的采集的血樣要及時(shí)通過采用的方法使紅液分層，用膠頭吸管吸出上層透明的黃2色，將下層紅細(xì)胞倒入燒杯，再加入，緩慢攪拌低速離心，如此重復(fù)三次，直到，表明紅細(xì)胞憶洗滌干凈。注意：離心轉(zhuǎn)速及離心時(shí)間不能過長，否則，達(dá)不到分離效果。（2）血紅蛋白的釋放：原理是當(dāng)外界溶液濃度低于細(xì)胞內(nèi)液濃度時(shí)，細(xì)胞，紅細(xì)胞由于沒有的保護(hù)，而，釋放出血紅蛋白；使用的試劑。（3）分離血紅蛋白溶液：將攪拌好的混合溶液離心后，試管中的溶液分為 4 層。第一層為無色透明的，第 2 層為白色薄層固體，是，第 3 層是紅色透明的液體,這是，第 4 層是紅

4、細(xì)胞破碎物沉淀物（其他雜質(zhì)，色）。將試管中的液體用濾紙過濾，除去，于分液漏斗中靜置片刻后，分出層的紅色透明液體。（4）透析：取 2mL 的血紅蛋白溶液裝中，將透析袋放入盛有 300mL 的物質(zhì)量濃度為中（pH 為），透析 12h。透析可以去除樣品中的雜質(zhì)，或用于。3.凝膠色譜操作首先要;第二步是，因?yàn)?，因此裝柱前需要根據(jù)色譜柱的內(nèi)體積計(jì)算所需的凝膠量。在裝填凝膠柱時(shí)，不得有，避免影響分離效果；第三步?！竞献魈骄俊俊竞献魈骄俊?凝膠色譜分離蛋白質(zhì)的原理是怎樣的？2. 根據(jù)凝膠色譜分離的原理分析，在裝填凝膠時(shí)要緊密、均勻的原因。3課題課題 3 3 血紅蛋白的提取和分離當(dāng)堂檢測血紅蛋白的提取和分離當(dāng)

5、堂檢測2.利用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)，最先洗脫的蛋白質(zhì)特點(diǎn)是（）A.相對分子質(zhì)量大的 B.溶解度高的 C.相對分子質(zhì)量小的 D.所帶電荷多的3凝膠色譜法中所用的凝膠化學(xué)本質(zhì)大多是（）A.糖類化合物 B.脂質(zhì) C.蛋白質(zhì) D.核酸4.相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)在凝膠中的進(jìn)行過程可表示為圖中哪一個(gè)（）AKQ【）5用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時(shí)，分子量大的蛋白質(zhì)（）A.路程較長，移動(dòng)速度較慢 B.路程較長，移動(dòng)速度較快C.路程較短，移動(dòng)速度較慢 D.路程較短，移動(dòng)速度較快6.能進(jìn)入凝膠內(nèi)部通道的蛋白質(zhì)是指（）A.相對分子質(zhì)量大的 B.吸附性高的 C.相對分子質(zhì)量小的 D.溶解度低的7在對蛋白質(zhì)進(jìn)行洗脫時(shí)，使用

6、的試劑是A.蒸餾水 B.生理鹽水 C.緩沖液 D.飽和磷酸鹽溶液8緩沖液的作用是在一定范圍內(nèi)，抵制外界的影響來維持下列哪一項(xiàng)狀態(tài)基本不變的A.溫度 B.pHC.滲透壓 D.氧氣濃度9初步分離血紅蛋白的實(shí)驗(yàn)中用到的緩沖溶液為（）A.HCONaHC0 緩沖液 B.NHOHNHCl 緩沖液23344C.CHCOOHCHCOONa 緩沖液 D.HP0 緩沖液333410.蛋白質(zhì)提取和分離分為哪幾步（）A 樣品處理、凝膠色譜操作、SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳 B.樣品處理、凝膠色譜操作、純化 C.樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定 D.樣品處理、純化、粗分離、純度鑒定11. 血紅蛋白因含有什么物質(zhì)而呈紅色（）

7、A.OB.COC.Mg2+D.血紅素12. 將攪拌好的混合液離心來分離血紅蛋白溶液時(shí)，第二層是（）A.甲苯 B.血紅蛋白水溶液 C.脂溶性物質(zhì)的沉淀層 D.其他雜質(zhì)的沉淀13.下列說法不正確的是（）A. 血紅蛋白在釋放時(shí)，加蒸餾水到原血液的體積，再加 40%體積的甲苯，充分?jǐn)嚢鐱. 血紅蛋白溶液離心后分為 4 層，第 1 層為白色薄層固體C. 血紅蛋白溶液離心后分為 4 層，第 4 層為暗紅色沉淀物D. 血紅蛋白溶液離心后分為 4 層，第 3 層為紅色透明液體，這是血紅蛋白的水溶液14. 下列操作正確的是（）4A.分離紅細(xì)胞時(shí)采用低速長時(shí)間離心 B.紅細(xì)胞釋放出血紅蛋白只需要加入蒸餾水就可C.

8、分離血紅蛋白溶液是低速短時(shí)間離心 D.透析時(shí)要用 20mmol/1 的磷酸緩沖液，透析 12h15. 使用十二烷基硫酸鈉一聚丙烯酰胺電泳過程中，不同蛋白質(zhì)的遷移速度完全取決于A.電荷的多少 B.分子的大小 C.肽鏈的多少 D.分子形狀的差異16洗滌紅細(xì)胞的目的是()A.去除血清 B.去除雜蛋白 C.除去血小板 D.除去水17. 洗滌紅細(xì)胞時(shí)，分離所用的方法為()A.低速長時(shí)間離心 B.低速短時(shí)間離心 C.高速長時(shí)間離心 D.高速短時(shí)間離心18. SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法中加入 SDS 的作用是()A.增大蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量 B.改變蛋白質(zhì)的形狀C.掩蓋不同種蛋白質(zhì)問的電荷差別 D.減少蛋白

9、質(zhì)的相對分子質(zhì)量19. 下列有關(guān)凝膠色譜法中樣品的加入和洗脫的敘述中，正確的是()A.先加入 1mL 透析后的樣品 B.加樣前要使緩沖液緩慢下降，全部流出C.如果紅色區(qū)帶均勻一致地移動(dòng)，說明色譜柱制作成功 D.洗脫時(shí)可以用緩沖液也可以用清水20. 在下列哪一種條件下生物大分子具有的可解離的基團(tuán)會帶上正電或負(fù)電()A.一定溫度 B.一定 pHC.定壓強(qiáng) D.一定容器21. 電泳時(shí)帶電粒子在電場的作用下，移動(dòng)所向的電極的方向與其所帶電荷是()A.相同 B.相反 C.相對 D.相向22. 樣品的加入和洗脫的操作不正確的是()A. 加樣前，打開色譜柱下端的流出口，使柱內(nèi)凝膠面上的緩沖液緩慢下降到凝膠面

10、的下面B. 加樣后，打開下端出口，使樣品滲入凝膠床內(nèi)C. 等樣品完全進(jìn)入凝膠層后，關(guān)閉下端出口D. 用吸管小心的將 1ml 透析后的樣品加到色譜柱的頂端，不要破壞凝膠面23. 人體正常的血紅蛋白中應(yīng)含有 Fe2+，若誤食亞硝酸鹽，則導(dǎo)致血紅蛋白中的 Fe2+。轉(zhuǎn)化為Fe3+，產(chǎn)生高價(jià)鐵血紅蛋白而中毒。服用維生素 C 可解除亞硝酸鹽中毒。在維生素 C 參與的反應(yīng)中()A.亞硝酸鹽是還原劑 B.維生素 C 是氧化劑C.亞硝酸鹽被氧化 D.維生素 C 將 Fe3+還原為 Fe2+24. 加有少量檸檬酸鈉(防止血液凝固)的豬血分裝于標(biāo)號、的試管中，隨后依次加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 0.3%、0.9%和 1.5%

11、的氯化鈉溶液稀釋，30min 后離心。下列敘述中，正確的是()A. 和試管的上清液中有血紅蛋白，沉淀中都有紅細(xì)胞B. 和試管的上清液呈淡黃色，沉淀中均有皺縮的紅細(xì)胞C. 和試管的沉淀中分別有紅細(xì)胞的碎片和皺縮的紅細(xì)胞D. 和試管的上清液是血清(血清與血漿的主要區(qū)別是血清中不含纖維蛋白原)25. 在血紅蛋白的整個(gè)提取過程中，不斷用磷酸緩沖液處理的目的是()A.磷酸緩沖液會加速血紅蛋白的提取過程 B.血紅蛋白是一種兩性物質(zhì)，需要酸中和C.防止血紅蛋白被 02氧化 D.讓血紅蛋白處在穩(wěn)定的 pH 范圍內(nèi)，維持其結(jié)構(gòu)和功能526. 下列有關(guān)提取和分離血紅蛋白的程度敘述錯(cuò)誤的是()A.樣品的處理就是通過

12、一系列操作收集到血紅蛋白溶液B.通過透析可以去除樣品中分子質(zhì)量較大的雜質(zhì)，此為樣品的粗提取C.可通過凝膠色譜法將相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去，即樣品的純化D.可通過 SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定血紅蛋白的純度27選用紅細(xì)胞作分離蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)材料，下列是其優(yōu)點(diǎn)的是()A.血紅蛋白是有色蛋白 B.紅細(xì)胞無細(xì)胞核C.紅細(xì)胞蛋白質(zhì)含量高 D.紅細(xì)胞 DNA 含量高28下面關(guān)于對血紅蛋白提取和分離的樣品的處理措施中，不正確的是()A. 采集血樣后要高速短時(shí)問離心獲得血細(xì)胞B. 洗滌三次后如上清液仍有黃色，可增加洗滌次數(shù)，否則血漿蛋白無法除凈。C. 在蒸餾水和甲苯的作用下，細(xì)胞破裂，釋放出血紅蛋白D. 釋

13、放血紅蛋白后再經(jīng)過離心，就可以使血紅蛋白和其他雜質(zhì)分離開來29下列有關(guān)提取和分離血紅蛋白的過程的敘述中，不正確的是()A. 樣品的處理就是通過一系列操作收集到血紅蛋白溶液B. 通過透析可以去除樣品中相對分子質(zhì)量較大的雜質(zhì)，此為樣品的粗提取C. 可通過凝膠色譜法將相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去，即樣品的純化D. 可通過 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定血紅蛋白的純度30雄性激素是小分子脂溶性物質(zhì)，很容易穿過細(xì)胞膜。睪丸每天分泌的雄性激素約 7mg，其中約 2呈游離狀態(tài)， 其余在血中與血漿蛋白呈可逆性結(jié)合。 下列有關(guān)雄性激素與血漿蛋白結(jié)合后的作用的敘述中，不正確的是()A使其不容易通過腎臟排出 B.使其不容易進(jìn)入細(xì)胞C.使其有效濃度處于特定水平 D.抑制雄性激素發(fā)揮作用31.紅細(xì)胞含有大量的血紅蛋白，紅細(xì)胞的機(jī)能主要是由血紅蛋白完成，血紅蛋白的主要功能是攜帶氧氣或二氧化碳，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動(dòng)物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，來提取和分離血紅蛋白，請回答下列有關(guān)問題：(1)_ 血紅蛋白提取和分離的程度可分為四步：、和。(2)實(shí)驗(yàn)前取新鮮的血液，要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉，取血回來，馬上進(jìn)行離心，收集血紅蛋白溶液。加入檸檬酸鈉的目的是。以上