第十三章：食品中有毒有害物質(zhì)的檢測(cè)

1、 食品中有害元素的測(cè)定食品中有害元素的測(cè)定1食品中農(nóng)藥殘留量的測(cè)定食品中農(nóng)藥殘留量的測(cè)定2食品中黃曲霉素的測(cè)定食品中黃曲霉素的測(cè)定3食品中亞硝基化合物的測(cè)定食品中亞硝基化合物的測(cè)定4食品中苯并芘的測(cè)定食品中苯并芘的測(cè)定5白酒中甲醇的測(cè)定白酒中甲醇的測(cè)定6 動(dòng)物性食品中獸藥殘留測(cè)定動(dòng)物性食品中獸藥殘留測(cè)定7 有害物質(zhì) 自然界中，按其原來(lái)的用途正常使用導(dǎo)致人體生理機(jī)能、自然環(huán)境或生態(tài)平衡遭受破壞的物質(zhì)或含有該物質(zhì)的物料。 有毒物質(zhì) 凡是以小劑量進(jìn)入機(jī)體，通過(guò)化學(xué)或物理化學(xué)作用能夠?qū)е陆】凳軗p的物質(zhì)。有害物質(zhì)普通有害物質(zhì)有毒物質(zhì)致癌物質(zhì)危險(xiǎn)物質(zhì)食品中的有害物質(zhì)生物性有害物質(zhì)黃曲霉、李斯特菌、口蹄疫病

2、毒化學(xué)性有害物質(zhì)有害元素、農(nóng)藥殘留、黃曲霉毒素亞硝基化合物、甲醇、獸藥殘留、苯并芘物理性有害物質(zhì)金屬屑、石子、動(dòng)物排瀉物農(nóng)藥、獸藥使用不當(dāng)食品中有害物質(zhì)的主要來(lái)源加工、貯藏、運(yùn)輸污染特定食品加工工藝包裝材料環(huán)境污染食品原料固有毒素第一節(jié) 食品中有害元素的測(cè)定 食品中有毒有害元素主要有鉛、鎘、汞、砷等； 主要來(lái)源是工業(yè)“三廢”、化學(xué)農(nóng)藥、食品加工輔料等方面的污染； 有害元素污染食品后，隨食品進(jìn)入體內(nèi)，會(huì)危害人體健康，甚至致人終身殘廢或死亡； 檢測(cè)食品中有害元素的意義： 可以分析食品中有害元素的種類及含量； 可以防止有害元素危害人體健康； 可以為加強(qiáng)食品生產(chǎn)和衛(wèi)生管理提供依據(jù)。1.1 鉛的測(cè)定 鉛

3、污染現(xiàn)狀 隨著工業(yè)化和交通運(yùn)輸業(yè)的迅猛發(fā)展，鉛污染已由職業(yè)環(huán)境擴(kuò)展到日常環(huán)境，成為人類文明中最嚴(yán)重的環(huán)境污染物之一； 我國(guó)兒童鉛中毒流行率很高，零鉛工程亟待啟動(dòng)； 鉛的毒性 鉛是多系統(tǒng),多親和性毒物，通過(guò)呼吸、進(jìn)食、皮膚吸收進(jìn)入人體，具有嗜胎盤和嗜神經(jīng)性，尤其影響少年兒童智商和正常發(fā)育； 鉛進(jìn)入人體，不被消化吸收，不會(huì)自主排出體外，需要排鉛制劑干預(yù)。1.1 鉛的測(cè)定 鉛的測(cè)定方法 原子吸收分光光度法 雙硫腙比色法 鉛的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn) GB/T 5009.122003食品中鉛的測(cè)定 GB/T 5009.752003食品添加劑中鉛的測(cè)定1.1.1 原子吸收分光光度法測(cè)鉛 原理 鉛元素經(jīng)原子化后，在283

4、.3nm處有最大吸收，而且吸光度大小與鉛含量成正比。 試劑 硝酸與高氯酸（5+1）混合酸，0.5mol/L硝酸溶液，1mg/ml鉛標(biāo)準(zhǔn)貯備液，100g/ml鉛標(biāo)準(zhǔn)使用液。 儀器 原子吸收分光光度計(jì)，鉛燈，電熱板，馬福爐。 操作步驟 樣品消化 樣品濕法消化 固體樣品 液體樣品 樣品干法消化1.1.1 原子吸收分光光度法測(cè)鉛 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 儀器條件設(shè)置 測(cè)定波長(zhǎng)283.3nm，等電流、狹縫寬度、空氣乙炔流量和時(shí)間程序設(shè)置均參照儀器說(shuō)明書(shū)調(diào)至最佳狀態(tài)。 樣品測(cè)定 結(jié)果計(jì)算mVccX)(21式中：X樣品中鉛的含量(mg/Kg或mg/mL) c1測(cè)定用樣液中鉛的含量(g/mL) c2試劑空白液中鉛的含量

5、(g/mL) V樣品處理液的總體積(mL) m樣品質(zhì)量或體積(g或mL)1.1.2 雙硫腙比色法測(cè)鉛 原理 樣品消化后在pH值為8.59.0時(shí)，鉛離子與雙硫腙生成紅色配合物，溶于三氯甲烷，在波長(zhǎng)510nm處有最大吸收。加入檸檬酸銨、氰化鉀、鹽酸羥胺等，防止銅、鐵、鋅等離子干擾，與標(biāo)準(zhǔn)比較定量。 試劑 氨水(1+1)、鹽酸(1+1)、1g/L 酚紅指示劑、200g/L 鹽酸羥胺溶液、200g/L 檸檬酸銨溶液、 100g/L氰化鉀溶液、三氯甲烷、5mg/mL 淀粉指示液、硝酸(1+99)、0.5g/L雙硫腙三氯甲烷溶液、雙硫腙使用液、硝酸硫酸混合液(4+1)、1mg/ml鉛標(biāo)準(zhǔn)貯備液，10g/m

6、l鉛標(biāo)準(zhǔn)使用液。 儀器 分光光度計(jì)1.1.2 雙硫腙比色法測(cè)鉛 操作步驟 樣品預(yù)處理 樣品灰化 測(cè)定 結(jié)果計(jì)算1000)/(1000)(1221VVmmmX式中：X樣品中鉛的含量(mg/Kg或mg/L) m1測(cè)定用樣品消化液中鉛的質(zhì)量(g) m2試劑空白液中鉛的質(zhì)量(g) m樣品質(zhì)量或體積(g或mL) V1樣品消化液的總體積(mL) V2測(cè)定用樣品消化液體積(mL) 1.2 鎘的測(cè)定 鎘的測(cè)定方法 原子吸收分光光度法 228.8nm 分光光度法 樣品消化后在堿性溶液中，鎘離子與6溴苯并噻唑偶氮萘酚生成紅色配合物，溶于三氯甲烷，在波長(zhǎng)585nm 處有最大吸收。 鎘的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn) GB/T 5009.

7、152003食品中鎘的測(cè)定1.3 汞的測(cè)定 汞的測(cè)定方法 冷原子吸收分光光度法 253.7nm 雙硫腙比色法 樣品消化后在酸性條件下，汞與雙硫腙氯仿溶液生成雙硫腙汞在氯仿溶液中呈橙黃色，在波長(zhǎng)492nm處有最大吸收。 汞的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn) GB/T 5009.172003食品中總汞和有機(jī)汞的測(cè)定1.3 砷的測(cè)定 砷的測(cè)定方法 銀鹽法 樣品消化后，以碘化鉀、氯化亞錫將高價(jià)砷還原為三價(jià)砷，然后與鋅粒和酸產(chǎn)生的新生態(tài)氫生成砷化氫，經(jīng)銀鹽溶液吸收后，形成紅色膠體，在波長(zhǎng)520nm處有最大吸收。 砷斑法 砷的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn) GB/T 5009.112003食品中總砷和無(wú)機(jī)砷的測(cè)定第二節(jié) 食品中農(nóng)藥殘留量的測(cè)定 概述

8、農(nóng)藥：用于預(yù)防、消滅或者控制危害農(nóng)業(yè)、林業(yè)的病、蟲(chóng)、草及其他有害生物，以及調(diào)節(jié)植物、昆蟲(chóng)生長(zhǎng)的藥物總稱。 農(nóng)藥殘留：指農(nóng)藥本身及代謝產(chǎn)物等在環(huán)境、動(dòng)植物或食品中的殘留現(xiàn)象。 殘留量：就是殘留的數(shù)量，單位mg/Kg或g/Kg。 目前，全世界使用的農(nóng)藥品種有上千種，其中絕大部分為化學(xué)合成農(nóng)藥。 農(nóng)藥按用途可分為殺蟲(chóng)劑、殺菌劑、除草劑、殺螨劑、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、殺鼠藥等。 農(nóng)藥按化學(xué)成分可分為有機(jī)磷類、氨基甲酸酯類、有機(jī)氯類、擬除蟲(chóng)菊酯類、苯氧乙酸類、有機(jī)錫類等。 食物中農(nóng)藥殘留數(shù)量超過(guò)最大殘留限量時(shí)經(jīng)對(duì)人體和 動(dòng)物產(chǎn)生不良影響。2.1 食品中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量的測(cè)定 有機(jī)氯農(nóng)藥(OCPs)是具有殺蟲(chóng)活

9、性的氯代烴的總稱； OCPs分為滴滴涕及其類似物、六六六和環(huán)戊二烯衍生物，均為神經(jīng)毒性物質(zhì)； 常見(jiàn)的OCPs有滴滴涕、六六六、林丹、氯丹、硫丹、毒殺芬、七氯、艾氏劑、狄氏劑、異狄氏劑等；滴滴涕六六六表71我國(guó)主要食品中DDT和BHC殘留限量標(biāo)準(zhǔn)食品種類食品種類指標(biāo)指標(biāo)BHC (mg/Kg)DDT (mg/Kg)糧食糧食(成品糧食成品糧食)、麥乳精、麥乳精(含乳固體飲料含乳固體飲料)0.30.2肉：脂肪含量在肉：脂肪含量在10以下以下(以鮮重計(jì)以鮮重計(jì))0.40.2 脂肪含量在脂肪含量在10以上以上(以脂肪計(jì)以脂肪計(jì))4.02.0魚(yú)：魚(yú)：(其他水產(chǎn)品參照魚(yú)其他水產(chǎn)品參照魚(yú))2.01.0蔬菜、水果

10、、干食用菌蔬菜、水果、干食用菌0.20.1綠茶和紅茶綠茶和紅茶0.40.2牛乳、鮮食用菌、蘑菇罐頭牛乳、鮮食用菌、蘑菇罐頭0.10.1蛋蛋(去殼去殼)1.01.0蛋制品蛋制品按蛋折算按蛋折算乳制品乳制品按牛乳折算按牛乳折算表72 WHO建議的DDT和BHC在某些食品中允許殘留量標(biāo)準(zhǔn)食品種類食品種類DDT (mg/Kg)食品種類食品種類BHC (mg/Kg)瓜果、蔬菜瓜果、蔬菜7.0萵苣、畜肉脂肪萵苣、畜肉脂肪2.0熱帶水果熱帶水果3.5水果、蔬菜水果、蔬菜0.5全脂奶全脂奶0.05奶脂、甜菜根及葉、米、奶脂、甜菜根及葉、米、蛋蛋(去殼去殼)0.1蛋類蛋類(去殼去殼)0.5馬鈴薯馬鈴薯0.052

11、.1 食品中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量的測(cè)定 食品中有機(jī)氯農(nóng)藥的測(cè)定采用氣相色譜法或薄層色譜法； 最為常用的氣相色譜電子捕獲檢測(cè)器(GC-ECD)，具有靈敏度高、分離效果好、定量準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)。 有機(jī)氯農(nóng)藥的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)： GB/T5009.146-2003 植物性食品 中有機(jī)氯和擬除蟲(chóng)菊酯農(nóng)藥多種 殘留的測(cè)定； GB/T5009.162-2003 動(dòng)物性食品 中有機(jī)氯和擬除蟲(chóng)菊酯農(nóng)藥多種 殘留的測(cè)定；2.1.1 動(dòng)物性食品中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量的測(cè)定 原理 樣品處理后，用氣相色譜法測(cè)定。在一定溫度下，載氣攜帶氣化后的樣品，通過(guò)色譜柱，被逐一分離，隨即通過(guò)電子捕獲器，以保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。20種有機(jī)氯農(nóng)藥和擬

12、除蟲(chóng)菊酯農(nóng)藥多組分色譜圖種有機(jī)氯農(nóng)藥和擬除蟲(chóng)菊酯農(nóng)藥多組分色譜圖1.BHC 2. BHC 3. BHC 4.五氯硝基苯五氯硝基苯 5.BHC 6.七氯七氯 7.艾氏劑艾氏劑 8.除螨酯除螨酯9.環(huán)氧七氯環(huán)氧七氯 10.殺螨酯殺螨酯 11.狄氏劑狄氏劑 12.p,p-DDE 13. p, p-DDD 14. o, p-DDT 15 .p, p-DDT 16.胺菊酯胺菊酯17.氯菊酯氯菊酯18.氯氰菊酯氯氰菊酯19. 氰戊菊酯氰戊菊酯20.溴氰菊酯溴氰菊酯2.1.1 動(dòng)物性食品中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量的測(cè)定 試劑 丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、環(huán)乙烷、正乙烷，重蒸 石油醚，沸程3060，分析純重蒸； 氯化鈉

13、、無(wú)水硫酸鈉； 凝膠，Bil-beads S-X3,200400目； 農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品； 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制； 儀器 氣相色譜儀電子捕獲檢測(cè)器 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 凝膠凈化柱 302.5cm玻璃層析柱玻璃層析柱2.1.1 動(dòng)物性食品中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量的測(cè)定 操作要點(diǎn) 提取與分配 凈化 將樣品濃縮液過(guò)凝膠柱，用乙酸乙酯環(huán)乙烷(1+1)溶液洗脫，棄去035ml流分，收集35 70ml流分，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至約1ml，再經(jīng)凝膠柱凈化收集35 70ml流分，蒸發(fā)濃縮，用氮?dú)獯党軇┮允兔讯ㄈ葜?ml。 測(cè)定 氣相色譜條件： 色譜柱：涂以O(shè)V-101,0.25m,30m0.32mm,石英彈性毛細(xì)管柱 柱溫：程序升溫 進(jìn)樣口溫度：

14、270 檢測(cè)器：電子捕獲檢測(cè)器(ECD)，300 載氣流速：氮?dú)?N2)：1ml/min；尾吹：50ml/min2.1.1 動(dòng)物性食品中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量的測(cè)定 程序升溫 色譜分析 分別量取1l混合標(biāo)準(zhǔn)溶液及樣品凈化液注入氣相色譜儀，以保留時(shí)間定性，以樣品和標(biāo)準(zhǔn)峰高或峰面積比較定量。 結(jié)果計(jì)算60,1min170235280,10min40/min2/min40/min10001000121VmVmX式中 X樣品中各農(nóng)藥的含量(mg/Kg) m1 被測(cè)樣液中各農(nóng)藥的含量(ng) m 樣品質(zhì)量(g) V1 樣液進(jìn)樣體積(L) V2 樣液最后定容體積(mL) 2.1.2 植物性食品中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量

15、的測(cè)定 原理同2.1.1 試劑 石油醚(沸程3060)，苯，丙酮，乙酸乙酯，重蒸 弗羅里硅土， 620灼燒4h后備用，用前140烘2h，趁熱加5水滅活，層析用； 無(wú)水硫酸鈉 農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品與標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制。 儀器 氣相色譜儀電子捕獲檢測(cè)器 電動(dòng)振蕩器、組織搗碎機(jī)、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 布氏漏斗(直徑80mm)、抽濾瓶(200mL) 250mL分液漏斗、 100mL具塞三角瓶 層析柱2.1.2 植物性食品中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量的測(cè)定 樣品制備 糧食樣品粉碎過(guò)20目篩備用； 蔬菜樣品除去非可食部分備用。 操作方法 提取 凈化 準(zhǔn)確吸取樣品2mL,加入以淋洗過(guò)的無(wú)水硫酸鈉+弗羅里硅土層析柱中，用100mL石油醚+乙酸

16、乙酯(95+5)洗脫，收集洗脫液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮近干，用少量石油醚多次溶解殘?jiān)诳潭入x心瓶中，最終定容至1.0mL，備測(cè)。 測(cè)定 色譜條件 涂以O(shè)V-101,15m0.25mm,石英彈性毛細(xì)管柱 氣體流速：氮?dú)?N2)40ml/min；尾吹：60ml/min；分流比 1：502.1.2 植物性食品中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量的測(cè)定 溫度：柱溫自180 升至230 保持30min；檢測(cè)器及進(jìn)樣溫度為250 。 色譜分析 分別吸取1l樣液和混合標(biāo)準(zhǔn)溶液注入氣相色譜儀，以保留時(shí)間定性，以樣品和標(biāo)準(zhǔn)峰高或峰面積比較定量。 計(jì)算結(jié)果KXmVHVEhsisii12有機(jī)氯和擬除蟲(chóng)菊酯標(biāo)準(zhǔn)色譜圖有機(jī)氯和擬除蟲(chóng)菊酯標(biāo)準(zhǔn)色

17、譜圖1.BHC 2. BHC 3. BHC 4. BHC 5. 七氯七氯 6.艾氏劑艾氏劑 7. p,p-DDE 8. o, p-DDT9. p, p-DDD 10. p, p-DDT 11.三氟氯氰菊酯三氟氯氰菊酯 12.二氯苯醚菊酯二氯苯醚菊酯13. 氰戊菊酯氰戊菊酯14. 溴氰菊酯溴氰菊酯2.2食品中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量測(cè)定 有機(jī)磷農(nóng)藥(OPPs)是含有C-P鍵或C-O-P,C-S-P,C-N-P鍵的有機(jī)化合物，屬磷酸酯類化合物； 有機(jī)磷農(nóng)藥有上百種，具有代表性的有： 敵敵畏、對(duì)硫磷、氧化樂(lè)果、辛硫磷、甲胺磷、甲拌磷(3911)、樂(lè)果、敵百蟲(chóng)、二溴磷、久效磷、磷銨、殺螟硫磷、甲基對(duì)硫磷、倍硫

18、磷、內(nèi)吸磷(1059)、雙硫磷、乙酰甲胺磷、二嗪磷、丙溴磷等； 有機(jī)磷農(nóng)藥，高效廣譜，易降解，半衰期短，人體、動(dòng)物體內(nèi)不易蓄積，不易殘留； 由于某些有機(jī)磷農(nóng)藥急性毒性強(qiáng)，常因使用、保管、運(yùn)輸?shù)炔簧?，污染食品造成人畜急性中毒，因此食品中需要測(cè)定有機(jī)磷農(nóng)藥殘留。表73其中有機(jī)磷農(nóng)藥比較表名稱名稱毒毒性性殘效殘效期期(d)用途與特點(diǎn)用途與特點(diǎn)我國(guó)允許殘留量標(biāo)準(zhǔn)我國(guó)允許殘留量標(biāo)準(zhǔn)(mg/Kg)糧食糧食蔬菜水果蔬菜水果植物油植物油甲拌磷甲拌磷劇劇30-40拌種拌種0.02不得檢出不得檢出不得檢出不得檢出殺螟硫磷殺螟硫磷低低短短糧食作物糧食作物0.040.4不得檢出不得檢出倍硫磷倍硫磷低低短短果樹(shù)蔬菜糧食

19、果樹(shù)蔬菜糧食0.050.050.1樂(lè)果樂(lè)果低低5使用范圍廣使用范圍廣101敵敵畏敵敵畏劇劇短短煎煮破壞煎煮破壞未定未定0.2對(duì)硫磷對(duì)硫磷劇劇7糧食作物糧食作物0.1不得檢出不得檢出0.1馬拉硫磷馬拉硫磷低低短短糧食熏蒸糧食熏蒸3未定未定2.2食品中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量測(cè)定 食品中有機(jī)磷農(nóng)藥的測(cè)定采用氣相色譜法； 食品中有機(jī)磷農(nóng)藥的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)： GB/T5009.20-2003 食品中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量的測(cè)定； GB/T5009.161-2003 動(dòng)物性食品中有機(jī)磷農(nóng)藥多組分殘留量的測(cè)定 GB/T5009.145-2003 植物性食品中有機(jī)磷和氨基甲酸酯多組分的測(cè)定2.2.1動(dòng)物性食品中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量

20、測(cè)定 原理： 樣品經(jīng)提取凈化后，用氣相色譜法分離測(cè)定，火焰光度檢測(cè)器檢測(cè)，以保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。 試劑： 丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、環(huán)乙烷，均重蒸 氯化鈉、無(wú)水硫酸鈉 凝膠 Bio-Beads S-X3，200400目； 有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品及標(biāo)準(zhǔn)溶液配制 儀器 氣相色譜儀火焰光度檢測(cè)器 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 凝膠凈化柱2.2.1動(dòng)物性食品中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量測(cè)定 操作方法 樣品提取制備，同有機(jī)氯農(nóng)藥測(cè)定； 凈化，同有機(jī)氯農(nóng)藥測(cè)定； 測(cè)定 色譜條件 色譜柱：涂SE-54 0.25m,30m0.32mm(內(nèi)徑)石英彈性毛細(xì)管柱 柱溫：程序升溫 檢測(cè)器：火焰光度檢測(cè)器(FPD-P) 進(jìn)樣口溫度：270 氣體

21、流程：氮?dú)?N2載氣)1 ml/min；尾吹：50 ml/min；氫氣， 50 ml/min；空氣500 ml/min。60,1min11023526540/min5/min40/min2.2.1動(dòng)物性食品中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留 色譜分析 分別吸取1l樣液和混合標(biāo)準(zhǔn)溶液注入氣相色譜儀，以保留時(shí)間定性，以樣品和標(biāo)準(zhǔn)峰高或峰面積比較定量。 結(jié)果計(jì)算13中有機(jī)磷農(nóng)藥色譜圖1.甲胺磷 2.敵敵畏 3.乙酰甲胺磷 4.久效磷5.樂(lè)果 6.乙拌磷 7.甲基對(duì)硫磷 8.殺螟硫磷9.甲基嘧啶磷 10.馬拉硫磷 11.倍硫磷 12.對(duì)硫磷 13.乙硫磷10001000121VmVmX式中 X樣品中各農(nóng)藥含量(mg/K

22、g)m1被測(cè)樣品中各農(nóng)藥的含量 (ng); m樣品質(zhì)量(g)V1樣液進(jìn)樣體積(L) ；V2 樣液最后定容體積(mL)2.2.2植物性食品中有機(jī)磷和氨基甲酸酯農(nóng)藥殘留 原理： 樣品中有機(jī)磷和氨基甲酸酯農(nóng)藥有機(jī)溶劑提取，液液分配、微型柱凈化除去干擾物質(zhì)，用氮磷檢測(cè)器(FID)檢測(cè)，以保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。 試劑 丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、正己烷，重蒸 磷酸、氯化鈉、無(wú)水硫酸鈉、氯化銨 硅膠，6080目130烘2h，以5%水失活； 助濾劑，celite545; 凝結(jié)劑，5g氯化銨+10mL磷酸+100mL水，用前稀釋5倍； 農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品及標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制2.2.2植物性食品中有機(jī)磷和氨基甲酸酯

23、農(nóng)藥殘留 儀器 組織搗碎機(jī)、離心機(jī)、超聲波清洗器、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器 氣相色譜儀火焰光度檢測(cè)器 操作方法 提取 凈化 將凝結(jié)液和助濾劑加入提取樣品的分液漏斗中，輕搖靜置5min用布氏漏斗抽濾，然后用二氯甲烷提取經(jīng)無(wú)水硫酸鈉漏斗過(guò)濾后35旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至少量，氮吹儀吹干加入少量正己烷過(guò)硅膠柱，依次用4mL正己烷+丙酮(7+3)、4mL乙酸乙酯、8mL丙酮+乙酸乙酯(1+1)、4mL丙酮+甲醇(1+1)洗柱，收集洗脫液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀45濃縮近干，用二氯甲烷定容至1mL。2.2.2植物性食品中有機(jī)磷和氨基甲酸酯農(nóng)藥殘留 測(cè)定 氣相色譜條件 色譜柱：BP5或OV-101 25m0.32mm(內(nèi)徑)石英彈性毛細(xì)管

24、柱 氣體流速：氮?dú)?N2載氣)50ml/min；尾吹(氮?dú)?：50 ml/min；氫氣:0.5Kg/cm2；空氣:0.3Kg/cm2 。 溫度：柱溫采用程序升溫方式 檢測(cè)器：氮磷檢測(cè)器(FTD) 色譜分析：量取1 L樣液和混合標(biāo)準(zhǔn)溶液注入氣相色譜儀，以保留時(shí)間定性，以樣品和標(biāo)準(zhǔn)峰高或峰面積比較定量。14018519523550/min恒溫2min2/min10/min進(jìn)樣口溫度235恒溫1min2.2.2植物性食品中有機(jī)磷和氨基甲酸酯農(nóng)藥殘留 結(jié)果計(jì)算fmhEhsisiiX1000色譜圖色譜圖2.062甲胺磷甲胺磷 2. 3.775乙酰甲胺磷乙酰甲胺磷 3. 4.097敵百蟲(chóng)敵百蟲(chóng)4. 5.0

25、58葉撣散葉撣散 5. 6.163仲丁威仲丁威 6. 6.5甲基內(nèi)吸磷甲基內(nèi)吸磷7. 7.688甲拌磷甲拌磷 8. 7.797久效磷久效磷 9. 8.41樂(lè)果樂(lè)果10. 8.575甲基對(duì)硫磷甲基對(duì)硫磷 11.12.288馬拉氧磷馬拉氧磷12. 12.745毒殺稗毒殺稗 13. 13.367西維因西維因 14. 14.18蟲(chóng)螨磷蟲(chóng)螨磷15. 14.353倍硫磷倍硫磷 16. 14.827馬拉硫磷馬拉硫磷17. 15.027對(duì)硫磷對(duì)硫磷 18. 18.28 殺撲磷殺撲磷19. 19.412乙硫磷乙硫磷 20. 21.293克線磷克線磷2.3 食品中氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的測(cè)定 氨基甲酸酯類農(nóng)藥的理

26、化性質(zhì) 氨基甲酸酯類農(nóng)藥是氨基甲酸的衍生物，殺蟲(chóng)力強(qiáng)，作用迅速，對(duì)蟲(chóng)體有較強(qiáng)的選擇性，對(duì)人畜毒性較低并易分解失效，在體內(nèi)無(wú)蓄積中毒作用； 常見(jiàn)的有西維因(甲萘威)、呋喃丹、涕滅威、殘殺威、速滅威、害撲威、滅殺威、異丙威(葉蟬散)、抗蚜威、滅草、滅草猛等； 目前WHO和我國(guó)僅對(duì)西維因的殘留量有規(guī)定。各類食品中的最高殘留量(mg/Kg): 稻米和小麥5.0； 全麥粉和根莖類2.0； 家禽和蛋類(去殼)0.5；馬鈴薯和白面粉0.2； 畜禽肉0.2； 奶制品0.1。2.3.1 動(dòng)物性食品中氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量測(cè)定 原理 樣品提取處理凈化微孔濾膜過(guò)濾后進(jìn)樣，用反相高效液相色譜分離，紫外檢測(cè)器檢測(cè)，色譜

27、峰保留時(shí)間定性外標(biāo)法定量 試劑 甲醇、丙酮、乙酸乙酯、環(huán)己烷，均重蒸； 氯化鈉、無(wú)水硫酸鈉；重蒸蒸餾水； 凝膠，Bio-Beads S-X3，200400目； 氨基甲酸酯類農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品與標(biāo)準(zhǔn)溶液 儀器 高效液相色譜(HPLC)紫外檢測(cè)器 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 凝膠凈化柱2.3.1 動(dòng)物性食品中氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量測(cè)定高效液相色譜紫外檢測(cè)器高效液相色譜紫外檢測(cè)器2.3.1 動(dòng)物性食品中氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量測(cè)定 操作方法 樣品提取凈化制備，同動(dòng)物性食品中有機(jī)磷農(nóng)藥處理方法； 高效液相色譜測(cè)定 色譜條件： 色譜柱：Altima C18 4.6mm25cm; 流動(dòng)相：甲醇+水(60+40)；流速：0.5mL/

28、min; 柱溫：30;紫外檢測(cè)波長(zhǎng)：210nm。 測(cè)定：將儀器調(diào)至最佳狀態(tài)，分別將5L混合標(biāo)準(zhǔn)溶液及樣品凈化液注入色譜儀中，以保留時(shí)間定性，以樣品和標(biāo)準(zhǔn)峰高或峰面積比較定量。氨基甲酸酯農(nóng)藥氨基甲酸酯農(nóng)藥HPLC標(biāo)準(zhǔn)色譜圖標(biāo)準(zhǔn)色譜圖1.涕滅威涕滅威 2.速滅威速滅威3.呋喃丹呋喃丹 4.西維因西維因5.異丙威異丙威2.4 食品中擬除蟲(chóng)菊酯農(nóng)藥殘留量的測(cè)定 擬除蟲(chóng)菊酯農(nóng)藥的理化性質(zhì) 除蟲(chóng)菊酯是菊科植物除蟲(chóng)菊成分，對(duì)昆蟲(chóng)具有高效速殺作用 擬除蟲(chóng)菊酯農(nóng)藥就是仿天然除蟲(chóng)菊酯化學(xué)合成的殺蟲(chóng)劑，具有高效、廣譜、低毒、低殘留的特點(diǎn)，對(duì)水生動(dòng)物毒性較大 常見(jiàn)的溴氰菊酯(敵殺死)、氯氰菊酯、氯菊酯、中西殺滅菊酯、

29、甲氰菊酯、氰戊菊酯、二氯苯醚菊酯等； 第十三屆國(guó)際食品中獸藥殘留法典委員會(huì)規(guī)定：溴氰菊酯在動(dòng)物源食品中的MRL(mg/Kg)為牛羊雞肌肉0.03，肝腎0.05，脂肪0.5，牛奶和雞蛋0.03； 我國(guó)農(nóng)業(yè)部規(guī)定： 氰戊菊酯在牛羊豬肌肉、脂肪1.0，副產(chǎn)品0.02，牛奶0.01 氟氯苯氰菊酯在牛肌肉、腎0.01，肝0.02，奶0.03，脂肪0.15。 測(cè)定方法參照GB/T 5009.162和GB/T 5009.1462003第三節(jié) 食品中黃曲霉毒素的測(cè)定 概述 黃曲霉毒素(AFT)是黃曲霉和寄生曲霉的代謝產(chǎn)物，溫特曲霉也能少量產(chǎn)生毒素； 黃曲霉毒素是一族結(jié)構(gòu)類似化合物的總稱，基本結(jié)構(gòu)是二呋喃環(huán)和香

30、豆素，紫外線下能發(fā)熒光； 目前已分離鑒定出12種，包括B1、B2、G2、M1、M2、P1、Q、H1、GM、B2a和毒醇； 黃曲霉毒素是劇毒物質(zhì)，毒性相當(dāng)于氰化鉀的10倍，砒霜的68倍，具有極強(qiáng)的致癌性，長(zhǎng)期攝入會(huì)誘發(fā)肝癌； 各種黃曲霉毒素中以黃曲霉毒素B1毒性和致癌性最強(qiáng)，在食品中污染最為嚴(yán)重; 食品中黃曲霉毒素B1的測(cè)定常采用薄層色譜法。表74 食品中黃曲霉毒素的最高限量食品名稱食品名稱黃曲霉素黃曲霉素B1最高允許限量最高允許限量(g/Kg)玉米玉米,花生花生,花生油花生油,堅(jiān)果和干果堅(jiān)果和干果(核桃杏仁核桃杏仁)20玉米及花生制品玉米及花生制品(按原料折算按原料折算)20大米大米,其它油脂

31、其它油脂(香油香油,菜籽油菜籽油,大豆油大豆油,葵花油葵花油胡麻油胡麻油,茶油茶油,麻油麻油,玉米胚芽油玉米胚芽油,米糠油米糠油,棉籽油棉籽油)10其它食品其它食品(麥類麥類,面粉面粉,薯干薯干),發(fā)酵食品發(fā)酵食品(醬油醬油,醋豆豉醋豆豉,腐乳腐乳),淀粉制品淀粉制品(糕點(diǎn)糕點(diǎn),餅干餅干,面包面包,裱花蛋糕裱花蛋糕)5牛乳及其制品牛乳及其制品(消毒牛奶消毒牛奶,新鮮生牛乳新鮮生牛乳,全脂奶粉全脂奶粉,淡淡煉煉,乳奶油乳奶油),黃油黃油,新鮮豬組織新鮮豬組織(肝肝,腎腎,血血,瘦肉瘦肉)0.53.1 食品中黃曲霉毒素B1的測(cè)定 原理 樣品中黃曲霉毒素B1經(jīng)提取濃縮、薄層分離后，在波長(zhǎng)365nm紫

32、外燈下產(chǎn)生紫色熒光，根據(jù)其在薄層上顯示熒光的最低檢出量來(lái)測(cè)定含量。 試劑 三氯甲烷、甲醇、苯、乙腈、丙酮； 正己烷或石油醚，沸程3060或6090； 無(wú)水乙醚、硅膠G、三氟乙酸、無(wú)水硫酸鈉、氯化鈉； 苯乙腈(98+2ml)混合液、甲醇水(55+45) 溶液； 黃曲霉毒素B1標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.04g/ml黃曲霉毒素B1標(biāo)準(zhǔn)使用液 25g/L消毒用次氯酸鈉溶液3.1 食品中黃曲霉毒素B1的測(cè)定 儀器 小型粉碎機(jī)、篩、電動(dòng)振蕩器、全玻璃濃縮器、玻璃板(520cm)、薄層板涂布器、展開(kāi)槽 紫外燈100125W帶365nm濾光片； 微量注射器或血色素吸管 操作方法 取樣、提取 測(cè)定 薄層板的制備 單向展開(kāi)法

33、 點(diǎn)樣 距薄層板下端3cm基線上滴加樣液，一板可滴加4個(gè)點(diǎn)，距邊和點(diǎn)間為1cm,點(diǎn)直徑3cm,點(diǎn)依次為10 L的0.04 g/mL黃曲霉毒素B1標(biāo)樣,20 L樣液,20 L樣液+ 10 L的0.04 g/mL黃曲霉毒素B1標(biāo)樣,20 L樣液+ 10 L的0.2g/mL黃曲霉毒素B1標(biāo)樣；黃曲霉毒素 B13.1 食品中黃曲霉毒素B1的測(cè)定 展開(kāi)與觀察：在展開(kāi)槽內(nèi)加10mL無(wú)水乙醇，預(yù)展12cm，取出揮干。再于另一展開(kāi)槽內(nèi)加10mL丙酮三氯甲烷(8+92)，展開(kāi)1012cm取出，在紫外燈下觀察結(jié)果。 確證試驗(yàn)：驗(yàn)證需要加三滴三氟乙酸，產(chǎn)生黃曲霉毒素B1的衍生物，展開(kāi)后此衍生物比移值約在0.1左右，

34、在薄層板左邊一次滴加兩個(gè)點(diǎn)。1點(diǎn)10 L0.04 g/mL黃曲霉毒素B1標(biāo)樣， 2點(diǎn)20 L樣液，在以上兩點(diǎn)上各加一滴三氟乙酸蓋于其上，反應(yīng)5min后，用吹風(fēng)機(jī)吹熱風(fēng)2min，注意熱風(fēng)吹到薄層板上溫度不高于40。再在薄層板上滴加兩個(gè)點(diǎn)。 3點(diǎn)10 L0.04 g/mL黃曲霉毒素B1標(biāo)樣， 4點(diǎn)20 L樣液，展開(kāi)，在紫外燈下觀察樣液是否產(chǎn)生與黃曲霉毒素B1標(biāo)樣相同的衍生物。未加三氟乙酸的3、4點(diǎn)可作為樣液和標(biāo)準(zhǔn)液的衍生物對(duì)照。 稀釋定量：如樣液的熒光點(diǎn)的強(qiáng)度與黃曲霉毒素B1標(biāo)樣最低檢出量(0.0004 g)的熒光強(qiáng)度一致，則樣液中黃曲霉毒素B1含量為5g/Kg;如強(qiáng)度高于標(biāo)樣檢出限，則需要估計(jì)減

35、少滴加樣液量或稀釋樣液至強(qiáng)度一致為止。 結(jié)果計(jì)算mVDVX1000210004. 0第四節(jié) 食品中亞硝基化合物的測(cè)定 概述 N亞硝基化合物可分為N亞硝胺和N亞硝酰胺兩大類，即通常所說(shuō)亞硝胺化合物； N亞硝基化合物不是食品中天然存在物質(zhì)，是食品中的亞硝酸鹽與仲胺在酸性條件下的反應(yīng)產(chǎn)物： 魚(yú)和肉的腌制和烘烤 蔬菜的腌制 乳制品發(fā)酵、啤酒釀造 魚(yú)和肉腐敗變質(zhì) 亞硝胺化合物除少量劇毒外大多毒性較低，對(duì)人類的危害主要是其致癌性，可能誘發(fā)各種部位腫瘤，如：食道癌、肝癌等； 食品中N亞硝胺的測(cè)定方法有氣相色譜熱能分析儀法和氣相色譜質(zhì)譜法。食食 品品限量限量(MLs)(g/Kg)N亞硝胺亞硝胺N亞硝酰胺亞硝酰

36、胺海產(chǎn)品海產(chǎn)品47肉制品肉制品35表表75 食品中亞硝基化合物的限量指標(biāo)食品中亞硝基化合物的限量指標(biāo) GB 2762-20054.1氣相色譜熱能分析法測(cè)亞硝胺化合物 原理 樣品中N亞硝胺經(jīng)硅藻土吸附或真空低溫蒸餾，二氯甲烷提取分離，氣相色譜熱能分析法(GC-TEA)測(cè)定 氣相色譜分離的亞硝胺在熱解室裂解產(chǎn)生NO與臭氧反應(yīng)成激發(fā)態(tài)NO，返回基態(tài)時(shí)發(fā)射近紅外光(6002800nm)用熱能分析儀特異檢測(cè)。適用于啤酒中N亞硝基二甲胺含量測(cè)定。 試劑 二氯甲烷、硅藻土、氮?dú)?、無(wú)水硫酸鈉； 1mol/L氫氧化鈉溶液、0.1mol/L鹽酸溶液； 200mg/L, 200g/L N亞硝胺標(biāo)準(zhǔn)貯備液和工作液。

37、儀器 氣相色譜熱能分析儀、玻璃層析管、加壓蒸餾裝置 K-D濃縮器、恒溫水浴鍋4.1氣相色譜熱能分析法測(cè)亞硝胺化合物 操作方法 提取、濃縮 測(cè)定 氣相色譜條件 汽化室溫度：220 色譜柱溫度：175或從75以5/min速度升至175后維持 色譜柱：23m2 3mm(內(nèi)徑)玻璃管或不銹鋼柱，內(nèi)裝涂以固定液，10%(m/m)聚乙二醇20M和氫氧化鉀10g/L或13%(m/m) Carbowax20M/TPA于載體Chromosorb WAW-DMCs(80100目)； 載氣：氬氣，流速2040mL/min。 熱能分析儀 接口溫度：250；熱解室溫度：500 真空度：133266Pa 冷阱：用液氮調(diào)至

38、250(可用CTR過(guò)濾器代替)。4.1氣相色譜熱能分析法測(cè)亞硝胺化合物 測(cè)定：分別注入樣品濃縮液和N亞硝胺標(biāo)準(zhǔn)工作液510L，利用保留時(shí)間定性，峰高或峰面積定量。 計(jì)算mVhVcVhX1221 式中式中 X樣品中樣品中N亞硝基二甲胺含量亞硝基二甲胺含量(g/Kg) h1樣品濃縮液中亞硝基二甲胺的峰高樣品濃縮液中亞硝基二甲胺的峰高(mm)或峰面積或峰面積(mm2) h2 標(biāo)準(zhǔn)品工作液中亞硝基二甲胺的峰高標(biāo)準(zhǔn)品工作液中亞硝基二甲胺的峰高(mm)或峰面積或峰面積(mm2) c標(biāo)準(zhǔn)品工作液中亞硝基二甲胺的濃度標(biāo)準(zhǔn)品工作液中亞硝基二甲胺的濃度(g/L) V1,V2分別為樣品濃縮液和標(biāo)準(zhǔn)工作液的進(jìn)樣體積分

39、別為樣品濃縮液和標(biāo)準(zhǔn)工作液的進(jìn)樣體積(L) V樣品濃縮液的濃縮體積樣品濃縮液的濃縮體積(L) m樣品的質(zhì)量樣品的質(zhì)量(g)氮氮 吹吹 儀儀4.1氣相色譜質(zhì)譜法測(cè)亞硝胺化合物 原理 樣品中的N亞硝胺類化合物經(jīng)水蒸氣蒸餾和有機(jī)溶萃取后，濃縮至一定量，采用氣相色譜質(zhì)譜法定性定量 試劑 二氯甲烷，須用全玻璃蒸餾裝置重蒸； 無(wú)水硫酸鈉、優(yōu)級(jí)純氯化鈉、硫酸(1+3)、耐火磚顆粒； 0.5mg/mL, 5 g/mL的 N 亞硝胺標(biāo)準(zhǔn)溶液和使用液； 120g/L氫氧化鈉溶液； 儀器 氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法 水蒸汽蒸餾裝置 K-D濃縮器4.1氣相色譜質(zhì)譜法測(cè)亞硝胺化合物 操作方法 水蒸汽蒸餾、萃取純化、濃縮 氣相色

40、譜質(zhì)譜聯(lián)用法 色譜條件 汽化室溫度：190 色譜柱溫度：對(duì)N亞硝基二甲胺 130; N亞硝基二乙胺 145; N亞硝基二丙胺 130; N亞硝基吡咯烷160； 色譜柱：2m1.8 3.0mm(內(nèi)徑)玻璃管，內(nèi)裝涂以15%(m/m) PEG20M固定液和氫氧化鉀10g/L的 80100目Chromosorb WAW-DMCs； 載氣：氦氣，流速40mL/min。 質(zhì)譜儀條件 分辨率7000;離子化電壓70 V;離子化電流300A;離子源溫度180;離子源真空度1.3310-4Pa;界面溫度180 。4.1氣相色譜質(zhì)譜法測(cè)亞硝胺化合物 測(cè)定 采用電子轟擊源高分辨率匹配法，用全氟煤油碎片離子分別監(jiān)視

41、N亞硝基二甲胺 、N亞硝基二乙胺 、 N亞硝基二丙胺 、 N亞硝基吡咯烷的分子、離子，結(jié)合保留時(shí)間定性，以示波器上該分子、離子的峰高來(lái)定量 。100021mVchhX式式中中 X樣品中某一種樣品中某一種N亞硝胺化合物的含量亞硝胺化合物的含量(g/Kg 或或g/L) h1濃縮液中該濃縮液中該N亞硝胺化合物的峰高亞硝胺化合物的峰高(mm) h2樣品標(biāo)準(zhǔn)液中該樣品標(biāo)準(zhǔn)液中該N亞硝胺化合物的峰高亞硝胺化合物的峰高(mm) c樣品標(biāo)準(zhǔn)液中該樣品標(biāo)準(zhǔn)液中該N亞硝胺化合物的濃度亞硝胺化合物的濃度(g/mL) V樣品濃縮液體積樣品濃縮液體積(mL) m樣品質(zhì)量或體積樣品質(zhì)量或體積(g或或mL)第五節(jié) 食品中苯

42、并(a)芘的測(cè)定 苯并芘的危害 苯并芘為致癌物質(zhì)多環(huán)芳烴中的一種。3,4-苯并芘是一種有5個(gè)苯環(huán)構(gòu)成的多環(huán)芳烴，性質(zhì)穩(wěn)定； 在有機(jī)溶劑中，用波長(zhǎng)365nm紫外線照射可產(chǎn)生典型的紫色熒光； 3,4-苯并芘是已發(fā)現(xiàn)的200多種多環(huán)芳烴中最主要的環(huán)境和食品污染物，是一種強(qiáng)烈的致癌物質(zhì)，對(duì)機(jī)體各器官具有致癌作用；食品食品限量限量(MLs)(g/Kg)熏烤肉熏烤肉5植物油植物油10糧食糧食5表表76 食品中苯并食品中苯并(a)芘的限量指標(biāo)芘的限量指標(biāo) GB 2762-20055.1熒光分光光度法測(cè)定食品中苯并(a)芘 食品中苯并(a)芘測(cè)定有熒光分光光度法和目測(cè)比色法 熒光法原理 樣品用溶劑或經(jīng)皂化后提

43、取，再用液液分配或色譜柱凈化，用乙酰化濾紙分離苯并(a)芘。因苯并(a)芘在紫外光照射下呈藍(lán)紫色熒光斑點(diǎn)，剪下有苯并(a)芘的濾紙部分溶劑浸出用熒光分光光度計(jì)測(cè)熒光強(qiáng)度與標(biāo)準(zhǔn)品比較定量。 試劑 苯、無(wú)水乙醇、丙酮，重蒸； 環(huán)乙烷(或石油醚，沸程3060)重蒸或氧化柱處理除熒光 二甲基甲酰胺或二甲基亞砜、95乙醇、氫氧化鉀； 無(wú)水硫酸鈉，乙醇(95%)二氯甲烷(2+1)展開(kāi)劑 硅鎂型吸附劑、層析用(中性)氧化鋁、乙?；癁V紙； 100 g/mL，1.0 g/mL，0.1 g/mL苯并(a)芘標(biāo)準(zhǔn)溶液5.1熒光分光光度法測(cè)定食品中苯并(a)芘 儀器 脂肪提取儀 層析柱 35cm1015mm(內(nèi)徑)

44、上端有25mm(內(nèi)徑) 810cm的內(nèi)徑漏斗，下端具有活塞； 層析缸，K-D全玻璃濃縮器，回流皂化裝置，組織搗碎機(jī) 組織搗碎機(jī)，振蕩器，25、50L微量注射器； 熒光分光光度計(jì)，帶365或254nm濾光片的紫外光燈。 操作方法 樣品提取、凈化 薄層層析分離 在乙酰化濾紙上一端5cm處，吸取樣品液點(diǎn)于 濾紙上，用電吹風(fēng)從背面吹散溶劑；同樣點(diǎn) 苯并(a)芘標(biāo)準(zhǔn)液，濾紙下端浸入層析缸內(nèi)展開(kāi) 劑約1cm，待溶劑前沿至20cm時(shí)取出陰干；5.1熒光分光光度法測(cè)定食品中苯并(a)芘 在365nm或254nm紫外燈下觀察濾紙條，用鉛筆劃出標(biāo)準(zhǔn)苯并(a)芘及其同一位置的樣品的藍(lán)紫色斑點(diǎn)，剪下此點(diǎn)分別放入小比色

45、管中，各加4mL苯加蓋，放入5060水浴搖蕩浸泡15min； 測(cè)定 將樣品和標(biāo)準(zhǔn)液的苯浸出液移入熒光分光光度計(jì)的石英杯中，以365nm為激發(fā)光波長(zhǎng)，以365460nm波長(zhǎng)進(jìn)行熒光掃描，所得熒光光譜與標(biāo)準(zhǔn)苯并(a)芘的光譜對(duì)比； 在分析同時(shí)做試劑空白、處理樣品所用全部試劑，分別讀取樣品、標(biāo)準(zhǔn)及試劑空白于波長(zhǎng)4065nm處熒光強(qiáng)度，按基線法由下式計(jì)算數(shù)值，為定量計(jì)算的熒光強(qiáng)度。2/411401406FFFF熒光分光光度計(jì)熒光分光光度計(jì)5.1熒光分光光度法測(cè)定食品中苯并(a)芘 結(jié)果計(jì)算 樣品中的苯并(a)芘按下式計(jì)算：12211000VVmFFFSX 式中式中 X樣品中的苯并樣品中的苯并(a) 芘

46、含量芘含量(g/Kg) S苯并苯并(a) 芘標(biāo)準(zhǔn)斑點(diǎn)的質(zhì)量芘標(biāo)準(zhǔn)斑點(diǎn)的質(zhì)量(g) F標(biāo)準(zhǔn)斑點(diǎn)浸出液熒光強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn)斑點(diǎn)浸出液熒光強(qiáng)度(mm) F1樣品斑點(diǎn)浸出液熒光強(qiáng)度樣品斑點(diǎn)浸出液熒光強(qiáng)度(mm) F2試劑空白斑點(diǎn)浸出液熒光強(qiáng)度試劑空白斑點(diǎn)浸出液熒光強(qiáng)度(mm) V1,V2 分別為樣品濃縮液體積和點(diǎn)樣體積分別為樣品濃縮液體積和點(diǎn)樣體積(mL) m樣品質(zhì)量樣品質(zhì)量(g)5.2 目測(cè)比色法測(cè)定食品中苯并(a)芘 原理 樣品提取凈化后在乙?；癁V紙上層析分離苯并(a)芘，分離到的斑點(diǎn)在波長(zhǎng)365nm的紫外燈下觀察，與標(biāo)準(zhǔn)斑點(diǎn)進(jìn)行目測(cè)比色概略定量。 試劑和儀器同5.1 操作方法見(jiàn)P249 計(jì)算121210

47、00VVmmX 式中式中 X樣品中的苯并樣品中的苯并(a) 芘含量芘含量(g/Kg) m2樣品斑點(diǎn)相當(dāng)苯并樣品斑點(diǎn)相當(dāng)苯并(a) 芘質(zhì)量芘質(zhì)量(g) V1,V2 分別為樣品濃縮液體積和點(diǎn)樣體積分別為樣品濃縮液體積和點(diǎn)樣體積(mL) m1樣品質(zhì)量樣品質(zhì)量(g) 第六節(jié) 白酒中甲醇的測(cè)定 白酒中甲醇的危害 白酒中通常含有甲醇，微量甲醇可引起人體慢性損害，高劑量可引起人體急性中毒； 果膠含量較高原料、蒸煮原料溫度過(guò)高、時(shí)間過(guò)長(zhǎng)及使用含果膠多的糖化劑能增加成品中甲醇含量； 甲醇進(jìn)入人體后分解緩慢有蓄積作用。少量甲醇可至中毒。飲后數(shù)小時(shí)發(fā)生昏暈、沉睡、全身無(wú)力、頭痛、視覺(jué)模糊、惡心嘔吐、腹痛、呼吸困難，接著譫妄和直覺(jué)喪失，數(shù)小時(shí)至數(shù)日后失明。第六節(jié) 白酒中甲醇的測(cè)定 甲醇最突出的毒性是對(duì)視神經(jīng)作用，中毒劑量因人而異，一般78mL純甲醇可致失明， 30100mL可致死 酒中甲醇含量在2.441.1g/100mL，因而蒸餾酒必須嚴(yán)可控制甲醇含量； 我國(guó)規(guī)定： 薯干酒甲醇0.12g/L; 谷類酒甲醇0.04g/L。 蒸餾酒中甲醇含量測(cè)定有氣相色譜法和品紅亞硫酸比色法第六節(jié) 白酒中甲醇的測(cè)定 白酒中甲醇的測(cè)定常采用品紅亞硫酸比色法； 原理 甲醇在磷酸溶液中被高錳酸鉀氧化為甲醛，過(guò)量的高錳酸鉀及在反應(yīng)中產(chǎn)生的二氧化錳，在硫酸環(huán)境下被草酸還原，甲醛再與無(wú)色品紅亞硫酸試劑作用生成藍(lán)紫色化合物，在