細(xì)胞生物學(xué)-第三章研究方法

1、Structure of MicroscopeLight Pathway of Microscope1）紅外：0.8100um；2）紫外：1400nm； 近紫外輻射（A波段）：320-400nm； 中紫外輻射（B波段）：280-320nm； 遠(yuǎn)紫外輻射（C波段）：200-280nm； 極遠(yuǎn)紫外輻射（D波段）：10-200nm。 200nm以下會(huì)被空氣中氧氣所吸收，一般在真空中使用，所以又稱為真空紫外。 3）可見光：通常指波長(zhǎng)范圍為390780nm 的電磁波，其實(shí)人眼可見范圍為3121050nm。 可見光中的各種顏色的光：紅:605nm-700nm,橙:595-605,黃:580-595,綠:5

2、00-560,青:480nm-490nm,藍(lán):435nm-480nm,紫:400-435允許綠色熒光發(fā)射第一道屏障過濾器分束鏡Fluorescence image, DNA in blue and Microtubules in greenlaser confocal scanning microscope, LCSM激光共聚焦掃描顯微鏡光路圖激發(fā)針孔LCSM Image of a Xenopus Melanophore microtubule cytoskeleton (green) and the nucleus (blue)非洲蟾蜍黑色素細(xì)胞淀粉TEM LIGHT PATHWAYtran

3、smissionelectronmicroscope，TEM 透射電子顯微鏡透射電子顯微鏡Negative Stained Archaebacteria 培養(yǎng)細(xì)胞內(nèi)面的深度蝕刻電鏡照片，示籠形蛋白衣被Scanning electron microscope（ SEM）SEM LIGHT PATHWAY人類紅細(xì)胞人類紅細(xì)胞酵母酵母人類精子人類精子掃描隧道顯微鏡原理引自http:/www.iap.tuwien.ac.at STM image of a DNA molecule顯微操作儀顯微操作儀轉(zhuǎn)基因顯微操作過程 顯微操作技術(shù)包括細(xì)胞核移植、顯微注射、嵌合體技術(shù)、胚胎移植以及顯微操作技術(shù)包括細(xì)胞核

4、移植、顯微注射、嵌合體技術(shù)、胚胎移植以及顯微切割等，例如多莉羊就是運(yùn)用細(xì)胞核移植技術(shù)而成功的；而轉(zhuǎn)基因顯微切割等，例如多莉羊就是運(yùn)用細(xì)胞核移植技術(shù)而成功的；而轉(zhuǎn)基因技術(shù)指的是將外源基因?qū)塍w細(xì)胞并能穩(wěn)定的嵌入宿主動(dòng)物的生殖細(xì)胞技術(shù)指的是將外源基因?qū)塍w細(xì)胞并能穩(wěn)定的嵌入宿主動(dòng)物的生殖細(xì)胞染色體中的一門技術(shù)，基因轉(zhuǎn)殖動(dòng)物被定義為由人為的方式將外源基因染色體中的一門技術(shù)，基因轉(zhuǎn)殖動(dòng)物被定義為由人為的方式將外源基因引入體內(nèi)而引起基因改變的動(dòng)物，并可將遺傳特質(zhì)傳遞到接續(xù)的每一世引入體內(nèi)而引起基因改變的動(dòng)物，并可將遺傳特質(zhì)傳遞到接續(xù)的每一世代中。代中。The technique for the take

5、 apart and gather up of cell, and microscope manipulation Preparation and reform of karyoplast and cytoplastTransgenic animals and plantsTransgenic mice10 weeks44g and 29gLow speedHigh speedDifferential centrifugationVelocity (A) and Equilibrium (B) sedimentation群體培養(yǎng)（左）和克隆培養(yǎng)（右） Henrietta Lacks, Amer

6、ican black ,died of cancer of uterine cervix in 1951實(shí)驗(yàn)用增殖表皮癌細(xì)胞，源自一位美國黑人婦女海瑞塔 拉克斯（Henrietta Lacks）的宮頸癌細(xì)胞的細(xì)胞系Plant Cell CultureAnimal Cell CultureHAT:hypoxanthine，aminopterin，thymidine 單克隆抗體技術(shù)B淋巴細(xì)胞能分泌特異抗體，但不能長(zhǎng)期培養(yǎng)，瘤細(xì)胞可以在體外長(zhǎng)期培養(yǎng)，但不分泌特異抗體。于是Kohler和Milstein 1975將兩種細(xì)胞雜交而創(chuàng)立了單克隆抗體技術(shù)，獲1984年諾貝爾獎(jiǎng)。一、幾種模式生物第五節(jié) 模式生物