核酸檢驗(yàn)基本技術(shù)

1、第六章核酸檢驗(yàn)基本技術(shù)第一節(jié)分子生物學(xué)基本知識(shí)一、DN麗RNADNA脫氧核糖核酸白英文縮寫。DNA核甘酸排列順序形式儲(chǔ)存遺傳信息。DNA分子由4種核甘酸組成，由堿基互補(bǔ)維持DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)。在動(dòng)植物、細(xì)菌和真菌中都含有DNA但在病毒中不一定含DNADNA為長(zhǎng)絲狀分子相互糾纏，其溶液十分黏稠。它對(duì)紫外線有最強(qiáng)的吸收，通常用260nm波長(zhǎng)測(cè)DN夠液濃度，它在近中性環(huán)境中帶負(fù)電荷，DNA變性后OD值會(huì)升高。因DNA溶于乙醇，常用二倍量乙醇沉淀DNA在變性溫度時(shí)，它的黏性突然降低。淬火是為了保持DNA戀狀態(tài)。DNA變性后溶液慢慢冷卻，DNA會(huì)自動(dòng)回復(fù)雙螺旋結(jié)構(gòu)。RNA是核糖核酸的英文縮寫，在大多數(shù)生物

2、類型中，RN即遺傳信息傳遞作用并指導(dǎo)合成蛋白質(zhì)，但在一部分病毒中，RNAfe是遺傳信息的保存者。RNA分子中除了含有核糖而不是脫氧核糖外，凡DNA中出現(xiàn)胸腺喀咤的地方都代之以尿喀咤。二、DNA的復(fù)制和修復(fù)細(xì)胞分裂一次，染色體DNAa合成一次。DNA分子拆開成兩條鏈，每一條單鏈按照堿基配對(duì)的原則合成另一條新的單鏈，成為半保留復(fù)制。在合成DNA寸限制性核酸內(nèi)切酶不是合成DNA勺必要條件。DNA多聚酶只能結(jié)合在一長(zhǎng)段DNAII鏈的一小段局部雙鏈結(jié)卞上，才能順利開始DN蛤成。在DN蛤成中單核甘酸分子必須順序以共價(jià)鏈連接在已形成核酸鏈3冰端的羥基上。在合成大聲錯(cuò)誤時(shí)，DN夠聚酶會(huì)切除錯(cuò)誤核甘酸，在那個(gè)位

3、置上重新加一個(gè)正確核甘酸。在人工合成DNAM,至加一種或兩種三磷酸單核甘酸，那么和成就會(huì)停止在缺失的核甘酸位置上。在大腸菌DNA傷修復(fù)時(shí)填補(bǔ)缺口最重要的酶是DN咪合酶I,而復(fù)制最主要的DN咪合酶是DNAM合酶n。該酶的核心聚合酶中，具有325a卜切酶活性。DNA修復(fù)過(guò)程中尿喀咤糖基酶系統(tǒng)不包括SI核酸酶。逆轉(zhuǎn)錄酶的RNAase毋性是一般DNAm合酶所不具備的。三、轉(zhuǎn)錄在生物體內(nèi)，DN儂口道的RNA合成過(guò)程稱為轉(zhuǎn)錄。它是按照儲(chǔ)存在DNA尚的遺傳信息合成。合成RNA寸DNAZ鏈也要解旋，解旋部位稱啟動(dòng)子。大腸菌的RNA聚合酶有5個(gè)亞基，其d亞基有啟動(dòng)子作用。四、翻譯再合成各種不同RNA中，tRNA

4、具有搬運(yùn)氨基酸功能。構(gòu)成核糖體骨架的是rRNA而mRNAt接決定蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)。4種核甘酸排列組成遺傳信息，很撐蛋白質(zhì)時(shí)轉(zhuǎn)換成20種氨基酸的排列順序，遺傳信息的這種轉(zhuǎn)換稱為翻譯。3個(gè)核昔酸排列順序代表一種氨基酸密碼，表示蛋白質(zhì)合成開始的密碼有一種，DNA孫終止密碼子分另I是UAAUAGUGA在細(xì)菌里，依靠rRNA和mRNA：間一段互補(bǔ)序列能發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)合成開始的位置。元和生物核糖體是由16SrRNA23SrRNA和5SrRNA組成，在振和生物核糖體的五種主要的組蛋白中，H1在進(jìn)化中最不保守。在核糖體上，有2個(gè)位置上暴露出mRN吩子相鄰的2個(gè)密碼子，當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)合成進(jìn)行到?jīng)]有攜帶任何一種氨基酸的tRNA

5、與其對(duì)應(yīng)，這說(shuō)明合成蛋白質(zhì)結(jié)束，并已開始同一種蛋白質(zhì)分子的合成。合成蛋白質(zhì)后，決定其空間結(jié)構(gòu)的是蛋白質(zhì)的氨基酸排列順序確定后，就能自動(dòng)折疊卷曲呈一定的空間形狀。第二節(jié)分子生物學(xué)基本技術(shù)一、質(zhì)粒DNA的分離、純化和鑒定質(zhì)粒是一種染色體外的穩(wěn)定遺傳因子，大小從1200kb不等，為雙鏈、閉環(huán)的DNA分子，并以超螺旋狀態(tài)存在于宿主細(xì)胞中。質(zhì)粒主要發(fā)現(xiàn)于細(xì)菌、放線菌和真菌細(xì)胞中，它具有自主復(fù)制和轉(zhuǎn)錄能力，能在子代細(xì)胞中保持恒定的拷貝數(shù)，并表示所攜帶的遺傳信息。質(zhì)粒的存在使宿主具有一些額外的特性，如致病的能力和對(duì)抗生素的抗性等。把一個(gè)有用的目的DNA片段通過(guò)重組DNA技術(shù)，送進(jìn)受體細(xì)胞中進(jìn)行繁殖和表達(dá)的工

6、具叫載體。細(xì)菌質(zhì)粒是重組DNA技術(shù)中常用的載體。質(zhì)粒載體是在天然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上為適應(yīng)實(shí)驗(yàn)室操作而進(jìn)行人工構(gòu)建的。與天然質(zhì)粒相比，質(zhì)粒載體通常帶有一個(gè)或一個(gè)以上的選擇性標(biāo)記基因（如抗生素抗性基因）和一個(gè)人工合成的含有多個(gè)限制性內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)的多克隆位點(diǎn)序列，并去掉了大部分非必須序列，使分子量盡可能減少，以便于基因工程操作。一個(gè)理想的克隆抗體大致應(yīng)有下列一些特性：分子量小、多拷貝、松弛控制型；具有多種常用的限制性內(nèi)切酶的單切點(diǎn)；能插入較大的外源DNA段；具有容易操作的檢測(cè)表型。常用的質(zhì)粒載體大小一般在110kb,如PBR322PUC列、PGEM5列和pBluescript（pBS）等。從細(xì)菌中分離質(zhì)

7、粒DNA的方法都包括3個(gè)基本步驟：培養(yǎng)細(xì)菌使質(zhì)粒擴(kuò)增；收集和裂解細(xì)胞；分離和純化質(zhì)粒DNA含有治理細(xì)菌應(yīng)在能夠保存質(zhì)粒的條件下培養(yǎng)，生長(zhǎng)到足夠數(shù)量時(shí)，加入抑制蛋白質(zhì)合成的抗生素，在細(xì)菌停止繁殖后質(zhì)粒仍然還在復(fù)制，這樣就可以提高質(zhì)粒的收獲量。采用溶菌酶可以破壞菌體細(xì)胞壁，十二烷基磺酸鈉（SDS和TritonX-100可使細(xì)胞膜裂解。經(jīng)溶菌酶和SDSTritonX-100處理后，細(xì)菌染色體DNA會(huì)纏繞附著在細(xì)胞碎片上，同時(shí)由于細(xì)菌染色體DNAt匕質(zhì)粒大得多，易受機(jī)械力和核酸酶等的作用而被切斷呈不同大小的線性片段。當(dāng)用強(qiáng)熱或酸、堿處理時(shí)，細(xì)菌的線性染色體DNA變性，而質(zhì)粒的共價(jià)閉合環(huán)狀DNA的兩條鏈

8、不會(huì)相互分開，當(dāng)外界條件恢復(fù)正常時(shí)，線狀染色體DNA段難以復(fù)性，而是與變性的蛋白質(zhì)和細(xì)胞碎片產(chǎn)然在一起，而質(zhì)粒DNA鏈又恢復(fù)原狀，重新形成天然的超螺旋分子，并以溶解狀態(tài)存在也液相中。離心除去斷裂的染色體DN用口細(xì)胞的碎片，使用酚處理等方法除去包括核酸酶等的蛋白質(zhì)，在使用乙醇沉積等方法將質(zhì)粒DNA從上清液中沉積下來(lái)，就可以獲得高濃度的質(zhì)粒溶液。細(xì)胞在提取質(zhì)粒過(guò)程中，除了超螺旋DNA7卜，還會(huì)產(chǎn)生其他形式的質(zhì)粒DNA如果質(zhì)粒DNA兩條鏈中有一條鏈發(fā)生一處或多處斷裂，分子就能旋轉(zhuǎn)而消除鏈的張力，形成松弛型的環(huán)狀分子，稱開環(huán)DNA如果質(zhì)粒DNA的兩條鏈在同一處斷裂，則形成線狀DNA二、記憶組DNA的提

9、取基因組DNA的提取是研究各種生物，包括病原微生物遺傳特征的基本條件。利用基因組DNA$長(zhǎng)的特性，可以將其與細(xì)胞器或質(zhì)粒等小分子DNA分離。加入一定量的異丙醇或乙醇，基因組的大分子DNAW沉淀形成纖維狀絮團(tuán)漂浮其中，可用玻棒將其取出，而小分子DNA則只形成顆粒狀沉淀附于壁上及地步，從而達(dá)到提取的目的。在提取過(guò)程中，染色體會(huì)發(fā)生機(jī)械斷裂，產(chǎn)生大小不同的片段，因此分離基因組的DNA寸應(yīng)量在溫和條件下操作，如盡量減少酚/氯仿抽提、混勻過(guò)程要輕緩，以保證得到較長(zhǎng)的DNA一般來(lái)說(shuō)，構(gòu)建基因組文庫(kù)，初始DNA£度必須在100kb以上，否則酶切后兩邊都帶合適末端的有效片段很少。而進(jìn)行RFLP和PC

10、R分析，DNA£度可短至50kb,在該長(zhǎng)度以上，可保證酶切后產(chǎn)生RFLP片段（20kb以下），并可以保證含PCR所擴(kuò)增的片段（一般2kb以下）。不同生物（植物、動(dòng)物、微生物）的基因組DNA的提取方法有所不同；不同種類或同一種類的不同組織因其細(xì)胞結(jié)構(gòu)及所含的成分不同，分離方法也有差異。組織中的多糖和酶類物質(zhì)對(duì)隨后的酶切、PC或應(yīng)等又較強(qiáng)的抑制作用，因此用富含這類物質(zhì)的材料提取基因組DNA寸，應(yīng)考慮出去多糖和酚類物質(zhì)。三、RNA的提取和cDNA合成在病原微生物中，許多種類病毒的基因組由RNAfi成，真核生物的組織或細(xì)胞中也存在著大量的RNA提取這些RNA是了解生物和微生物中的生命過(guò)程，認(rèn)

11、識(shí)疾病的基本條件。細(xì)胞內(nèi)總RNA制備方法很多，如異硫鼠酸月瓜熱本分發(fā)等。許多公司有現(xiàn)成的總RN碾取試劑盒，可快速有效地提取到高質(zhì)量的總RNA分離的總RNA可利用mRNA深端含有多聚（A）+的特點(diǎn)，當(dāng)RNA流經(jīng)oligo（dT）纖維素柱時(shí)，在高鹽緩沖液彳用下，mRN酸特異的吸附在oligo（dT）纖維素上，然后逐漸降低鹽濃度洗脫，在地鹽溶液或蒸儲(chǔ)水中，mRN徽洗下。經(jīng)過(guò)兩次oligo（dT）纖維素柱，可得到較純的mRNA純化的mRN肝70呃醇中-70C可保存1年以上。RNA®可以通過(guò)酶促反應(yīng)逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA來(lái)加以研究，將雙鏈cDNA和載體連接，然后轉(zhuǎn)化擴(kuò)增，即可獲得cDNA文庫(kù)，構(gòu)建

12、的cDNA文庫(kù)可用于振和生物基因的結(jié)構(gòu)、表達(dá)和調(diào)控的分析；比較cDNA相應(yīng)基因組DNA列差異可確定內(nèi)含子存在和了解轉(zhuǎn)錄后加工等一序列問(wèn)題。cDNA成及克隆的基本步驟包括用反轉(zhuǎn)錄酶合成cDNA1一鏈，聚合酶合成cDNA第二鏈，加入合成接頭以及將雙鏈DNA克隆到適當(dāng)載體（噬菌體或質(zhì)粒）。四、DNA酶切及凝膠電泳限制性內(nèi)切酶能特異地結(jié)合于一段被稱為限制性酶識(shí)別序列的DNA序列之內(nèi)或其附近的特異位點(diǎn)上，并切割雙鏈DNA它可分為三類，其中n類限制性內(nèi)切酶在分子克隆和微生物鑒定中得到廣泛應(yīng)用。絕大多數(shù)n類限制酶識(shí)別長(zhǎng)度為4個(gè)或6個(gè)核甘酸的回文對(duì)稱特異核甘酸序列。與的在對(duì)稱軸處切割，產(chǎn)生平末端的DNM段，有

13、的切割位點(diǎn)在對(duì)稱軸一側(cè)，產(chǎn)生帶有單鏈突出末端的DNA片段稱黏性末端。利用限制性內(nèi)切酶的這些性質(zhì)，可以對(duì)各種DNA吉構(gòu)進(jìn)行限制性內(nèi)切酶分析。DNA經(jīng)限制性內(nèi)切酶切割后，產(chǎn)生許多一定長(zhǎng)度的片段，使用電泳的方法分離不同長(zhǎng)度的片段，一種DNA吉構(gòu)就能形成一種特征性的圖形，稱為DNA的電泳圖譜，為了獲得條帶清晰的電泳圖譜，一般DNAffl量為0.51g。限制性內(nèi)切酶的酶解反應(yīng)最適條件各不相同，各種酶有其相應(yīng)的酶切緩沖液和最適反應(yīng)溫度（大多數(shù)為37C）。對(duì)質(zhì)粒DNA酶切反應(yīng)而言，限制性內(nèi)切酶用量可按標(biāo)準(zhǔn)體系1科9口人加1單位酶，下滑12小時(shí)。但要完全酶解則必須增加酶的用量，一般增加23倍，甚至更多，反應(yīng)時(shí)

14、間也要適當(dāng)延長(zhǎng)。在酶切圖譜制作過(guò)程中，瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠電泳是分離鑒定和純化DNA片段的標(biāo)準(zhǔn)方法。瓊脂糖和聚丙烯酰胺可以制成各種形狀、大小和孔隙度。瓊脂糖凝膠分離DNA片段大小范圍較廣，不同濃度瓊脂糖凝膠可分離長(zhǎng)度從200bp至近50kb的DNA片段。瓊脂糖通常用水平裝置在強(qiáng)度和方向恒定的電場(chǎng)下電泳。聚丙烯酰胺分離小片段DNA5500bp）效果較好，其分辨力極高，甚至相差1bp的DNM段就能分開。聚丙烯酰胺凝膠通常采用垂直裝置進(jìn)行電泳。電泳完畢后，使用澳化一咤染色，DN*段聚集的地方，在紫外線下可以顯示發(fā)橙色熒光的條帶。如果電泳中使用了已知大小的DNA片段作為分子量標(biāo)志，可以測(cè)量并計(jì)算出每

15、一DN*段的長(zhǎng)度。結(jié)合使用多種限制性內(nèi)切酶，通過(guò)綜合分析將這些片段排列起來(lái)，便可作出DNA的限制性內(nèi)切酶酶切圖譜。DNA限制性內(nèi)切酶酶切圖譜又稱DNA勺物理圖譜，它由一系列位置確定的多種限制性內(nèi)切酶酶切位點(diǎn)組成，以直線或環(huán)狀圖式表示。需要注意DNA純度、緩沖液、溫度條件及限制性內(nèi)切酶本身都會(huì)影響限制性內(nèi)切酶的活性，只有嚴(yán)格控制條件才能保證酶切圖譜的準(zhǔn)確性。第三節(jié)探針和雜交技術(shù)DNA的雙鏈結(jié)構(gòu)解旋形成單鏈稱為DNA勺變性，變性后的DNAII鏈，仍可通過(guò)堿基配對(duì)重新次年工程雙鏈結(jié)構(gòu)，稱為復(fù)性。在復(fù)性過(guò)程中，不同來(lái)源的互補(bǔ)核甘酸系列形成穩(wěn)定的雜合雙鏈DNA的過(guò)程稱為分子雜交。帶有可以識(shí)別標(biāo)記的已知核

16、甘酸系列稱為探針，由于雜交過(guò)程的高度特異性，可以根據(jù)所使用的探針測(cè)知對(duì)應(yīng)系列的存在，這種方法稱為雜交技術(shù)。核酸分子雜交具有很高的靈敏度和高度的特異性，因而該技術(shù)在分子生物學(xué)領(lǐng)域中已廣泛地使用于克隆基因的篩選、酶切圖譜的制作、基因組中特定基因系列的定性、定量檢測(cè)和疾病的診斷等方面。因而它不僅在分子生物學(xué)領(lǐng)域中具有廣泛地應(yīng)用，而且在臨床診斷上的應(yīng)用也日趨增多。核算探針根據(jù)核酸的性質(zhì)，可分為DN窗口RN琳針。分子生物研究中，DNA探針最為常用，通常使用已知的DNA片段，將帶有顯色酶促反應(yīng)標(biāo)記的單核昔酸合成其中，也可在PCR反應(yīng)的過(guò)程中加入標(biāo)記的單核甘酸，擴(kuò)增的產(chǎn)物即可用作探針。利用寡核甘酸探針可檢測(cè)

17、到靶基因上單個(gè)核甘酸的點(diǎn)突變。常用的寡核甘酸探針主要有兩種：?jiǎn)我灰阎盗械墓押烁仕崽结樅驮S多簡(jiǎn)并性寡核甘酸探針組成的寡核甘酸探針庫(kù)。單一已知系列的寡核甘酸探針能與它們的目的系列準(zhǔn)確配對(duì)，可以準(zhǔn)確地設(shè)計(jì)雜交條件，以保證探針只與目的系列雜交而不與系列相近的非完全配對(duì)系列雜交，對(duì)于一些未知系列的目的片段則無(wú)效。RNA探針一般都是單鏈，它具有單鏈DNA探針的優(yōu)點(diǎn)，又具有許多DNAII鏈探針?biāo)鶝](méi)有的優(yōu)點(diǎn)，主要是：RNA:DN賒交體比DNA:DN賒交體有更高的穩(wěn)定性，所以在雜交反應(yīng)中RNA探針比相同比活性的DNA探針?biāo)a(chǎn)生信號(hào)要強(qiáng)。RNA:RN賒交體用RNA酶A酶切比S1酶切DNA:RN殊交體容易控制，所

18、以用RNA探針進(jìn)行RNA吉構(gòu)分析比用DN琳針效果好。分子雜交是通過(guò)各種方法將核酸分子固定在固相支持物上，然后用帶有標(biāo)記的探針與被固定的分子雜交，經(jīng)顯影后顯示出目的DNARNA分子所處的位置。根據(jù)被測(cè)定的對(duì)象，分子雜交基本可分為以下幾大類：(1) Southern雜交：DNA片段經(jīng)電泳分離后，從凝膠中轉(zhuǎn)移到硝酸纖維膜或尼龍膜針上，然后與探針雜交。被檢對(duì)象為DNA探針為DNA<RNA(2) Northern雜交：RNA片段經(jīng)電泳后，從凝膠中轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素濾膜上，然后用探針雜交。被檢對(duì)象為RNA探針為DNA<RNA(3)其他：根據(jù)雜交所用的方法，另外還有斑點(diǎn)雜交、狹槽雜交和原位雜交等。

19、有3種固相支持體可用于雜交：硝酸纖維素濾膜、尼龍膜和Whatman541濾紙。Whatman541濾紙有很高的濕強(qiáng)度，最早用于篩選細(xì)菌菌落，與硝酸纖維濾膜相比有一些有限：它更便宜，雜交中更耐用，干燥過(guò)程中不易變形和碎裂等。然而若變形過(guò)程不小心，雜交信號(hào)的強(qiáng)度會(huì)明顯弱于用硝酸纖維濾膜時(shí)所得到的信號(hào)強(qiáng)度。因此，常規(guī)的細(xì)菌篩選和各種雜交時(shí)多選用硝酸纖維濾膜作為固相支持體。第四節(jié)擴(kuò)增技術(shù)PCR（聚合酶鏈反應(yīng)）是一種選擇性體外擴(kuò)增DNARNA的方法。它包括三個(gè)基本步驟：變形：雙鏈DNA片段在94c下解鏈；退火：兩種寡核甘酸引物在適當(dāng)溫度（50c左右）下與模板上的目的系列通過(guò)氫鍵配對(duì)；延伸：在TaqDNA

20、聚合酶合成DNA的最適溫度下，以目的DNA為模板進(jìn)行合成。由這三個(gè)基本步驟組成一輪循環(huán)，理論上每一輪循環(huán)將使目的DNAT增一倍，這些經(jīng)合成產(chǎn)生的DNA又可作為下一輪循環(huán)模板，所以經(jīng)2535輪循環(huán)就可使DNAT增達(dá)106倍。PCR反應(yīng)中的成分主要有：（1） 引物：PCR反應(yīng)產(chǎn)物的特異性由一堆上下游引物所決定。引物的好壞往往是PC做敗的關(guān)鍵。（2） 4種三磷酸脫氧核甘酸（dNTP）:理論上4種dNTP各20科mol/L,足以在100“反應(yīng)中合成2.6科g的DNA當(dāng)dNTP終濃度大于50mmol/L時(shí)可抑制TaqDNA聚合酶的活性。4種dNTP的濃度應(yīng)該相等，以減少合成由于某種dNTP的不足出現(xiàn)的錯(cuò)

21、誤摻入。，一、_2+（3） Mg:M0+濃度對(duì)TaqDNA聚合酶影響很大，通常反應(yīng)體系中Mg+濃度范圍為0.52mmol/L。（4）模板：PC即應(yīng)必須以DNA為模板進(jìn)行擴(kuò)增，模板DNAM以是單鏈分子，也可以是雙鏈分子，可以是線狀分子，也可以是環(huán)狀分子（線狀分子比環(huán)狀分子的擴(kuò)增能效果稍好），就模板DNAB言，影響PCR勺主要因素是模板的數(shù)量和純度。（5）TaqDNA聚合酶：TaqDNA聚合酶耐高溫，其活性半衰期92.5C為130分鐘，95c為40分鐘，97c為5分鐘。（6）反應(yīng)緩沖液：反應(yīng)緩沖液一般含1050mmol/LTrisCl,20c下pH8.38.8,50mmol/LKCl和適當(dāng)濃度的M

22、。利用擴(kuò)增技術(shù)可以獲得任何數(shù)量的已知基因或DNA片段，也可以進(jìn)一步通過(guò)系列測(cè)定來(lái)逐段查明生物基因組的結(jié)構(gòu)，在分子水平上的基因組多態(tài)性檢測(cè)技術(shù)中，也有一些擴(kuò)增技術(shù)為基礎(chǔ)。例如隨機(jī)擴(kuò)增的多態(tài)性DNA（RAPD分析和擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性（AFLP）分析。前者利用一系列（通常數(shù)百個(gè)）不停的隨機(jī)排列堿基順序的寡聚核甘酸單鏈（通常為10聚體）為引物，對(duì)所研究基因組DNA®彳TPCRT增；后者則在限制酶切割的基礎(chǔ)上，利用DNA片段兩端的黏性末端連接人工合成的“接頭”，再根據(jù)接頭序列進(jìn)行擴(kuò)增。擴(kuò)增的產(chǎn)物電泳分離后形成圖形，可以作為整個(gè)基因組的特征標(biāo)志，也可以將擴(kuò)增的片段測(cè)序后，對(duì)基因組的結(jié)構(gòu)進(jìn)行細(xì)致的分析。第五節(jié)高通量檢測(cè)技術(shù)生物基因組是一個(gè)機(jī)器巨大的分子，目前，已經(jīng)可以使用精確的測(cè)定方法，查明其中每一部分的特征。然而，這種測(cè)定的數(shù)量及其龐大，迫切需要發(fā)展在一次測(cè)定中，獲得成百上千反應(yīng)的結(jié)果。這樣的技術(shù)，稱為高通量檢測(cè)技術(shù)。目前，生物芯片技術(shù)是發(fā)展最快，也是應(yīng)用最為廣泛的高通量技術(shù)。生物芯片技術(shù)是20試劑90年代生命科學(xué)領(lǐng)域中迅速發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)新技術(shù)，其本質(zhì)是固定在玻片等載體上的微型生物化學(xué)分析系統(tǒng)，芯片上每平方厘米可密集排列成千上萬(wàn)個(gè)生物分子，能快速準(zhǔn)確地檢測(cè)細(xì)胞、蛋白質(zhì)、DNA其他生物組分，并獲得樣品的有關(guān)信息，其效率是傳統(tǒng)方法的成百上千倍