細胞工程課程設(shè)計模板參閱版

1、燕山大學(xué)課 程 設(shè) 計 說 明 書透明質(zhì)酸對牛卵母細胞體外成熟影響的設(shè)計學(xué)院（系）： 環(huán)境與化學(xué)工程學(xué)院年級 專業(yè)： 00級 生 物 制 藥 學(xué) 號： 040110050001 學(xué)生 姓名： 趙宏偉 指導(dǎo) 教師： 趙紅衛(wèi) 教師 職稱： 講 師 燕山大學(xué)課程設(shè)計（論文）任務(wù)書院（系）：XXXXXXXX 基層教學(xué)單位： 這個地方經(jīng)常犯錯誤學(xué) 號040110050001學(xué)生姓名趙宏偉也容易犯錯誤專業(yè)（班級）00級生物制藥設(shè)計題目透明質(zhì)酸對牛卵母細胞體外成熟的影響設(shè)計主要內(nèi)容1.HA濃度對牛卵母細胞體外成熟的影響2.HA在不同基礎(chǔ)培養(yǎng)液中對卵母細胞成熟的影響3.OCS、BSA與HA 對牛卵母細胞體外成

2、熟的影響設(shè)計要求1.要有明確設(shè)計的目的2.設(shè)計合理的操作方式3.設(shè)計出合理的測定指標4.設(shè)計的內(nèi)容要與題目基本一致5.設(shè)計總結(jié)與分析（設(shè)計特點及補充說明，鑒別比較分析，個人體會等）工作量1.至少閱讀15篇以上的相關(guān)科技文獻2.設(shè)計文字至少在15000字以上工作計劃這部分內(nèi)容要按照自己的需求去定.8.278.28 查閱資料8.298.31 整理文獻9.1 9.5 提出設(shè)計方案9.6 9.10 撰寫說明書9.119.12 檢查內(nèi)容，準備答辯9.139.14 答辯參考資料嚴格按照參考文獻標準去撰寫具體寫法參考標準版參考文獻1方巖雄,呂錢江等.超臨界二氧化碳流體萃取分離技術(shù)J.精細與專用化學(xué)品,200

3、2, 10(6): 17-19, 21. 2王欣,陳慶華，李元瑞.大蒜品種及預(yù)處理條件對超臨界C02萃取效果的影響J.食品與機械，2003,(2): 13-14. 3王欣,李元瑞.眼臨界充體萃取過程的優(yōu)化選擇J.中國油脂,2000,25(6):200-203. 指導(dǎo)教師簽字基層教學(xué)單位主任簽字說明：學(xué)生、指導(dǎo)教師、基層教學(xué)單位各一份。年 月 日 燕山大學(xué)課程設(shè)計成績評定表設(shè)計者姓名: 趙宏偉 學(xué)號: A100000000 設(shè)計題目: 透明質(zhì)酸對牛卵母細胞體外成熟的影響 指導(dǎo)教師成績評定（滿分100分）： 得分設(shè)計內(nèi)容的切題程度：滿分20分你的題目是否和設(shè)計的內(nèi)容相吻合，內(nèi)容超出題目范疇或者題目

4、太大而內(nèi)容過小都會扣分按照不合理的程度，就是立題的程度分別扣分，2分，4分，6、8分 （ ）設(shè)計內(nèi)容立題合理性：滿分10分就是要符合科學(xué)規(guī)律，如果超出現(xiàn)有科學(xué)規(guī)律，或者超出本學(xué)科的范疇，將按照程度扣除分，分，分，分 （ ）設(shè)計內(nèi)容的規(guī)范程度：滿分10分這個內(nèi)容就是要求,每一個單元的撰寫規(guī)范性，按照要求書寫每個單元：譬如，把設(shè)計寫成方法，或者把方法寫成設(shè)計，把材料寫成設(shè)備，把設(shè)備寫成材料，或者設(shè)計內(nèi)容撰寫不清楚或者文不對題等等，按照程度不同扣分，2分，4分，6分，8分。 （ ）設(shè)計書前后內(nèi)容完整：滿分20分本部分是指，說明書前后不一致，題目和內(nèi)容不一致，方法和內(nèi)容的不一致，分析和內(nèi)容的不一致，摘

5、要和設(shè)計內(nèi)容的不一致，目錄和內(nèi)容的不一致；例如：某個設(shè)計內(nèi)容完成必須需要某種試驗方法，但是在方法中找不到你要完成某個內(nèi)容方法；另外，多余方法的存在，把設(shè)計內(nèi)容不需要的方法也添加在其中，為了增加內(nèi)容。出現(xiàn)這些問題都要扣分，按照程度分別扣4分，8分，12分，16分。 （ ）設(shè)計說明說排版成績：滿分20分 排版嚴格按照標準版進行排版,錯誤1處扣2分，扣完為止。 （ ）設(shè)計說明書的工作量：滿分10分工作量就是字數(shù)和參考文獻數(shù)量，不到字數(shù)和要求的，一次扣完。 （ ）設(shè)計過程平時成績： 滿分10分不能按照要求提交說明書的，按照每晚1小時扣除2分，時間按照QQ郵箱郵件時間為準，成績?yōu)?分者將視為放棄本次設(shè)計

6、。 （ ）總分: 答辯成績評定：（滿分100分） 得分儀表成績：滿分20分 （ ）口語表達：滿分30分 （ ）幻燈質(zhì)量：滿分20分 （ ）設(shè)計分析：滿分40分 （ ）總分: 設(shè)計撰寫成績（70%）答辯成績（30%）合計教師簽字： 年 月 日200X-201X X季學(xué)期注意修改生物工程專業(yè)課程設(shè)計結(jié)題論文透明質(zhì)酸對牛卵母細胞體外成熟影響的設(shè)計學(xué)院（系）： 環(huán)境與化學(xué)工程學(xué)院年級 專業(yè)： 00級 生 物 制 藥 學(xué) 號： 040110050001 學(xué)生 姓名： 趙宏偉 指導(dǎo) 教師： 趙紅衛(wèi) 教師 職稱： 講 師 摘 要 說明：摘要就是整篇材料的濃縮，通過摘要的信息，讀者能夠知道你做了什么；大體30

7、0-500字，把這部分刪除，是用來解釋的 本設(shè)計擬定在改良的基礎(chǔ)培養(yǎng)液中添加HA，主要探討HA對牛卵母細胞成熟的影響。設(shè)計內(nèi)容主要分為三部分：HA濃度對牛卵母細胞體外成熟影響的設(shè)計；HA在不同基礎(chǔ)培養(yǎng)液中對卵母細胞成熟影響的設(shè)計；OCS、BSA與HA 對牛卵母細胞體外成熟影響的設(shè)計。第一部分設(shè)計擬定探索出HA能夠提高卵母細胞成熟的最佳濃度，為HA對卵母細胞成熟影響的研究奠定基礎(chǔ)；第二部分設(shè)計是在第一部分的基礎(chǔ)上分析HA對母細胞成熟的影響，擬定探索基礎(chǔ)培養(yǎng)基是否影響HA的效果；第三部分設(shè)計就是在前兩部分的基礎(chǔ)上，探討新發(fā)現(xiàn)的HA是否由于傳統(tǒng)的添加物 OCS、BSA。通過本次設(shè)計，擬定探討HA能否

8、有效地提高牛卵母細胞的成熟率，并確定最佳的濃度范圍，進一步與傳統(tǒng)添加物比較，新型的HA能否代替OCS、BSA，成為一種成分確定的卵母細胞成熟添加物。關(guān)鍵詞：透明質(zhì)酸；牛卵母細胞；體外成熟；卵裂率目 錄第一部分：文獻綜述1.XXXXXXXXX 11.1 XXXX 11.2 XXXX 11.3 XXXX 11.4 XXXX 22. XXXXXXXXX 22.1 XXXXX22.2 XXXXX32.3 XXXXX32.4 XXXXXX32.5 XXXXX32.6 XXXXX42.7 XXXXX42.8 XXXXX43. XXXXXXX43.1 XXXXX 43.2 XXXXX44. XXXXXX44

9、.1 XXXX44.2 XXXXX54.3 XXXXXX7 XXXX74.3.2 XXXXX84.3.3 XXXXXX94.4 XXXXX9第二部分：課程設(shè)計部分1. 材料111.1 XXX111.2 XXXX11 XXX111.2.2 XXXX111.3 XXX111.4 XXX112. 方法112.1 XXX112.2 XXXX112.3 XXXX122.4 XXXX122.5 XX122.6 XXXXX122.7 XXXXX123. 設(shè)計133.1 HA濃度對牛卵母細胞體外成熟的影響133.2 OCS、BSA與HA對牛卵母細胞體外成熟的影響133.3 HA在不同基礎(chǔ)培養(yǎng)液中對卵母細胞成熟

10、的影響134. 分析與總結(jié)14參考文獻14第一部分 文獻綜述 文獻綜述就是對你研究或者設(shè)計題目相關(guān)材料的歸納、總結(jié)與分析，得到你要的信息，發(fā)現(xiàn)此部分內(nèi)容的不足！你的設(shè)計就是彌補不足或者填補空白！是問題得到很好的解決7500字左右 1. XXXXXX（標題四號（黑體）1.1XXXX（小四 黑體）XXXX（小四 宋體）XXXXXXXXXXXXXXX（正文字體宋體小四，固定值21磅）2.XXXX2.1三個空格（正文字體宋體小四固定值21磅）3XXXXXXXXX（1）XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX（2）XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX這種標號屬于標號體系混亂。第二

11、部分 課程設(shè)計部分透明質(zhì)酸對牛卵母細胞體外成熟影響的設(shè)計（與正文之間空兩行）（下面部分為設(shè)計的引言，就是你為什么要進行這項研究，有什么價值以及你的目的，這也是文獻綜述的延伸，就是從文獻綜述中提煉的精華，作為研究或者設(shè)計的引子，7500字左右，此部分為解釋，應(yīng)該刪除）隨著現(xiàn)代動物生物技術(shù)的發(fā)展，卵母細胞的需求日益增加，而且卵母細胞的成熟程度直接影響卵母細胞的利用效率，提高卵母細胞成熟的質(zhì)量將會有益于這一問題的解決。但是，體外成熟的卵母細胞與體內(nèi)成熟相比較，支持胚胎發(fā)育的潛力有限；因此，進一步模擬卵母細胞體內(nèi)的生長環(huán)境仍然是目前研究的重點。研究表明，在哺乳動物卵泡液、輸卵管和子宮液中存在大量的粘多

12、糖分子14，透明質(zhì)酸（hyaluronic acid，HA）便是其中主要成分，它由顆粒細胞、卵丘細胞和上皮細胞分泌5，并在牛的卵母細胞、卵丘細胞、早期胚胎和囊胚上發(fā)現(xiàn)了其受體6，其主要功能是支持細胞粘結(jié)和遷移、調(diào)節(jié)細胞基因表達、蛋白質(zhì)分泌、細胞增生分化等，影響細胞代謝途徑、影響腺苷酸環(huán)化酶的活性以及ATP的濃度7,8。國外有人在卵母細胞成熟液中添加HA可代替血清和血清白蛋白（bovine serum albumin，BSA）使卵母細胞成熟9，國內(nèi)尚無此類研究。因此，本研究通過在無血清培養(yǎng)基中添加HA對牛卵母細胞進行成熟培養(yǎng)，探索不同濃度的HA對卵母細胞成熟培養(yǎng)的影響，并能否代替BSA和血清使卵

13、母細胞成熟，以期尋找牛卵母細胞無血清成熟培養(yǎng)的較佳途徑。1材料1.1 卵巢豬卵巢采集自河北省秦皇島市海濱區(qū)新店子屠宰場。豬宰殺剖腹后，立即無菌剪下卵巢，挑選黃體期和紅體較少，卵泡直徑約35 mm、大小均勻的卵巢，使用37 的PBS緩沖液沖洗干凈，置于37 的PBS緩沖液4h內(nèi)帶回實驗室。1.2 試驗儀器儀器廠商型號體式顯微鏡日本NikonSMZ熒光顯微鏡日本NikonE600全自動高壓消毒鍋日本YamatoSM-51CO2培養(yǎng)箱美國 BINDER低溫臺式高速離心機德國 Eppendorf自動數(shù)字天平ADEK-120A液氮罐Taylar-Wharton這里只是為了排版需要，其實它不是表格。1.3

14、 試驗藥品藥品廠商TCM199GIBCOHepesSIGMAFCSSIGMAFSH寧波市激素制品有限公司LH寧波市激素制品有限公司PFF自制青霉素大連美羅大藥廠鏈霉素大連美羅大藥廠蔗糖上海生物優(yōu)先公司GlySIGMADMSOSIGMA0.25ml細管北京耀北生物技術(shù)公司四孔板北京耀北生物技術(shù)公司2.方法（方法就是具體的試驗步驟；解釋刪除）2.1卵母細胞的采集從屠宰場收集卵巢后，放入35雙抗生理鹽水中，用保溫瓶在3 h 內(nèi)運到實驗室，去除血污。然后用帶有18G針頭的一次性注射器，抽吸直徑2 10 mm卵泡中的卵泡液。吸卵液為TCM199+25 mmol/L HEPES+10 g/mL肝素+4.0

15、 g/L BSA。吸出液收集在35 mm一次性培養(yǎng)皿中，靜置510 min后，在實體顯微鏡下挑選形態(tài)及顏色正常的、卵丘顆粒細胞層完整、細胞質(zhì)均勻的卵母細胞。2.2卵母細胞的成熟培養(yǎng)收集的卵母細胞用成熟培養(yǎng)液半量沖洗3次，然后移至至少平衡2 h培養(yǎng)液滴中，每滴放置約1020枚卵母細胞，上覆石蠟油，在39，5的CO2和相對飽和濕度的二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2224 h。成熟培養(yǎng)液為見試驗設(shè)計。2.3體外受精 用含有6 g/L BSA、3.0µg/mL肝素、3.0 µg/L青霉素、1.0 µg/mL亞牛黃酸和0.3 µg/mL腎上腺素組成的受精液做成30 

16、1;L受精滴，放入CO2 培養(yǎng)箱中平衡12 h。然后，用改良的Tyrodes液離心洗滌解凍精液23次，最終用受精液將精子密度稀釋至2×106/mL。在精液洗滌的同時，分離卵丘卵母細胞復(fù)合體（cumulus-oocyte complexes，COCs）上的卵丘細胞，使卵母細胞和卵丘細胞相互分離，用受精液洗滌3 次，每10個卵母細胞移置一個受精滴中。再用移液器吸取10 L處理好的精液加至受精小滴中，然后覆蓋石蠟油，在39、5 CO2、飽和濕度培養(yǎng)箱中進行孵育，48 h后檢查卵裂率。3. 設(shè)計設(shè)計方法與任務(wù)書內(nèi)容不一致。也是存在的問題。（設(shè)計就是你的核心內(nèi)容，就是你要如何解決你在任務(wù)書中列

17、舉的問題設(shè)計的內(nèi)容，通過什么樣手段達到你的目的，這部分與方法不一樣，方法只是操作的流程，而不涉及思想，此內(nèi)容為解釋要刪除）3.1 HA濃度對牛卵母細胞體外成熟的影響將選擇的卵母細胞隨機分配到HA濃度為0、1.5、3.0、4.5、6.0 mg/mL培養(yǎng)液中進行體外培養(yǎng)，以空白組為對照組（CK）。檢查極體排出率，再將成熟的卵母細胞進行體外受精檢查卵裂率，以確定HA的最佳濃度。3.2 OCS、BSA與HA 對牛卵母細胞體外成熟的影響將選擇的卵母細胞隨機分配到含有HA、發(fā)情母牛血清(Oestrus Calf Serum，OCS)與BSA的mTCM-199中進行體外培養(yǎng)，以HA組為對照組（CK），檢查極

18、體排出率，再將成熟的卵母細胞進行體外受精檢查卵裂率，探索HA能否代替OCS和BSA。3.3 HA在不同基礎(chǔ)培養(yǎng)液中對卵母細胞成熟的影響將選擇的卵母細胞隨機分配到含有4.0mg/mL HA的mTCM-199和mSOF培養(yǎng)液中進行體外培養(yǎng)，檢查極體排出率，再將成熟的卵母細胞進行體外受精檢查卵裂率，確定HA的效果是否與基礎(chǔ)培養(yǎng)液有關(guān)。4分析與總結(jié)就是論證每部分設(shè)計的合理性和自己設(shè)計的理論依據(jù)。（此部分內(nèi)容就是對你的設(shè)計的自我評價，通過別人的試驗結(jié)果或者科學(xué)原理進行進一步的論證分析，此部分為解釋，應(yīng)刪除）3.1 HA濃度對牛卵母細胞體外成熟的影響HA作為一種粘多糖不僅能夠改善無血清培養(yǎng)基的物理特性，而

19、且通過降解代謝為細胞成熟提供營養(yǎng)與能量10。本設(shè)計，3.2 OCS、BSA與HA對牛卵母細胞體外成熟的影響Stojkovic 等9認為HA可代替血清支持培養(yǎng)系統(tǒng)，但本設(shè)計XXXXXXX。以上分析表明在無血清培養(yǎng)條件下，HA可代替BSA，但是效果還不及血清。3.3 HA在不同基礎(chǔ)培養(yǎng)液中對卵母細胞成熟的影響Stojkovic等9（1999）在SOF-HA液中的卵母細胞成熟率比本研究mTCM-199-HA的結(jié)果高，本設(shè)計XXXXXXXX 本設(shè)計通過在改良的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加HA使牛卵母細胞成熟，初步認為HA在一定的濃度范圍內(nèi)可能對牛卵母細胞的成熟具有促進作用；在無血清培養(yǎng)中擬代替BSA，但是培養(yǎng)的效

20、果可能如血清，因此完全代替血清還需要進一步探討分析。另外HA在不同的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，對卵母細胞的成熟應(yīng)該無明顯差異。參考文獻（宋體 5號）1 Pincus G, Enzmam EV.西文點號 The comparative behaviors of mammalian eggs in vivo and in vitroJ文獻屬性 ExpMed,1935, 62: 665-675.2 Suchanek E, Simunic V, Juretic D and Grizelj V. Follicular fluid contents of hyaluronic acid, follicle-

21、stimulating hormone and steroids relative to the success of in vitro fertilization of human oocytes J. Fertility and Sterility, 1994, 62: 347-352.3 Stojkovic M, Peinl S, Stojkovic P, et al. High concentration of hyaluronic acid in culture medium increases the survival rate of frozen or thawed in vit

22、ro produced bovine embryos J. Theriogenology, 2001, 55: 317-356.4 Kanok K, Miyano T and Kota S. Effects of glycosaminoglycans on the development of in vitro matured and fertilized porcine oocytes to the blastocyst stage in vitro J. Biology of Reprodction, 1998, 58: 1226-1232.5 Eppig JJ. FSH stimulat

23、es hyaluronic acid synthesis by oocyte-cumulus cell complexes from mouse preovulatory follicles J. Nature, 1979, 281: 483-484.6 Valcarcel A, Matos DG, Furnus C. The hyaluronic acid receptor (CD44) is express in bovine oocytes and preimplantational stage embryos J. Theriogenology, 1999, 51: 193-197.7 Fraser JRE, Laurent TC, Laurent UBG. Hyaluronan: its nature, distribition, functions and turnover J. Journal of internal Medicine, 1997, 242: 27-33.8 Laurent TC, Fraser JRE. Hyaluronic J. Journal of the Federation of American societies for Experimental Biology, 1992