第14章 平面色譜法

1、第第14章章 平面色譜法平面色譜法14.1 概述14.2 平面色譜法的技術參數(shù)14.3 固定相、載體與薄層板14.4 樣品制備與點樣14.5 平面色譜法的展開14.6 展開后處理與斑點定位14.7 定性分析14.8 定量分析14.9 在藥學領域的應用14.1 概述14.1 概述14.1.1 平面色譜法的一般過程薄層板制備點樣展開斑點定位定性定量樣品制備衍生化預平衡平面色譜法一般操作流程14.1 概述14.1.2 分離原理、分類及分離機理14.2 平面色譜法的技術參數(shù)14.2 平面色譜法的技術參數(shù)1. 比移值2. 相對比移值0ifLLR sif(s)f(i)rLLRRRiL0L比移值計算示意圖s

2、L0LiL相對比移值計算示意圖展開劑前沿原點14.2 平面色譜法的技術參數(shù)1. 平面色譜中K、k與Rf的關系kRRRVVKVcVck11 1msmmssffmsf1 /1111RRkVKVkR14.2 平面色譜法的技術參數(shù)2. 相平衡參數(shù)的對比移值和分離效果的影響 相平衡參數(shù)分配系數(shù)和容量因子決定著Rf的大小，進而決定著平面色譜的分離結果。而相平衡參數(shù)從根本上取決于組分、固定相和展開劑三者之間的性質，當組分和固定相選定后，比較靈活實用的策略是對展開劑進行優(yōu)化選擇。此外，展開過程中的溫度、壓力等外界因素也會影響熱力學參數(shù)的大小，影響比移值。14.2 平面色譜法的技術參數(shù) 平面色譜法的分離效能稱為

3、面效，薄層色譜法稱為板效。面效參數(shù)也為理論塔板數(shù)N和理論塔板高度H，反映的是組分在平面色譜中分離效能的動力學特性，但其表達式與柱效有所不同。1. 平面色譜的理論塔板數(shù)2. 平面色譜的理論塔板高度NLHWLN02 1614.2 平面色譜法的技術參數(shù)1. 分離度2. 分離數(shù)21ff021122112222WWRRLWWLLWWdR112/102/10WWLSN1W2Wdd原點原點展開劑前沿展開劑前沿分離度計算示意圖14.3 固定相、載體與薄層板14.4 樣品制備與點樣14.5 平面色譜法的展開1. 展開劑的選擇 展開劑的作用是攜帶樣品中的組分分子向一定方向移動，使不同組分因移行速度的差異而分離。展

4、開劑有單一溶劑或多元溶劑體系所構成。 要求：合適的純度、穩(wěn)定性、低粘度、適當?shù)恼魵鈮骸⒕€性分配等溫線、低毒性。 薄層色譜的展開劑選擇原則與其它色譜法相類似。 紙色譜的展開劑由三類溶劑構成三元系統(tǒng)：第一類是對被分離物質溶解度較小的極性溶劑；第二類是對被分離物質溶解度較大的溶劑；第三類是用于調節(jié)的溶劑。14.5 平面色譜法的展開2. 展開方式：一維單向展開、單向多次展開、增量(減量)單向多次展開。3. 展開設備：俗稱層析缸，常用的有上行展開室、下行展開室、水平展開室、全自動展開室等。4. 影響展開的因素：平面色譜是開放型色譜，影響因素較多，主要有固定相的厚度和均勻程度、環(huán)境相對濕度、溶劑蒸氣、溫度、展開方式、展開距離等。14.6 展開后處理與斑點定位14.7 平面色譜法定性分析1. 斑點比移值對照法2. 斑點顯色特征法3. 斑點薄層掃描法(1) 斑點原位光譜掃描定性(2) 薄層色譜全掃描定性(3) 薄層三維掃描光譜圖定性(4) 與其它方法聯(lián)合定性。14.8 平面色譜法定量分析1. 薄層色譜掃描定量分析原理2. 薄層色譜掃描定量分析方法3. 薄層