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文檔簡介

1、會計學(xué)1酵母菌數(shù)量變化酵母菌數(shù)量變化 單細(xì)胞單細(xì)胞真核真核生物生物 生長周期短,增殖速度快生長周期短,增殖速度快 還可以用酵母菌作為實驗材料研還可以用酵母菌作為實驗材料研究究 探究酵母菌的呼吸方式探究酵母菌的呼吸方式酵母菌酵母菌一、提出問題:一、提出問題:培養(yǎng)液中酵母菌種群是怎樣隨時間變化的?培養(yǎng)液中酵母菌種群是怎樣隨時間變化的?二、作出假設(shè):二、作出假設(shè): 酵母菌在培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)時,由于食物,酵母菌在培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)時,由于食物,空間資源等是有限的,種群增長呈現(xiàn)空間資源等是有限的,種群增長呈現(xiàn)“S”“S”型型曲線;后期因環(huán)境急劇惡化,種群逐漸消亡曲線;后期因環(huán)境急劇惡化,種群逐漸消亡。三、

2、討論探究思路三、討論探究思路血細(xì)胞計數(shù)板血細(xì)胞計數(shù)板( (血球計數(shù)板血球計數(shù)板) )方法名稱:方法名稱:使用范圍:使用范圍:顯微計數(shù)顯微計數(shù)(抽樣檢測抽樣檢測)調(diào)查細(xì)胞數(shù)量時;調(diào)查細(xì)胞數(shù)量時; 肉眼看不見的細(xì)菌、肉眼看不見的細(xì)菌、酵母菌等微生物酵母菌等微生物問題一:怎樣進(jìn)行酵母菌的計數(shù)?問題一:怎樣進(jìn)行酵母菌的計數(shù)?1 1、血球計數(shù)板的結(jié)構(gòu)、血球計數(shù)板的結(jié)構(gòu) 血球計數(shù)板是一種專門用于計算較大單細(xì)胞微血球計數(shù)板是一種專門用于計算較大單細(xì)胞微生物數(shù)量的儀器,由一塊比普通載玻片厚的特制玻生物數(shù)量的儀器,由一塊比普通載玻片厚的特制玻片制成的,玻片中有四條下凹的槽,構(gòu)成三個平臺片制成的,玻片中有四條下凹

3、的槽,構(gòu)成三個平臺。中間的平臺較寬,其中間又被一短橫槽隔為兩半。中間的平臺較寬,其中間又被一短橫槽隔為兩半,每半邊上面刻有一個,每半邊上面刻有一個方格網(wǎng)方格網(wǎng)。 方格網(wǎng)上刻有方格網(wǎng)上刻有9 9個個大方格,其中只有大方格,其中只有中間的一個大方格中間的一個大方格為為計數(shù)室計數(shù)室,供微生,供微生物計數(shù)用物計數(shù)用。 大方格的長和寬各為大方格的長和寬各為1mm1mm,深度為,深度為0.1mm0.1mm,即,即1mm1mm1mm1mm0.1mm0.1mm,其容積為,其容積為0.1mm0.1mm3 3;大方格中方格小方格16 (中格)(中格)25 (小格(小格)25(中格)(中格)16(小格)(小格)3、

4、血球計數(shù)板的分區(qū)與分格、血球計數(shù)板的分區(qū)與分格 不管計數(shù)室是哪一種構(gòu)造,其每一大方格不管計數(shù)室是哪一種構(gòu)造,其每一大方格都是由都是由161625=2525=2516=40016=400個小方格組成。個小方格組成。 2 2、計數(shù)、計數(shù)16 62525型:型: 一般取四角的四一般取四角的四個中方格(個中方格(100100個小個小方格)計數(shù)方格)計數(shù)25251616型:型: 一般計數(shù)四個角一般計數(shù)四個角和中央的五個中方和中央的五個中方格(格(8080個小方格)個小方格)的細(xì)胞數(shù)。的細(xì)胞數(shù)。 例例1 1 通常用血球計數(shù)板對培養(yǎng)液中酵母菌進(jìn)通常用血球計數(shù)板對培養(yǎng)液中酵母菌進(jìn)行計數(shù),若計數(shù)室為行計數(shù),若計

5、數(shù)室為1mm1mm1mm1mm0.1mm0.1mm方格方格,由,由400400個小方格組成。若多次重復(fù)計數(shù)后,個小方格組成。若多次重復(fù)計數(shù)后,算得每個小方格中平均有算得每個小方格中平均有5 5個酵母菌,則個酵母菌,則10mL10mL該培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)有該培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)有 個。個。2 210108 8例例2 2 檢測員將檢測員將1 mL1 mL水樣稀釋水樣稀釋1010倍后,用抽樣倍后,用抽樣檢測的方法檢測每毫升藍(lán)藻的數(shù)量;將蓋玻片檢測的方法檢測每毫升藍(lán)藻的數(shù)量;將蓋玻片放在計數(shù)室上,用吸管吸取少許培養(yǎng)液使其自放在計數(shù)室上,用吸管吸取少許培養(yǎng)液使其自行滲入計數(shù)室,并用濾紙吸去多余液體。已知行

6、滲入計數(shù)室,并用濾紙吸去多余液體。已知每個計數(shù)室由每個計數(shù)室由25251616400400個小格組成,容納液個小格組成,容納液體的總體積為體的總體積為0 01 mm1 mm3 3。 現(xiàn)觀察到圖中該計數(shù)室所示現(xiàn)觀察到圖中該計數(shù)室所示a a、b b、c c、d d、e 5e 5個中個中格格8080個小格內(nèi)共有藍(lán)藻個小格內(nèi)共有藍(lán)藻n n個,則上述水樣中約有藍(lán)個,則上述水樣中約有藍(lán)藻藻 個個mLmL。 5n5n10105 53 3、計算、計算b b表示培養(yǎng)液稀釋倍數(shù);用所數(shù)小方格中細(xì)胞總數(shù)表示培養(yǎng)液稀釋倍數(shù);用所數(shù)小方格中細(xì)胞總數(shù)/ /所數(shù)小方格數(shù)是為求得每個小方格中的細(xì)胞總數(shù)。所數(shù)小方格數(shù)是為求得每

7、個小方格中的細(xì)胞總數(shù)。4 4、血球計數(shù)板的使用方法步驟、血球計數(shù)板的使用方法步驟 計數(shù):計數(shù): 稍待片刻(約稍待片刻(約5min5min),待酵母菌細(xì)胞全部沉降到計數(shù)),待酵母菌細(xì)胞全部沉降到計數(shù)室底部后,將計數(shù)板放在載物臺的中央,先在低倍鏡下找室底部后,將計數(shù)板放在載物臺的中央,先在低倍鏡下找到計數(shù)室所在位置后,再轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察、計數(shù)并記錄。到計數(shù)室所在位置后,再轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察、計數(shù)并記錄。 鏡檢計數(shù)室:鏡檢計數(shù)室: 在加樣前,先對計數(shù)板的計數(shù)室進(jìn)行鏡檢。若有污物在加樣前,先對計數(shù)板的計數(shù)室進(jìn)行鏡檢。若有污物,則需清洗,吹干后才能進(jìn)行計數(shù)。,則需清洗,吹干后才能進(jìn)行計數(shù)。 加樣品:加樣品:

8、將清潔干燥的血球計數(shù)板的計數(shù)室上加蓋專用的蓋玻將清潔干燥的血球計數(shù)板的計數(shù)室上加蓋專用的蓋玻片,用吸管吸取稀釋后的酵母菌懸液,滴于蓋玻片邊緣片,用吸管吸取稀釋后的酵母菌懸液,滴于蓋玻片邊緣,讓培養(yǎng)液自行緩緩滲入,一次性充滿計數(shù)室,防止產(chǎn),讓培養(yǎng)液自行緩緩滲入,一次性充滿計數(shù)室,防止產(chǎn)生氣泡,充入細(xì)胞懸液的量以不超過計數(shù)室臺面與蓋玻生氣泡,充入細(xì)胞懸液的量以不超過計數(shù)室臺面與蓋玻片之間的矩形邊緣為宜。多余培養(yǎng)液可用濾紙吸去。片之間的矩形邊緣為宜。多余培養(yǎng)液可用濾紙吸去。從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計數(shù)之前,要從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計數(shù)之前,要將試管輕輕將試管輕輕震蕩震蕩幾下,這樣使酵母菌分布均幾下,這

9、樣使酵母菌分布均勻,防止酵母凝聚沉淀,提高計數(shù)的代表性勻,防止酵母凝聚沉淀,提高計數(shù)的代表性和準(zhǔn)確性,求得的培養(yǎng)液中的酵母菌數(shù)量誤和準(zhǔn)確性,求得的培養(yǎng)液中的酵母菌數(shù)量誤差小。差小。 問題二:從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計數(shù)之前,應(yīng)問題二:從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計數(shù)之前,應(yīng)該將試管輕輕震蕩幾次,為什么?該將試管輕輕震蕩幾次,為什么? 一個小方格內(nèi)酵母菌過多,難以數(shù)清,應(yīng)一個小方格內(nèi)酵母菌過多,難以數(shù)清,應(yīng)當(dāng)對培養(yǎng)液進(jìn)行當(dāng)對培養(yǎng)液進(jìn)行稀釋稀釋以便于酵母菌的計數(shù)。以便于酵母菌的計數(shù)。 具體方法是:搖勻試管,取具體方法是:搖勻試管,取1mL1mL酵母菌培養(yǎng)酵母菌培養(yǎng)液,加入成倍的無菌水稀釋,稀釋液,加入成倍

10、的無菌水稀釋,稀釋n n倍后,再倍后,再用血球計數(shù)板計數(shù),所得數(shù)值乘以稀釋倍數(shù)用血球計數(shù)板計數(shù),所得數(shù)值乘以稀釋倍數(shù)。以每小方格內(nèi)含有。以每小方格內(nèi)含有4 45 5個酵母細(xì)胞為宜。特個酵母細(xì)胞為宜。特別是在培養(yǎng)后期的樣液需要稀釋后計數(shù)。別是在培養(yǎng)后期的樣液需要稀釋后計數(shù)。 問題三:如果一個小方格內(nèi)酵母菌過多,難以問題三:如果一個小方格內(nèi)酵母菌過多,難以計數(shù),應(yīng)當(dāng)采取怎樣的措施?計數(shù),應(yīng)當(dāng)采取怎樣的措施? 對于壓在方格界線上對于壓在方格界線上的酵母菌應(yīng)當(dāng)計數(shù)同側(cè)相的酵母菌應(yīng)當(dāng)計數(shù)同側(cè)相鄰兩邊上的菌體數(shù),一般鄰兩邊上的菌體數(shù),一般可采取可采取“數(shù)上線不數(shù)下線數(shù)上線不數(shù)下線,數(shù)左線不數(shù)右線,數(shù)左線不數(shù)右線”的原的原則處理,另兩邊不計數(shù)。則處理,另兩邊不計數(shù)。 問題四:對于壓在小方格界限上的酵母菌,應(yīng)問題四:對于壓在小方格界限上的酵母菌,應(yīng)當(dāng)怎樣計數(shù)

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