植物病毒2015

1、植物病毒植物病毒 目前已研究和命名的植物病毒達(dá)目前已研究和命名的植物病毒達(dá)1000多多種，其中許多為重要的農(nóng)作物病原。種，其中許多為重要的農(nóng)作物病原。 第一節(jié) 植物病毒概述 在我國北方麥區(qū)間歇性暴發(fā)的小麥黃矮?。˙arley yellow dwarf）平均造成30%的產(chǎn)量損失。在油菜上，因病毒病造成的產(chǎn)量損失常年達(dá)2030%。 1576，荷蘭人，荷蘭人Charles de Lieclase描述郁金描述郁金香雜色花。香雜色花?！坝艚鹣銦嵊艚鹣銦帷?。一株郁金香（球。一株郁金香（球根）：數(shù)頭牛、豬、綿羊；幾頓谷物；上千根）：數(shù)頭牛、豬、綿羊；幾頓谷物；上千磅奶酪；一個磨坊。磅奶酪；一個磨坊。 188

2、6年，德國人年，德國人Mayer證明煙草花葉病證明煙草花葉?。═MV）具有傳染性（認(rèn)為是細(xì)菌）。）具有傳染性（認(rèn)為是細(xì)菌）。 1892年，俄國人年，俄國人Ivanowski發(fā)現(xiàn)煙草花葉病發(fā)現(xiàn)煙草花葉病病原（病原（TMV）可通過細(xì)菌過濾器（認(rèn)為是微）可通過細(xì)菌過濾器（認(rèn)為是微小細(xì)菌）。小細(xì)菌）。植物病毒學(xué)發(fā)現(xiàn)病毒粒體的形態(tài)微小，其度量單位通常采用病毒粒體的形態(tài)微小，其度量單位通常采用納米納米（nm，1nm=10-9m）。）。植物病毒粒體形態(tài)植物病毒粒體形態(tài)大部分為大部分為球狀球狀、桿狀桿狀和和線狀線狀，少數(shù)為少數(shù)為彈狀彈狀、桿菌狀桿菌狀和和雙聯(lián)體狀雙聯(lián)體狀等等 。 第二節(jié) 植物病毒的一般性狀一、

3、植物病毒的形態(tài)許多植物病毒由不只一種粒體構(gòu)成許多植物病毒由不只一種粒體構(gòu)成 煙草脆裂病毒有兩種桿狀粒體，長的一種為煙草脆裂病毒有兩種桿狀粒體，長的一種為19525 nm，短的一種為，短的一種為4311025 nm； 苜?；ㄈ~病毒有苜?；ㄈ~病毒有5種粒體組分：大小為種粒體組分：大小為5818、5418、4218、3018、1810 nm。 植物病毒粒體主要含植物病毒粒體主要含有核酸和蛋白兩大部分。有核酸和蛋白兩大部分。中間為中間為核酸核酸（RNA或或DNA），外部有），外部有外殼蛋外殼蛋白白（Coat Protein，CP）包被形成衣殼，少數(shù)病包被形成衣殼，少數(shù)病毒在蛋白衣殼外面還包毒在蛋白衣殼

4、外面還包被一層那囊膜被一層那囊膜（envelope），稱為包），稱為包膜病毒膜病毒,如如植物彈狀病毒植物彈狀病毒。二、植物病毒的結(jié)構(gòu) 植物病毒的衣殼呈植物病毒的衣殼呈螺旋對稱螺旋對稱（如（如TMV ） 、二二十面體對稱十面體對稱（如（如蕪菁黃色花葉病毒蕪菁黃色花葉病毒TYMV ） 。三、植物病毒的核酸三、植物病毒的核酸病毒基因組所包含的基因數(shù)目從病毒基因組所包含的基因數(shù)目從1個個（如衛(wèi)星煙草壞死病毒，（如衛(wèi)星煙草壞死病毒，STNV ）至）至12個（植物呼腸孤病毒），一般為個（植物呼腸孤病毒），一般為27個基因。個基因。1、植物病毒的核酸類型 植物病毒的基因組多數(shù)為核糖核酸（植物病毒的基因組多數(shù)

5、為核糖核酸（RNA），），少數(shù)為脫氧核糖核酸（少數(shù)為脫氧核糖核酸（DNA）。根據(jù)核酸性質(zhì)及）。根據(jù)核酸性質(zhì)及功能，可將植物病毒基因組分為下列功能，可將植物病毒基因組分為下列5種類型：種類型： 2 2、病毒粒體核酸含量、病毒粒體核酸含量球狀病毒：球狀病毒：15%45%。線狀及桿狀病毒：線狀及桿狀病毒：5%6%。彈狀病毒：彈狀病毒：1%。3 3、病毒的多分體現(xiàn)象、病毒的多分體現(xiàn)象為植物病毒所特有，并僅存在于為植物病毒所特有，并僅存在于ssRNA病毒中。病毒中。是指病毒的基因組分布在不同的核酸鏈上，是指病毒的基因組分布在不同的核酸鏈上，分別包裝在不同的病毒粒體里。由于遺傳分別包裝在不同的病毒粒體里。

6、由于遺傳信息分開了，單獨一個粒體不能侵染，必信息分開了，單獨一個粒體不能侵染，必需是一組幾個同時侵染才能全部表達(dá)遺傳需是一組幾個同時侵染才能全部表達(dá)遺傳特性。特性。多（雙、三）分基因組病毒多（雙、三）分基因組病毒：分段基因組分別：分段基因組分別包裝于不同的病毒粒體中。包裝于不同的病毒粒體中。煙草花葉病毒屬煙草花葉病毒屬(Tobamovirus)、馬鈴薯、馬鈴薯X病毒屬病毒屬(Potxvirus)和馬鈴薯和馬鈴薯Y病毒屬病毒屬(Potyvirus)。 單分基因組病毒單分基因組病毒：一個病毒粒體中包含有全套基：一個病毒粒體中包含有全套基因組。因組。如煙草脆裂病毒屬如煙草脆裂病毒屬(Tobravir

7、us) ； 黃瓜花葉病毒屬黃瓜花葉病毒屬(Cucumovirus)和苜?；ㄈ~病毒和苜蓿花葉病毒(AMV) 結(jié)構(gòu)蛋白結(jié)構(gòu)蛋白主要是主要是外殼蛋白外殼蛋白和和包膜蛋白包膜蛋白，有些病毒，有些病毒還有基因組結(jié)合蛋白（還有基因組結(jié)合蛋白（VPg）。絕大多數(shù)植物?。?。絕大多數(shù)植物病毒的毒的外殼蛋白僅由一種蛋白多肽外殼蛋白僅由一種蛋白多肽構(gòu)成，個別的有構(gòu)成，個別的有兩種以上。兩種以上。 非結(jié)構(gòu)蛋白包括復(fù)制酶、參與病毒運轉(zhuǎn)的運動蛋白等。 （二）蛋白質(zhì)（三）脂類 大多數(shù)植物病毒不含脂類，只有具包膜的大多數(shù)植物病毒不含脂類，只有具包膜的病毒才有脂類。病毒才有脂類。（四）其他組份 糖蛋白、金屬離子、多胺、水等。糖

8、蛋白、金屬離子、多胺、水等。第三節(jié)第三節(jié) 植物病毒的侵染和傳播植物病毒的侵染和傳播以（以（+）RNA病毒為例，病毒的復(fù)制過程如下：病毒為例，病毒的復(fù)制過程如下：（1）病毒粒體進入寄主細(xì)胞，脫殼，釋放）病毒粒體進入寄主細(xì)胞，脫殼，釋放RNA；（2）RNA與核糖體結(jié)合，翻譯出病毒復(fù)制酶等與核糖體結(jié)合，翻譯出病毒復(fù)制酶等與復(fù)制相關(guān)的基因產(chǎn)物；與復(fù)制相關(guān)的基因產(chǎn)物；（3）復(fù)制酶以（）復(fù)制酶以（+）RNA為模板合成（為模板合成（-）RNA鏈，并形成雙鏈復(fù)制型；鏈，并形成雙鏈復(fù)制型；（4）從復(fù)制型產(chǎn)生子代（）從復(fù)制型產(chǎn)生子代（+）RNA鏈；鏈；（5）以病毒）以病毒RNA為模板合成外殼蛋白；為模板合成外殼蛋

9、白；（6）外殼蛋白亞基和）外殼蛋白亞基和RNA組裝成新的病毒粒體。組裝成新的病毒粒體。 病毒類型 復(fù)制形式mRNA 合成途徑核酸侵染性舉 例(+)ssRNARNA RNA(+)RNA (-)RNA mRNA+多數(shù)植物病毒(-)ssRNARNA RNA(-)RNA mRNA-植物彈狀病毒dsRNARNA RNA(+-)RNA mRNA-植物呼腸孤病毒(+)ssDNADNA DNA(+)DNA (+-)DNA mRNA+雙聯(lián)病毒dsDNADNA RNA DNA(+-)DNA mRNA+花椰菜花葉病毒RNARNA DNA RNARNA dsDNA mRNA反轉(zhuǎn)錄病毒植物病毒基因組復(fù)制具有多樣性植物病

10、毒基因組復(fù)制具有多樣性 在植物葉肉細(xì)胞間的移動稱為胞間運轉(zhuǎn)（移動）； 經(jīng)維管束輸導(dǎo)組織的運轉(zhuǎn)稱為長距離運轉(zhuǎn)（移動）。 二、病毒在植物體內(nèi)的運轉(zhuǎn)（移動） 已知植物病毒的已知植物病毒的胞間運轉(zhuǎn)有多種途徑胞間運轉(zhuǎn)有多種途徑，而以，而以經(jīng)胞間連絲的運轉(zhuǎn)最為普遍。經(jīng)胞間連絲的運轉(zhuǎn)最為普遍。 該過程需有病毒的該過程需有病毒的運動蛋白運動蛋白參與。參與。 首先運動蛋白作用于胞間連絲，使胞間連絲首先運動蛋白作用于胞間連絲，使胞間連絲的孔徑增大幾倍至幾十倍；同時運動蛋白與病毒的孔徑增大幾倍至幾十倍；同時運動蛋白與病毒核酸結(jié)合，使核酸呈細(xì)長的線狀；最后病毒是以核酸結(jié)合，使核酸呈細(xì)長的線狀；最后病毒是以核酸的形式通

11、過擴展了的胞間連絲進入相鄰的細(xì)核酸的形式通過擴展了的胞間連絲進入相鄰的細(xì)胞。胞。 （一）胞間運轉(zhuǎn)一些病毒僅能在某些寄主的接種點附近有一些病毒僅能在某些寄主的接種點附近有限的細(xì)胞內(nèi)擴散，表現(xiàn)為局部侵染。限的細(xì)胞內(nèi)擴散，表現(xiàn)為局部侵染。病毒在細(xì)胞間移動的速度是病毒在細(xì)胞間移動的速度是緩慢緩慢的，平均的，平均每天不過每天不過1mm左右。左右。（二）長距離運轉(zhuǎn)植物病毒的侵染大都是系統(tǒng)性的；植物病毒的侵染大都是系統(tǒng)性的； 先在薄壁細(xì)胞組織中增殖和運轉(zhuǎn)；先在薄壁細(xì)胞組織中增殖和運轉(zhuǎn)； 然后進入維管束組織的韌皮部或木質(zhì)部很快然后進入維管束組織的韌皮部或木質(zhì)部很快地運轉(zhuǎn)。地運轉(zhuǎn)。（三）病毒在植物體內(nèi)的分布 全

12、株性侵染的病毒并不是植株的每個部全株性侵染的病毒并不是植株的每個部分都有病毒；分都有病毒； 只有部分病毒可以進入植株的種胚，只有部分病毒可以進入植株的種胚，所以病毒可以由種子傳染的還是少數(shù)；所以病毒可以由種子傳染的還是少數(shù)； 花粉可以傳染病毒。花粉可以傳染病毒。 植物旺盛生長的分生組織很少含有病毒，植物旺盛生長的分生組織很少含有病毒，如莖尖、根尖；如莖尖、根尖； 采用分生組織培養(yǎng)的方法，可以從病株采用分生組織培養(yǎng)的方法，可以從病株上得到無毒苗。上得到無毒苗。 三、植物病毒的傳播 植物病毒只能被動傳播，需借外界因子進入活的細(xì)胞內(nèi)。 植物病毒傳播方式可以分為介體傳播和非介體傳播。二、植物病毒的命名

13、采用得最多的是英文俗名法采用得最多的是英文俗名法: 寄主植物寄主植物+癥狀癥狀（不采用斜體，常使用縮寫）（不采用斜體，常使用縮寫） 煙草花葉病毒（煙草花葉病毒（Tobacco mosaic virus，TMV） 黃瓜花葉病毒（黃瓜花葉病毒（Cucumber mosaic virus，CMV）有的按照發(fā)現(xiàn)的先后給予命名，如馬鈴薯有的按照發(fā)現(xiàn)的先后給予命名，如馬鈴薯X病毒病毒（Potato virus X，PVX）和馬鈴薯）和馬鈴薯Y病毒病毒（Potato virus Y，PVY）等。）等。 目前國際上采用類似于拉丁雙名法來命名植物目前國際上采用類似于拉丁雙名法來命名植物病毒病毒: 寄主名寄主名+

14、癥狀癥狀+病毒屬名病毒屬名 如如Tobacco Mosaic Tobamovirus 屬名采用斜體書寫。屬名采用斜體書寫。植物病毒屬名以植物病毒屬名以-virus結(jié)尾，常由結(jié)尾，常由模式種寄主模式種寄主名稱名稱（英文或拉丁文）（英文或拉丁文）縮寫縮寫+主要特征描述主要特征描述（英文或拉丁文）縮寫（英文或拉丁文）縮寫+virus組合而成，書寫組合而成，書寫采用斜體。采用斜體。 如黃瓜花葉病毒屬記作如黃瓜花葉病毒屬記作Cucumovirus?？?、目的名稱分別以科、目的名稱分別以-viridae和和-virales為結(jié)尾，為結(jié)尾，均采用斜體書寫。均采用斜體書寫。 類病毒類病毒(viroid)在命名時

15、遵循相似于病在命名時遵循相似于病毒的規(guī)則，因縮寫名易與病毒混淆，新毒的規(guī)則，因縮寫名易與病毒混淆，新命名規(guī)則規(guī)定類病毒的縮寫為命名規(guī)則規(guī)定類病毒的縮寫為Vd，如馬，如馬鈴薯紡錘塊莖類病毒鈴薯紡錘塊莖類病毒(Potato spindle tuber viroid)縮寫為縮寫為PSTVd。昆昆 蟲蟲 病病 毒毒 灰白蠶蛾屬鱗翅目，蠶蛾科昆蟲，分布于廣東、廣灰白蠶蛾屬鱗翅目，蠶蛾科昆蟲，分布于廣東、廣西、四川、臺灣、海南等地，在華南地區(qū)危害小葉榕、西、四川、臺灣、海南等地，在華南地區(qū)危害小葉榕、黃葛榕、高山榕、菩提榕、木波蘿等主要園林樹木，是黃葛榕、高山榕、菩提榕、木波蘿等主要園林樹木，是一種主要的

16、園林害蟲。一種主要的園林害蟲。 1 13 3齡幼蟲取食葉肉，致葉片只剩下網(wǎng)葉脈，齡幼蟲取食葉肉，致葉片只剩下網(wǎng)葉脈，被危害葉片不久呈深褐色。被危害葉片不久呈深褐色。4 4齡后的幼蟲取食齡后的幼蟲取食葉片呈空洞或缺刻。末齡幼蟲食量大增，食葉片呈空洞或缺刻。末齡幼蟲食量大增，食光葉片及嫩梢，僅余樹干光葉片及嫩梢，僅余樹干。十二世紀(jì)中葉我國十二世紀(jì)中葉我國農(nóng)書農(nóng)書中，已有關(guān)中，已有關(guān)于家蠶于家蠶“高節(jié)高節(jié)”、“腳腫腳腫”等病癥的記等病癥的記載；載；十六到十七世紀(jì)，我國對蠶膿病有描述；十六到十七世紀(jì)，我國對蠶膿病有描述；十九世紀(jì)中葉，十九世紀(jì)中葉，Cornelia和和Maestri才才記述了家蠶的多角

17、體病的癥狀；記述了家蠶的多角體病的癥狀； 包涵體包涵體 由單個或多個昆蟲病毒粒子被包圍在一由單個或多個昆蟲病毒粒子被包圍在一個主要由蛋白質(zhì)構(gòu)成的包被結(jié)構(gòu)個主要由蛋白質(zhì)構(gòu)成的包被結(jié)構(gòu)包含單個病毒粒子的呈圓形；包含多個病毒粒子的呈多角體形包含單個病毒粒子的呈圓形；包含多個病毒粒子的呈多角體形 顆粒體病毒顆粒體病毒 多角體病毒多角體病毒 包涵體的大小為包涵體的大小為0.515微米微米 不溶于水，也不溶于乙醇、氯仿、苯酚不溶于水，也不溶于乙醇、氯仿、苯酚等一般的有機溶劑，許多種蛋白酶對它等一般的有機溶劑，許多種蛋白酶對它不起作用不起作用 包涵體的理化特征包涵體的理化特征 它保護著病毒粒子，使病毒粒子在

18、離開它保護著病毒粒子，使病毒粒子在離開昆蟲數(shù)年后仍然具有侵染活性。昆蟲數(shù)年后仍然具有侵染活性。包涵體的生理功能包涵體的生理功能 在自然條件下，病毒包涵體通過食物進在自然條件下，病毒包涵體通過食物進入昆蟲的消化道，由于昆蟲堿性消化液入昆蟲的消化道，由于昆蟲堿性消化液的作用，使得包涵體破裂釋放出病毒粒的作用，使得包涵體破裂釋放出病毒粒子。當(dāng)病毒粒子逐步侵染昆蟲體內(nèi)的各子。當(dāng)病毒粒子逐步侵染昆蟲體內(nèi)的各種細(xì)胞后，造成昆蟲死亡。種細(xì)胞后，造成昆蟲死亡。 包涵體的致病機理包涵體的致病機理 包涵體病毒的分類包涵體病毒的分類根據(jù)有無包涵體及包涵體的形狀、在細(xì)根據(jù)有無包涵體及包涵體的形狀、在細(xì)胞中的位置等，將

19、其分為胞中的位置等，將其分為核型多角體病核型多角體病毒毒、細(xì)胞質(zhì)型多角體病毒細(xì)胞質(zhì)型多角體病毒、顆粒體病毒顆粒體病毒及及無包涵體病毒無包涵體病毒等等。 桿狀病毒科桿狀病毒科核型多角體病毒屬核型多角體病毒屬(Nucleopolyhedrovirus，簡稱，簡稱NPV)顆粒體病毒屬顆粒體病毒屬(Granulovirus，簡稱，簡稱GV) 桿狀病毒科桿狀病毒科(Baculoviridae)包含：包含：桿狀病毒科的兩種病毒形態(tài)桿狀病毒科的兩種病毒形態(tài)許多核內(nèi)獲得包膜的病毒子被包埋入多許多核內(nèi)獲得包膜的病毒子被包埋入多角體蛋白的結(jié)晶基質(zhì)中，逐漸形成多角角體蛋白的結(jié)晶基質(zhì)中，逐漸形成多角體。這種病毒子稱為

20、體。這種病毒子稱為包埋型病毒子包埋型病毒子（oocluded virus，OV）。）。 核衣殼于胞核內(nèi)病毒發(fā)生基質(zhì)上進行裝核衣殼于胞核內(nèi)病毒發(fā)生基質(zhì)上進行裝配，通過細(xì)胞質(zhì)出芽，獲得包膜，這種配，通過細(xì)胞質(zhì)出芽，獲得包膜，這種病毒稱為病毒稱為芽生型病毒芽生型病毒（Budded virus，BV）雙鏈環(huán)狀的超螺旋雙鏈環(huán)狀的超螺旋DNA，大小為，大小為80180 kb；基因組編碼基因組編碼100-200蛋白質(zhì)；蛋白質(zhì)；雙鏈雙鏈DNA具有侵染性。具有侵染性。桿狀病毒的基因組桿狀病毒的基因組核型多角體病毒核型多角體病毒(NPV)核型多角體病毒核型多角體病毒(nuclear polyhedrosis vi

21、ruse,簡稱簡稱NPV)是研究得最早和最為是研究得最早和最為詳細(xì)的一類昆蟲病毒。詳細(xì)的一類昆蟲病毒。到到1986年為止，國內(nèi)外發(fā)現(xiàn)年為止，國內(nèi)外發(fā)現(xiàn)464株，中國株，中國約約124株。株。屬于桿狀病毒屬（屬于桿狀病毒屬（Baculovirus）的）的A亞組亞組。具有較大的包涵體，稱為具有較大的包涵體，稱為多角體多角體，在被感，在被感染的細(xì)胞核內(nèi)形成。染的細(xì)胞核內(nèi)形成。 多角體大小常因寄主昆蟲種類的不同而不同，多角體大小常因寄主昆蟲種類的不同而不同，。常見的形狀有三角形、四角形、五角形、立。常見的形狀有三角形、四角形、五角形、立方體、不規(guī)則形等。方體、不規(guī)則形等。核型多角體病毒核型多角體病毒N

22、PV的理化性狀的理化性狀不溶于水及多種有機溶劑如乙醇、乙醚、不溶于水及多種有機溶劑如乙醇、乙醚、三氯甲烷、苯、丙酮等三氯甲烷、苯、丙酮等強酸或強堿溶液處理，能使多角體蛋白質(zhì)強酸或強堿溶液處理，能使多角體蛋白質(zhì)溶解。溶解。病毒粒子外有包涵體的保護，可在自然條病毒粒子外有包涵體的保護，可在自然條件下存活多年仍不失效。對低溫有較高件下存活多年仍不失效。對低溫有較高的忍受力。的忍受力。如家蠶如家蠶NPV在超低溫條件下反復(fù)凍結(jié)融解在超低溫條件下反復(fù)凍結(jié)融解多次，其感染力不變。對高溫的抵抗力多次，其感染力不變。對高溫的抵抗力較差，如棉鈴蟲較差，如棉鈴蟲NPV7580條件下不條件下不到到10分鐘就失活分鐘就

23、失活。NPV對昆蟲的侵染對昆蟲的侵染 感病初期無明顯異常變化；感病初期無明顯異常變化； 行動遲緩食欲減退；行動遲緩食欲減退； 死前體軀變軟；死前體軀變軟； 以腹足緊附枝葉倒掛而死；以腹足緊附枝葉倒掛而死； 皮膚則脆弱易裂；皮膚則脆弱易裂； 內(nèi)含大量新形成的核多角體。內(nèi)含大量新形成的核多角體。NPV的感染途徑的感染途徑接種量少潛伏期長；接種量少潛伏期長；幼蟲齡期越后易感性一般較小；幼蟲齡期越后易感性一般較??；溫度顯著影響潛伏期長短，如家蠶在正常室溫下溫度顯著影響潛伏期長短，如家蠶在正常室溫下57天天就出現(xiàn)病征；就出現(xiàn)病征；較高的相對濕度也能誘發(fā)某些昆蟲發(fā)生病毒病較高的相對濕度也能誘發(fā)某些昆蟲發(fā)生

24、病毒病 。顆粒體病毒顆粒體病毒(GV)顆粒體病毒顆粒體病毒（granulosis virus，簡稱，簡稱GV）在分類上屬桿狀病毒科）在分類上屬桿狀病毒科B亞組，是亞組，是有包有包涵體涵體的昆蟲病毒。的昆蟲病毒。目前為止國內(nèi)外發(fā)現(xiàn)目前為止國內(nèi)外發(fā)現(xiàn)GV約約130株，中國發(fā)株，中國發(fā)現(xiàn)約現(xiàn)約42株。株。GV的形態(tài)特征的形態(tài)特征包涵體稱包涵體稱顆粒體顆粒體(granule) 或或莢膜莢膜(capsule)。先在被感染細(xì)胞的核內(nèi)形成，但當(dāng)核膜破裂后可先在被感染細(xì)胞的核內(nèi)形成，但當(dāng)核膜破裂后可溢出到細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。溢出到細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。包涵體很小包涵體很小。顆粒體的形狀有卵形、橢圓形、長。顆粒體的形狀有卵形、橢圓形

25、、長卵形等，通常直徑為卵形等，通常直徑為0.10.3m，長，長0.31.0m。每個包涵體內(nèi)。每個包涵體內(nèi)一般只有一個病毒粒子一般只有一個病毒粒子。霜天蛾霜天蛾GV的形態(tài)的形態(tài)小菜蛾小菜蛾GV經(jīng)堿處理經(jīng)堿處理后的病毒粒子后的病毒粒子GV的理化性狀的理化性狀不溶于水和一般的有機溶劑如乙醚、乙醇不溶于水和一般的有機溶劑如乙醚、乙醇、丙酮、二甲苯等。、丙酮、二甲苯等。遇強酸或強堿，包涵體能迅速溶解，并可遇強酸或強堿，包涵體能迅速溶解，并可使病毒粒子變性而失去侵染力。使病毒粒子變性而失去侵染力。可在室溫下保存可在室溫下保存5年以上而不失侵染力。年以上而不失侵染力。高溫可使其失活。高溫可使其失活。較低的溫

26、度有可能延長貯存的時期。較低的溫度有可能延長貯存的時期。紫外線或其他輻射線能使完整的病毒失活紫外線或其他輻射線能使完整的病毒失活。用稀堿處理后可獲得完整和具侵染性的病用稀堿處理后可獲得完整和具侵染性的病毒粒子。毒粒子。GV對昆蟲的侵染對昆蟲的侵染感染初期無明顯病征；感染初期無明顯病征； 之后出現(xiàn)反應(yīng)遲鈍和停止取食；之后出現(xiàn)反應(yīng)遲鈍和停止取食； 感病蟲體可能膨大或收縮；感病蟲體可能膨大或收縮； 已死幼蟲體壁脆弱；已死幼蟲體壁脆弱； 染病幼蟲可存活較長時間；染病幼蟲可存活較長時間；GV的感染途徑的感染途徑通過通過口服口服進入易感蟲體，顆粒體在中腸中進入易感蟲體，顆粒體在中腸中溶解，游離的病毒粒子通

27、過腸道柱形細(xì)溶解，游離的病毒粒子通過腸道柱形細(xì)胞的微絨毛而侵入，在這些細(xì)胞核中增胞的微絨毛而侵入，在這些細(xì)胞核中增殖，新形成的顆粒體病毒釋放于血淋巴殖，新形成的顆粒體病毒釋放于血淋巴中而導(dǎo)致對其他組織的繼發(fā)感染。中而導(dǎo)致對其他組織的繼發(fā)感染。蟲體外傷和寄生天敵產(chǎn)卵可引起蟲體外傷和寄生天敵產(chǎn)卵可引起GV對皮下對皮下感染，也可經(jīng)卵垂直傳播。感染，也可經(jīng)卵垂直傳播。桿狀病毒的復(fù)制循環(huán)桿狀病毒的復(fù)制循環(huán)主要侵入方式為胞吞作用，突起糖蛋白主要侵入方式為胞吞作用，突起糖蛋白gp64為表面抗原；為表面抗原；核衣殼在細(xì)胞質(zhì)中釋放；核衣殼在細(xì)胞質(zhì)中釋放；借助肌動蛋白移動進入細(xì)胞核；借助肌動蛋白移動進入細(xì)胞核；在

28、細(xì)胞核中脫去衣殼，釋放核蛋白。在細(xì)胞核中脫去衣殼，釋放核蛋白。昆蟲病毒的吸附和侵染過程昆蟲病毒的吸附和侵染過程病毒的裸露病毒的裸露DNA具有侵染性；具有侵染性；轉(zhuǎn)錄調(diào)控因自最先啟動；轉(zhuǎn)錄調(diào)控因自最先啟動；早期復(fù)制：解旋酶早期復(fù)制：解旋酶(pl43)、阻斷寄主蛻、阻斷寄主蛻皮的酶（皮的酶（egt） 、p35 、gp64.桿狀病毒的早期復(fù)制桿狀病毒的早期復(fù)制晚期晚期RNA聚合酶不同于早期；聚合酶不同于早期；晚期的晚期的RNA聚合酶對聚合酶對a-鵝膏菌素敏感；鵝膏菌素敏感；主要合成：堿性蛋白、衣殼蛋白和糖蛋主要合成：堿性蛋白、衣殼蛋白和糖蛋白。白。桿狀病毒的晚期復(fù)制桿狀病毒的晚期復(fù)制最后復(fù)制最后復(fù)制

29、合成多角體蛋白。合成多角體蛋白。最后復(fù)制的最后復(fù)制的RNA聚合酶對聚合酶對a-鵝膏菌素敏鵝膏菌素敏感；感；毒粒的裝配毒粒的裝配核衣殼的裝配與病毒基質(zhì)的形成同時發(fā)核衣殼的裝配與病毒基質(zhì)的形成同時發(fā)生；生；基質(zhì)基質(zhì)是由病毒是由病毒39kDa的衣殼蛋白和的衣殼蛋白和RNA構(gòu)成的核蛋白；構(gòu)成的核蛋白；多角體蛋白和病毒粒子同時生成，只有多角多角體蛋白和病毒粒子同時生成，只有多角體蛋白的產(chǎn)量很高時，才能病毒粒子形成包涵體蛋白的產(chǎn)量很高時，才能病毒粒子形成包涵體體 。包涵體外被一層碳水化合物和蛋白質(zhì)組包涵體外被一層碳水化合物和蛋白質(zhì)組成的外膜，病毒成熟；成的外膜，病毒成熟；核衣殼的一端與核孔相互作用后，完整

30、核衣殼的一端與核孔相互作用后，完整的核衣殼通過核孔進入細(xì)胞質(zhì)中，并與的核衣殼通過核孔進入細(xì)胞質(zhì)中，并與細(xì)胞膜上的蛋白結(jié)合，芽生胞外。細(xì)胞膜上的蛋白結(jié)合，芽生胞外。 毒粒的成熟與釋放毒粒的成熟與釋放家蠶核型多角體病毒家蠶核型多角體病毒是養(yǎng)蠶生產(chǎn)上膿病的病原；是養(yǎng)蠶生產(chǎn)上膿病的病原；多角體的形狀不一，多數(shù)為四角形、六角形，多角體的大多角體的形狀不一，多數(shù)為四角形、六角形，多角體的大小范圍在小范圍在0.5-15之間；之間； 病毒粒子為桿狀病毒粒子為桿狀,其大小為其大小為40090nm。 在粒子一端具有乳頭狀在粒子一端具有乳頭狀突起突起, 是病毒感染細(xì)胞的是病毒感染細(xì)胞的吸附裝置；吸附裝置； dsDN

31、A病毒病毒dsDNA, 環(huán)狀、線形分子環(huán)狀、線形分子; DNA含量約占病毒粒子的含量約占病毒粒子的10%左右。左右。昆蟲病毒的生產(chǎn)昆蟲病毒的生產(chǎn) 病毒為專性寄生病原，至今尚未研究出能病毒為專性寄生病原，至今尚未研究出能在人工培養(yǎng)基上生長，只能在活細(xì)胞中在人工培養(yǎng)基上生長，只能在活細(xì)胞中增殖。因此，目前國內(nèi)外應(yīng)用于害蟲防增殖。因此，目前國內(nèi)外應(yīng)用于害蟲防治的昆蟲病毒制劑主要是通過活蟲體增治的昆蟲病毒制劑主要是通過活蟲體增殖和細(xì)胞培養(yǎng)法繁殖。殖和細(xì)胞培養(yǎng)法繁殖。 在昆蟲活體中大量增殖昆蟲病毒在昆蟲活體中大量增殖昆蟲病毒直接在自然種群中繁殖直接在自然種群中繁殖 從野外采回大量活蟲接種繁殖從野外采回大

32、量活蟲接種繁殖 在室內(nèi)條件下飼育大量害蟲接種繁殖在室內(nèi)條件下飼育大量害蟲接種繁殖 各種類型的昆蟲病毒包括各種類型的昆蟲病毒包括NPV、CPV、GV和和昆蟲痘病毒等通過人工飼料飼育昆蟲而增殖均昆蟲痘病毒等通過人工飼料飼育昆蟲而增殖均獲得較好的成效。獲得較好的成效。細(xì)胞系中增殖昆蟲病毒細(xì)胞系中增殖昆蟲病毒 用組織培養(yǎng)增殖的病毒在致病性、專化性用組織培養(yǎng)增殖的病毒在致病性、專化性及其他特性方面有無變異，尚待進一步及其他特性方面有無變異，尚待進一步研究。研究。核多角體病毒殺蟲劑核多角體病毒殺蟲劑核型多角體病毒是應(yīng)用最廣泛的昆蟲病毒核型多角體病毒是應(yīng)用最廣泛的昆蟲病毒。主要有：棉鈴蟲。主要有：棉鈴蟲NP

33、V、斜紋夜蛾、斜紋夜蛾NPV、油桐尺蠖、油桐尺蠖NPV、茶黃毒蛾、茶黃毒蛾NPV、舞毒、舞毒蛾蛾NPV、美國白蛾、美國白蛾NPV、楊尺蠖、楊尺蠖NPV、甘藍(lán)夜蛾甘藍(lán)夜蛾NPV等。等。斜紋夜蛾斜紋夜蛾NPV殺蟲劑的生產(chǎn)殺蟲劑的生產(chǎn)斜紋夜蛾屬鱗翅目夜蛾科。分布很廣，遍及全國斜紋夜蛾屬鱗翅目夜蛾科。分布很廣，遍及全國，危害植物達(dá)，危害植物達(dá)99科科290種以上，種以上，在大田作物中，主要危害棉花、大豆、花生、芝在大田作物中，主要危害棉花、大豆、花生、芝麻、煙草、甘薯、甜菜、玉米、高粱、水稻等麻、煙草、甘薯、甜菜、玉米、高粱、水稻等，在蔬菜中等，在蔬菜中等斜紋夜蛾斜紋夜蛾NPV的生產(chǎn)的生產(chǎn)飼料飼料：黃

34、豆粉，山梨酸，麩皮，泥泊金黃豆粉，山梨酸，麩皮，泥泊金1.6g，酵母粉，酵母粉，L-抗壞血酸抗壞血酸4g 卵管理卵管理：在幼蟲孵化前一天，用在幼蟲孵化前一天，用5福爾馬福爾馬林溶液將卵塊浸泡林溶液將卵塊浸泡15分鐘，無菌水漂洗分鐘，無菌水漂洗3次，次，滅菌紙上晾干，移入盛有人工飼料的塑料盒里滅菌紙上晾干，移入盛有人工飼料的塑料盒里，放置，放置25度條件下孵育度條件下孵育 幼蟲管理幼蟲管理：14齡幼蟲飼養(yǎng)密度可為齡幼蟲飼養(yǎng)密度可為300粒粒500粒粒/盒；盒；蟲子養(yǎng)到蟲子養(yǎng)到4齡后，飼養(yǎng)密度要適當(dāng)調(diào)小。由于齡后，飼養(yǎng)密度要適當(dāng)調(diào)小。由于46齡幼蟲蛻皮會吐水，造成容器濕度過大，齡幼蟲蛻皮會吐水，造

35、成容器濕度過大，影響生長發(fā)育。所以相對濕度也應(yīng)適度調(diào)低。影響生長發(fā)育。所以相對濕度也應(yīng)適度調(diào)低。蛹的管理蛹的管理： 將老熟幼蟲放入自制的沙營造蛹室（在已消毒將老熟幼蟲放入自制的沙營造蛹室（在已消毒的有紗蓋的木盒里，放入的有紗蓋的木盒里，放入10cm高的已高溫消高的已高溫消毒的沙子），待蛹體變黑后，挑取個體大，富毒的沙子），待蛹體變黑后，挑取個體大，富有光澤，有活力的蛹，放入產(chǎn)卵箱羽化。有光澤，有活力的蛹，放入產(chǎn)卵箱羽化。 成蟲管理成蟲管理： 將蛹放入墊有濕濾紙的培養(yǎng)皿中，移入紙制將蛹放入墊有濕濾紙的培養(yǎng)皿中，移入紙制養(yǎng)蟲籠內(nèi)，每籠放養(yǎng)蟲籠內(nèi)，每籠放10對蛹，成蟲交配產(chǎn)卵后收對蛹，成蟲交配產(chǎn)卵后

36、收剪卵塊。剪卵塊。昆蟲病毒的診斷鑒定昆蟲病毒的診斷鑒定一般的形態(tài)學(xué)和組織學(xué)方法：一般的形態(tài)學(xué)和組織學(xué)方法： 產(chǎn)生多角體的病毒類型，用一般產(chǎn)生多角體的病毒類型，用一般光學(xué)顯微鏡光學(xué)顯微鏡觀觀察而明確病毒的存在，并鑒別包涵體。察而明確病毒的存在，并鑒別包涵體。 生物鑒定方法：生物鑒定方法： 通過感染試驗方法鑒別病毒的存在，比如接通過感染試驗方法鑒別病毒的存在，比如接種后能引起健蟲發(fā)生同樣疾病。種后能引起健蟲發(fā)生同樣疾病。電子顯微鏡觀察電子顯微鏡觀察 通常包括通常包括超薄切片技術(shù)超薄切片技術(shù)、負(fù)染色技術(shù)和投影技、負(fù)染色技術(shù)和投影技術(shù)等。術(shù)等。 血清學(xué)方法血清學(xué)方法 該法可確定各個分離株的親緣關(guān)系，鑒別用一該法可確定各個分離株的親緣關(guān)系，鑒別用一般方法難以區(qū)分的病毒。般方法難以區(qū)分的病毒。昆蟲病毒的應(yīng)用昆蟲病毒的應(yīng)用較早應(yīng)用于森林害蟲膜翅目葉蜂類的防治。較早應(yīng)用于森林害蟲膜翅目葉蜂類的防治。在鱗翅目森林害蟲中，利用病毒有效防治舞毒蛾，天幕在鱗翅目森林害蟲中，利用病毒有效防治舞毒蛾，天幕毛蟲、松毒蛾等。毛蟲、松毒蛾等。目前大約已有幾十種昆蟲病毒進行過大田防治試驗。目前大約已有幾十種昆蟲病毒進行過大田防治試驗。 我國約有我國約有20種昆