蟾蜍坐骨神經(jīng)干

1、神經(jīng)干動作電位電生理神經(jīng)干動作電位電生理綜合實驗實驗 實驗?zāi)康?測定測定蛙坐骨神經(jīng)的動作電位傳導(dǎo)速度坐骨神經(jīng)的動作電位傳導(dǎo)速度 學(xué)習(xí)蛙類離體坐骨神經(jīng)干的單相、雙相動作電位的記錄方法及與強度學(xué)習(xí)蛙類離體坐骨神經(jīng)干的單相、雙相動作電位的記錄方法及與強度的關(guān)系。的關(guān)系。 判別、分析神經(jīng)干動作電位的基本波形、測量其幅值以及時程。判別、分析神經(jīng)干動作電位的基本波形、測量其幅值以及時程。學(xué)會制作坐骨神經(jīng)標(biāo)本的學(xué)會制作坐骨神經(jīng)標(biāo)本的方法實驗原理（一） 將蛙的神經(jīng)標(biāo)本放在任氏液中，其興奮性在幾個小時內(nèi)可保持不變。將蛙的神經(jīng)標(biāo)本放在任氏液中，其興奮性在幾個小時內(nèi)可保持不變。 若給神經(jīng)一次適宜刺激，可在神經(jīng)上產(chǎn)生

2、一個動作電位。生理學(xué)實驗若給神經(jīng)一次適宜刺激，可在神經(jīng)上產(chǎn)生一個動作電位。生理學(xué)實驗中常利用蛙的坐骨神經(jīng)標(biāo)本來觀察神經(jīng)興奮性的規(guī)律。中常利用蛙的坐骨神經(jīng)標(biāo)本來觀察神經(jīng)興奮性的規(guī)律。 蛙蛙坐骨神經(jīng)標(biāo)本制作坐骨神經(jīng)標(biāo)本制作實驗原理（二） 本實驗將兩個引導(dǎo)電極置于正常完整的神經(jīng)干本實驗將兩個引導(dǎo)電極置于正常完整的神經(jīng)干表面，當(dāng)神經(jīng)干的一端興奮之后，興奮波會先后通表面，當(dāng)神經(jīng)干的一端興奮之后，興奮波會先后通過兩個引導(dǎo)電極，可記錄到兩個相反方向的電位偏過兩個引導(dǎo)電極，可記錄到兩個相反方向的電位偏轉(zhuǎn)波形，稱為轉(zhuǎn)波形，稱為雙相動作電位雙相動作電位。如果兩個引導(dǎo)電極之。如果兩個引導(dǎo)電極之間的神經(jīng)組織有損傷，興

3、奮波只能通過一個引導(dǎo)電間的神經(jīng)組織有損傷，興奮波只能通過一個引導(dǎo)電極，不能傳導(dǎo)至第二個引導(dǎo)電極，則只能記錄到一極，不能傳導(dǎo)至第二個引導(dǎo)電極，則只能記錄到一個方向的電位偏轉(zhuǎn)波形，稱為個方向的電位偏轉(zhuǎn)波形，稱為單向動作電位。單向動作電位。蛙坐骨神經(jīng)雙相、單相動作電位與強度法則蛙坐骨神經(jīng)雙相、單相動作電位與強度法則實驗原理（三） 動作電位在神經(jīng)干上傳導(dǎo)具有一定的速度蟾蜍的坐骨神經(jīng)是混合神經(jīng)，動作電位在神經(jīng)干上傳導(dǎo)具有一定的速度蟾蜍的坐骨神經(jīng)是混合神經(jīng)，由許多粗細(xì)不等的有髓和無髓神經(jīng)纖維構(gòu)成，其中以由許多粗細(xì)不等的有髓和無髓神經(jīng)纖維構(gòu)成，其中以A A類纖維為主，傳類纖維為主，傳導(dǎo)速度約為導(dǎo)速度約為35

4、3540m/s40m/s。 神經(jīng)沖動的傳導(dǎo)速度神經(jīng)沖動的傳導(dǎo)速度 （v v）是指動作電位在單位時間（）是指動作電位在單位時間（t t）內(nèi)傳導(dǎo)）內(nèi)傳導(dǎo)的距離（的距離（s s） 神經(jīng)神經(jīng)動作電位傳導(dǎo)速度的測定傳導(dǎo)速度的測定儀器與器械（一）普通剪刀、手術(shù)剪、組織剪、眼科鑷普通剪刀、手術(shù)剪、組織剪、眼科鑷金屬探針、蛙板、蛙釘金屬探針、蛙板、蛙釘玻璃分針玻璃分針瓷碗、細(xì)線、培養(yǎng)皿、滴管瓷碗、細(xì)線、培養(yǎng)皿、滴管實驗方法與步驟1.1.破壞腦、脊髓破壞腦、脊髓 （雙毀髓）（雙毀髓） 枕骨大孔枕骨大孔2.2.剪除軀干上部、皮膚及內(nèi)臟坐骨神經(jīng)坐骨神經(jīng)的走行坐骨神經(jīng)的走行3.3.剝皮剝皮 剝完皮膚后，將標(biāo)本放在盛有

5、任氏液的培養(yǎng)皿中。剝完皮膚后，將標(biāo)本放在盛有任氏液的培養(yǎng)皿中。 4.4.洗干凈雙手及使用過的全部手術(shù)器械。洗干凈雙手及使用過的全部手術(shù)器械。5.5.分離兩腿分離兩腿6.6.游離坐骨神經(jīng)標(biāo)本游離坐骨神經(jīng)標(biāo)本注意事項1.1.破壞腦脊髓要徹底，防止蟾酥射入操作者眼中或污染實驗標(biāo)本。破壞腦脊髓要徹底，防止蟾酥射入操作者眼中或污染實驗標(biāo)本。2.2.操作時避免壓擠、損傷和用力牽拉標(biāo)本，不可用金屬器械觸碰神經(jīng)干。操作時避免壓擠、損傷和用力牽拉標(biāo)本，不可用金屬器械觸碰神經(jīng)干。3.3.操作過程中，應(yīng)給神經(jīng)和肌肉滴加任氏液，防止表面干燥，以免影響標(biāo)本的興操作過程中，應(yīng)給神經(jīng)和肌肉滴加任氏液，防止表面干燥，以免影響

6、標(biāo)本的興奮性。奮性。4.4.標(biāo)本制成后須放在任氏液中浸泡數(shù)分鐘標(biāo)本制成后須放在任氏液中浸泡數(shù)分鐘, ,使標(biāo)本興奮性穩(wěn)定使標(biāo)本興奮性穩(wěn)定, ,再開始實驗效果會再開始實驗效果會較好。較好。儀器與器械（二） 計算機生物信號采集計算機生物信號采集處理系統(tǒng)處理系統(tǒng) RM6240 RM6240 神經(jīng)標(biāo)本屏蔽盒神經(jīng)標(biāo)本屏蔽盒 實驗方法與步驟1.1.坐骨神經(jīng)標(biāo)本的制備坐骨神經(jīng)標(biāo)本的制備2.2.儀器及標(biāo)本的連結(jié)儀器及標(biāo)本的連結(jié) 坐骨神經(jīng)干放置于神經(jīng)標(biāo)本屏蔽盒內(nèi)坐骨神經(jīng)干放置于神經(jīng)標(biāo)本屏蔽盒內(nèi)神經(jīng)標(biāo)本屏蔽盒神經(jīng)標(biāo)本屏蔽盒 與與RM6240RM6240系統(tǒng)連接系統(tǒng)連接刺激電極刺激電極引導(dǎo)電極引導(dǎo)電極s+ s_s+

7、s_r1 r1r1 r1r2 r2r2 r2接地電極接地電極（1）引導(dǎo)雙相神經(jīng)動作電位引導(dǎo)雙相神經(jīng)動作電位 3. 3.啟動啟動BL410BL410系統(tǒng)，進(jìn)入系統(tǒng)軟件，點擊系統(tǒng)，進(jìn)入系統(tǒng)軟件，點擊“實驗項目實驗項目”菜單，選擇菜單，選擇“神經(jīng)肌肉生理實神經(jīng)肌肉生理實驗驗”。點擊點擊“神經(jīng)干神經(jīng)干動作電位的引動作電位的引導(dǎo)導(dǎo)”，引導(dǎo)出，引導(dǎo)出一個雙相動作一個雙相動作電位。電位。 仔細(xì)觀察雙相動作電位的仔細(xì)觀察雙相動作電位的波形。讀出最大刺激時雙相波形。讀出最大刺激時雙相動作電位上下相的振幅和整動作電位上下相的振幅和整個動作電位持續(xù)時間數(shù)值。個動作電位持續(xù)時間數(shù)值。 自動調(diào)節(jié)刺激強度，觀自動調(diào)節(jié)刺激

8、強度，觀察動作電位波形的變化。讀察動作電位波形的變化。讀出波寬為某一數(shù)值時的閾刺出波寬為某一數(shù)值時的閾刺激和最大刺激。激和最大刺激。（2 2）觀察和測定雙相動作電位）觀察和測定雙相動作電位 測定神經(jīng)沖動傳導(dǎo)速度測定神經(jīng)沖動傳導(dǎo)速度分別測量兩個動作電位分別測量兩個動作電位起始點之間的時間差（起始點之間的時間差（t t），），為神經(jīng)沖動從第一對引導(dǎo)電為神經(jīng)沖動從第一對引導(dǎo)電極傳導(dǎo)到第二對引導(dǎo)電極所極傳導(dǎo)到第二對引導(dǎo)電極所需要的時間。需要的時間。測量神經(jīng)屏蔽盒內(nèi)兩對測量神經(jīng)屏蔽盒內(nèi)兩對電極之間的距離（電極之間的距離（s s）即為）即為神經(jīng)干的長度。（神經(jīng)干的長度。（2 2）按公式按公式v=s/t(m

9、/sv=s/t(m/s）計）計算神經(jīng)沖動傳導(dǎo)的速度。算神經(jīng)沖動傳導(dǎo)的速度。用鑷子將兩個引導(dǎo)電極用鑷子將兩個引導(dǎo)電極r1,r1r1,r1之間的神經(jīng)夾傷，之間的神經(jīng)夾傷，記錄單相動作電位。記錄單相動作電位。 觀察和測定單相動作電位觀察和測定單相動作電位注意事項1.1.制備標(biāo)本時，神經(jīng)干應(yīng)盡可能分離長一些，上自制備標(biāo)本時，神經(jīng)干應(yīng)盡可能分離長一些，上自脊柱附近的主干，下至踝關(guān)節(jié)附近。分離過程中脊柱附近的主干，下至踝關(guān)節(jié)附近。分離過程中勿損傷神經(jīng)組織，以免影響其興奮性。勿損傷神經(jīng)組織，以免影響其興奮性。2.2.將神經(jīng)干搭在引導(dǎo)電極上時，神經(jīng)干不能與標(biāo)本將神經(jīng)干搭在引導(dǎo)電極上時，神經(jīng)干不能與標(biāo)本盒壁相接

10、觸，盡量將其拉成水平線，不要下垂或盒壁相接觸，盡量將其拉成水平線，不要下垂或斜向放置。斜向放置。3.3.刺激強度在開始時不要過強，先由弱強度開始，刺激強度在開始時不要過強，先由弱強度開始，逐步加大強度，以免剌激傷害神經(jīng)標(biāo)本。逐步加大強度，以免剌激傷害神經(jīng)標(biāo)本。4.4.經(jīng)常滴加任氏液，保持神經(jīng)標(biāo)本濕潤。經(jīng)常滴加任氏液，保持神經(jīng)標(biāo)本濕潤。5.5.實驗完畢神經(jīng)糟應(yīng)仔細(xì)清洗，擦干，以免殘留的實驗完畢神經(jīng)糟應(yīng)仔細(xì)清洗，擦干，以免殘留的鹽液導(dǎo)致電極腐蝕生銹。鹽液導(dǎo)致電極腐蝕生銹。 1. 1. 神經(jīng)干動作電位與刺激強度有何關(guān)系？神經(jīng)干動作電位符合神經(jīng)干動作電位與刺激強度有何關(guān)系？神經(jīng)干動作電位符合“全或無全或無