日立Chromaster液相色譜儀操作、清潔、維護、保養(yǎng)規(guī)程

1、編 號頁 數(shù)1 / 12制訂部門技質(zhì)部頒發(fā)部門技質(zhì)部安琪酵母股份有限公司藥業(yè)分公司日立日立 ChromasterChromaster 液相色譜液相色譜儀操作、清潔、維護、保儀操作、清潔、維護、保養(yǎng)規(guī)程養(yǎng)規(guī)程生效日期： 年 月 日文文 件件 目目 錄錄一、一、目的目的 .2 2二、二、范圍范圍 .2 2三、三、責任者責任者 .2 2四、四、內(nèi)容內(nèi)容 .2 2五、五、修訂歷史修訂歷史 .2 2六、六、相關(guān)記錄相關(guān)記錄 .3 3你的簽名表明你已清楚了解本文件及附件內(nèi)容，充分理解并認可本文件的所有條款。部門部門簽簽 名名日日 期期起草人起草人技質(zhì)部技質(zhì)部審核人審核人技質(zhì)部技質(zhì)部審核人審核人機修車間機修

2、車間QAQA 審閱審閱技質(zhì)部技質(zhì)部批準人批準人質(zhì)量管理負責人質(zhì)量管理負責人批準人批準人總經(jīng)理總經(jīng)理本文件根據(jù)需要應(yīng)分發(fā)于以下部門：技質(zhì)部生產(chǎn)部辦公室調(diào)度室制劑車間原料藥車間機修車間中心化驗室倉儲檔案室編 號安琪酵母股份有限公司藥業(yè)分公司日立日立 ChromasterChromaster 液相色譜儀操作、液相色譜儀操作、清潔、維護、保養(yǎng)規(guī)程清潔、維護、保養(yǎng)規(guī)程頁 數(shù)2 / 12一、一、 目的目的1、建立一個日立Chromaster液相色譜儀操作、清潔、維護、保養(yǎng)規(guī)程。二、二、 范圍范圍1、日立 Chromaster 液相色譜儀。三、三、 責任者責任者1、中心化驗室主任，操作者。四、四、 內(nèi)容內(nèi)容

3、1、儀器型號及組成：日立 Chromaster 液相色譜儀模塊泵自動進樣器柱溫箱二極管陣列檢測器（DAD）熒光檢測器蒸發(fā)散射光檢測器(ELSD)型號5110521053105430544060002、工作環(huán)境溫度435，在測量期間溫度波動5；濕度25%85%電源220V 50HZ環(huán)境無腐蝕氣體、磁場、陽光直射3、操作規(guī)程3.1 使用前準備a）每次開機前先檢查電源連接情況,確保電源正確的連接。b）每次開機前檢驗流動相,以保證足夠量的流動相。3.2 開機 確認電源連接正確后，打開各使用模塊電源。3.3 打開與設(shè)備連接的電腦，在電腦桌面雙擊圖標，使操作系統(tǒng)與設(shè)備聯(lián)機，進入登錄窗口。3.4 第一次使用

4、儀器時應(yīng)對儀器進行配置。選擇配置，進入儀器配置界面3.4.1 點擊“增加” ，選擇連接的儀器編 號安琪酵母股份有限公司藥業(yè)分公司日立日立 ChromasterChromaster 液相色譜儀操作、液相色譜儀操作、清潔、維護、保養(yǎng)規(guī)程清潔、維護、保養(yǎng)規(guī)程頁 數(shù)3 / 123.4.2 打開儀器，自動檢測配置的儀器模塊編 號安琪酵母股份有限公司藥業(yè)分公司日立日立 ChromasterChromaster 液相色譜儀操作、液相色譜儀操作、清潔、維護、保養(yǎng)規(guī)程清潔、維護、保養(yǎng)規(guī)程頁 數(shù)4 / 123.4.3 確認自動檢測所有模塊，確認泵的信息、自動進樣器的信息、柱溫箱信息（選擇control off a

5、t shutdown） 、檢測器信息（選擇 lamp off at shutdown）3.4.4 配置儀器，點擊向右箭頭，命名儀器名稱。3.5 輸入用戶名、密碼，選擇創(chuàng)建新工程登錄。3.6 儀器準備3.6.1 排空 打開設(shè)備監(jiān)視器，打開排空閥，設(shè)流速為 5，流量 100%，點擊“清洗” ，分別將四條管路排氣泡，結(jié)束之后關(guān)閉排空閥。3.6.2 自動進樣器清洗 點擊“清洗” ，依次對柱塞、注射器進行清洗3.7 方法設(shè)置點擊“新建方法” ，在“方法”下選擇“事件表”按照檢測需要對自動進樣器、LC 梯度、液相色譜控制、測量、采集、恒溫器、積分、計算進行設(shè)置，設(shè)置完成后點擊“發(fā)送方法”3.8 基線 方法

6、發(fā)送儀器運行穩(wěn)定之后，點擊“數(shù)據(jù)采集”查看基線3.9 序列設(shè)置及運行 點擊“序列” ，分別對樣品起始位置“SV” 、結(jié)束位置“EV” 、樣品編 號安琪酵母股份有限公司藥業(yè)分公司日立日立 ChromasterChromaster 液相色譜儀操作、液相色譜儀操作、清潔、維護、保養(yǎng)規(guī)程清潔、維護、保養(yǎng)規(guī)程頁 數(shù)5 / 12ID、樣品名、進樣量、進樣體積、文件名、方法名、報告格式等進行設(shè)置，設(shè)置完畢后點擊“序列檢查” 、 “序列保存”再“運行” 。3.10 ELSD 檢測器操作3.10.1開機：打開 ELSD 電源，并通過面板將 ELSD 設(shè)置為“運行(run)”狀態(tài)。3.10.2通氣：打開并逐步調(diào)節(jié)

7、供氣壓力至 0.5Mpa。 （注意：在使用鋼瓶氣源時，通氣前主閥與減壓閥應(yīng)處于全關(guān)狀態(tài)；擰開減壓閥時需小心操作、將供氣壓力從小到大逐步調(diào)高至 0.5Mpa，最高壓力不得超過 0.55Mpa 或 80psi。 ）3.10.3通氣加熱平衡：根據(jù)檢測的需要設(shè)定加熱溫度和氣體流速，然后讓儀器平衡 10 分鐘。平衡后基線噪音應(yīng)小于 1mV，否則需要進行故障排查（如氣體清潔度及光源穩(wěn)定性） 。3.10.4流動相平衡：確保流動相清潔無污染，不含不揮發(fā)的改性劑。將柱后流份接入 ELSD，然后平衡 5 分鐘，基線噪音應(yīng)小于 2mV，可通過調(diào)整漂移管溫度和氣流量使噪音最小化。如噪音始終很高，需要進行故障排查（如氣

8、源、流動相或柱后流出物是否被污染） 。3.10.5測試后清洗：如測試時使用腐蝕性的流動相（含強酸或強堿） ，建議將 ELSD 繼續(xù)連接在柱上清洗約 30 分鐘。在使用高水含量的流動相清洗柱和 ELSD 時，相應(yīng)調(diào)高 ELSD 漂移管加熱溫度和氣流量以利于流動相揮發(fā)。3.10.6關(guān)機：停止通入流動相后保持 ELSD 繼續(xù)運行 10 分鐘?？蓪?ELSD 設(shè)置為“待機(standby)”狀態(tài)則 ELSD 會自動關(guān)閉氣閥、光源并停止加熱，等待下次啟動工作。或者，可以關(guān)閉供氣源 1 分鐘后，完全關(guān)閉 ELSD 電源。3.10 數(shù)據(jù)處理 點擊“數(shù)據(jù)處理”進入數(shù)據(jù)處理界面，打開需要處理的色譜圖。3.10.

9、1 單擊右鍵，選擇“基線” 、 “鎖定”編 號安琪酵母股份有限公司藥業(yè)分公司日立日立 ChromasterChromaster 液相色譜儀操作、液相色譜儀操作、清潔、維護、保養(yǎng)規(guī)程清潔、維護、保養(yǎng)規(guī)程頁 數(shù)6 / 123.10.2 選擇鎖定基線后，指定不需要積分的區(qū)域編 號安琪酵母股份有限公司藥業(yè)分公司日立日立 ChromasterChromaster 液相色譜儀操作、液相色譜儀操作、清潔、維護、保養(yǎng)規(guī)程清潔、維護、保養(yǎng)規(guī)程頁 數(shù)7 / 123.10.3 定峰，為目標峰命名編 號安琪酵母股份有限公司藥業(yè)分公司日立日立 ChromasterChromaster 液相色譜儀操作、液相色譜儀操作、清

10、潔、維護、保養(yǎng)規(guī)程清潔、維護、保養(yǎng)規(guī)程頁 數(shù)8 / 123.10.4 制作標準曲線 3.10.4.1 點擊“新建” ，創(chuàng)建一個新的標準曲線并命名。3.10.4.2 打開校準下面的“選項”設(shè)置校準選項3.10.4.3 設(shè)置校準選項編 號安琪酵母股份有限公司藥業(yè)分公司日立日立 ChromasterChromaster 液相色譜儀操作、液相色譜儀操作、清潔、維護、保養(yǎng)規(guī)程清潔、維護、保養(yǎng)規(guī)程頁 數(shù)9 / 123.10.4.4 打開標準曲線的第一個標樣色譜圖，選擇“增加峰” ，為目標峰定峰，修改化合物名稱和峰類型，輸入含量編 號安琪酵母股份有限公司藥業(yè)分公司日立日立 ChromasterChromas

11、ter 液相色譜儀操作、液相色譜儀操作、清潔、維護、保養(yǎng)規(guī)程清潔、維護、保養(yǎng)規(guī)程頁 數(shù)10 / 123.10.4.5 打開第二個濃度的標樣色譜圖，選擇“增加現(xiàn)有的” ，然后輸入等級 2 的含量；打開第三個濃度的標樣色譜圖，輸入含量，創(chuàng)建等級 3；打開第 4 個濃度的標樣色譜圖，輸入含量，創(chuàng)建等級 4，所有濃度處理完后，可在左下角化合物，查看標樣的標準曲線。3.10.4.6 打開未知樣品的色譜圖，使用得到的標準曲線計算未知樣，單擊“設(shè)置”選擇已有的標準曲線，選擇 ESTD 外標法，左下角查看計算結(jié)果、性能等編 號安琪酵母股份有限公司藥業(yè)分公司日立日立 ChromasterChromaster 液

12、相色譜儀操作、液相色譜儀操作、清潔、維護、保養(yǎng)規(guī)程清潔、維護、保養(yǎng)規(guī)程頁 數(shù)11 / 124、清潔維護及保養(yǎng)4.1 檢測器的維護和保養(yǎng)4.1.1 檢測器是液相色譜儀器的數(shù)據(jù)收集部分，由很多的電子和光學元件組成。禁止拆卸更動儀器內(nèi)部元件防止損壞或影響準確度。4.1.2 儀器內(nèi)部的流通池是流動相流過的元件，樣品的干凈程度和微生物的生長都可能污染流通池，導致無法檢測或檢測結(jié)果不準，所以在使用了一段時間以后要先用水沖洗流通池和管路再換有機溶劑沖洗。4.1.3 當儀器檢測數(shù)據(jù)出現(xiàn)明顯波動，基線噪音變大時要沖洗儀器管路，沖洗后如果還是沒有改善就應(yīng)該檢測氘燈能量，如果能量不足就因更換新的氘燈。4.1.4 儀

13、器在每次使用完了以后都要用水和一定濃度的有機溶劑沖洗管路，保證下次使用時管路和系統(tǒng)的清潔。4.1.5 氣源純度（氮氣或空氣）必須達到 99.9%，否則引起基線噪音。4.1.6 對于鋼瓶氣源，ELSD 操作結(jié)束后應(yīng)完全關(guān)閉主閥與減壓閥。要進行 ELSD 操作時，先打開 ELSD 電源，然后依次打開鋼瓶主閥與減壓閥，小心操作減壓閥，將供氣壓力逐漸提高到 0.5Mpa。4.2 色譜柱的維護和保養(yǎng)編 號安琪酵母股份有限公司藥業(yè)分公司日立日立 ChromasterChromaster 液相色譜儀操作、液相色譜儀操作、清潔、維護、保養(yǎng)規(guī)程清潔、維護、保養(yǎng)規(guī)程頁 數(shù)12 / 124.2.1 所使用的流動相均應(yīng)為 HPLC 級或相當于該級別的，在配置過程中所有非 HPLC 級的試劑或溶液均經(jīng) 0.45um 薄膜過濾。而且流動相使用前都經(jīng)過超聲儀超聲脫氣后才使用。4.2.2 所使用的水必須是經(jīng)過蒸餾純化后再經(jīng)過 0.45um 水膜過濾后使用，所有試液均新用新配。并且在進樣的樣品都必須經(jīng)過 0.45um 薄膜針筒過濾后進樣。4.2.3 在儀器檢測完了后，均使用水：甲醇=90：10 清洗管路和色譜柱 1